Name: Minimalinvasives Cisterna magna-Injektionsmodell für Studien zur leptomeningealen Metastasierung bei Mäusen (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-05-23T14:25:00.000+00:00
Duration: 7 min 14 s
Description: Lernen Sie eine minimalinvasive Injektionsmethode für die Cisterna magna bei Mäusen zur Induktion leptomeningealer Metastasen. Dieses Verfahren reduziert Trauma und extracranielle Tumorlast erheblich.

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<ol><li>Wilcox, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Leptomeningeal+metastases+from+solid+tumors%3A+A+Society+for+Neuro-Oncology+and+American+Society+of+Clinical+Oncology+consensus+review+on+clinical+management+and+future+directions%5BTitle%5D)+AND+%22Neuro+Oncol%22%5BJournal%5D)">Leptomeningeal metastases from solid tumors: A Society for Neuro-Oncology and American Society of Clinical Oncology consensus review on clinical management and future directions.</a> Neuro Oncol. 26 (10), 1781-1804 (2024).</li>
<li>Wasserstrom, W. R., Glass, J. P., Posner, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diagnosis+and+treatment+of+leptomeningeal+metastases+from+solid+tumors%3A+experience+with+90+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer%22%5BJournal%5D)">Diagnosis and treatment of leptomeningeal metastases from solid tumors: experience with 90 patients.</a> Cancer. 49 (4), 759-772 (1982).</li>
<li>Remsik, J., Boire, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+path+to+leptomeningeal+metastasis%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Cancer%22%5BJournal%5D)">The path to leptomeningeal metastasis.</a> Nat Rev Cancer. 24 (7), 448-460 (2024).</li>
<li>Kokkoris, C. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Leptomeningeal+carcinomatosis.+How+does+cancer+reach+the+pia-arachnoid%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer%22%5BJournal%5D)">Leptomeningeal carcinomatosis. How does cancer reach the pia-arachnoid.</a> Cancer. 51 (1), 154-160 (1983).</li>
<li>Remsik, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Leptomeningeal+metastatic+cells+adopt+two+phenotypic+states%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Rep%22%5BJournal%5D)">Leptomeningeal metastatic cells adopt two phenotypic states.</a> Cancer Rep. 5 (4), e1236(2022).</li>
<li>Chi, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cancer+cells+deploy+lipocalin-2+to+collect+limiting+iron+in+leptomeningeal+metastasis%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Cancer cells deploy lipocalin-2 to collect limiting iron in leptomeningeal metastasis.</a> Science. 369 (6501), 276-282 (2020).</li>
<li>Yin, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+molecular+graded+prognostic+assessment+%28molGPA%29+model+specific+for+estimating+survival+in+lung+cancer+patients+with+leptomeningeal+metastases%5BTitle%5D)+AND+%22Lung+Cancer%22%5BJournal%5D)">A molecular graded prognostic assessment (molGPA) model specific for estimating survival in lung cancer patients with leptomeningeal metastases.</a> Lung Cancer. 131, 134-138 (2019).</li>
<li>Li, Y. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Leptomeningeal+Metastases+in+Patients+with+NSCLC+with+EGFR+Mutations%5BTitle%5D)+AND+%22J+Thorac+Oncol%22%5BJournal%5D)">Leptomeningeal Metastases in Patients with NSCLC with EGFR Mutations.</a> J Thorac Oncol. 11 (11), 1962-1969 (2016).</li>
<li>Li, Y. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Unique+genetic+profiles+from+cerebrospinal+fluid+cell-free+DNA+in+leptomeningeal+metastases+of+EGFR-mutant+non-small-cell+lung+cancer%3A+a+new+medium+of+liquid+biopsy%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Oncol%22%5BJournal%5D)">Unique genetic profiles from cerebrospinal fluid cell-free DNA in leptomeningeal metastases of EGFR-mutant non-small-cell lung cancer: a new medium of liquid biopsy.</a> Ann Oncol. 29 (4), 945-952 (2018).</li>
<li>Posner, J. B., Chernik, N. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intracranial+metastases+from+systemic+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Adv+Neurol%22%5BJournal%5D)">Intracranial metastases from systemic cancer.</a> Adv Neurol. 19, 579-592 (1978).</li>
<li>Kuiper, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Treatment+and+survival+of+patients+with+EGFR-mutated+non-small+cell+lung+cancer+and+leptomeningeal+metastasis%3A+A+retrospective+cohort+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Lung+Cancer%22%5BJournal%5D)">Treatment and survival of patients with EGFR-mutated non-small cell lung cancer and leptomeningeal metastasis: A retrospective cohort analysis.</a> Lung Cancer. 89 (3), 255-261 (2015).</li>
<li>Tsukada, Y., Fouad, A., Pickren, J. W., Lane, W. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Central+nervous+system+metastasis+from+breast+carcinoma.+Autopsy+study%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer%22%5BJournal%5D)">Central nervous system metastasis from breast carcinoma. Autopsy study.</a> Cancer. 52 (12), 2349-2354 (1983).</li>
<li>Singh, M., Bakhshinyan, D., Venugopal, C., Singh, S. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preclinical+Modeling+and+Therapeutic+Avenues+for+Cancer+Metastasis+to+the+Central+Nervous+System%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Oncol%22%5BJournal%5D)">Preclinical Modeling and Therapeutic Avenues for Cancer Metastasis to the Central Nervous System.</a> Front Oncol. 7, 220(2017).</li>
<li>Shi, M. X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((PROTAC+EZH2+degrader-1+overcomes+the+resistance+of+podophyllotoxin+derivatives+in+refractory+small+cell+lung+cancer+with+leptomeningeal+metastasis%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Cancer%22%5BJournal%5D)">PROTAC EZH2 degrader-1 overcomes the resistance of podophyllotoxin derivatives in refractory small cell lung cancer with leptomeningeal metastasis.</a> BMC Cancer. 24 (1), 504(2024).</li>
<li>Choi, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+bioluminescence+imaging+for+leptomeningeal+dissemination+of+medulloblastoma+in+mouse+models%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Cancer%22%5BJournal%5D)">In vivo bioluminescence imaging for leptomeningeal dissemination of medulloblastoma in mouse models.</a> BMC Cancer. 16 (1), 723(2016).</li>
<li>Zhao, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dura+immunity+configures+leptomeningeal+metastasis+immunosuppression+for+cerebrospinal+fluid+barrier+invasion%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Cancer%22%5BJournal%5D)">Dura immunity configures leptomeningeal metastasis immunosuppression for cerebrospinal fluid barrier invasion.</a> Nat Cancer. 5 (12), 1940-1961 (2024).</li>
<li>Boire, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Complement+Component+3+Adapts+the+Cerebrospinal+Fluid+for+Leptomeningeal+Metastasis%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Complement Component 3 Adapts the Cerebrospinal Fluid for Leptomeningeal Metastasis.</a> Cell. 168 (6), 1101-1113.e13 (2017).</li>
<li>Zhang, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metastasis+Initiation+Is+Coupled+with+Bone+Remodeling+through+Osteogenic+Differentiation+of+NG2%2B+Cells%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Discov%22%5BJournal%5D)">Metastasis Initiation Is Coupled with Bone Remodeling through Osteogenic Differentiation of NG2+ Cells.</a> Cancer Discov. 13 (2), 474-495 (2023).</li>
<li>Louis, K. S., Siegel, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cell+viability+analysis+using+trypan+blue%3A+manual+and+automated+methods%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Cell viability analysis using trypan blue: manual and automated methods.</a> Methods Mol Biol. 740, 7-12 (2011).</li>
<li>Green, T. R. F., Ortiz, J. B., Harrison, J. L., Lifshitz, J., Rowe, R. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Simultaneous+Cryosectioning+of+Multiple+Rodent+Brains%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Simultaneous Cryosectioning of Multiple Rodent Brains.</a> J Vis Exp. (139), e58513(2018).</li>
<li>Feldman, A. T., Wolfe, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tissue+Processing+and+Hematoxylin+and+Eosin+Staining%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Tissue Processing and Hematoxylin and Eosin Staining.</a> Methods Mol Biol. 1180, 31-43 (2014).</li>
<li>Shih, A. Y., Mateo, C., Drew, P. J., Tsai, P. S., Kleinfeld, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+polished+and+reinforced+thinned-skull+window+for+long-term+imaging+of+the+mouse+brain%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">A polished and reinforced thinned-skull window for long-term imaging of the mouse brain.</a> J Vis Exp. (61), e3742(2012).</li>
<li>Shih, A. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Two-photon+microscopy+as+a+tool+to+study+blood+flow+and+neurovascular+coupling+in+the+rodent+brain%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cereb+Blood+Flow+Metab%22%5BJournal%5D)">Two-photon microscopy as a tool to study blood flow and neurovascular coupling in the rodent brain.</a> J Cereb Blood Flow Metab. 32 (7), 1277-1309 (2012).</li>
<li>Drew, P. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+optical+access+through+a+polished+and+reinforced+thinned+skull%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">Chronic optical access through a polished and reinforced thinned skull.</a> Nat Methods. 7 (12), 981-984 (2010).</li>
<li>Wilcox, J. A., Li, M. J., Boire, A. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Leptomeningeal+Metastases%3A+New+Opportunities+in+the+Modern+Era%5BTitle%5D)+AND+%22Neurotherapeutics%22%5BJournal%5D)">Leptomeningeal Metastases: New Opportunities in the Modern Era.</a> Neurotherapeutics. 19 (6), 1782-1798 (2022).</li>
<li>Zhang, C., Lowery, F. J., Yu, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intracarotid+Cancer+Cell+Injection+to+Produce+Mouse+Models+of+Brain+Metastasis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Intracarotid Cancer Cell Injection to Produce Mouse Models of Brain Metastasis.</a> J Vis Exp. (120), e55085(2017).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>1,5 ml Eppendorf Tuben</td><td>Bioscharf</td><td>BS-15-M-S</td><td></td></tr><tr><td>15ml Zentrifugenröhrchen</td><td>LABSELECT</td><td>Nr. CT-002-15A</td><td></td></tr><tr><td>31G x 8mm Insulinspritze (0,3ml)</td><td>Versprochen</td><td>/</td><td></td></tr><tr><td>Schleifbohrer</td><td>GLOBALEBIO</td><td>GEGZ-AM1</td><td></td></tr><tr><td>Heizmatte für Tiere</td><td>Woggee</td><td>/</td><td></td></tr><tr><td>Kryoform</td><td>Supin</td><td>SP-AB-7 x 7 x 5</td><td></td></tr><tr><td>Enthaarungs-Cremes</td><td>Nair</td><td>1.00023E+11</td><td></td></tr><tr><td>D-Luciferin</td><td>Gold Biologie</td><td>GLÜCK-1G</td><td></td></tr><tr><td>DMEM</td><td>Gibco</td><td>C11995500CP</td><td></td></tr><tr><td>FBS</td><td>Gibco</td><td>10270-106</td><td></td></tr><tr><td>IVIS-Spektrum</td><td>Schieblehre</td><td>/</td><td></td></tr><tr><td>Ketamin</td><td>Jiangsu Hengrui Pharmaceuticals Co., Ltd.</td><td>H20193336</td><td></td></tr><tr><td>Optimale Schnitttemperatur</td><td>Sakura</td><td>4583-1</td><td></td></tr><tr><td>Paraformaldehyd</td><td>SCR</td><td>80096618</td><td></td></tr><tr><td>PBS</td><td>Servicebiografie</td><td>Nr. G4202-500ML</td><td></td></tr><tr><td>Pen/Strep Amphotericin B</td><td>Gibco</td><td>15140122</td><td></td></tr><tr><td>Rasierapparat</td><td>Hipidog</td><td>Artikel-Nr.: 2103CGMJ3373-GQ22N526</td><td></td></tr><tr><td>Stereo-Fluoreszenzmikroskop</td><td>Olymp</td><td>/</td><td></td></tr><tr><td>Gerade Pinzette</td><td>Beyotime</td><td>FS019</td><td>Muss autoklaviert werden</td></tr><tr><td>Chirurgische Schere</td><td>Beyotime</td><td>FS001</td><td>Muss autoklaviert werden</td></tr><tr><td>Dreieckiges Kopfstück zur Mausfixierung</td><td>Transzendieren Sie das Vivoskop</td><td>TVS-FDM-027</td><td></td></tr><tr><td>TRITC-Dextran, MW 70000</td><td>MedChemExpress</td><td>HY-158082C</td><td></td></tr><tr><td>Trypsin/EDTA-Lösung</td><td>Gibco</td><td>25200056</td><td></td></tr><tr><td>Zwei-Photonen-Laser-Scanning-Mikroskopie</td><td>Olymp</td><td>/</td><td></td></tr><tr><td>Vetbond Tissue-Klebstoffe</td><td>3M</td><td>1469SB</td><td></td></tr><tr><td>Xylazin</td><td>Sigma</td><td>Nr. X1126</td><td></td></tr></tbody></table>

minimalinvasives cisterna magna-injektionsmodell für studien zur leptomeningealen metastasierung bei mäusen

Minimally Invasive Cisterna Magna Injection Model for Leptomeningeal Metastasis Studies in Mice

Abbildung 1 zeigt die Platzierung der Maus für die Injektion und die Einstichstelle aus der Seiten- und Frontansicht. Abbildung 2 zeigt repräsentative in vivo Biolumineszenzbilder von Tieren, die mit verschiedenen Ansätzen auf die Erzeugung von LM getestet wurden. GFP-Luciferase-markierte LLC1-Zellen wurden den Tieren auf verschiedenen Wegen injiziert, gefolgt von biolumineszierender Bildgebung. Wie in Abbildung 2A...

Minimalinvasives Cisterna magna-Injektionsmodell für Studien zur leptomeningealen Metastasierung bei Mäusen

Leptomeningeal metastasis (LM), the spread of cancer cells into the cerebrospinal fluid (CSF)-filled leptomeninges, is a rare yet devastating complication ...

Leptomeningeale Metastasen, eine sehr schwere und tödliche Form der metastasierenden Erkrankung. Seine Umgebung hängt wahrscheinlich von der Interaktion zwischen Tumorzellen und der einzigartigen Mikroumgebung des Gewebes ab. Bei Tiermodellen ist es sehr wichtig, den zugrunde liegenden Mechanismus zu untersuchen.Um leptomeningeale Metastasen in vivo zu untersuchen, verwenden Forscher häufig Techniken wie die intrakardiale, intrakarotisartige Arterie oder die direkte Injektion von Krebszellen in die Cisterna magna oder die Hirnventrikel. Diese Ansätze helfen dabei, zuverlässige Mausmodelle für die LM-Forschung zu generieren. Aktuelle Versuche haben bemerkenswerte Einschränkungen. Zum Beispiel erzeugen intrakardiale Injektionen oft Tumore außerhalb des leptomeningealen Raums und können zu Todesfällen führen, die nichts mit LM zu tun haben. Während Karotis-Zugänge hochinvasiv und zeitaufwändig sind. Dieses Protokoll kann schnell LM-Modelle generieren. Es umgeht die Blut-Hirn-Schranke, bringt Tumorzellen präzise in den leptomeningealen Raum und reduziert sowohl chirurgische Traumata als auch wertvolle Zeit.[Dozent] Nehmen Sie zunächst 1 Million Lewis-Lungenkarzinom- oder LLC1-Zellen in

minimally-invasive-cisterna-magna-injection-model-for-leptomeningeal

Research

Forschung

JoVE Journal

Cancer Research

Krebsforschung

Quelle: Joshi, K., et al. Stereotaktischer chirurgischer Ansatz zur Mikroinjektion des kaudalen Hirnstamms und des oberen zervikalen Rückenmarks über die Cisterna magna bei Mäusen. J. Vis. Exp. (2022)Dieses Video zeigt den stereotaktischen Ansatz der Cisterna magna für die gezielte Verabreichung an den Hirnstamm und das obere Rückenmark. Durch den Zugang zur mit Liquor gefüllten Cisterna magna ermöglicht dieser Ansatz präzise Injektionen in Bereiche, die mit stereotaktischen Standardmethoden...

Stereotaktischer Cisterna magna-Ansatz für die therapeutische Verabreichung in einem Mausmodell

Quelle: Zamboni, M., et al., Induktion der Modifikation von leptomeningealen Zellen durch intrazisternale Injektion. J. Vis. Exp. (2020)Dieses Video zeigt das Verfahren zur Verabreichung eines Induktor-Medikaments in die Cisterna magna einer anästhesierten Maus. Die Injektion induziert selektiv die Expression von Fluoreszenzmarkern in Oberflächenzellen des Gehirns, die über die Zerebrospinalflüssigkeit zugänglich sind, was durch Fluoreszenzbildgebung bestätigt wurde.

Gezielte Verabreichung von Medikamenten in einem Mausmodell über Cisterna Magna Injektion

In diesem Video beschreiben wir das Verfahren, um vom Menschen stammende Tumorzellen in die Cisterna magna des Gehirns einer Maus zu bringen. Das orthotope Mausmodell kann verwendet werden, um die metastasierende Ausbreitung von Krebs auf die kranialen Hirnhäute zu untersuchen.

Chirurgische Cisterna magna Injektion: eine Methode zur direkten Verabreichung von Tumorzellen in das zentrale Nervensystem des Mausmodells

Hier beschreiben wir ein Protokoll zur Durchführung der Cisterna Magna Kanülierung (CMc), minimalinvasiv, Tracer, Substrate und Signalmoleküle in den Liquor cerebrospinalis (CSF) zu liefern. In Kombination mit verschiedenen Bildgebungsverfahren ermöglicht CMc Glymphatic System sowie CSF Dynamik Bewertung und Gehirn-weite Lieferung verschiedener Verbindungen.

Kanüle Implantation in die Cisterna Magna von Nagetieren

Wir beschreiben eine intrazisternale Injektion, die eine an der Spitze gebogene Nadel verwendet, die zum Schädel stabilisiert werden kann, wodurch das Risiko einer Schädigung des darunter liegenden Parenchyms beseitigt wird. Der Ansatz kann für die genetische Schicksalskartierung und Manipulation von Leptomeningealzellen und für die Verfolgung der Bewegung von Zerebrospinalflüssigkeit verwendet werden.

Induktion von Leptomeningealzellen Modifikation über intrazisternale Injektion

Die modellierung der intrakraniellen Hirnmetastasen wird durch die Unfähigkeit erschwert, die Tumorgröße und die Reaktion auf die Behandlung mit präzisen und zeitnahen Methoden zu überwachen. Die vorgestellte Methodik koppelt die intrakranielle Tumorinjektion mit einer Magnetresonanztomographie-Analyse, die in Kombination präzise und konsistente Injektionen, eine verbesserte Tierüberwachung und genaue Tumorvolumenmessungen kultiviert.

Modellierung von Hirnmetastasen durch intrakranielle Injektion und Magnetresonanztomographie

Hier beschreiben wir ein murines Xenograft-Modell, das funktionell einem Ommaya-Reservoir bei Patienten ähnelt. Wir haben die Murine Ommaya entwickelt, um neuartige Therapeutika für die universell tödliche Leptomeningealerkrankung zu untersuchen.

Ein murines Ommaya Xenograft-Modell zur Untersuchung der direkten zielgerichteten Therapie von Leptomeningealerkrankungen

Wir beschreiben ein Xenotransplantat-Mausmodell für Brustkrebs-Hirnmetastasen, die durch Schwanzveneninjektion einer endogen HER2-amplifizierten entzündlichen Brustkrebszelllinie erzeugt werden.

Modellierung der Hirnmetastasierung durch Injektion von entzündlichen Brustkrebszellen in die Schwanzvene

Das vorliegende Protokoll beschreibt die Entwicklung eines reproduzierbaren Mausmodells des Rückenmarksglioms durch Injektion von Tumorzellen in den Zwischenwirbelraum und bietet damit einen effektiveren und weniger invasiven Ansatz für die Forschung und therapeutische Entwicklung.

Chirurgische Transplantation von Tumorzellen in das Rückenmark von Mäusen

Hier wird ein Protokoll zur Bewertung der meningealen lymphatischen Gefäße (MLVs) der Maus vorgestellt, die eine wichtige Rolle bei mehreren neurologischen Erkrankungen spielen. Ziel dieses Protokolls ist es, eine integrierte Methode bereitzustellen, die sowohl die funktionale Bewertung der Tracerdrainage als auch eine detaillierte morphologische Charakterisierung des dorsalen MLVs-Netzwerks ermöglicht.

Integriertes Protokoll zur Beurteilung der meningealen Lymphatik: Cisterna-Magna-Injektion, Lymphknotenbildgebung, meningeale Dissektion und Ganz-Mount-Färbung

Lernen Sie eine minimalinvasive Injektionsmethode für die Cisterna magna bei Mäusen zur Induktion leptomeningealer Metastasen. Dieses Verfahren reduziert Trauma und extracranielle Tumorlast erheblich.

Minimalinvasives Cisterna magna-Injektionsmodell für Studien zur leptomeningealen Metastasierung bei Mäusen

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