Name: Generierung und Charakterisierung von humanen induzierten pluripotenten Stammzell-abgeleiteten Astrozyten, denen das fragile X-Boten-Ribonukleoprotein fehlt (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-06-06T14:35:00.000+00:00
Duration: 10 min 59 s
Description: Erfahren Sie die Differenzierung humaner iPSCs in Astrozyten für die Erforschung neurodevelopmentaler Störungen wie Fragiles-X-Syndrom. Diese Methode ermöglicht die Untersuchung metabolischer Veränderungen in Gliazellen.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Santoro, M. R., Bray, S. M., Warren, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+of+fragile+X+syndrome%3A+A+twenty-year+perspective%5BTitle%5D)+AND+%22Annu+Rev+Pathol%22%5BJournal%5D)">Molecular of fragile X syndrome: A twenty-year perspective.</a> Annu Rev Pathol. 7, 219-245 (2012).</li>
<li>Wang, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Developmentally-programmed+FMRP+expression+in+oligodendrocytes%3A+A+potential+role+of+FMRP+in+regulating+translation+in+oligodendroglia+progenitors%5BTitle%5D)+AND+%22Hum+Mol+Genet%22%5BJournal%5D)">Developmentally-programmed FMRP expression in oligodendrocytes: A potential role of FMRP in regulating translation in oligodendroglia progenitors.</a> Hum Mol Genet. 13 (1), 79-89 (2004).</li>
<li>Pacey, L. K. K., Doering, L. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Developmental+expression+of+FMRP+in+the+astrocyte+lineage%3A+Implications+for+fragile+X+syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22Glia%22%5BJournal%5D)">Developmental expression of FMRP in the astrocyte lineage: Implications for fragile X syndrome.</a> Glia. 55 (15), 1601-1609 (2007).</li>
<li>Zhang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Purification+and+characterization+of+progenitor+and+mature+human+astrocytes+reveals+transcriptional+and+functional+differences+with+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Purification and characterization of progenitor and mature human astrocytes reveals transcriptional and functional differences with mouse.</a> Neuron. 89 (1), 37-53 (2016).</li>
<li>Allen, N. J., Barres, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuroscience%3A+Glia+-+more+than+just+brain+glue%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Neuroscience: Glia - more than just brain glue.</a> Nature. 457 (7230), 675-677 (2009).</li>
<li>Khakh, B. S., McCarthy, K. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Astrocyte+calcium+signaling%3A+From+observations+to+functions+and+the+challenges+therein%5BTitle%5D)+AND+%22Cold+Spring+Harb+Perspect+Biol%22%5BJournal%5D)">Astrocyte calcium signaling: From observations to functions and the challenges therein.</a> Cold Spring Harb Perspect Biol. 7 (4), a020404(2015).</li>
<li>Allen, N. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Astrocyte+glypicans+4+and+6+promote+formation+of+excitatory+synapses+via+GluA1+AMPA+receptors%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Astrocyte glypicans 4 and 6 promote formation of excitatory synapses via GluA1 AMPA receptors.</a> Nature. 486 (7403), 410-414 (2012).</li>
<li>Chung, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Structural+and+molecular+interrogation+of+intact+biological+systems%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Structural and molecular interrogation of intact biological systems.</a> Nature. 497 (7449), 332-337 (2013).</li>
<li>Rothstein, J. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Knockout+of+glutamate+transporters+reveals+a+major+role+for+astroglial+transport+in+excitotoxicity+and+clearance+of+glutamate%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Knockout of glutamate transporters reveals a major role for astroglial transport in excitotoxicity and clearance of glutamate.</a> Neuron. 16 (3), 675-686 (1996).</li>
<li>Almad, A., Maragakis, N. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+stocked+toolbox+for+understanding+the+role+of+astrocytes+in+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Neurol%22%5BJournal%5D)">A stocked toolbox for understanding the role of astrocytes in disease.</a> Nat Rev Neurol. 14 (6), 351-362 (2018).</li>
<li>Zhang, Y., Barres, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Astrocyte+heterogeneity%3A+An+underappreciated+topic+in+neurobiology%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">Astrocyte heterogeneity: An underappreciated topic in neurobiology.</a> Curr Opin Neurobiol. 20 (5), 588-594 (2010).</li>
<li>Clarke, L. E., Barres, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Emerging+roles+of+astrocytes+in+neural+circuit+development%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Emerging roles of astrocytes in neural circuit development.</a> Nat Rev Neurosci. 14 (5), 311-321 (2013).</li>
<li>Bradley, R. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regionally+specified+human+pluripotent+stem+cell-derived+astrocytes+exhibit+different+molecular+signatures+and+functional+properties%5BTitle%5D)+AND+%22Development%22%5BJournal%5D)">Regionally specified human pluripotent stem cell-derived astrocytes exhibit different molecular signatures and functional properties.</a> Development. 146 (13), dev170910(2019).</li>
<li>Das Sharma, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Astrocytes+mediate+cell+non-autonomous+correction+of+aberrant+firing+in+human+FXS+neurons%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Rep%22%5BJournal%5D)">Astrocytes mediate cell non-autonomous correction of aberrant firing in human FXS neurons.</a> Cell Rep. 42 (4), 112344(2023).</li>
<li>Chambers, S. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Highly+efficient+neural+conversion+of+human+ES+and+iPS+cells+by+dual+inhibition+of+SMAD+signaling%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Highly efficient neural conversion of human ES and iPS cells by dual inhibition of SMAD signaling.</a> Nat Biotechnol. 27 (3), 275-280 (2009).</li>
<li>Hu, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+JAK%2FSTAT+signaling+pathway%3A+from+bench+to+clinic%5BTitle%5D)+AND+%22Sig+Transduct+Target+Ther%22%5BJournal%5D)">The JAK/STAT signaling pathway: from bench to clinic.</a> Sig Transduct Target Ther. 6, 402(2021).</li>
<li>Baser, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Onset+of+differentiation+is+post-transcriptionally+controlled+in+adult+neural+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Onset of differentiation is post-transcriptionally controlled in adult neural stem cells.</a> Nature. 566 (7742), 100-104 (2019).</li>
<li>Pal, R., Bhattacharya, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modelling+protein+synthesis+as+a+biomarker+in+fragile+x+syndrome+patient-derived+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Sci%22%5BJournal%5D)">Modelling protein synthesis as a biomarker in fragile x syndrome patient-derived cells.</a> Brain Sci. 9 (3), 1-12 (2019).</li>
<li>Gross, C., Bassell, G. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Excess+protein+synthesis+in+FXS+patient+lymphoblastoid+cells+can+be+rescued+with+a+p110%CE%B2-selective+inhibitor%5BTitle%5D)+AND+%22J+Mol+Med%22%5BJournal%5D)">Excess protein synthesis in FXS patient lymphoblastoid cells can be rescued with a p110β-selective inhibitor.</a> J Mol Med. 18 (3), 336-345 (2012).</li>
<li>Kumari, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+of+fragile+X+syndrome+specific+molecular+markers+in+human+fibroblasts%3A+A+useful+model+to+test+the+efficacy+of+therapeutic+drugs%5BTitle%5D)+AND+%22Hum+Mutat%22%5BJournal%5D)">Identification of fragile X syndrome specific molecular markers in human fibroblasts: A useful model to test the efficacy of therapeutic drugs.</a> Hum Mutat. 35 (12), 1485-1494 (2014).</li>
<li>Jacquemont, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protein+synthesis+levels+are+increased+in+a+subset+of+individuals+with+fragile+X+syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22Hum+Mol+Genet%22%5BJournal%5D)">Protein synthesis levels are increased in a subset of individuals with fragile X syndrome.</a> Hum Mol Genet. 27 (12), 2039-2051 (2018).</li>
<li>Bowser, D. N., Khakh, B. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ATP+excites+interneurons+and+astrocytes+to+increase+synaptic+inhibition+in+neuronal+networks%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">ATP excites interneurons and astrocytes to increase synaptic inhibition in neuronal networks.</a> J Neurosci. 24 (39), 8606-8620 (2004).</li>
<li>Schmunk, G., Boubion, B. J., Smith, I. F., Parker, I., Gargus, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Shared+functional+defect+in+IP3R-mediated+calcium+signaling+in+diverse+monogenic+autism+syndromes%5BTitle%5D)+AND+%22Transl+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Shared functional defect in IP3R-mediated calcium signaling in diverse monogenic autism syndromes.</a> Transl Psychiatry. 5 (9), e643-e710 (2015).</li>
<li>Peteri, U. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Generation+of+the+human+pluripotent+stem-cell-derived+astrocyte+model+with+forebrain+identity%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Sci%22%5BJournal%5D)">Generation of the human pluripotent stem-cell-derived astrocyte model with forebrain identity.</a> Brain Sci. 11 (2), 209(2021).</li>
<li>Alvarez-Mora, M. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impaired+mitochondrial+function+and+dynamics+in+the+pathogenesis+of+FXTAS%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">Impaired mitochondrial function and dynamics in the pathogenesis of FXTAS.</a> Mol Neurobiol. 54 (9), 6896-6902 (2017).</li>
<li>Giulivi, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mitochondrial+dysfunction+in+autism%5BTitle%5D)+AND+%22JAMA%22%5BJournal%5D)">Mitochondrial dysfunction in autism.</a> JAMA. 304 (21), 2389-2396 (2010).</li>
<li>Anitha, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Brain+region-specific+altered+expression+and+association+of+mitochondria-related+genes+in+autism%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Autism%22%5BJournal%5D)">Brain region-specific altered expression and association of mitochondria-related genes in autism.</a> Mol Autism. 3 (1), 12(2012).</li>
<li>Teves, J. M. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Parkinson%27s+disease+skin+fibroblasts+display+signature+alterations+in+growth%2C+redox+homeostasis%2C+mitochondrial+function%2C+and+autophagy%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Parkinson's disease skin fibroblasts display signature alterations in growth, redox homeostasis, mitochondrial function, and autophagy.</a> Front Neurosci. 11, 737(2018).</li>
<li>Yao, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mitochondrial+bioenergetic+deficit+precedes+Alzheimer%27s+pathology+in+female+mouse+model+of+Alzheimer%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+USA%22%5BJournal%5D)">Mitochondrial bioenergetic deficit precedes Alzheimer's pathology in female mouse model of Alzheimer's disease.</a> Proc Natl Acad Sci USA. 106 (34), 14670-14675 (2009).</li>
<li>Sonntag, K. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Late-onset+Alzheimer%27s+disease+is+associated+with+inherent+changes+in+bioenergetics+profiles%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Late-onset Alzheimer's disease is associated with inherent changes in bioenergetics profiles.</a> Sci Rep. 7 (1), 14038(2017).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>1-Thioglycerol</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>M6145</td><td></td></tr><tr><td>Accutase&nbsp; Lösung</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A6964</td><td>Medium zur Ablösung von Enzymzellen&nbsp;</td></tr><tr><td>Adenosin 5&prime;-triphosphat Magnesiumsalz</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A9187</td><td></td></tr><tr><td>Advanced DMEM/F-12</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>12634010</td><td></td></tr><tr><td>Antibiotikum-Antimykotikum (100x)</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>15240062</td><td></td></tr><tr><td>B-27 Supplement (50x), serumfrei</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>17504044</td><td></td></tr><tr><td>Rinderserumalbumin</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A9418</td><td></td></tr><tr><td>Chemisch definiertes Lipidkonzentrat</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>11905031</td><td></td></tr><tr><td>Kollagenase, Typ IV, Pulver</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>17104019</td><td></td></tr><tr><td>Desoxyribonuklease I</td><td>Worthington Biochemical Corporation</td><td>LK003170</td><td></td></tr><tr><td>Dimethylsulfoxid</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>D2650</td><td></td></tr><tr><td>Dispase II, Pulver</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>17105041</td><td></td></tr><tr><td>DPBS, kein Kalzium, kein Magnesium</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>14190144</td><td></td></tr><tr><td>Essential 8 Medium</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>A1517001</td><td></td></tr><tr><td>FXS1, FXS2&nbsp;</td><td>Coriell Institut für medizinische Forschung&nbsp;</td><td>GM07072, GM05848</td><td>FXS-Patientenzellen</td></tr><tr><td>GlutaMAX Supplement</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>35050061</td><td>Glutaminersatz</td></tr><tr><td>Ham's F-12 Nährstoffmischung</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>11765054</td><td></td></tr><tr><td>Gesunde Kontrollzellen&nbsp;</td><td>Cedars-Sinai Medizinisches Zentrum&nbsp;</td><td>ND30625</td><td>gesunde Kontrollzellen&nbsp;</td></tr><tr><td>Heparin-Natriumsalz aus der Darmschleimhaut des Schweins</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>H3149</td><td></td></tr><tr><td>IMDM</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>12440053</td><td></td></tr><tr><td>Insulin, humanes</td><td></td><td>Roche 11376497001</td><td></td></tr><tr><td>LDN 193189&nbsp;</td><td>Stratech</td><td>Scientific S2618-SEL</td><td></td></tr><tr><td>Leukämie-Hemmfaktor humaner</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>L5283</td><td></td></tr><tr><td>Matrigel&nbsp; Wachstumsfaktor reduziert (GFR) Basalmembran-Matrix</td><td>Corning</td><td>354230</td><td></td></tr><tr><td>MEM Lösung für nicht-essentielle Aminosäuren (100x)</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>11140050</td><td></td></tr><tr><td>Maus FGF-basisch (FGF-2/bFGF) Rekombinantes Protein</td><td>Peprotech</td><td>450-33</td><td></td></tr><tr><td>Mr. Frosty Gefrierbehälter</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>5100-0001</td><td>Kryobox</td></tr><tr><td>N-2 Ergänzung (100x)</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>17502048</td><td></td></tr><tr><td>N-Acetyl-L-Cystein</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A9165</td><td></td></tr><tr><td>Neurobasales Medium</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>21103049</td><td></td></tr><tr><td>Nunc Biobank- und Zellkultur-Kryoröhrchen</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>377267</td><td></td></tr><tr><td>Nunc Zellkulturbehandelte 6-Well-Schale</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>140675</td><td></td></tr><tr><td>Papain-Dissoziationssystem</td><td>Worthington Biochemical Corporation</td><td>LK003150</td><td></td></tr><tr><td>Penicillin-Streptomycin</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>15140122</td><td></td></tr><tr><td>rekombinantes humanes CNTF-Protein, CF&nbsp;</td><td>Forschung & Forschung D Systems</td><td>257-NT-010</td><td></td></tr><tr><td>Rekombinantes humanes EGF-Protein, CF</td><td>F& D Systems</td><td>236-EG-01M</td><td></td></tr><tr><td>RevitaCell Supplement (100x)</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>A2644501</td><td></td></tr><tr><td>SB431542</td><td>Tocris</td><td>1614</td><td></td></tr><tr><td>Seahorse XFe24 Analysator&nbsp;</td><td>Agilent Technologies</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Seahorse XF Cell Mito Stresstest-Kit</td><td>Agilent Technologies</td><td>103015-100</td><td></td></tr><tr><td>Seahorse XF Glykolyse-Stresstest-Kit</td><td>Agilent Technologies</td><td>103020-100</td><td></td></tr><tr><td>Gewebekulturschalen-100 cm</td><td>Biostar Lifetech</td><td>TCD000100</td><td></td></tr><tr><td>Transferrin</td><td>Roche</td><td>10652202001</td><td></td></tr><tr><td>VWR Rasierer Klingen</td><td>VWR International</td><td>55411-050</td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td><stark>Antikörper&nbsp; </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Primärer Antikörper</td><td>Company</td><td>Katalognummer<</td><td>strong>Verdünnung</td></tr><tr><td>Oct4 (C-10)</td><td>Santa Cruz Biotechnology</td><td>sc-5279</td><td>Verdünnung: 1:250 Sekundärer Antikörper: Ziegen-Anti-Maus-IgG, Alexa Fluor 568</td></tr><tr><td>Nanog</td><td>R & D Systems</td><td>AF1997</td><td>Verdünnung: 1:100 Sekundärer Antikörper: Esel Anti-Ziegen IgG, Alexa Fluor 488</td></tr><tr><td>Vimentin</td><td>Abcam</td><td>Ab5733</td><td>Verdünnung: 1:500 Sekundärer Antikörper: Ziege Anti-Chicken IgY, Alexa Fluor 488</td></tr><tr><td>NFIA</td><td>Abcam</td><td>Ab41851</td><td>Verdünnung: 1:500 Sekundärer Antikörper: Ziege anti-Kaninchen IgG, Alexa Fluor 568</td></tr><tr><td>GFAP-cy3</td><td>Sigma</td><td>C9205</td><td>Verdünnung: 1:500 Sekundärer Antikörper: NA</td></tr><tr><td>GFAP</td><td>DAKO</td><td>Z0334</td><td>Verdünnung: 1:500 Sekundärer Antikörper: Ziegen-Anti-Kaninchen-IgG, Alexa Fluor 568</td></tr><tr><td>S100&beta;</td><td>DAKO</td><td>IR504</td><td>Verdünnung: 1:500 Sekundärer Antikörper: Ziege Anti-Kaninchen IgG, Alexa Fluor 488</td></tr><tr><td>Anti-Nuklei Antikörper, Klon 235-1</td><td>Merck Millipore</td><td>MAB1281</td><td>Verdünnung: 1:1000 Sekundärer Antikörper: Ziege Anti-Maus IgG1, Alexa Fluor 555</td></tr><tr><td>Sekundäre Antikörper&nbsp; </stark></td><td></td><td></td><td><stark>Verdünnung</stark></td></tr><tr><td>Ziege Anti-Maus-IgG, Alexa Fluor 568</td><td>Thermo Fisher Scientsp;</td><td>A11004</td><td>1:1000</td></tr><tr><td>Esel Anti-Ziegen IgG, Alexa Fluor 488</td><td>Thermo Fisher Scientific&nbsp;</td><td>A11055</td><td>1:1000</td></tr><tr><td>Anti-Hühner-IgY, Alexa Fluor 488</td><td>Thermo Fisher Scientific&nbsp;</td><td>A11039</td><td>1:1000</td></tr><tr><td>Ziege Anti-Kaninchen IgG, Alexa Fluor 568</td><td>Thermo Fisher Scientific&nbsp;</td><td>A11011</td><td>1:1000</td></tr><tr><td>Ziege Anti-Kaninchen IgG, Alexa Fluor 488</td><td>Thermo Fisher Scient&nbsp;</td><td>A11034</td><td>1:1000</td></tr><tr><td>Ziege Anti-Maus IgG1, Alexa Fluor 555</td><td>Thermo Fisher Scientific&nbsp;</td><td>A21127</td><td>1:1000</td></tr></tbody></table>

generierung und charakterisierung von humanen induzierten pluripotenten stammzell-abgeleiteten astrozyten, denen das fragile x-boten-ribonukleoprotein fehlt

Generation and Characterization of Human Induced Pluripotent Stem Cell-derived Astrocytes Lacking Fragile X Messenger Ribonucleoprotein

Die Kolonien humaner induzierter pluripotenter Stammzellen (hiPSC) wurden unter Verwendung eines kommerziell erhältlichen definierten Mediums gehalten und mit den Pluripotenzmarkern Oct4 und Nanog immungefärbt (Abbildung 1B). FXS- und CTRL-APCs zeigten vergleichbare hochangereicherte Anteile von Zellen, die immunpositiv für Vimentin und NFIA waren (Abbildung 1C,D). Wir fanden heraus, dass APCs, die von gesunden u...

Generierung und Charakterisierung von humanen induzierten pluripotenten Stammzell-abgeleiteten Astrozyten, denen das fragile X-Boten-Ribonukleoprotein fehlt

Fragile X syndrome (FXS), a leading inherited cause of autism spectrum disorder and intellectual disability, has been studied extensively using rodent ...

generation-characterization-human-induced-pluripotent-stem-cell

Research

Forschung

JoVE Journal

Neuroscience

Neurowissenschaften

Das Video zeigt eine Methode zur Erzeugung von Astrosphären aus Vorläuferzellen menschlicher pluripotenter Stammzellen. Dabei handelt es sich um das Wachstum und die Proliferation von Stammzellen mit Nährmedien, die Wachstumsfaktoren und Kinase-Inhibitoren enthalten. Diese Zellen aggregieren sich dann und differenzieren sich zu Astrozyten, die Astrosphären bilden.

Erzeugung und Pflege von Astrosphären mit humanen pluripotenten Stammzellen

Astrozyten wurden erkannt, vielseitige beteiligten Zellen in grundlegender biologischer Prozesse, die wichtig für die normale Entwicklung des Gehirns und Funktion, und das zentrale Nervensystem Reparatur sein. Hier präsentieren wir ein schnelles Verfahren zur reinen Maus Astrozytenkulturen erhalten, um die Biologie dieser wichtigen Klasse von zentralen Nervensystems Zellen zu untersuchen.

Isolation und Kultur von Maus Kortikale Astrozyten

Astrozyten sind eine der wichtigsten Schlüsselspieler im zentralen Nervensystem (ZNS). Hier berichten wir eine praktische Methode der sexed Hippokampus - Astrozyten Kulturprotokoll , um die zugrunde liegenden Mechanismen der Astrozytenfunktion bei männlichen und weiblichen Neugeborenen Welpen nach In-vitro - Ischämie zu untersuchen.

Geschlechtsunterschiede in Mäuse Hippocampus Astrozyten nach<em&gt; In-Vitro</em&gt; Ischemia

Wir modifizieren und Umsetzung eines bereits veröffentlichten Protokoll beschreibt die schnelle, reproduzierbare und effiziente Differenzierung von humanen 12 pluripotenten Stammzellen (hiPSCs) in exzitatorischen kortikalen Neuronen induziert. Insbesondere ermöglicht unsere Modifikation zur Steuerung neuronaler Zelldichte und der Verwendung auf Mikroelektrodenarrays elektrophysiologischen Eigenschaften auf Netzwerkebene zu messen.

Schnelle Neuronale Differenzierung von induzierten pluripotenten Stammzellen zur Messung der Netzwerkaktivität auf Micro-Elektroden-Arrays

Wir beschreiben ein Protokoll zur Neuprogrammierung menschlicher hautabgeleiteter Fibroblasten in induzierte neuronale Vorläuferzellen (iNPCs) und deren anschließende Differenzierung in induzierte Astrozyten (iAs). Diese Methode führt zu einer schnellen und reproduzierbaren Generierung von iNPCs und iAs in großen Mengen.

In-vitro-Modellierung für neurologische Erkrankungen mit direkter Konvertierung von Fibroblasten in neuronale Progenitorzellen und Differenzierung in Astrozyten

Wir haben eine Methode entwickelt, die menschliche Astrozytenpopulationen aus frisch gefrorenem Gewebe anreichert und isoliert, um sie in nachgelagerten molekularen Analysen zu verwenden.

Isolierung von erwachsenen menschlichen Astrozytenpopulationen aus frisch gefrorenen Kortex mittels fluoreszenzaktivierter Zellkernsortierung

Wir beschreiben eine Methode zur Differenzierung von vom Menschen induzierten pluripotenten Astrozyten und Neuronen des Rückenmarks und deren Kokultur für die elektrophysiologische Aufzeichnung.

Etablierung einer elektrophysiologischen Plattform zur Modellierung von ALS mit regionalspezifischen humanen pluripotenten Stammzell-abgeleiteten Astrozyten und Neuronen

Es werden zwei verwandte Methoden beschrieben, um subzelluläre Ereignisse zu visualisieren, die für die synaptische Übertragung erforderlich sind. Diese Protokolle ermöglichen die Echtzeitüberwachung der Dynamik des präsynaptischen Kalziumeinflusses und der synaptischen Vesikelmembranfusion mittels Lebendzellbildgebung von in vitro kultivierten Neuronen.

Echtzeit-Fluoreszenzmessung synaptischer Funktionen in Modellen der amyotrophen Lateralsklerose

Hier beschreiben wir ein detailliertes Protokoll zur Erzeugung hochangereicherter Kulturen von Astrozyten, die aus verschiedenen Regionen des Zentralnervensystems postnataler Mäuse stammen, und deren direkte Umwandlung in funktionelle Neuronen durch die erzwungene Expression von Transkriptionsfaktoren.

Isolierung und direkte neuronale Reprogrammierung von Maus-Astrozyten

Wir, basierend auf Erkenntnissen aus der Entwicklungsbiologie und veröffentlichten Forschungsergebnissen, haben ein optimiertes Protokoll entwickelt, um effizient A9-Mittelhirn-dopaminerge Neuronen sowohl aus menschlichen embryonalen Stammzellen als auch aus menschlichen induzierten pluripotenten Stammzellen zu erzeugen, was für die Krankheitsmodellierung und Zellersatztherapie bei der Parkinson-Krankheit nützlich wäre.

Regie dopaminergen Neuron Differenzierung von humanen pluripotenten Stammzellen

Erfahren Sie die Differenzierung humaner iPSCs in Astrozyten für die Erforschung neurodevelopmentaler Störungen wie Fragiles-X-Syndrom. Diese Methode ermöglicht die Untersuchung metabolischer Veränderungen in Gliazellen.

Generierung und Charakterisierung von humanen induzierten pluripotenten Stammzell-abgeleiteten Astrozyten, denen das fragile X-Boten-Ribonukleoprotein fehlt (Video) | JoVE Journal

Generierung und Charakterisierung von humanen induzierten pluripotenten Stammzell-abgeleiteten Astrozyten, denen das fragile X-Boten-Ribonukleoprotein fehlt

Weitere Videos entdecken