Name: Etablierung und histologische Analyse von Ösophagusorganoiden zur Modellierung des Verlaufs von normalem zu krebsartigem Gewebe (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-05-30T14:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 57 s
Description: Lernen Sie die Etablierung und histologische Analyse von Ösophagusorganoiden zur Modellierung des Tumorverlaufs. Diese Methode ermöglicht die Untersuchung zellulärer und molekularer Veränderungen von normalem zu krebsartigem Gewebe.

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<ol><li>Zhang, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tumor+initiation+and+early+tumorigenesis%3A+Molecular+mechanisms+and+interventional+targets%5BTitle%5D)+AND+%22Signal+Transduct+Target+Ther%22%5BJournal%5D)">Tumor initiation and early tumorigenesis: Molecular mechanisms and interventional targets.</a> Signal Transduct Target Ther. 9 (1), 149(2024).</li>
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<li>Tong, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Patient-derived+organoids+in+precision+cancer+medicine%5BTitle%5D)+AND+%22Med%22%5BJournal%5D)">Patient-derived organoids in precision cancer medicine.</a> Med. 5 (11), 1351-1377 (2024).</li>
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<li>Lau, H. C. H., Kranenburg, O., Xiao, H., Yu, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Organoid+models+of+gastrointestinal+cancers+in+basic+and+translational+research%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Gastroenterol+Hepatol%22%5BJournal%5D)">Organoid models of gastrointestinal cancers in basic and translational research.</a> Nat Rev Gastroenterol Hepatol. 17 (4), 203-222 (2020).</li>
<li>Han, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Landscape+of+human+organoids%3A+Ideal+model+in+clinics+and+research%5BTitle%5D)+AND+%22The+Innovation%22%5BJournal%5D)">Landscape of human organoids: Ideal model in clinics and research.</a> The Innovation. 5 (3), 100620(2024).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>0,22 μm m Filter</td><td>Merck</td><td>Cat#SLGPR33RB</td><td></td></tr><tr><td>24-Well-Platte</td><td>Corning</td><td>Cat#3524</td><td></td></tr><tr><td>4% Paraformaldehyd</td><td>Beyotime</td><td>Cat# P0099</td><td></td></tr><tr><td>70 &mu; m steriles Sieb</td><td>Falcon</td><td>Cat#352350</td><td></td></tr><tr><td>A83-01</td><td>Tocris Bioscience</td><td>Cat# 2939</td><td></td></tr><tr><td>Advanced DMEM/F12</td><td>Gibco</td><td>Cat# 12634028</td><td></td></tr><tr><td>Agar</td><td>Solarbio</td><td>Cat# A8190</td><td></td></tr><tr><td>Anti-Anti (Antibiotikum-Antimykotikum)</td><td>Gibco</td><td>Cat# 15240062</td><td></td></tr><tr><td>B-27 Nahrungsergänzungsmittel</td><td>Gibco</td><td>Cat# 17504044</td><td></td></tr><tr><td>CO2 Inkubator</td><td>Thermo&nbsp;</td><td>Cat#371GPCN</td><td></td></tr><tr><td>Kollagenase IV</td><td>Gibco</td><td>Cat# 17104019</td><td></td></tr><tr><td>Cryostor</td><td>STEMCELL</td><td>Cat# 07930</td><td></td></tr><tr><td>DMEM</td><td>Corning</td><td>Cat# 10-013-CV</td><td></td></tr><tr><td>EGF</td><td>Gibco</td><td>Cat# PHG0313</td><td></td></tr><tr><td>Fötales Rinderserum</td><td>Cell Technologies</td><td>Cat# 30070</td><td></td></tr><tr><td>G-418</td><td>Sigma</td><td>Cat# A1720</td><td></td></tr><tr><td>Gelatine</td><td>Solarbio</td><td>Cat# G8061</td><td></td></tr><tr><td>GlutaMAX</td><td>Gibco</td><td>Cat# 35050061</td><td></td></tr><tr><td>Wachstumsfaktor-reduziertes Matrigel</td><td>Corning</td><td>Cat# 354230</td><td></td></tr><tr><td>HE Färbeset</td><td>Beijing Yili Fine Chemicals Co., Ltd</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>HEPES</td><td>Gibco</td><td>Cat# 15630080</td><td></td></tr><tr><td>Histologischer Stift</td><td>Zsbio</td><td>Cat#ZLI-9305</td><td></td></tr><tr><td>Hygromycin B</td><td>Sigma</td><td>Cat# 400050</td><td></td></tr><tr><td>Immunhistochemisches Färbekit</td><td>ZSGB-BIO</td><td>PV-8000</td><td></td></tr><tr><td>L-WRN</td><td>ATCC</td><td>CRL-3276; RRID:CVCL_DA06</td><td></td></tr><tr><td>N-2 Ergänzung</td><td>Gibco</td><td>Cat# 17502048</td><td></td></tr><tr><td>Neutrales Kaugummi&nbsp;</td><td>Zsbio</td><td>Cat#ZLI-9555</td><td></td></tr><tr><td>Opal 5-Color Manual IHC Kit</td><td>PANOVUE</td><td>Cat# 10144100100</td><td></td></tr><tr><td>PBS</td><td>MeilunBio</td><td>Cat#MA0015</td><td></td></tr><tr><td>Kaninchen Monoklon Anti-PD-L1</td><td>CST</td><td>Cat# 13684; RRID:AB_2687655</td><td></td></tr><tr><td>Kaninchen Polyklonales Anti-Ki67</td><td>Abcam</td><td>Kat# ab16667; RRID:AB_302459</td><td></td></tr><tr><td>Kaninchen Polyklonales Anti-KRT6A</td><td>Proteintech</td><td>Kat# 10590-1-AP; RRID: AB_2134306</td><td></td></tr><tr><td>Serum für Schafe</td><td>Zsbio</td><td>Cat#ZLI-9056</td><td></td></tr><tr><td>TrypLE Express</td><td>Gibco</td><td>Cat# 12604021</td><td></td></tr><tr><td>TrypLE-EDTA</td><td>Gibco</td><td>Cat#15400-054</td><td></td></tr><tr><td>Whole Slide Image Scanner</td><td>Hamamatsu</td><td>Cat#C13210</td><td></td></tr><tr><td>Y-27632</td><td>Selleck Chemicals</td><td>Cat# S1049</td><td></td></tr></tbody></table>

etablierung und histologische analyse von Ösophagusorganoiden zur modellierung des verlaufs von normalem zu krebsartigem gewebe

Establishment and Histological Analysis of Esophageal Organoids Modeling the Progression from Normal to Cancerous Tissues

Dieses Protokoll beschreibt die Organoid-Probenahme und die histologische Analyse in verschiedenen Stadien der ESCC-Tumorgenese (Abbildung 1). Durch die Probenahme von normaler Ösophagusschleimhaut, niedriggradigen intraepithelialen Neoplasien (LGIN), hochgradigen intraepithelialen Neoplasien (HGIN) und Tumorgeweben von ESCC-Patienten können Organoide konstruiert werden, die verschiedene Stadien der Tumorgenese repräsentieren. Des Weiteren wurden Paraffineinbettungen und Schnitte dieser Orga...

Etablierung und histologische Analyse von Ösophagusorganoiden zur Modellierung des Verlaufs von normalem zu krebsartigem Gewebe

Organoids have emerged as a pivotal tool for advancing the understanding of tumorigenesis and cancer therapy. By generating human organoid models ...

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Research

Forschung

JoVE Journal

Cancer Research

Krebsforschung

Diese Handschrift beschreibt die Herstellung, Charakterisierung und Anwendungsmöglichkeiten eines mittels Tissue Engineering 3D-Ösophagus-Konstrukt von normalen primären humanen Ösophagus-Fibroblasten und Plattenepithelzellen in einem de-cellularized Schweine Gerüst ausgesät vorbereitet. Die Ergebnisse zeigen die Bildung eines reifen geschichteten Epithel ähnlich dem normalen menschlichen Speiseröhre.

Herstellung, Charakterisierung und Einsatzmöglichkeiten von 3D-Tissue-Engineering Menschen Ösophagus-Schleimhaut-Modell

Dieses Protokoll beschreibt die Methoden der Subkultur und Kryokonservierung von Ösophagus-Adenokarzinom-Organoiden mit und ohne Einzelzellaufschluss, um es den Forschern zu ermöglichen, geeignete Strategien auf der Grundlage ihres experimentellen Designs auszuwählen.

Subkultur und Kryokonservierung von Ösophagus-Adenokarzinom-Organoiden: Vor- und Nachteile für die Einzelzellverdauung

In diesem Protokoll wird ein Ansatz zur Erzeugung von Epithelorganoiden aus primärem Normal- und Tumorbrustgewebe durch differentielle Zentrifugation erörtert. Darüber hinaus sind Anleitungen für die dreidimensionale Kultivierung sowie die Immunfluoreszenz-Bildgebung von eingebetteten Organoiden enthalten.

Erzeugung und Bildgebung von Epithelorganoiden von Mäusen und Menschen aus normalem und Tumor-Brustgewebe ohne Passaging

Dieses Protokoll beschreibt die wichtigsten Schritte zur Erzeugung und Charakterisierung von murinen oral-ösophagealen 3D-Organoiden, die normale, präneoplastische und Plattenepithelkarzinomläsionen darstellen, die durch chemische Karzinogenese induziert werden.

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Organoid-Fibroblasten-Kokulturen bieten ein Modell zur Untersuchung der In-vivo-Stammzellnische . In dieser Arbeit wird ein Protokoll für ösophageale Organoid-Fibroblasten-Kokulturen beschrieben. Zusätzlich wird die Whole-Mount-Bildgebung verwendet, um die Fibroblasten-Organoid-Interaktion sichtbar zu machen.

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Aus Magenpatienten stammende Organoide finden zunehmend Verwendung in der Forschung, jedoch fehlen formale Protokolle zur Erzeugung menschlicher Magenorganoide aus Einzelzellverdauen mit standardisierter Aussaatdichte. Dieses Protokoll stellt eine detaillierte Methode zur zuverlässigen Herstellung von Magenorganoiden aus Biopsiegewebe dar, das während der oberen Endoskopie gewonnen wurde.

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Hier wird ein Protokoll für die Kultivierung von humanen Ösophagus-Organoiden und Luft-Flüssig-Grenzflächenkulturen bereitgestellt. Die Luft-Flüssig-Grenzflächenkultur von Ösophagus-Organoiden kann verwendet werden, um den Einfluss von Zytokinen auf die Epithelbarriere der Speiseröhre zu untersuchen.

Dreidimensionale Zellkulturmodelle zur Untersuchung der Epithelbarriere bei eosinophiler Ösophagitis 

Dieses Protokoll beschreibt eine Methode, um gleichzeitig Krebsorganoide, karzinomassoziierte Fibroblasten (CAFs) und nicht-tumorassoziierte Fibroblasten (CFs) vom selben Patienten mit Speiseröhrenplattenepepit (ESCC) zu isolieren. Der Einsatz dieser patientenabgestimmten Materialien könnte Probleme durch interpatientische Variabilität vermeiden und eine geeignete experimentelle Grundlage für die ESCC-Forschung bieten.

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Das Vorhandensein von Krebsstammzellen (KSZ) in Knochensarkomen kürzlich ihrer Pathogenese in Verbindung gebracht worden. In diesem Artikel stellen wir die Isolierung des CSCS aus primären Zellkulturen aus humanen Biopsien herkömmlicher Osteosarkom (OS) mit der Fähigkeit des CSCS erhalten unter nichtadhärenten Bedingungen zu wachsen.

Gründung der Krebszellkulturen von Human Konventionelle Osteosarkom Stem

Einem Tiermodell wird benötigt, um die Rolle der zirkulierende Tumorzellen (CTC) bei der Förderung der Lunge Kolonisation in Krebsmetastasen zu entschlüsseln. Hier wir etabliert und erfolgreich durchgeführt eine in Vivo assay, speziell Test das Erfordernis der Polymeren Fibronektin (PolyFN) Montage auf CTCs zur Besiedlung der Lunge.

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Lernen Sie die Etablierung und histologische Analyse von Ösophagusorganoiden zur Modellierung des Tumorverlaufs. Diese Methode ermöglicht die Untersuchung zellulärer und molekularer Veränderungen von normalem zu krebsartigem Gewebe.

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