Automatisierte Präparation von [⁶⁸Ga]Ga-3BP-3940 auf einem Synthesemodul für die PET-Bildgebung der Tumormikroumgebung

Diese Arbeit beschreibt den automatisierten Prozess zur Herstellung von [⁶⁸Ga]Ga-3BP-3940 mit dem GAIA V2-Synthesizer für die PET-Bildgebung von Fibroblasten-Aktivierungsproteinen. Die Ergebnisse von Qualitätskontrolltests, die an drei Testchargen durchgeführt wurden, werden ebenfalls vorgestellt.

Diese Forschung konzentriert sich auf die Entwicklung eines automatisierten Radiomarkierungsprotokolls für die Herstellung von Gallium 68 3BP3940. Diese Verbindung ist ein experimentelles Radiopharmakon für die Petabildgebung der Tumormikroumgebung. Die Ausrichtung auf die Mikroumgebung des Tumors hat in den letzten Jahren stark an Interesse gewonnen. Im Bereich der Radiopharmazeutika besteht eine zentrale Herausforderung darin, effiziente und sichere automatisierte Radiomarkierungsprotokolle für deren Erstellung zu entwickeln. Die größte experimentelle Herausforderung bei der Herstellung von Gallium-markierten Radiopharmazeutika besteht darin, ein Radiomarkierungsprotokoll zu implementieren, das schließlich sowohl an das zu radioaktive Markierungsmolekül als auch an den verwendeten Synthesizer angepasst ist. Im Bereich Gallium 68 markierte experimentelle Radiopharmazeutika. Wir haben hervorgehoben, dass eine sorgfältige Optimierung der automatisierten Reaktionsbedingungen den Radiomarkierungsprozess für eine bestimmte Verbindung erheblich verbessern kann. Dieses Protokoll behebt das Fehlen einer automatisierten Gallium 68-Radiomarkierung von drei BP 3940 und bietet eine schlüsselfertige Methode für die Herstellung mit einem bestimmten Synthesizer, die eine Synthese in nur 20 Minuten ermöglicht. Seine GMP-Konformität ermöglicht die Radiomarkierung von BP3940 in pharmazeutischer Qualität drei und unterstützt die klinischen Anwendungen dieses innovativen Radiotracers.

[Erzähler] Um zu beginnen, packen Sie den Umschlag der Gallium 68-Kassette aus. Nachdem Sie auf Beschädigungen überprüft haben, ziehen Sie jede Lurer-Verbindung an der Kassette mit einer Fünf-Milliliter-Lurer-Lock-Spritze fest, die mit einer 21-Gauge-Nadel ausgestattet ist. Nehmen Sie fünf Milliliter absolutes Ethanol aus dem Reagenzkit und leiten Sie es sehr langsam über die C18-Kartusche. Entnehmen Sie dann mit derselben Spritze fünf Milliliter Wasser für die Injektion und leiten Sie es sehr langsam über dieselbe Patrone. Positionieren Sie die Rampe A des Schlauchsatzes auf dem Synthesemodul und drehen Sie die beiden Riegel, um ihn an Ort und Stelle zu halten. Verbinden Sie das freie Ende des vertikalen A-One-Schlauchs mit einer 19-Gauge-Nadel und führen Sie sie in das Abfallfläschchen ein. Führen Sie eine Entlüftungsnadel in das Abfallfläschchen ein und richten Sie sie nach hinten hinter dem abgeschirmten Behälter aus, in dem das Evakuierungsfläschchen den 0,22-Mikrometer-Filter in Position a vier aufnimmt. Verbinden Sie den horizontalen A-One-Schlauch mit dem Drucksensor, der sich unten links an der Frontplatte des Moduls befindet. Verbinden Sie mit einem Stecker-auf-Stecker-Adapter eine 30 Zentimeter lange Verlängerungsleitung in der horizontalen A-Fünf-Position, die in einem 0,22-Mikrometer-Endfilter und einer 80-Millimeter-20-Gauge-Nadel endet. Führen Sie die 20-Gauge-Nadel in ein versiegeltes steriles Evakuierungsfläschchen ein. Fügen Sie dann eine Belüftungsnadel hinzu und stellen Sie das Fläschchen in den abgeschirmten Behälter. Platzieren Sie die Schlauchleitung, die die vertikale A eins mit der vertikalen C eins verbindet, hinter den Haltehaken über der Rampe B. Verbinden Sie die horizontalen Verteiler A, zwei und b eins mit einer kurzen Verlängerungslinie. Nachdem Sie den Adapter in Position A zwei entfernt haben, positionieren Sie die Rampe B am Synthesemodul und sichern Sie sie durch Drehen der beiden Riegel. Schließen Sie die Vorbedingung C 18 an die horizontale Position C zwei an und achten Sie darauf, dass der Adapter, der das horizontale Ventil B fünf mit C zwei verbindet, auf der linken Seite bleibt. Positionieren Sie die Rampe C auf dem Synthesemodul, bevor Sie sie durch Verriegeln beider Riegel sichern. Verbinden Sie mit einem Stecker-auf-Stecker-Adapter eine 50 Zentimeter lange Verlängerungsleitung von horizontalem C fünf mit dem Gallium-68-Generator. Stellen Sie das Buntglas-Reaktionsfläschchen des Schlauchsets in den Modulofen. Platzieren Sie dann vorsichtig den Schlauch von vertikal A fünf auf vertikal C fünf in der Schlauchpumpe. Schließen Sie die Pumpe und führen Sie den Schlauch durch den Aktivitätssensor auf der linken Seite der Pumpe, nachdem Sie sich vergewissert haben, dass der Schlauch richtig positioniert ist. Verbinden Sie den 250-Milliliter-Wasserbeutel für Injektionszwecke mit dem Spike-Adapter mit c vier Schläuchen und hängen Sie den Beutel an den dafür vorgesehenen Haken an der rechten Seite des Moduls. Mit einer dreiteiligen Lurer-Lock-Spritze mit drei Millilitern und einer 20-Gauge-Nadel werden 1,5 Milliliter 10 Milligramm pro Milliliter l Methioninlösung entnommen. Verbinden Sie die Spritze mit dem horizontalen C-One-Schlauch und hängen Sie sie in den dafür vorgesehenen Schlitz auf der rechten Seite des Moduls. Lassen Sie etwa zwei Milliliter Luft zwischen der Flüssigkeitsoberfläche und der Dichtung des Spritzenkolbens, um einen vollständigen Transfer zu gewährleisten. Entnehmen Sie mit einer Ein-Milliliter-Spritze und einer 20-Gauge-Nadel 750 Mikroliter der 10 Milligramm pro Milliliter L Methioninlösung und injizieren Sie sie in die 0,9%ige Natriumchlorid-Durchstechflasche, nachdem Sie das Septum desinfiziert haben. Entnehmen Sie mit einer dreiteiligen 10-Milliliter-Lurer-Lock-Spritze und einer 20-Gauge-Nadel den Inhalt der Durchstechflasche mit 0,9 % Natriumchlorid und L-Methionin. Stellen Sie die Lautstärke auf 8,6 Milliliter ein. Entfernen Sie den Dorn in Position B vier und schließen Sie stattdessen die Spritze in B vier an. Entnehmen Sie nach der Desinfektion des Septums den Inhalt des 60%igen Ethanol-Fläschchens mit einer dreiteiligen Drei-Milliliter-Lurer-Lock-Spritze mit einer 20-Gauge-Nadel. Nachdem Sie sich vergewissert haben, dass das Volumen mindestens 1,5 Milliliter beträgt, entfernen Sie den Spike aus Position B fünf und schließen Sie die Spritze an seinem Platz an. Mit einer Ein-Milliliter-Spritze mit geringem Totvolumen, die mit einer 20-Gauge-Nadel ausgestattet ist, werden 0,25 Milliliter 0,8 molare Natriumacetat-Pufferlösung entnommen und in die Durchstechflasche mit 30 Mikrogramm von drei BP3940 injiziert. Lösen Sie es durch aufeinanderfolgende Injektions- und Aspirationszyklen. Ziehen Sie die 0,25-Milliliter-Lösung in dieselbe Spritze auf. Entfernen Sie die Nadel und platzieren Sie die Spritze in Position B drei. Klicken Sie auf Synthese ausführen, wenn alle Reagenzien auf den Rampen platziert sind und alle erforderlichen Informationen korrekt in der Software aufgezeichnet wurden. Übertragen Sie das Endfläschchen in eine geeignete abgeschirmte Zelle. Zur Vorbereitung für die Radioaktivitätsmessung und die Vorbereitung der Patientendosis. Messen Sie die Radioaktivität des Endfläschchens mit einem ordnungsgemäß kalibrierten DOS-Kalibrator und zeichnen Sie die Zubereitung am Computer auf. Nachdem Sie die Durchstechflasche korrekt beschriftet haben, stellen Sie sie in einen geeigneten abgeschirmten Behälter. Unter Verwendung von aseptischen und Strahlenschutztechniken werden etwa 0,5 Milliliter der Probe für die Qualitätskontrolle aus dem Endgefäß entnommen. Untersuchen Sie die Probe visuell, um Klarheit und Farbe zu beurteilen. Bestimmen Sie den pH-Wert, indem Sie einen Tropfen des Produkts auf einen pH-Papierstreifen auftragen. Geben Sie einen Tropfen der Produktlösung auf jede der beiden ITLCSG-Platten, um die radiochemische Reinheit durch Radio-TLC zu messen. Lassen Sie die Platten in den entsprechenden mobilen Phasen entstehen und lesen Sie sie mit dem Radiochromatographen ab. Integrieren Sie das resultierende Radiochromatogramm, indem Sie die Fläche unter der Kurve des Produktsignals und des Verunreinigungssignals messen. Berechnen Sie dann die radiochemische Reinheit gemäß der auf dem Bildschirm angezeigten Formel, um die radiochemische Reinheit zu messen. Mit Hilfe der Radio-HPLC injizieren Sie etwa 50 Mikroliter der Probe in das HPLC-Fläschchen. Legen Sie das Fläschchen an der richtigen Position in den HPLC-Autosampler und starten Sie die Analysesequenz. Nachdem die Probe injiziert wurde, nehmen Sie das Fläschchen aus dem Autos-Probenehmer, bevor Sie es wieder in den abgeschirmten Behälter legen, um die Exposition zu minimieren. Am Ende des Laufs integrieren Sie das Radiochromatogramm, indem Sie die Fläche unter der Kurve für die Produkt- und Verunreinigungssignale messen, wie zuvor gezeigt, und berechnen Sie die radiochemische Reinheit unter Verwendung der angegebenen Formel. In dieser Abbildung ist ein Vergleich der Wirksamkeit verschiedener Anti-Radiologen-Wirkstoffe bei der Erhaltung der radiochemischen Reinheit während der Synthese von rohem Gallium drei BP 3940 dargestellt. Ohne terminale Reinigung erreichte Methionin mit 10 Milligramm pro Milliliter die höchste radiochemische Reinheit von 94,7 % im Vergleich zu Gentisinsäure und Ascorbinsäure. Das Endprodukt, das in der Endfläschchen gesammelt wurde, hielt durchschnittlich über 75,1 % der Gesamtradioaktivität zurück, was eine hohe Ausbeute und eine effiziente Sammlung bestätigt. Die Gesamtsyntheseverluste betrugen durchschnittlich nur etwa 24,9 %, verteilt auf das Abfallgefäß, die SPE-Kartusche und das Reaktionsgefäß, was auf eine geringe Abfallerzeugung hinweist. Die durchschnittliche Endaktivität der radioaktiv markierten Verbindung über die drei Testchargen hinweg lag bei über 737 Megabecquerel, was auf eine konsistente Syntheseleistung hinweist.