Name: Mausmodell der metabolischen Dysfunktion-assoziierten steatotischen Lebererkrankung mit Fibrose (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-07-18T13:30:00.000+00:00
Duration: 6 min 26 s
Description: Erfahren Sie ein Mäusemodell der MASLD mit Fibrose durch hyperphage Ernährung. Diese Methode ermöglicht Studien zur Pathophysiologie und Testung neuer Therapien.

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</ol>

<table><tbody><tr><td>4-(Dimethylamino)Benzaldehyd</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>D2004</td><td></td></tr><tr><td>Essigsäure</td><td>Verschiedene</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>Kalorienangepasste Diät Westliche Ernährung</td><td>Inotiv</td><td>TD.88137</td><td>Die Ernährung enthält Fett (42 % kcal) und Saccharose (34 % w/w). Andere Anbieter bieten Diäten mit derselben Zusammensetzung an</td></tr><tr><td>B6. Cg-Ay/J</td><td>Das Jackson-Labor</td><td>000021</td><td>Der Stamm hat die Agouti-Mutation lethal yellow und einen C57BL6/J-Hintergrund. Derzeit hat das Jackson Laboratory den Stamm cryproserviert.</td></tr><tr><td>C57BL/6J</td><td>Das Jackson-Labor</td><td>000664</td><td></td></tr><tr><td>Zentrifuge</td><td>Verschiedene</td><td>NA</td><td>Mit Rotor für 1,5-mL-Röhren, gekühlt, in der Lage, 16.000 xg zu erreichen.</td></tr><tr><td>Zentrifuge</td><td>Verschiedene</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>Chloramin-T-Hydrat</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>857319</td><td></td></tr><tr><td>Zitronensäure</td><td>Verschiedene</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>Direct Red 80</td><td>Sigma</td><td>365548-5G</td><td></td></tr><tr><td>Ethanol</td><td>Dekontaminationslabore</td><td>2701</td><td></td></tr><tr><td>Formalinlösung, neutral gepuffert</td><td>Sigma</td><td>HT501128</td><td></td></tr><tr><td>Fruktose</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>F0127</td><td></td></tr><tr><td>Glukose</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>G8270</td><td></td></tr><tr><td>Histologie-Verarbeitungsgeräte</td><td>NA</td><td>NA</td><td>Einbettung und Sektionierung können im Untersuchungslabor oder in einer externen Einrichtung erfolgen</td></tr><tr><td>Homogenisator</td><td>Verschiedene</td><td>NA</td><td>Perlenklopfer sind effizient, um mehrere Proben zu verarbeiten. Andere Homogenisierungsmethoden können verwendet werden</td></tr><tr><td>Salzsäure</td><td>Verschiedene</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>Hydroxyprolin</td><td>Sigma</td><td>H5534</td><td></td></tr><tr><td>Fettarme Kontrolldiät</td><td>Inotiv</td><td>TD.08485</td><td>Kontrolldiät, fettarm (13 % kcal) und Saccharose (12 % w/w)</td></tr><tr><td>Mikroskop ausgestattet für polarisierte Lichtmikroskopie</td><td>Verschiedene</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>N-Propanol</td><td>Verschiedene</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>Perchlorsäure</td><td>Verschiedene</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>Permount-Montagemedium</td><td>Fisher Scientific</td><td>SP15-100</td><td></td></tr><tr><td>Pikrinsäure, gesättigte wässrige Lösung, Spektrum</td><td>Fisher</td><td>18612375</td><td></td></tr><tr><td>Natriumacetattrihydrat</td><td>Verschiedene</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>Natriumhydroxid</td><td>Verschiedene</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>Sonicator</td><td>Verschiedene</td><td>NA</td><td>Sonicator ist nützlich, um Pellets in Schritt 2.5 wieder zu suspendieren, aber nicht unbedingt notwendig</td></tr><tr><td>Trichloressigsäure</td><td>Verschiedene</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>VWR Micro Cover Glasses, rechteckig</td><td>VWR&nbsp;</td><td>48393-081</td><td></td></tr><tr><td>VWR Premium Superfrost Plus Mikroskop-Objektträger | VWR</td><td>VWR&nbsp;</td><td>48311-703</td><td></td></tr><tr><td>Wasser, deionisiert</td><td>Verschiedene</td><td>NA</td><td>Deionisiertes Wasser aus einem Wasseraufbereitungssystem oder bei einem Lieferanten gekauft.</td></tr><tr><td>Xylenes</td><td>Fisher Scientific</td><td>X3F</td><td>Citrisolv Clearing Agent&nbsp; (Fisher 22-143-975) wird als umweltfreundliche Alternative verkauft</td></tr></tbody></table>

mausmodell der metabolischen dysfunktion-assoziierten steatotischen lebererkrankung mit fibrose

Mouse Model of Metabolic Dysfunction-Associated Steatotic Liver Disease with Fibrosis

Mausmodell der metabolischen Dysfunktion-assoziierten steatotischen Lebererkrankung mit Fibrose

Liver fibrosis is the most important predictor of adverse outcomes in metabolic dysfunction-associated steatotic liver disease (MASLD). In pre-clinical ...

mouse-model-metabolic-dysfunction-associated-steatotic-liver-disease

Research

Forschung

JoVE Journal

Medicine

Medizin

Hier werden optimierte Methoden zur Generierung von in vivo und in vitro Modellen der hepatischen Steatose und zur Analyse der steatotischen Phänotypen und der damit verbundenen physiologischen Parameter beschrieben.

Optimierte Analyse von<em&gt; In Vivo</em&gt; und<em&gt; In Vitro</em&gt; Hepatosteatose

Hier beschreiben wir eine gängige Methode um chronische Schädigung der Leber bei Mäusen zu induzieren, durch die Fütterung einer Cholin-Mangel und Ethionine ergänzt (CDE) Ernährung. Wir zeigen Systemüberwachung, Leber Perfusion, Isolation und Erhaltung. Schädigung der Leber, Pathohistology, Fibrose, entzündliche, und Leber Stammvater-Zell-Reaktionen kann ein zeitlichen Verlauf von sechs Wochen mitteilen.

Der murinen Cholin-Mangel, Ethionine ergänzt (CDE) Diät-Modell einer chronischen Leberschädigung

Es wird ein einfaches und zuverlässiges, diächterinduziertes Zäuntiermodell für alkoholfreie Steatohepatitis (NASH) beschrieben, das durch das nicht-SPF-Gehäuse der Tiere und die Verabreichung einer bestimmten fettreichen Ernährung erreicht wird. Wir beschreiben die Identifizierung von Leber-und Fettzell-Subsets, um die menschlichen Immunbedingungen zu rekapitulieren, indem Mäuse Umweltkeimen aussetzen.

Ein fortgeschrittenes Murine-Modell für alkoholfreie Steatohepatitis in Verbindung mit Typ-2-Diabetes

In dieser Studie beschreiben wir ein detailliertes Protokoll zur Induktion von Lebervesikulärsteatose in differenzierten HepaRG-Zellen mit dem Fettsäuresalz Natriumoleat und verwenden Methoden zum Nachweis und zur Quantifizierung der Lipidakkumulation, einschließlich kohärenter Anti-Stokes Raman-Streuung (CARS) Mikroskopie, zytofluorimetrische Analyse, Ölrot O-Färbung und qPCR.

Induzieren und Charakterisieren der vesikulären Steatose in differenzierten HepaRG-Zellen

Die Übersetzung der Ribosomenaffinitätsreinigung (TRAP) ermöglicht eine schnelle und effiziente Isolierung der zelltypspezifischen mRNA. Hier zeigen wir eine Methode, die hydrodynamische Schwanzveneninjektion in einem Mausmodell der Leberrepopulation und TRAP kombiniert, um das Expressionsprofil von wiederbevölkerten Hepatozyten zu untersuchen.

Zelltypspezifische Gene Expression Profiling in der Mausleber

Dieses Protokoll soll ein Werkzeug sein, um Steatose und die molekularen, biochemischen, zellulären Veränderungen zu untersuchen, die durch die übermäßige Exposition von Hepatozyten gegenüber Lipiden in vitroverursacht werden.

Ein Modell der experimentellen Steatose in vitro: Hepatozytenzellkultur in lipidüberlastetem Medium

Das vorliegende Protokoll optimiert die Methoden der  Leber-in-situ-Perfusion/Dezellularisierung und der Zwei-Photonen-Mikroskopie, um eine zuverlässige Plattform zur Visualisierung der Dynamik des Remodells der extrazellulären Matrix (EZM) während der nicht-alkoholischen Steatohepatitis (NASH) zu schaffen.

3D-Bildgebung der extrazellulären Matrix der Leber in einem Mausmodell der nicht-alkoholischen Steatohepatitis

Wir haben ein Mausmodell für chronische Leberfibrose etabliert, das ein geeignetes Tiermodell für die virusinduzierte Leberfibrose-mechanistische Untersuchung der Gallengangsatresie (BA) und eine Plattform für zukünftige BA-Behandlungen darstellt.

Ein Mausmodell der chronischen Leberfibrose zur Untersuchung der Gallengangsatresie

In dieser Arbeit stellen wir eine robuste Methode für die in situ Perfusion der Mausleber vor, um die akute und direkte Regulation des Leberstoffwechsels zu untersuchen, ohne die Leberarchitektur zu stören, aber in Abwesenheit von extrahepatischen Faktoren.

Glukoseproduktion, Harnstoffgenese und Lipolyse in der Leber quantifiziert mit dem perfundierten Mauslebermodell

In diesem Artikel wird die Verwendung von Ölsäure-induzierten HepG2-Zellen als Modell für eine mit metabolischer Dysfunktion assoziierte steatotische Lebererkrankung beschrieben.

In vitro Modellierung der Fettablagerung bei metabolischer Dysfunktion-assoziierter steatotischer Lebererkrankung

Dieses Protokoll bietet eine umfassende Bildgebende Pipeline, um die Morphologie hepatischer Stellatenzellen im intakten Lebergewebe zu visualisieren und zu modellieren. Dieser Ansatz kombiniert fluoreszierende Markierung von Fibroblasten mittels Mausgenetik, in situ leberperfusionsbasierte Gewebevorbereitung und eine modifizierte iDISCO-Gewebereinigungsmethode, um optische Transparenz zu erreichen.

Kartierung der Morphologie hepatischer stellater Zellen in Mausmodellen der Leberfibrose

Erfahren Sie ein Mäusemodell der MASLD mit Fibrose durch hyperphage Ernährung. Diese Methode ermöglicht Studien zur Pathophysiologie und Testung neuer Therapien.

Mausmodell der metabolischen Dysfunktion-assoziierten steatotischen Lebererkrankung mit Fibrose

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