Name: Herstellung eines SARS-CoV-2 Virus ähnlichen Partikelsystems zur Untersuchung viraler Lebenszyklen in vitro (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-06-06T15:57:00.000+00:00
Duration: 9 min 26 s
Description: Lernen Sie die Herstellung von SARS-CoV-2 Virus-ähnlichen Partikeln in HEK-293T-Zellen zur Untersuchung viraler Lebenszyklen ohne Biosicherheitsstufe 3. Diese Methode ermöglicht sichere Arzneimittelscreenings.

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<ol><li>Narayanan, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+comprehensive+SARS-CoV-2+and+COVID-19+review%2C+Part+2%3A+host+extracellular+to+systemic+effects+of+SARS-CoV-2+infection%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Hum+Genet%22%5BJournal%5D)">A comprehensive SARS-CoV-2 and COVID-19 review, Part 2: host extracellular to systemic effects of SARS-CoV-2 infection.</a> Eur J Hum Genet. 32 (1), 10-20 (2024).</li>
<li>Shang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Structural+basis+of+receptor+recognition+by+SARS-CoV-2%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Structural basis of receptor recognition by SARS-CoV-2.</a> Nature. 581 (7807), 221-224 (2020).</li>
<li>Lan, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Structure+of+the+SARS-CoV-2+spike+receptor-binding+domain+bound+to+the+ACE2+receptor%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Structure of the SARS-CoV-2 spike receptor-binding domain bound to the ACE2 receptor.</a> Nature. 581 (7807), 215-220 (2020).</li>
<li>Zhang, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Structure+of+SARS-CoV-2+membrane+protein+essential+for+virus+assembly%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Structure of SARS-CoV-2 membrane protein essential for virus assembly.</a> Nat Commun. 13 (1), 4399(2022).</li>
<li>Han, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((SARS-CoV-2+N+protein+coordinates+viral+particle+assembly+through+multiple+domains%5BTitle%5D)+AND+%22J+Virol%22%5BJournal%5D)">SARS-CoV-2 N protein coordinates viral particle assembly through multiple domains.</a> J Virol. 98 (11), e0103624(2024).</li>
<li>Ghosh, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((beta-coronaviruses+use+lysosomes+for+egress+instead+of+the+biosynthetic+secretory+pathway%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">beta-coronaviruses use lysosomes for egress instead of the biosynthetic secretory pathway.</a> Cell. 183 (6), 1520-1535.e14 (2020).</li>
<li>Andrews, H. S., Herman, J. D., Gandhi, R. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Treatments+for+COVID-19%5BTitle%5D)+AND+%22Annu+Rev+Med%22%5BJournal%5D)">Treatments for COVID-19.</a> Annu Rev Med. 75, 145-157 (2024).</li>
<li>Crawford, K. H. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protocol+and+reagents+for+pseudotyping+lentiviral+particles+with+SARS-CoV-2+spike+protein+for+neutralization+assays%5BTitle%5D)+AND+%22Viruses%22%5BJournal%5D)">Protocol and reagents for pseudotyping lentiviral particles with SARS-CoV-2 spike protein for neutralization assays.</a> Viruses. 12 (5), 513(2020).</li>
<li>Sultana, R., Stahelin, R. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Strengths+and+limitations+of+SARS-CoV-2+virus-like+particle+systems%5BTitle%5D)+AND+%22Virology%22%5BJournal%5D)">Strengths and limitations of SARS-CoV-2 virus-like particle systems.</a> Virology. 601, 110285(2025).</li>
<li>Xu, R., Shi, M., Li, J., Song, P., Li, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Construction+of+SARS-CoV-2+virus-like+particles+by+mammalian+expression+system%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Bioeng+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Construction of SARS-CoV-2 virus-like particles by mammalian expression system.</a> Front Bioeng Biotechnol. 8, 862(2020).</li>
<li>Plescia, C. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((SARS-CoV-2+viral+budding+and+entry+can+be+modeled+using+BSL-2+level+virus-like+particles%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biol+Chem%22%5BJournal%5D)">SARS-CoV-2 viral budding and entry can be modeled using BSL-2 level virus-like particles.</a> J Biol Chem. 296, 100103(2021).</li>
<li>Cruz-Cardenas, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+pseudovirus-based+platform+to+measure+neutralizing+antibodies+in+Mexico+using+SARS-CoV-2+as+proof-of-concept%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">A pseudovirus-based platform to measure neutralizing antibodies in Mexico using SARS-CoV-2 as proof-of-concept.</a> Sci Rep. 12 (1), 17966(2022).</li>
<li>Syed, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rapid+assessment+of+SARS-CoV-2-evolved+variants+using+virus-like+particles%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Rapid assessment of SARS-CoV-2-evolved variants using virus-like particles.</a> Science. 374 (6575), 1626-1632 (2021).</li>
<li>Hoffmann, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((SARS-CoV-2+cell+entry+depends+on+ACE2+and+TMPRSS2+and+is+blocked+by+a+clinically+proven+protease+inhibitor%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">SARS-CoV-2 cell entry depends on ACE2 and TMPRSS2 and is blocked by a clinically proven protease inhibitor.</a> Cell. 181 (2), 271-280 (2020).</li>
<li>Matsuyama, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enhanced+isolation+of+SARS-CoV-2+by+TMPRSS2-expressing+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+USA%22%5BJournal%5D)">Enhanced isolation of SARS-CoV-2 by TMPRSS2-expressing cells.</a> Proc Natl Acad Sci USA. 117 (13), 7001-7003 (2020).</li>
<li>Alegria-Schaffer, A., Lodge, A., Vattem, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Performing+and+optimizing+Western+blots+with+an+emphasis+on+chemiluminescent+detection%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Enzymol%22%5BJournal%5D)">Performing and optimizing Western blots with an emphasis on chemiluminescent detection.</a> Methods Enzymol. 463, 573-599 (2009).</li>
<li>V'Kovski, P., Kratzel, A., Steiner, S., Stalder, H., Thiel, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coronavirus+biology+and+replication%3A+implications+for+SARS-CoV-2%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Coronavirus biology and replication: implications for SARS-CoV-2.</a> Nat Rev Microbiol. 19 (3), 155-170 (2021).</li>
<li>Yang, H., Rao, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Structural+biology+of+SARS-CoV-2+and+implications+for+therapeutic+development%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Structural biology of SARS-CoV-2 and implications for therapeutic development.</a> Nat Rev Microbiol. 19 (11), 685-700 (2021).</li>
<li>Katiyar, H., Arduini, A., Li, Y., Liang, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((SARS-CoV-2+assembly%3A+Gaining+infectivity+and+beyond%5BTitle%5D)+AND+%22Viruses%22%5BJournal%5D)">SARS-CoV-2 assembly: Gaining infectivity and beyond.</a> Viruses. 16 (11), 1648(2024).</li>
<li>Klein, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((SARS-CoV-2+structure+and+replication+characterized+by+in+situ+cryo-electron+tomography%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">SARS-CoV-2 structure and replication characterized by in situ cryo-electron tomography.</a> Nat Commun. 11 (1), 5885(2020).</li>
<li>Li, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((SARS-CoV-2+spike+host+cell+surface+exposure+promoted+by+a+COPI+sorting+inhibitor%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Pharm+Sin+B%22%5BJournal%5D)">SARS-CoV-2 spike host cell surface exposure promoted by a COPI sorting inhibitor.</a> Acta Pharm Sin B. 13 (7), 3043-3053 (2023).</li>
<li>Dey, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+single+C-terminal+residue+controls+SARS-CoV-2+spike+trafficking+and+incorporation+into+VLPs%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">A single C-terminal residue controls SARS-CoV-2 spike trafficking and incorporation into VLPs.</a> Nat Commun. 14 (1), 8358(2023).</li>
<li>Christie, S. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single-virus+tracking+reveals+variant+SARS-CoV-2+spike+proteins+induce+ACE2-independent+membrane+interactions%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Adv%22%5BJournal%5D)">Single-virus tracking reveals variant SARS-CoV-2 spike proteins induce ACE2-independent membrane interactions.</a> Sci Adv. 8 (49), eabo3977(2022).</li>
<li>Guo, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targetable+elements+in+SARS-CoV-2+S2+subunit+for+the+design+of+pan-coronavirus+fusion+inhibitors+and+vaccines%5BTitle%5D)+AND+%22Signal+Transduct+Target+Ther%22%5BJournal%5D)">Targetable elements in SARS-CoV-2 S2 subunit for the design of pan-coronavirus fusion inhibitors and vaccines.</a> Signal Transduct Target Ther. 8 (1), 197(2023).</li>
<li>Mi, D., Hu, J., Qian, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+lentiviral+pseudotype+system+to+characterize+SARS-CoV-2+glycoprotein%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">A lentiviral pseudotype system to characterize SARS-CoV-2 glycoprotein.</a> Methods Mol Biol. 2610, 187-199 (2023).</li>
<li>Swann, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Minimal+system+for+assembly+of+SARS-CoV-2+virus+like+particles%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Minimal system for assembly of SARS-CoV-2 virus like particles.</a> Sci Rep. 10 (1), 21877(2020).</li>
<li>Xia, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Extracellular+vesicles+mediate+antibody-resistant+transmission+of+SARS-CoV-2%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Discov%22%5BJournal%5D)">Extracellular vesicles mediate antibody-resistant transmission of SARS-CoV-2.</a> Cell Discov. 9 (1), 2(2023).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Rinderserumalbumin (BSA)</td><td>Cell Signaling Technology</td><td>9998S</td><td></td></tr><tr><td>Konfokales Laser-Scanning-Mikroskop</td><td>Olympus</td><td>FV3000</td><td></td></tr><tr><td>DMEM</td><td>Corning</td><td>10-013-CV</td><td></td></tr><tr><td>Fötales Rinderserum (FBS)</td><td>Thermofisher</td><td>A5670402</td><td></td></tr><tr><td>Ziege Anti-Maus-IgG H& L (Alexa Fluor 488) Antikörper</td><td>Invitrogen</td><td>A11001</td><td>Verdünnungsverhältnis: IF 1:1000</td></tr><tr><td>Ziege Anti-Kaninchen IgG H& L (Alexa Fluor 594) Antikörper</td><td>Abcam</td><td>ab150080</td><td>Verdünnungsverhältnis: IF 1:1000</td></tr><tr><td>HEK-293T Zelllinie</td><td>National Infrastructure of Cell Line Resource (NICR)</td><td>NICR-293T-001</td><td>Um eine hohe Transfektionseffizienz und eine optimale SC2-VLP-Produktion zu gewährleisten, sollten HEK-293T-Zellen bei niedrigen Passagezahlen (&le; S. 10).</td></tr><tr><td>Hoechst 33342</td><td>Invitrogen</td><td>H1399</td><td>Arbeitskonzentration: 2,5 &mu; g/mL</td></tr><tr><td>Luciferase Reporter Assay System</td><td>Promega</td><td>E1500</td><td></td></tr><tr><td>Luc-T20</td><td>Addgene</td><td>177941</td><td></td></tr><tr><td>Maus monoklonal anti-GAPDH</td><td>Proteintech</td><td>60004-1-Ig</td><td>Verdünnungsverhältnis: WB 1:20.000</td></tr><tr><td>Maus monoklonal anti-S RBD</td><td>Abklonal</td><td>A23771</td><td>Verdünnungsverhältnis: IF 1:200</td></tr><tr><td>OptiMEM</td><td>Thermofisher</td><td>31985070</td><td>serumfreies Medium für die Transfektion</td></tr><tr><td>PEG3350</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P3635</td><td></td></tr><tr><td>PEG8000</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P2139</td><td></td></tr><tr><td>Penicillin-Streptomycin</td><td>Thermofisher</td><td>15140122</td><td></td></tr><tr><td>Polyethylenimin (PEI)</td><td>Thermofisher</td><td>43896.01</td><td></td></tr><tr><td>Promega passiver Lysepuffer</td><td>Promega</td><td>E1941</td><td></td></tr><tr><td>Polyklonales Kaninchen-Anti-ACE2-Proteintech</td><td></td><td>21115-1-AP-Verdünnungsverhältnis</td><td>: WB 1:1000</td></tr><tr><td>Polyklonales Kaninchen-Anti-ERGIC53</td><td>Proteintech</td><td>13364-1-AP-Verdünnungsverhältnis</td><td>: IF 1:200</td></tr><tr><td>Polyklonales Kaninchen-Anti-GM130</td><td>Proteintech</td><td>11308-1-AP-Verdünnungsverhältnis</td><td>: IF 1:200</td></tr><tr><td>Polyklonales Kaninchen-Anti-S-Anti-S</td><td>Abcam</td><td>ab272504</td><td>Verdünnungsverhältnis: WB 1:1000</td></tr><tr><td>Polyklonales Kaninchen Anti-Sec61&beta;</td><td>Proteintech</td><td>15087-1-AP</td><td>Verdünnungsverhältnis: IF 1:200</td></tr><tr><td>Kaninchen polyklonales Anti-TMPRSS2</td><td>Abcam</td><td>ab109131</td><td>Verdünnungsverhältnis: WB 1:1000</td></tr><tr><td>SARS-CoV-2 M-IRES-E</td><td>Plasmid Addgen</td><td>177938</td><td></td></tr><tr><td>SARS-CoV-2 N Plasmid</td><td>Addgen</td><td>177959</td><td></td></tr><tr><td>SARS-CoV-2 Nukleoprotein Kaninchen mAb</td><td>Abklonales</td><td>A21042</td><td>Verdünnungsverhältnis: WB 1:4000</td></tr><tr><td>SARS-CoV-2 S</td><td>Plasmid Addgen</td><td>177960</td><td></td></tr><tr><td>Sekundärantikörper, HRP, Ziege Anti-Maus IgG (H+L)</td><td>Invitrogen</td><td>31460</td><td>Verdünnungsverhältnis: WB 1:5000</td></tr><tr><td>Sekundärer Antikörper, HRP, Ziege Anti-Kaninchen IgG (H+L)</td><td>Invitrogen</td><td>31430</td><td>Verdünnungsverhältnis: WB 1:5000</td></tr><tr><td>SpectraMax i3x Plattenleser&nbsp;</td><td>Molekulare Bauelemente</td><td>SpectraMax i3x</td><td></td></tr></tbody></table>

herstellung eines sars-cov-2 virus ähnlichen partikelsystems zur untersuchung viraler lebenszyklen in vitro

Production of a SARS-CoV-2 Virus-Like-Particle System to Investigate Viral Life Cycles In Vitro

Die Austritts- und Assemblierungsschritte des SARS-CoV-2-Lebenszyklus sind weniger untersucht als die Infektions- und Replikationsschritte17,18. Bevor die SC2-VLP-Methode entwickelt wurde, konnten diese Prozesse nur mit lebendem SARS-CoV-2 untersucht werden, so dass die Forschung auf BSL-3-Laboratorien beschränkt war13. Der in Abbildung 1 gezeigte SC2-VLP-Workflow skizziert das experimentelle Protokoll und ver...

Herstellung eines SARS-CoV-2 Virus ähnlichen Partikelsystems zur Untersuchung viraler Lebenszyklen in vitro

The severe acute respiratory syndrome-coronavirus 2 (SARS-CoV-2) virus-like particle (SC2-VLP) method offers a powerful and accessible tool for studying ...

production-sars-cov-2-virus-like-particle-system-to-investigate-viral

Research

Forschung

JoVE Journal

Biochemistry

Biochemie

Source: Jamieson, T. R., et al. Detection of SARS-CoV-2 Neutralizing Antibodies using High-Throughput Fluorescent Imaging of Pseudovirus Infection. J. Vis. Exp. (2021)This video demonstrates the procedure for infecting mammalian cells with green fluorescent protein (GFP)-encoding pseudovirus, monitoring viral replication and spread by fluorescence microscopy, and collecting virus-containing supernatant for downstream applications.

Production and Collection of Pseudovirus Particles Using Mammalian Cell Culture

Source: Scarborough, R. J., et al. Evaluation of the Efficacy And Toxicity of RNAs Targeting HIV-1 Production for Use in Gene or Drug Therapy. J. Vis. Exp. (2016).This video demonstrates a reverse transcriptase (RT) assay to assess the effect of a test RNA on virus-like particle (VLP) production. Cells are co-transfected with plasmids, and RT activity is measured as a quantitative indicator of VLP output. A decrease in RT activity reflects suppression of viral gene expression by the test RNA.

Reverse Transcriptase Activity as a Marker for Virus-Like Particle Production

Quelle: Hoenen, T., et al. Modellierung des Lebenszyklus des Ebola-Virus unter Biosicherheitsstufe-2-Bedingungen mit virusähnlichen Partikeln, die tetracistronische Minigenome enthalten. J. Vis. Exp. (2014)In diesem Video wird gezeigt, wie ein tetracistronisches Minigenom-Plasmid, das das Genom des Ebola-Virus nachahmt, zusammen mit Hilfsplasmiden in humane Zellen transfiziert wird. Innerhalb der Zellen werden virale Proteine und Luciferase exprimiert, was zur Assemblierung und Ausknospung...

Herstellung von Reporter-enthaltenden, transkriptions- und replikationskompetenten Ebola-Virus-ähnlichen Partikeln

Quelle: Chen, Z., et al. Herstellung von konjugationsinduzierten fluoreszierenden PEGylierten Virus-ähnlichen Partikeln mittels Dibrommaleimid-Disulfid-Chemie. J. Vis. Exp. (2018)In diesem Video wird die Methode zur kontrollierten Expression des Kapsidproteins des Bakteriophagen Qβ in modifizierten E. coli demonstriert. Die resultierenden Proteine lagern sich selbst zu virusähnlichen Partikeln zusammen, die für die nachgeschaltete Biokonjugation gewonnen werden.

Produktion von virusähnlichen Partikeln in modifizierten E. coli

Dieses Video zeigt die Erzeugung von Influenzavirus-ähnlichen Partikeln (VLPs) in einem Säugetiersystem. Nach der Expression von drei eukaryotischen Expressionsvektoren – die für verschiedene virale Strukturproteine kodieren – in geeigneten Säugetier-Wirtszellen ordnen sich die exprimierten viralen Proteine auf der Plasmamembran des Wirts selbst zu VLPs an und werden durch Knospung von der Zelloberfläche freigesetzt.

Eine Technik zur Erzeugung von Influenzavirus-ähnlichen Partikeln über ein Säugetiersystem

Arbeit mit infektiösen Viren Ebola wird Biosicherheitsstufe 4 Laboratorien beschränkt. Tetracistronic Minigenom-haltigen Replikation und Transkription kompetenten virusähnlichen Partikeln (trVLPs) stellen eine Lebenszyklus-Modellierungssystem, das uns sicher zu modellieren mehrere Infektionszyklen unter Biosicherheitsstufe 2 Bedingungen, die sich ausschließlich auf Ebola-Virus-Komponenten ermöglicht.

Modellierung des Lebenszyklus von Ebola Virus unter Biosafety Level 2 Bedingungen mit Virus-ähnlichen Partikeln, die Tetracistronic Minigenome

Hier präsentieren wir Ihnen ein Protokoll zur pseudotyped Partikel in eine Einstellung "BSL-2" unter Einbeziehung der Spike-Protein des hoch pathogenen Viren Nahen Osten respiratorisches Syndrom und Schweres Akutes Respiratorisches Syndrom Coronaviren zu generieren. Diese pseudotyped Partikel enthalten eine Luciferase Reporter-gen ermöglicht die Quantifizierung der Virus Eintritt in Zielzellen Host.

Produktion von Pseudotyped Partikel hoch pathogene Coronaviren in eine Einstellung "Biosafety Level 2" zu studieren

Das hier beschriebene Protokoll skizziert eine schnelle und effektive Methode zur Messung neutralisierender Antikörper gegen das SARS-CoV-2-Spike-Protein, indem die Fähigkeit rekonvaleszenter Serumproben bewertet wird, die Infektion durch ein verbessertes grün fluoreszierendes proteinmarkiertes vesikuläres Stomatitisvirus zu hemmen, das mit Spike-Glykoprotein pseudotypisiert ist.

Nachweis von SARS-CoV-2 neutralisierenden Antikörpern mittels Hochdurchsatz-Fluoreszenzbildgebung von Pseudovirus-Infektionen

Dieses Protokoll beschreibt die Dynamik von Virusinfektionen unter Verwendung von Luciferase- und Fluoreszenz-exprimierenden rekombinanten (r)SARS-CoV-2 und einem in vivo Bildgebungssystem (IVIS) in transgenen K18 hACE2-Mäusen, um den Bedarf an sekundären Ansätzen zu überwinden, die zur Untersuchung von SARS-CoV-2-Infektionen in vivo erforderlich sind.

Live-Bildgebung und Quantifizierung von Virusinfektionen in transgenen K18-hACE2-Mäusen mit Reporter-exprimierendem rekombinantem SARS-CoV-2

Pseudotypisierte Viren (PVs) sind replikationsdefekte Virionen, die verwendet werden, um Wirt-Virus-Interaktionen unter sichereren Bedingungen zu untersuchen als mit authentischen Viren. Hier wird ein detailliertes Protokoll vorgestellt, das zeigt, wie SARS-CoV-2-PVs verwendet werden können, um die neutralisierende Fähigkeit des Serums von Patienten nach einer COVID-19-Impfung zu testen.

Pseudotypisierte Viren als molekulares Werkzeug zur Überwachung humoraler Immunantworten gegen SARS-CoV-2 mittels Neutralisationsassay

Dieser Artikel beschreibt die Methodik zur Erzeugung von SARS-CoV-2-Pseudotyp-Partikeln mit einem Luciferase-Reporter-System und deren Anwendung zur Identifizierung von Einstiegsinhibitoren. Diese Protokolle werden mit zwei verschiedenen Entry-Inhibitoren demonstriert, einem rekombinanten humanen ACE2-Fc-Fusionsprotein und der kleinmolekularen Verbindung Arbidol.

Verfahren zur Identifizierung von SARS-CoV-2-Eintrittsinhibitoren als potenzielle antivirale Mittel mittels MLV-basierten Pseudoviren

Lernen Sie die Herstellung von SARS-CoV-2 Virus-ähnlichen Partikeln in HEK-293T-Zellen zur Untersuchung viraler Lebenszyklen ohne Biosicherheitsstufe 3. Diese Methode ermöglicht sichere Arzneimittelscreenings.

Herstellung eines SARS-CoV-2 Virus ähnlichen Partikelsystems zur Untersuchung viraler Lebenszyklen in vitro

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