Name: Netzwerkpharmakologie und Validierung der antidepressiven Mechanismen von Qiangzhifang in einem Rattenmodell für chronische Restraint Stress-induzierte Depression (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-06-06T15:25:00.000+00:00
Duration: 8 min 15 s
Description: Erfahren Sie die antidepressive Wirkung von Qiangzhifang im Rattenmodell chronischer Immobilisierungsstress-induzierter Depression. Diese Studie untersucht die Regulation der HIF-1- und JAK-STAT-Signalwege mittels Netzwerkpharmakologie.

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Alle Versuchsprotokolle wurden von der Ethikkommission für Tierversuche der Universität für Traditionelle Chinesische Medizin (Zulassungsnummer: YYLW2023000327) genehmigt und entsprachen dem Leitfaden für die Pflege und Verwendung von Labortieren, der von den National Institutes of Health herausgegeben wurde. In diesem Experiment verwendeten wir 40 gesunde männliche Wistar-Ratten mit Lichtschutzfaktor und einem durchschnittlichen Körpergewicht von (140 ± 10) g (Abbildung 1). In der Materialtabelle finden Sie eine Liste aller Materialien, Geräte und Software, die in diesem Protokoll verwendet werden.
1. Modell der Rattendepression
<ol>
	<li>Unterbringung und Gruppierung von Tieren<ol>
		<li>Betreten Sie den Zuchtraum mit den Tieren und nummerieren Sie sie mit einem Schwanzmarkierungsinstrument.</li>
		<li>Halten Sie die Ratten einzeln in Käfigen mit einer Temperatur von 21 ± 2 °C und einem Hell-Dunkel-Zyklus von 12 h/12 h.</li>
		<li>Akklimatisieren Sie die Ratten 7 Tage lang im Labor, um ad libitum Zugang zu Futter und Wasser zu erhalten, während Sie sie täglich zur Anpassung behandeln.</li>
		<li>Messen Sie nach der Eingewöhnungsphase das Körpergewicht und führen Sie die Saccharose-Präferenztests (SPT) und Freifeldtests (OFT) durch.</li>
		<li>Teilen Sie die Ratten basierend auf den experimentellen Daten in vier Gruppen ein und stellen Sie sicher, dass jede Gruppe aus 10 Ratten besteht: die Kontrollgruppe (CON), die Modellgruppe (CRS), die QZF-Gruppe und die Fluoxetin (F)-Gruppe.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Etablierung eines Modells für chronischen Restraint Stress (CRS) bei Ratten<ol>
		<li>Konstruiere die Ratten-Rückhaltevorrichtung. Wählen Sie ein transparentes Kunststoffrohr mit einem Durchmesser und einer Länge, die für die Größe21 der Ratte geeignet sind, damit die Ratte stehen und sich nach innen drehen kann, ohne dass sie entkommen kann. Verwenden Sie einen elektrischen Lötkolben-Locher, um Löcher an den Seiten des Kunststoffrohrs und am Deckel zu erzeugen, um eine gute Luftzirkulation zu gewährleisten.</li>
		<li>Legen Sie die Ratten 1 h nach der täglichen intragastrischen Verabreichung des Arzneimittels vorsichtig in die Rückhaltevorrichtungen (außer denen der Gruppe C) und stellen Sie sicher, dass sie sich in einer bequemen Position befinden.</li>
		<li>Entziehen Sie allen Gruppen von Ratten während der Fixierungszeit Futter und Wasser. Nachdem die Ruhigstellung abgelaufen ist, versorgen Sie sie gleichmäßig mit reichlich Futter und Wasser. Legen Sie die tägliche Fesseldauer auf 6 h (von 9:30 Uhr bis 15:30 Uhr) fest und halten Sie sie an 28 aufeinanderfolgenden Tagen aufrecht.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
2. Medikamentöse Intervention
<ol>
	<li>Verabreichen über die Sonde: 1 ml Lösung/100 g Körpergewicht, Fluoxetin (2,7 mg/kg-1/Tag-1) und QZF (2 g/kg-1/Tag-1)22. Versorgen Sie die Gruppen C und CRS mit äquivalenter normaler Kochsalzlösung für die Steuerung mit einer einzigen Variablen. HINWEIS: Die tägliche Verabreichung des Medikaments erfolgte um 08:00 Uhr, wobei synchron mit der Modelletablierung begonnen wurde und während des gesamten 28-tägigen Modellierungszeitraums angehalten wurde.</li>
</ol>
3. Saccharosepräferenztest (SPT)
<ol>
	<li>Entziehen Sie den Ratten 24 Stunden lang vor Beginn des Experiments Futter und Wasser.</li>
	<li>Bereiten Sie eine 1%ige wässrige Saccharoselösung vor und füllen Sie die Lösung und das reine Wasser zum Wiegen in die Trinkflaschen der Versuchstiere. Messen Sie den Verbrauch von reinem Wasser und Saccharosewasser, indem Sie die Flaschen vor und nach dem Experiment wiegen.</li>
	<li>Stellen Sie eine Flasche Saccharoselösung und eine Flasche reines Wasser an den Wasserauslass jedes Rattenkäfigdeckels, eine links und eine rechts, um freien Zugang zum Trinken zu haben. Um zu verhindern, dass Ratten eine Seite für die Wasseraufnahme bevorzugen, tauschen Sie nach 30 Minuten im Experiment die Positionen der Wasserflaschen links und rechts.</li>
	<li>Entfernen Sie nach 1 Stunde des Versuchs alle Wasserflaschen, wiegen Sie sie umgehend und notieren Sie den Verbrauch von Saccharoselösung und reinem Wasser. Berechnen Sie das wöchentliche Saccharose-Präferenzverhältnis mit der Formel: Saccharose-Präferenzwert = <img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/68198/68198eq001.jpg" style="margin: auto;"> × 100%</li>
</ol>
4. Messung des Körpergewichts
<ol>
	<li>Wiegen Sie die Ratten wöchentlich bei ihrem Eintritt in das Labor und stellen Sie die festgelegte Zeit für das Wiegen auf 7:00 Uhr ein. Legen Sie diesen Zeitplan fest, um die Beobachtung von Veränderungen des Körpergewichts zu erleichtern.</li>
</ol>
5. Freilandtest (OFT)
<ol>
	<li>Bevor das Experiment beginnt, gewöhnen Sie die Ratten für 1 h an den Verhaltensraum und passen Sie die Beleuchtung in der offenen Feldbox an, um eine gleichmäßige Verteilung zu gewährleisten. Vergewissern Sie sich, dass die Ratten in der Tracking-Software deutlich sichtbar sind.</li>
	<li>Verwenden Sie das Video-Tracking- und Analysesystem, um die Unterseite der offenen Feldbox (50 cm x 50 cm x 50 cm) in neun flächengleichflächige quadratische Raster zu unterteilen. Legen Sie die acht Raster, die an die Wände angrenzen, als peripheren Bereich und das mittlere Raster als zentralen Bereich fest.</li>
	<li>Setze die Ratte in den mittleren Bereich des offenen Feldkastens. Zeichnen Sie die Bewegung der Ratte 5 Minuten lang mit dem Video-Tracking-System auf.</li>
	<li>Reinigen Sie die Kammer nach dem Testen jeder Ratte mit 75 % Ethanol, um Restgeruch zu entfernen und eine Beeinträchtigung des Verhaltens der nächsten Ratte zu verhindern. Geben Sie die Gesamtentfernung (mm) der Aktivitäten im offenen Feld und die Anzahl der Einträge im zentralen Raster in den OFT-Datensätzen ein.</li>
</ol>
6. Erzwungener Schwimmtest (FST)
HINWEIS: Das Experiment mit erzwungenem Schwimmen an der Ratte besteht aus einem Vorexperiment und einem formalen Experiment. Führen Sie den Vorversuch 24 Stunden vor dem formalen Experiment nach dem gleichen Verfahren durch, wobei die Ratte 15 Minuten lang schwimmt.
<ol>
	<li>Transportieren Sie die Versuchstiere mindestens 30 Minuten vor dem Versuch in den Verhaltensraum, damit sie sich an die Umgebung gewöhnen können.</li>
	<li>Bereiten Sie einen transparenten zylindrischen Wasserzylinder aus Plexiglas (50 cm hoch, 20 cm Durchmesser) vor und füllen Sie ihn mit Wasser bei 23-25 °C. Passen Sie die Wassertiefe an das Gewicht des Tieres an und stellen Sie sicher, dass der Schwanz des Tieres einen bestimmten Abstand zum Boden des Zylinders hat.</li>
	<li>Setzen Sie die Ratten langsam in den Wasserzylinder und verhalten Sie sich während des gesamten Experiments ruhig. Aktivieren Sie die Kamera und das Signalerfassungssystem. Beobachten und notieren Sie die Dauer der schwebenden Immobilität innerhalb von 300 s. Nehmen Sie die Ratten sofort aus dem Wasser und trocknen Sie sie am Ende des Versuchs.</li>
	<li>Ersetzen Sie nach jeder Sitzung das Wasser, um jegliche Beeinflussung der nächsten Ratte zu vermeiden.</li>
</ol>
7. Pharmakologische Vorhersage des Netzwerks
<ol>
	<li>Sammlung von QZF-Verbindungen und mutmaßlichen Zielen<ol>
		<li>Greifen Sie auf die Datenbank für Systempharmakologie der Traditionellen Chinesischen Medizin (TCMSP) (https://old.tcmsp-e.com/)23, die HERB-Datenbank24 und die TCMID-Datenbank (https://www.bidd.group/TCMID/) zu. Verwenden Sie die acht TCM-Namen in QZF, darunter GZ, YZ, YZR, BS, CBM, RS, HJT und ZGC, als Schlüsselwörter, um nach Wirkstoffen und Zielen der Kräuter zu suchen. Sammeln Sie Ziele aus dem TCMSP und der Schweizer Zielvorhersage (http://www.swisstargetprediction.ch/). Legen Sie den Filterwert auf Wahrscheinlichkeit* &gt; 0 fest. HINWEIS: In der Regel wurden die Inhaltsstoffe aufgrund ihrer pharmakokinetischen Eigenschaften als Wirkstoffe aufgenommen: orale Bioverfügbarkeit (OB) ≥ 30 % und arzneimittelähnliche Eigenschaften (DL) ≥ 0,1825.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Vorhersage von Krankheitszielen<ol>
		<li>Suchen Sie in der GeneCards-Datenbank (https://www.genecards.org/) nach dem Schlüsselwort "Depression", ermitteln Sie Genziele, die mit Depressionen in Verbindung gebracht werden, laden Sie die elektronische Tabelle mit Krankheitszielen herunter, filtern Sie die Genwerte, die über dem Durchschnittswert liegen, und stellen Sie eine Liste von Depressionszielenzusammen 26.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Wirkstoff-Komponente-Krankheit-Zielnetzwerk<ol>
		<li>Erstellen Sie eine neue Tabelle, und füllen Sie sie in derselben Spalte mit Zielen im Zusammenhang mit Depressionen und Medikamentenzielen. Klicken Sie in der Menüleiste auf Start | Bedingte Formatierung | Regeln zum Hervorheben von Zellen | Doppelte Werte. Wählen Sie im angezeigten Dialogfeld ein Format aus (z. B. "Hellrote Füllung")27 und klicken Sie auf OK, um die Ergebnisse anzuzeigen.</li>
		<li>Starten Sie die Netzwerkanalyse-Software und importieren Sie die Tabellenkalkulationsdatei, indem Sie in der Menüleiste auf Datei klicken | Importieren | Netzwerk. Optimieren Sie das Erscheinungsbild des Netzwerks, indem Sie die Größe und Farbe der Knoten im Bereich Stil anpassen, der sich in der linken Systemsteuerung befindet. Führen Sie eine Netzwerk-Topologie-Analyse durch, indem Sie in der Menüleiste auf Extras klicken | Analysieren Sie Netzwerk27.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Protein-Protein-Interaktionsnetzwerk (PPI)<ol>
		<li>Greifen Sie auf das Jvenn-Tool (https://jvenn.toulouse.inrae.fr/app/example.html) zu, laden Sie die Wirkstoffziele und Krankheitsziele separat hoch, stellen Sie die überlappenden Gene (OGE) zwischen den vermuteten Zielen der Verbindung und den Krankheitszielen dar. Klicken Sie auf die Zahlen im Bild, kopieren Sie sie in eine Tabelle und laden Sie das Venn-Diagrammbild herunter.</li>
		<li>Greifen Sie auf die STRING-Datenbank (https://stringdb.org/)28 zu, und geben Sie die OGEs aus der Tabelle in die Datenbank ein. Fügen Sie insbesondere die QZF-Anti-Depressions-Zielliste in das Dialogfeld Namensliste ein . Wählen Sie Homo sapiens im Abschnitt Organismen aus und klicken Sie auf SUCHEN | WEITER. Wählen Sie in der Titelleiste die Option Exporte aus, und laden Sie die Übersichtstabelle des PPI-Netzwerks im PNG- und TSV-Formatherunter 29.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Screening von Kernproteinen<ol>
		<li>Starten Sie die Netzwerkanalyse-Software (https://cytoscape.org/). Klicken Sie dann in der Menüleiste auf Datei | Importieren | Netzwerk | Datei zum Importieren der Datei im TSV-Format, die im vorherigen Schritt30 generiert wurde.</li>
		<li>Wählen Sie in der Menüleiste Netzwerk analysieren aus und klicken Sie auf die Schaltfläche Analysieren . Zeigen Sie dann die Analyseergebnisse an, und machen Sie sich mit den allgemeinen strukturellen Merkmalen des Netzwerks vertraut, z. B. die Anzahl der Knoten, die Anzahl der Kanten und den durchschnittlichen Grad.</li>
		<li>Wählen Sie Apps | App Manager in der Menüleiste. Suchen Sie nach MCODE, installieren Sie das Plug-In, und führen Sie das Plug-In aus, um das Hubziel abzurufen. Suchen Sie dann nach CytoNCA, installieren Sie das Plug-in und konzentrieren Sie sich auf die drei Parameterwerte Grad, Closeness-Zentralität (CC) und Betweenness-Zentralität (BC). Entsprechend den Werten dieser Parameter werden Knoten mit höherem Grad, CC und BC gescreent, die im Allgemeinen als Kernproteine31 betrachtet werden.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Gen-Ontologie (GO) und Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes (KEGG) Anreicherungsanalyse<ol>
		<li>Öffnen Sie die Bioinformatik-Plattform (https://www.omicshare.com/). Klicken Sie auf das Menü Tools , suchen Sie das ID-Genkonvertierungstool und klicken Sie darauf. Klicken Sie dann auf die Schaltfläche Datei hochladen , wählen Sie den generierten Schritt auf dem Kern der Zielgene aus und laden Sie die Liste der konvertierten Datei-IDs herunter.</li>
		<li>Klicken Sie im Menü Extras auf das Tool Dynamische KEGG-Anreicherungsanalyse. Laden Sie die Gen-ID-Liste hoch. Wählen Sie in der Option Spezies die Option Homo sapiens aus und klicken Sie auf die Schaltfläche Senden.</li>
		<li>Klicken Sie im Menü Extras auf das Werkzeug Dynamische GO-Anreicherungsanalyse | Gen-Option | Option Datei hochladen. Wählen Sie die Gen-ID-Liste und in der Option Spezies die Option Homo sapiens aus. Wählen Sie den GO-Typ für die Analyse aus, einschließlich biologischer Prozess, molekulare Funktion und zelluläre Komponente.</li>
		<li>Legen Sie für die Ergebnisse der KEGG- und GO-Anreicherungsanalyse den Filterschwellenwert auf p &lt; 0,05 fest. Ordnen Sie die Zählungen in absteigender Reihenfolge an.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
8. Verifizierung des molekularen Dockings
<ol>
	<li>Besuchen Sie die Website von PubChem (https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/). Geben Sie die Zielverbindungen in die Suchleiste ein. Klicken Sie auf die 2D-Struktur und laden Sie sie herunter.</li>
	<li>Öffnen Sie die Datenbank PDB (https://www.Rcsb.org/). Wählen Sie die Kristallstruktur mit hoher Auflösung, die den ursprünglichen Liganden enthält. Laden Sie die PDB-Datei herunter.</li>
	<li>Um die Proteinstruktur zu optimieren, öffnen Sie die molekulare Visualisierungssoftware. Laden Sie die heruntergeladene PDB-Datei. Entfernen Sie Wassermoleküle und speichern Sie die optimierte PDB-Datei.</li>
	<li>Öffnen Sie die Molecular Docking-Software und importieren Sie die optimierte PDB-Datei. Klicken Sie in AutoDockTools auf Bearbeiten | Wasser löschen , um Wassermoleküle zu löschen. Klicken Sie auf Bearbeiten | Wasserstoff hinzufügen | Hinzufügen , um dem Protein und dem LigandenWasserstoffatome hinzuzufügen 29.</li>
	<li>Legen Sie in AutoDockTools die Rezeptorleiste auf receptor.pdbqt und die Ligandenleiste auf ligand.pdbqt fest. Öffnen Sie das pdbqt. , um die Bindungsstellen des Proteins und des Liganden anzuzeigen, und stellen Sie die Größe und Position der Dockingbox so ein, dass sie das Rezeptorprotein und die Ligandenverbindung vollständig umschließen kann. Klicken Sie in AutoDockTools auf Raster | Definieren Sie Gitterbox , um die Mittelpunktkoordinaten und Abmessungen der Box festzulegen und Standardwerte für das molekulare Andocken zu verwenden. Die Docking-Frames werden automatisch in absteigender Reihenfolge der Bindungsenergien sortiert.</li>
	<li>Öffnen Sie die Ergebnisdatei, und notieren Sie den optimalen Wert für die Bindungsenergie. Niedrigere Bindungsenergien deuten auf eine stabilere Bindung hin. Verwenden Sie die molekulare Visualisierungssoftware, um die Ergebnisdatei zu laden. Passen Sie die Ansicht und die Farbe an, um die Liganden-Rezeptor-Wechselwirkung deutlich darzustellen.</li>
</ol>
9. Statistische Auswertung
<ol>
	<li>Führen Sie statistische Analysen in der wissenschaftlichen Datenanalyse- und Visualisierungssoftware durch und stellen Sie alle Daten als Mittelwert ± SEM dar. Verwenden Sie die Zwei-Wege-ANOVA mit wiederholten Messungen für Vergleiche zwischen Gruppen vor und nach der Verabreichung des Arzneimittels. Verwenden Sie die unidirektionale ANOVA für Vergleiche zwischen mehr als zwei Gruppen.</li>
	<li>Nehmen Sie den Wert von P &lt; 0,05 als statistisch signifikant an.</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>System zur Analyse des Tierverhaltens</td><td>Shanghai Xinsoft Information Technology Co., LTD</td><td>XR-SuperMaze</td><td></td></tr><tr><td>AutoDockWerkzeuge</td><td>Das Scripps Research Institute</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Zytolandschaft&nbsp; Software</td><td>Cytoscape-Konsortium</td><td>Version 3.7.2</td><td></td></tr><tr><td>Locher für Elektrolötkolben</td><td>Nanjing Naiwei Technology Co., Ltd.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Fluoxetin</td><td>Lilly Suzhou Pharmaceutical Co., LTD</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Experimentelles Freifeldsystem</td><td>Shanghai Xinsoft Information Technology Co., LTD</td><td>XR-XZ301</td><td></td></tr><tr><td>PyMol</td><td>Schr&ouml; Kondom</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Qiangzhifang&nbsp;</td><td>Angeschlossenes Krankenhaus der Shandong Universität für Traditionelle Chinesische Medizin, Jinan, China</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Transparentes Kunststoffrohr&nbsp;</td><td>Nantong Baiyang Plastic Products Co., Ltd.&nbsp;</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

netzwerkpharmakologie und validierung der antidepressiven mechanismen von qiangzhifang in einem rattenmodell für chronische restraint stress-induzierte depression

Network Pharmacology and Validation of the Antidepressant Mechanisms of Qiangzhifang in a Chronic Restraint Stress-induced Depression Rat Model

Verhaltenstestergebnisse im CRS-induzierten Rattendepressionsmodell 
Ergebnisse des Saccharose-Präferenztests Zu Studienbeginn gab es keinen Unterschied im Saccharosepräferenzkoeffizienten zwischen den Gruppen (P &gt; 0,05). Nach 28 Tagen Intervention war der Saccharosepräferenzkoeffizient der CRS-Gruppe signifikant niedriger als der der CON-Gruppe (P &lt; 0,05), während die F- und QZF-Gruppen im Vergleich zur CRS-Gruppe signifikant höhere...

Netzwerkpharmakologie und Validierung der antidepressiven Mechanismen von Qiangzhifang in einem Rattenmodell für chronische Restraint Stress-induzierte Depression

Depression is a complex psychiatric disorder that poses significant treatment challenges.Qiangzhifang (QZF), a compound used in traditional Chinese ...

Diese Forschung zielt darauf ab, zu untersuchen, wie Qiangzhifang gegen die Depression wirkt, wichtige Wirkstoffe zu identifizieren und ihre Wirkmechanismen zu verstehen. Diese Studie füllt die Lücke im Verständnis der spezifischen Mechanismen und Wirkstoffe von Qiangzhifang zur Verfolgung von Depressionen.Wir werden untersuchen, wie Qiangzhifang das Immunsystem beeinflusst, um Depressionen zu finden und ihre potenziellen neuen therapeutischen Anwendungen zu erforschen.[Erzähler] Um mit der Konstruktion der Rattenrückhaltevorrichtung zu beginnen, wählen Sie ein transparentes Kunststoffrohr mit einem Durchmesser und einer Länge, die für die Größe der Ratte geeignet sind, so dass die Ratte stehen und sich nach innen drehen kann, während ein Entweichen verhindert wird. Mit einem Lötkolben-Locher Löcher an den Seiten des Kunststoffrohrs und am Deckel bohren, um eine gute Luftzirkulation zu gewährleisten. Teilen Sie die Ratten in vier Gruppen ein und stellen Sie sicher, dass jede Gruppe aus 10 Ratten besteht. Eine Stunde nach der täglichen intragastrischen Verabreichung des Arzneimittels legen Sie die Ratten vorsichtig in die Rückhaltevorrichtungen, mit Ausnahme derjenigen in der Kontrollgruppe, und stellen Sie sicher, dass sie sich in einer bequemen Position befinden. Verabreichen Sie der Fluoxetin-Gruppe Fluoxetin in einer Menge von 2,7 Milligramm pro Kilogramm pro Tag und Qiangzhifang in einer Menge von zwei Gramm pro Kilogramm pro Tag der Qiangzhifang-Gruppe über eine Sonde mit einem Dosierungsvolumen von einem Milliliter pro 100 Gramm Körpergewicht für beide Lösungen. Füllen Sie die Trinkflaschen der Versuchstiere mit reinem Wasser oder einer 1%igen wässrigen Saccharoselösung. Geben Sie jede Lösung in eine separate Flasche und wiegen Sie die Flaschen. Stellen Sie eine Flasche Saccharoselösung und eine Flasche reines Wasser an die Wasseraufnahme jedes Rattenkäfigs. Einer links und einer rechts für freien Zugang zum Trinken. Wechseln Sie nach 30 Minuten die Positionen der Flaschen, um eine Seitenbevorzugung zu vermeiden. Entfernen Sie nach einer Stunde alle Wasserflaschen. Wiegen Sie sie rechtzeitig, um die Verbrauchswerte für beide Lösungen zu messen. Berechnen Sie dann das wöchentliche Saccharose-Präferenzverhältnis mit der angegebenen Gleichung. Wiegen Sie die Ratten wöchentlich zu einer festen Zeit von sieben Uhr morgens. Zur Überwachung von Veränderungen des Körpergewichts. Passen Sie die Beleuchtung in der offenen Feldbox an, um eine gleichmäßige Verteilung und klare Sichtbarkeit der Ratten in der Tracking-Software zu gewährleisten. Verwenden Sie das Videoverfolgungs- und Analysesystem, um die Unterseite der Freifeldbox in neun gleich quadratische Raster zu unterteilen, wobei acht an die Wände angrenzende Raster als Randbereich und die Mitte als zentraler Bereich dienen. Platzieren Sie die Ratte im mittleren Bereich der offenen Feldbox und zeichnen Sie ihre Bewegung fünf Minuten lang mit dem Tracking-System auf. Reinigen Sie nach dem Testen jeder Ratte die offene Feldkammer mit 75 % Ethanol, um Restgerüche zu entfernen und eine Beeinträchtigung des Verhaltens der nächsten Ratte zu verhindern. Geben Sie die Gesamtdistanz der Aktivitäten im offenen Feld und die Anzahl der Einträge im zentralen Raster in die Protokolle der Tests im offenen Feld ein. Nehmen Sie einen durchsichtigen Wasserzylinder aus Plexiglas und füllen Sie ihn mit einer Temperatur von 23 bis 25 Grad Celsius. Passen Sie die Wassertiefe an das Gewicht des Tieres an und stellen Sie sicher, dass der Schwanz der Ratte einen bestimmten Abstand über dem Boden bleibt. Nachdem Sie die Kamera und das Signalerfassungssystem aktiviert haben, setzen Sie die Ratten langsam in den Wasserzylinder und bewahren Sie während des gesamten Experiments Stille. Beobachten und notieren Sie die Dauer der schwebenden Immobilität innerhalb von 300 Sekunden. Am Ende der Sitzung nehmen Sie die Ratten sofort aus dem Wasser und trocknen Sie sie. Tauschen Sie nach jeder Sitzung das Wasser im Zylinder aus, um eine Beeinflussung der nächsten Ratte zu verhindern. Access, die Systempharmakologie der Traditionellen Chinesischen Medizin bzw. TCMSP-Datenbank, die Kräuterdatenbank und die TCMID-Datenbank. Verwenden Sie die Namen der acht traditionellen chinesischen Arzneimittel in Qiangzhifang als Schlüsselwörter, um nach Wirkstoffen und Zielen der Kräuter zu suchen. Sammeln Sie Zielinformationen aus TCMSP und der Schweizer Zielvorhersagedatenbank. Festlegen des Filterwerts auf eine Wahrscheinlichkeit größer als Null. Navigieren Sie nun zur GeneCards-Datenbank und suchen Sie nach dem Stichwort Depression. Nachdem Sie die mit Depressionen assoziierten Genziele erhalten haben, laden Sie die elektronische Tabelle herunter, filtern Sie die Genwerte heraus, die über dem Durchschnitt liegen, und stellen Sie eine Liste von Zielen im Zusammenhang mit Depressionen zusammen. Greifen Sie nun auf das Gen-Tool zu und laden Sie die Wirkstoffziele hoch, gefolgt von den Zieldateien für die Krankheit. Plotten Sie die überlappenden Gene zwischen den vermuteten Zielen der Verbindung und den Krankheitszielen. Laden Sie dann das Diagrammbild herunter. Greifen Sie schließlich auf die String-Datenbank zu und fügen Sie die überlappenden Gene, insbesondere die Liste der überlappenden Ziele gegen Qiangzhifang gegen Depressionen, in das Dialogfeld "Liste der Namen" ein. Wählen Sie im Bereich Organismus den Homo sapiens aus und klicken Sie auf Suchen, gefolgt von Weiter. Wählen Sie die Option "Exporte" in der Titelleiste aus und laden Sie die Übersichtstabelle des Protein-Protein-Interaktionsnetzwerks in den Formaten PNG und TSV herunter. Im Saccharose-Präferenztest nach 28 Tagen hatte die Chronic Restraint-Stressgruppe eine signifikant niedrigere Saccharosepräferenz als die Kontrolle. Sowohl mit Qiangzhifang als auch mit Fluoxetin behandelte Gruppen zeigten signifikant höhere Werte im Vergleich zur Stressgruppe. Die Körpergewichtszunahme war in der chronischen Stressgruppe nach 28 Tagen im Vergleich zur Kontrollgruppe signifikant reduziert, aber in der Qiangzhifang- und der Fluoxetin-Gruppe im Vergleich zur Stressgruppe signifikant erhöht. Die Bewegungsdiagramme im offenen Feld zeigten eine reduzierte Exploration des zentralen Bereichs in der Stressgruppe. Während beide Behandlungsgruppen eine sichtbar zentralere Aktivität zeigten. Die zurückgelegte Gesamtstrecke im Freilandtest zeigte keine signifikanten Unterschiede zwischen allen Gruppen. Auch die Zeit im zentralen Bereich war in der Stressgruppe signifikant reduziert und in beiden Behandlungsgruppen signifikant erhöht. Darüber hinaus war die Immobilitätszeit im erzwungenen Schwimmtest in der Stressgruppe höher und bei beiden Behandlungen signifikant reduziert.

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Research

Forschung

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Medicine

Medizin

Das Protokoll für unvorhersehbaren chronischen milden Stress (UCMS) ist eine validierte Methode zur Untersuchung von Verhaltens- und physiologischen Veränderungen, die mit chronischem Stress und depressiven Symptomen verbunden sind. Acht Wochen nach der Einführung des UCMS-Protokolls führen bei Nagetieren beiderlei Geschlechts zu Verhaltensänderungen und schlechten Gesundheitsergebnissen.

Ein unberechenbarer Chronische leichter Stress Protokoll zur Anstiftung depressive Symptome, Verhaltensänderungen und negativen gesundheitlichen Folgen in Nagetiere

Dieses Protokoll beschreibt ein neues Modell mit dem gesunde Ratten Depression über einen bestimmten Zeitraum Vertrag könnte Periodthrough Ansteckung durch die Einwirkung von chronischen unberechenbar (CUS) Ratten betont.

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Das unvorhersehbare milde Dauerstress Protokoll zur Induktion Anhedonie bei Mäusen

Hier präsentieren wir ein Protokoll, um depressive Mausmodell zu etablieren, beobachten die Verhalten Veränderungen im Zusammenhang mit unvorhersehbaren milde Dauerstress (spritzt) und den Anti-Depressionen-Effekt von Xiaoyaosan zu bewerten.

Bewertung des Anti-Depressionen-Effekts des Xiaoyaosan auf chronisch gestresste Mäuse

Dieser Artikel bietet ein vereinfachtes und standardisiertes Protokoll zur Induktion von depressivem Verhalten bei chronisch immobilisierten Mäusen mit einem Restrainer. Darüber hinaus werden Verhalten und physiologische Techniken zur Überprüfung der Induktion von Depressionen erklärt.

Ein chronisches Immobilisierungs-Stressprotokoll zur Induzieren von Depressionen-ähnlichem Verhalten bei Mäusen

Das vorliegende Protokoll beschreibt eine Methode zur Validierung von Verhaltenstests und zur bioinformatischen Vorhersage der therapeutischen Wirksamkeit von Zadi-5, einer traditionellen mongolischen Medizin, bei Depressionen.

Verhaltens- und netzwerkpharmakologische Analysen für die traditionelle mongolische Medizin Zadi-5 in einem Rattenmodell der Depression

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