Name: Im lebenden Organismus Calcium-Bildgebung von neuronalen Ensembles in Netzwerken primärer sensorischer Neuronen in intakten Trigeminusganglien (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-08-01T13:20:00.000+00:00
Duration: 7 min 55 s
Description: Erfahren Sie die in vivo GCaMP-Calcium-Bildgebung von Trigeminusganglion-Neuronen zur Untersuchung peripherer Ganglien-Netzwerke bei Schmerz, Juckreiz und Berührung. Diese Methode ermöglicht die Erfassung neuronaler Aktivität in Echtzeit.

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<table><tbody><tr><td>Anased-Injektion (Xylazin)</td><td>Covetrus, Akorn</td><td>33197</td><td></td></tr><tr><td>Flurar 5x/0.25 M27 verstellbar</td><td>Cal Zeiss</td><td>420130-9900-000</td><td></td></tr><tr><td>Applikatoren mit Baumwollspitze</td><td>Mckesson</td><td>24-106-1S</td><td></td></tr><tr><td>Gebogenes Hämostat</td><td>Werkzeuge für die Feinwissenschaft</td><td>13007-12</td><td></td></tr><tr><td>DC-Temperaturregler</td><td>FHC</td><td>40-90-8D</td><td></td></tr><tr><td>DC Temperaturregler Heizkissen</td><td>FHC</td><td>40-90-2-05</td><td></td></tr><tr><td>Dumont Keramikbeschichtete Pinzette</td><td>Werkzeuge für die Feinwissenschaft</td><td>11252-50</td><td></td></tr><tr><td>FHC DC Temperaturregler</td><td>FHC</td><td>40-90-8D</td><td></td></tr><tr><td>Fluriso (Isofluran)</td><td>MWI Tiergesundheit, Piramal Gruppe</td><td>501017</td><td></td></tr><tr><td>Friedman-Pearson Rongeurs</td><td>Werkzeuge für die Feinwissenschaft</td><td>16221-14</td><td></td></tr><tr><td>GelSchaum</td><td>Pfizer</td><td>09-0353-01</td><td></td></tr><tr><td>BildJ</td><td>Nationale Gesundheitsinstitute</td><td>ij153</td><td></td></tr><tr><td>Ketaset (Ketamin)</td><td>Zoetis</td><td>KET-00002R2</td><td></td></tr><tr><td>Modell 923-B Maus Gasanästhesie-Kopfhalter (Erwachsenenmaus)</td><td>Kopf Instruments</td><td>923-B</td><td></td></tr><tr><td>Leuchtgrünes Bühnenband</td><td>JSITON/ Amazon</td><td>B803YW8ZWL</td><td></td></tr><tr><td>M35 Kompaktes elektrisches Laborhandstücksystem</td><td>Buffalo Dental Manufacturing Co., Inc.</td><td>M35</td><td></td></tr><tr><td>Matrx VIP 3000 Isofluran Verdampfer</td><td>Mittelmark</td><td>91305430</td><td></td></tr><tr><td>Mikro-Präparierschere</td><td>Roboz</td><td>RS-5882</td><td></td></tr><tr><td>Mikro-Präparierfederschere</td><td>Werkzeuge für die Feinwissenschaft</td><td>15023-10</td><td></td></tr><tr><td>Mikro-Präparierfederschere</td><td>Roboz</td><td>RS-5677</td><td></td></tr><tr><td>Mini-Rektalthermistor-Sonde</td><td>FHC</td><td>Artikel-Nr.: 40-90-5D-02</td><td></td></tr><tr><td>Schere bedienen</td><td>Roboz</td><td>RS-6812</td><td></td></tr><tr><td>Pirt-GCaMP3 C57/BL/6J Mäuse</td><td>Johns Hopkins Universität</td><td>N/A</td><td>Beide Geschlechter können gleich gut abgebildet werden. Mäuse sollten mindestens 8 Wochen alt sein, da der Pirt-Promotor bei jüngeren Mäusen schwach oder intermittierend exprimiert wird.</td></tr><tr><td>Kaliumchlorid</td><td>Fisher Scientific</td><td>Nr. BP366-500</td><td></td></tr><tr><td>Stereotaktischer Rahmen</td><td>Kopf Modell 923-B</td><td>923-B</td><td></td></tr><tr><td>Sterotaktische Maske (aktiv) für Mäuse < 30g mit Tuben</td><td>RWD Lebenswissenschaften</td><td>68663</td><td></td></tr><tr><td>Konische Fissur TNT Bohrer (31P)</td><td>Buffalo Dental Manufacturing Co., Inc.</td><td>31P-GOLD</td><td></td></tr><tr><td>td-Tomato C57BL/6J Mäuse</td><td>Jackson-Labor</td><td>7909</td><td></td></tr><tr><td>Obere Platte, 6 Zoll x 10 Zoll</td><td>Newport</td><td>290-TP</td><td></td></tr><tr><td>Transferpipette, 3 mL</td><td>Cole Parmer</td><td>UX-06226-23</td><td></td></tr><tr><td>TrpV1-Cre C57BL/6J Mäuse</td><td>Jackson-Labor</td><td>17769</td><td></td></tr><tr><td>Zeiss LSM 800 Konfokalmikroskop</td><td>Cal Zeiss</td><td>LSM800</td><td></td></tr><tr><td>Zeiss Zen 2.6 Blue Edition Software</td><td>Cal Zeiss</td><td>Zen (Blaue Ausgabe) 2.6</td><td></td></tr></tbody></table>

im lebenden organismus calcium-bildgebung von neuronalen ensembles in netzwerken primärer sensorischer neuronen in intakten trigeminusganglien

In Vivo Calcium Imaging of Neuronal Ensembles in Networks of Primary Sensory Neurons in Intact Trigeminal Ganglia

Bildgebung einer großen Anzahl von Neuronen und spezifischen Trigeminusästen durch konfokales Scannen des Pirt-GCaMP Trigeminusganglions Nach chirurgischer TG-Exposition bei Pirt-GCaMP3-Mäusen ermöglicht die konfokale Mikroskopie die gleichzeitige Bildgebung von über &gt;3.000 Neuronen (Abbildung 4). Dies bietet den großen Vorteil, dass Tausende von TG-Neuronen gleichzeitig in ihrem normalen physiologischen Kontext beobachtet werden können. Spontane Ca2+ -Trans...

Im lebenden Organismus Calcium-Bildgebung von neuronalen Ensembles in Netzwerken primärer sensorischer Neuronen in intakten Trigeminusganglien

Calcium imaging is an important tool for monitoring signaling mechanisms that either influx Ca2+ into the cytosol or release Ca2+ from intracellular Ca2+ ...

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Research

Forschung

JoVE Journal

Neuroscience

Neurowissenschaften

Quelle: Shannonhouse, J., et al. In vivo Kalzium-Bildgebung von neuronalen Ensembles in Netzwerken primärer sensorischer Neuronen in intakten Spinalganglien. J. Vis. Exp. (2023). Das Video zeigt eine in vivo Calcium-Bildgebungstechnik zur Überwachung der neuronalen Aktivität in den Spinalganglien (DRG) einer transgenen Maus. DRG-Neuronen exprimieren einen Kalziumindikator, der die Fluoreszenzintensität bei Bindung an Kalzium erhöht. Mechanische oder thermische Reize, die auf eine Hinterpfote...

In vivo Calcium-Bildgebung von neuronalen Ensembles in den intakten Spinalwurzelganglien einer Maus

Wir beschreiben ein experimentelles Verfahren zur Messung der neuronalen Aktivität durch dual optische Fenster über bilaterale primären somatosensorischen Corticies (S1) in Thy1-GCaMP6s transgene Mäuse mit 2-Photonen (2P) Mikroskopie in Vivo.

Neuronalen Aktivität im primären somatosensorischen Cortex mit Thy1Imaging-GCaMP6s transgene Mäuse

Hier präsentieren wir, wie man das genikulierte Ganglion einer lebenden, betäubten Labormaus freilegt und wie man Kalziumbildgebung verwendet, um die Reaktionen von Ensembles dieser Neuronen auf Geschmacksreize zu messen, was mehrere Versuche mit verschiedenen Stimulanzien ermöglicht. Dies ermöglicht detaillierte Vergleiche, welche Neuronen auf welche Tastants reagieren.

In vivo Calcium Imaging of Mouse Geniculate Ganglion Neuron Reaktionen auf Geschmacksreize

Dieses Protokoll beschreibt die chirurgische Exposition des dorsalen Wurzelganglions (DRG) gefolgt von GCaMP3 (genetisch kodierter Ca2+ Indikator; Grün fluoreszierendes Protein-Calmodulin-M13 Protein 3) Ca2+ Bildgebung der neuronalen Ensembles mit Pirt-GCaMP3 Mäusen unter Anwendung einer Vielzahl von Stimuli auf die ipsilaterale Hinterpfote.

Im lebenden Organismus Calcium-Bildgebung neuronaler Ensembles in Netzwerken primärer sensorischer Neurone in intakten dorsalen Wurzelganglien

Das vorliegende Protokoll beschreibt in vivo Calcium-Bildgebung zur Messung der Reaktionen von Ensembles von lumbal-6 DRG-Neuronen auf somatische und viszerale Reize. Neuronen, die auf unterschiedliche Reize reagieren, lassen sich gründlich vergleichen. Dieses Protokoll ist wertvoll für die Untersuchung von Mechanismen des viszeralen Schmerzes und der somatischen Stimulation, wie z. B. der Akupunktur.

im lebenden Organismus Kalzium-Bildgebung der Reaktion von Neuronen der Spinalganglien auf somatische und viszerale Reize

Genetisch kodierte Kalziumindikatoren (GECI) ermöglichen eine robuste Analyse der sensorischen Neuronensignalisierung auf Populationsebene. Hier haben wir einen neuartigen Ansatz entwickelt, der eine in vivo GECI-Visualisierung der Aktivität von Trigeminusganglien bei Ratten ermöglicht.

In-vivo Kalzium-Bildgebung von sensorischen Neuronen im Trigeminusganglion der Ratte

Spontane Aktivitäten zu entwickeln neuronalen Netzen kann mit Hilfe AM-Ester Formen von Calcium-sensitiven Indikator Farbstoffe werden. Änderungen der intrazellulären Calcium, was darauf hinweist neuronale Aktivierung, werden als vorübergehende Veränderungen in Indikator Fluoreszenz mit ein-oder Zwei-Photonen-Imaging nachgewiesen werden. Dieses Protokoll kann für eine Reihe von entwicklungs-abhängige neuronale Netze angepasst...

Functional Calcium Imaging in Entwicklungsländern Kortikale Netzwerke

Retrograden Transport von Fluoreszenzfarbstoff markiert eine Subpopulation von Neuronen auf anatomische Projektion basiert. Beschriftet Axone kann visuell ausgerichtet...

Retrograde Fluoreszenzmarkierung Ermöglicht Gezielte Extracellular Einzel-Einheit Aufnahme von identifizierten Neuronen<em&gt; In vivo</em

Mit seinem kleinen transparenten Körper, gut dokumentierte Neuroanatomie und einer Vielzahl von zugänglicher genetischen Techniken und...

In vivo Neuronale Calcium Imaging in C. elegans

In diesem Artikel stellen wir schnell Mikro-Iontophorese von Neurotransmittern als eine Technik, um die Integration von postsynaptischen Signale mit hoher räumlicher und zeitlicher Präzision zu untersuchen.

Schnelle Micro-Iontophorese von Glutamat und GABA: Ein nützliches Tool, um Synaptic Integration Untersuchen

Erfahren Sie die in vivo GCaMP-Calcium-Bildgebung von Trigeminusganglion-Neuronen zur Untersuchung peripherer Ganglien-Netzwerke bei Schmerz, Juckreiz und Berührung. Diese Methode ermöglicht die Erfassung neuronaler Aktivität in Echtzeit.

Im lebenden Organismus Calcium-Bildgebung von neuronalen Ensembles in Netzwerken primärer sensorischer Neuronen in intakten Trigeminusganglien (Video) | JoVE Journal

Im lebenden Organismus Calcium-Bildgebung von neuronalen Ensembles in Netzwerken primärer sensorischer Neuronen in intakten Trigeminusganglien

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