Name: Ein ex vivo Explantatmodell zur Untersuchung von glialen Wechselwirkungen in der Netzhaut der Maus (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-07-15T13:15:00.000+00:00
Duration: 9 min 46 s
Description: Lernen Sie ein ex vivo Explantatmodell zur Untersuchung glialer Wechselwirkungen in der Mausnetzhaut. Diese Methode ermöglicht präzisere Studien zur Neuroinflammation bei Glaukom.

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<ol><li>Quigley, H. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Understanding+glaucomatous+optic+neuropathy%3A+the+synergy+between+clinical+observation+and+investigation%5BTitle%5D)+AND+%22Annu+Rev+Vis+Sci%22%5BJournal%5D)">Understanding glaucomatous optic neuropathy: the synergy between clinical observation and investigation.</a> Annu Rev Vis Sci. 2, 235-254 (2016).</li>
<li>Alqawlaq, S., Flanagan, J. G., Sivak, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((All+roads+lead+to+glaucoma%3A+induced+retinal+injury+cascades+contribute+to+a+common+neurodegenerative+outcome%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">All roads lead to glaucoma: induced retinal injury cascades contribute to a common neurodegenerative outcome.</a> Exp Eye Res. 183, 88-97 (2019).</li>
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<li>Vecino, E., Rodriguez, F. D., Ruzafa, N., Pereiro, X., Sharma, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glia-neuron+interactions+in+the+mammalian+retina%5BTitle%5D)+AND+%22Prog+Retin+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">Glia-neuron interactions in the mammalian retina.</a> Prog Retin Eye Res. 51, 1-40 (2016).</li>
<li>Livne-Bar, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Astrocyte-derived+lipoxins+A4+and+B4+promote+neuroprotection+from+acute+and+chronic+injury%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Invest%22%5BJournal%5D)">Astrocyte-derived lipoxins A4 and B4 promote neuroprotection from acute and chronic injury.</a> J Clin Invest. 127 (12), 4403-4414 (2017).</li>
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<li>Barres, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+mystery+and+magic+of+glia%3A+a+perspective+on+their+roles+in+health+and+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">The mystery and magic of glia: a perspective on their roles in health and disease.</a> Neuron. 60 (3), 430-440 (2008).</li>
<li>Verkhratsky, A., Nedergaard, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Physiology+of+astroglia%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Rev%22%5BJournal%5D)">Physiology of astroglia.</a> Physiol Rev. 98 (1), 239-389 (2018).</li>
<li>Colonna, M., Butovsky, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microglia+function+in+the+central+nervous+system+during+health+and+neurodegeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Annu+Rev+Immunol%22%5BJournal%5D)">Microglia function in the central nervous system during health and neurodegeneration.</a> Annu Rev Immunol. 35, 441-468 (2017).</li>
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<li>Sappington, R. M., Carlson, B. J., Crish, S. D., Calkins, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+microbead+occlusion+model%3A+a+paradigm+for+induced+ocular+hypertension+in+rats+and+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Invest+Ophthalmol+Vis+Sci%22%5BJournal%5D)">The microbead occlusion model: a paradigm for induced ocular hypertension in rats and mice.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 51 (1), 207-216 (2010).</li>
<li>Schlamp, C. L., Li, Y., Dietz, J. A., Janssen, K. T., Nickells, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Progressive+ganglion+cell+loss+and+optic+nerve+degeneration+in+DBA%2F2J+mice+is+variable+and+asymmetric%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Progressive ganglion cell loss and optic nerve degeneration in DBA/2J mice is variable and asymmetric.</a> BMC Neurosci. 7, 66(2006).</li>
<li>Paschalis, E. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Permanent+neuroglial+remodeling+of+the+retina+following+infiltration+of+CSF1R+inhibition-resistant+peripheral+monocytes%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Permanent neuroglial remodeling of the retina following infiltration of CSF1R inhibition-resistant peripheral monocytes.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 115 (48), E11359-E11368 (2018).</li>
<li>Rutigliani, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Widespread+retina+and+optic+nerve+neuroinflammation+in+enucleated+eyes+from+glaucoma+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Neuropathol+Commun%22%5BJournal%5D)">Widespread retina and optic nerve neuroinflammation in enucleated eyes from glaucoma patients.</a> Acta Neuropathol Commun. 10 (1), 118(2022).</li>
<li>Foo, L. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+a+method+for+the+purification+and+culture+of+rodent+astrocytes%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Development of a method for the purification and culture of rodent astrocytes.</a> Neuron. 71 (5), 799-811 (2011).</li>
<li>Batiuk, M. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+immunoaffinity-based+method+for+isolating+ultrapure+adult+astrocytes+based+on+ATP1B2+targeting+by+the+ACSA-2+antibody%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biol+Chem%22%5BJournal%5D)">An immunoaffinity-based method for isolating ultrapure adult astrocytes based on ATP1B2 targeting by the ACSA-2 antibody.</a> J Biol Chem. 292 (21), 8874-8891 (2017).</li>
<li>Timmerman, R., Burm, S. M., Bajramovic, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+overview+of+in+vitro+methods+to+study+microglia%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Cell+Neurosci%22%5BJournal%5D)">An overview of in vitro methods to study microglia.</a> Front Cell Neurosci. 12, 242(2018).</li>
<li>Batiuk, M. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+of+region-specific+astrocyte+subtypes+at+single+cell+resolution%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Identification of region-specific astrocyte subtypes at single cell resolution.</a> Nat Commun. 11 (1), 1220(2020).</li>
<li>Cullen, P. F., Sun, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Astrocytes+of+the+eye+and+optic+nerve%3A+heterogeneous+populations+with+unique+functions+mediate+axonal+resilience+and+vulnerability+to+glaucoma%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Ophthalmol+%28Lausanne%29%22%5BJournal%5D)">Astrocytes of the eye and optic nerve: heterogeneous populations with unique functions mediate axonal resilience and vulnerability to glaucoma.</a> Front Ophthalmol (Lausanne). 3, 1217137(2023).</li>
<li>Cullen, P. F., Gammerdinger, W. J., Ho Sui, S. J., Mazumder, A. G., Sun, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transcriptional+profiling+of+retinal+astrocytes+identifies+a+specific+marker+and+points+to+functional+specialization%5BTitle%5D)+AND+%22Glia%22%5BJournal%5D)">Transcriptional profiling of retinal astrocytes identifies a specific marker and points to functional specialization.</a> Glia. 72 (9), 1604-1628 (2024).</li>
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<li>Jeon, C. J., Strettoi, E., Masland, R. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+major+cell+populations+of+the+mouse+retina%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">The major cell populations of the mouse retina.</a> J Neurosci. 18 (21), 8936-8946 (1998).</li>
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<li>Tao, C., Zhang, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Retinal+proteoglycans+act+as+cellular+receptors+for+basement+membrane+assembly+to+control+astrocyte+migration+and+angiogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Rep%22%5BJournal%5D)">Retinal proteoglycans act as cellular receptors for basement membrane assembly to control astrocyte migration and angiogenesis.</a> Cell Rep. 17 (7), 1832-1842 (2016).</li>
<li>Schaeffer, J., Delpech, C., Albert, F., Belin, S., Nawabi, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adult+mouse+retina+explants%3A+from+ex+vivo+to+in+vivo+model+of+central+nervous+system+injuries%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Mol+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Adult mouse retina explants: from ex vivo to in vivo model of central nervous system injuries.</a> Front Mol Neurosci. 13, 599948(2020).</li>
<li>Vagaja, N. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Changes+in+murine+hyalocytes+are+valuable+early+indicators+of+ocular+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Invest+Ophthalmol+Vis+Sci%22%5BJournal%5D)">Changes in murine hyalocytes are valuable early indicators of ocular disease.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 53 (3), 1445-1451 (2012).</li>
<li>Alarautalahti, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Viability+of+mouse+retinal+explant+cultures+assessed+by+preservation+of+functionality+and+morphology%5BTitle%5D)+AND+%22Invest+Ophthalmol+Vis+Sci%22%5BJournal%5D)">Viability of mouse retinal explant cultures assessed by preservation of functionality and morphology.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 60 (6), 1914-1927 (2019).</li>
<li>Rodrigues, E. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+use+of+vital+dyes+in+ocular+surgery%5BTitle%5D)+AND+%22Surv+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">The use of vital dyes in ocular surgery.</a> Surv Ophthalmol. 54 (5), 576-617 (2009).</li>
<li>Shamir, E. R., Ewald, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Three-dimensional+organotypic+culture%3A+experimental+models+of+mammalian+biology+and+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Mol+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Three-dimensional organotypic culture: experimental models of mammalian biology and disease.</a> Nat Rev Mol Cell Biol. 15 (10), 647-664 (2014).</li>
<li>Antonetti, D. A., Silva, P. S., Stitt, A. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Current+understanding+of+the+molecular+and+cellular+pathology+of+diabetic+retinopathy%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Endocrinol%22%5BJournal%5D)">Current understanding of the molecular and cellular pathology of diabetic retinopathy.</a> Nat Rev Endocrinol. 17 (4), 195-206 (2021).</li>
<li>Kinuthia, U. M., Wolf, A., Langmann, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microglia+and+inflammatory+responses+in+diabetic+retinopathy%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Immunol%22%5BJournal%5D)">Microglia and inflammatory responses in diabetic retinopathy.</a> Front Immunol. 11, 564077(2020).</li>
<li>Reboussin, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+neuroprotective+and+immunomodulatory+properties+of+mesenchymal+stem+cells+in+an+ex+vivo+retinal+explant+model%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neuroinflammation%22%5BJournal%5D)">Evaluation of neuroprotective and immunomodulatory properties of mesenchymal stem cells in an ex vivo retinal explant model.</a> J Neuroinflammation. 19 (1), 63(2022).</li>
<li>Do, M. T. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Melanopsin+and+the+intrinsically+photosensitive+retinal+ganglion+cells%3A+biophysics+to+behavior%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Melanopsin and the intrinsically photosensitive retinal ganglion cells: biophysics to behavior.</a> Neuron. 104 (2), 205-226 (2019).</li>
<li>Yu, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microglia+target+synaptic+sites+early+during+excitatory+circuit+disassembly+in+neurodegeneration%5BTitle%5D)+AND+%22iScience%22%5BJournal%5D)">Microglia target synaptic sites early during excitatory circuit disassembly in neurodegeneration.</a> iScience. 28 (4), 112201(2025).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>#11 Skalpellklingen</td><td>Bard-Parker</td><td>3,71,311</td><td></td></tr><tr><td>1 mL Pipette ('Pipetman P1000')</td><td>Gilson</td><td>F144059M</td><td></td></tr><tr><td>100 mm Petrischale</td><td>Falcon</td><td>351029</td><td></td></tr><tr><td>16% Paraformaldehyd</td><td>Ted Pella Inc</td><td>18.505</td><td>Verdünnt auf 4% für die Fixierung</td></tr><tr><td>24 Well Plate</td><td>Falcon</td><td>353047</td><td>Zum Fixieren, Blockieren und Antikörper-Inkubation</td></tr><tr><td>35 mm Petrischale</td><td>Falcon</td><td>351008</td><td></td></tr><tr><td>6-Well-Platten- und Einsatzkit</td><td>Greiner bio-one</td><td>657641</td><td></td></tr><tr><td>Alexa Fluor 488-Donkey Anti-Rabbit IgG (H+L)</td><td>Jackson ImmunoResearch Laboratories, Inc.&nbsp;</td><td>711-545-152</td> 1<td>:800 Verdünnung</td></tr><tr><td>Alexa Fluor 594 Donkey Anti-Ratte IgG (H+L) Hochgradig kreuzadsorbiertes</td><td>Invitrogen</td><td>A-21209</td><td>1:800 Verdünnung</td></tr><tr><td>Alexa Fluor 594-F(ab')2 Donkey Anti-Mouse IgG (H+L)&nbsp;</td><td>Jackson ImmunoResearch Laboratories, Inc.&nbsp;</td><td>715-586-150</td><td>1:800 Verdünnung</td></tr><tr><td>Alexa Fluor 647-Esel Anti-Meerschweinchen IgG (H+L)</td><td>Jackson ImmunoResearch Laboratories, Inc.&nbsp;</td><td>706-605-148</td><td>1:800 Verdünnung</td></tr><tr><td>Alexa Fluor 647-F(ab')2 Donkey Anti-Chicken IgY (IgG) (H+L)&nbsp;</td><td>Jackson ImmunoResearch Laboratories, Inc.&nbsp;</td><td>703-606-155</td><td>1:800 Verdünnung</td></tr><tr><td>Abgewinkelte Pinzette ('5/45')</td><td>FST / Dumont</td><td>11251-35</td><td></td></tr><tr><td>Anti-Brn3a Antikörper (Maus)</td><td>Chemicon</td><td>MAB1585</td><td>1:200 Verdünnung</td></tr><tr><td>Anti-CD206 Antikörper (Ratte)</td><td>Biorad</td><td>MCA2235</td><td>1:200 Verdünnung</td></tr><tr><td>Anti-GFAP Antikörper (Huhn)</td><td>Abcam</td><td>ab4674</td><td>1:1000 Verdünnung</td></tr><tr><td>Anti-Iba1 Antikörper (Kaninchen)</td><td>FUJIFILM Wako Pure Chemical Corporation</td><td>019-19741</td><td>1:500 Verdünnung</td></tr><tr><td>Anti-Tmem119 Antikörper (Meerschweinchen)</td><td>Synaptic Systems</td><td>400 004</td><td>1:500 Verdünnung</td></tr><tr><td>B-27, 50x</td><td>Gibco (Thermofisher)</td><td>17504044</td><td></td></tr><tr><td>Stumpf gebogene Pinzette ('Extra Fine Graefe)</td><td>FST</td><td>11152-10</td><td></td></tr><tr><td>Rinderserumalbumin</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A9647</td><td>Verwenden Sie 1 % w/v für die Blockierung und Antikörperinkubation</td></tr><tr><td>Filterkit (0,2 & Mikro; m aPES-Membran, 150 mL Flaschenaufsatzfilter) &nbsp;</td><td>Fisherscientific</td><td>FB12566508</td><td></td></tr><tr><td>feiner Pinsel, Größe 3/0</td><td>Princeton Art & Brush Co.</td><td>06435-1030</td><td></td></tr><tr><td>GlutaMax</td><td>Gibco (Thermofisher)</td><td>35050061</td><td></td></tr><tr><td>Labortücher (Kim-Tücher)&nbsp;</td><td>KIMTECH</td><td>34155</td><td></td></tr><tr><td>N-2, 100x</td><td>Gibco (Thermofisher)</td><td>17502048</td><td></td></tr><tr><td>Neurobasal-A Medium, minus phenolrot</td><td>Gibco (Thermofisher)</td><td>12349015</td><td></td></tr><tr><td>Normales Eselserum</td><td>Jackson ImmunoResearch Laboratories, Inc.&nbsp;</td><td>017-000-121</td><td>Anwendung bei 10% zur Blockierung und Antikörperinkubation</td></tr><tr><td>Penicillin-Streptomycin</td><td>Gibco (Thermofisher)</td><td>15140122</td><td></td></tr><tr><td>Pipettenspitzen, 1000 & Mikro; L</td><td>TipOne</td><td>1126-7810</td><td></td></tr><tr><td>Federschere ('Cohan-Vannas')</td><td>FST</td><td>15000-11</td><td></td></tr><tr><td>Steriles Wasser ('Dnase, Rnase frei')</td><td>Invitrogen</td><td>10977-015</td><td></td></tr><tr><td>Sterilfiltriert PBS</td><td>Gibco</td><td>10010-023</td><td></td></tr><tr><td>Gerade Pinzette ('mini')</td><td>FST / Dumont</td><td>11200-14</td><td></td></tr><tr><td>Transferpipette, 5,8 mL</td><td>fisherscientific</td><td>13-711-9AMMD</td><td></td></tr><tr><td>Triton X-100</td><td>Thermo Scientific Chemicals</td><td>A16046. </td><td>AP-Anwendung bei 0,5 % zur Blockierung und Antikörperinkubation</td></tr></tbody></table>

ein ex vivo explantatmodell zur untersuchung von glialen wechselwirkungen in der netzhaut der maus

An Ex Vivo Explant Model for Studying Glial Interactions in the Mouse Retina

Auf der makroskopischen Skala bleiben explantierte Netzhäute sowohl zum 1- als auch zum 3-Tage-Zeitpunkt im Wesentlichen unverändert, obwohl sie zu letzterem Zeitpunkt relativ fragil werden, was eine sorgfältige Handhabung vor der Fixierung oder anderen experimentellen Endpunkten erfordert. Die Netzhaut sollte relativ flach sein, ohne Falten (was zu einer lokalen Störung der Diffusion von Sauerstoff und Nährstoffen führen kann) und im Medium zwischen der Luft-Flüssigkeits-Grenzfläche und dem Zellkultureinsatz suspendiert...

Ein ex vivo Explantatmodell zur Untersuchung von glialen Wechselwirkungen in der Netzhaut der Maus

The role of glia in glaucoma is an increasingly prominent research topic, but much remains unknown about how populations of these support cells - namely ...

an-ex-vivo-explant-model-for-studying-glial-interactions-mouse

Research

Forschung

JoVE Journal

Biology

Biologie

Hier präsentieren wir Ihnen zwei Techniken zur Manipulation der Genexpression in murinen retinalen Ganglienzellen (RGC)...

In utero und ex vivo Elektroporation für die Genexpression in Maus retinalen Ganglienzellen

Dieses Video Artikel veranschaulicht die Einrichtung von organotypischen Retina wholemount Kulturen und einer Cytospin Verfahren zur Analyse von exogen induzierten Effekte. Organotypischen Retina wholemount Kulturen imitieren...

In vivo-ähnlichen Organotypische Murine Retinal Wholemount Kultur

Hier entwickeln wir die notwendigen Werkzeuge...

Ex vivo Live-Imaging von Single Cell Divisionen in Maus Neuroepithel

Dieses Video zeigt die Kultivierung von Müller-Gliazellen (MG), die aus der Netzhaut von Mäusen isoliert wurden. Die Netzhaut wird mit Hilfe von Verdauungsenzymen in eine einzellige Suspension dissoziiert. Die Zellen werden dann in einem Medium mit einem Wachstumsfaktor gezüchtet, der die MG-Zellproliferation und die neuronale Zellsterblichkeit fördert. Tote neuronale Zellen werden während der Passage entfernt und MG-Zellen für die weitere Analyse gezüchtet.

Etablierung einer Müller-Gliazellkultur aus der Netzhaut von Mäusen

Quelle: Bosco, A., et al.  In vivo Dynamik der retinalen Mikrogliaaktivierung während der Neurodegeneration: Konfokale ophthalmoskopische Bildgebung und Zellmorphometrie beim Mausglaukom. J. Vis. Exp. (2015) Dieses Video zeigt die In-vivo-Bildgebung von retinalen Mikroglia in einem Mausmodell des Glaukoms. Eine transgene Maus mit fluoreszierenden Protein-exprimierenden retinalen Mikroglia wird unter einem Ophthalmoskop positioniert. Infrarotbeleuchtung wird verwendet, um den Sehnervenkopf (ONH)...

In vivo Bildgebung von retinalen Mikroglia in einem Mausmodell des Glaukoms

In diesem Bericht werden die Vorteile des organotypischen Kulturen und dissoziierten Primärkulturen von Maus-abgeleitete Dorsal Root Ganglien hervorgehoben, um eine Vielzahl von Mechanismen, die Neuron-Glia-Interaktion, Neuroplastizität zugeordnet zu nehmen, Neuroinflammation und Antwort auf virale Infektion.

Erwachsenen Maus DRG Explant und distanzierte Zellmodelle um Neuroplastizität und Antworten auf ökologische Beleidigungen einschließlich Virusinfektion zu untersuchen

Ein ex vivo Slice-Assay ermöglicht es, das okulomotorische Nervenwachstum in Echtzeit abzubilden. Die Scheiben werden durch Einbetten von E10.5 Isl MN:GFP-Embryonen in Agarose erzeugt, auf einem Vibram geschnitten und in einem Bühnen-Top-Inkubator wachsen. Die Rolle der Axon-Beratungswege wird durch Dieminadien zu den Kulturmedien bewertet.

Ex Vivo Okulomotor Slice Culture von embryonalen GFP-ausdrückenden Mäusen für Time-Lapse Imaging of Oculomotor Nerve Outgrowth

Das Protokoll beschreibt organotypische Explanten der Maus NeuroRetina, kultiviert zusammen mit seinem retinalen Pigment epithel (RPE), in R16 definierten Medium, frei von Serum und Antibiotika. Diese Methode ist relativ einfach durchzuführen, im Vergleich zu In-vivo-Experimenten kostengünstiger und zeitaufwändigund und kann an zahlreiche experimentelle Anwendungen angepasst werden.

Langfristige, serumfreie Kultivierung organotypischer Maus-Retina-Explanten mit intaktem retinalen Pigmentepithel

In-vivo-Bildgebung ist ein leistungsfähiges Werkzeug für das Studium der Biologie in Gesundheit und Krankheit. Dieses Protokoll beschreibt die transpupille Bildgebung der Netzhaut der Maus mit einem Standard-Zwei-Photonen-Mikroskop. Es zeigt auch verschiedene In-vivoimaging-Methoden, um mehrere zelluläre Kohorten der Netzhaut fluoreszierend zu markieren.

Transpupille Zwei-Photonen-In-vivo-Bildgebung der Netzhaut der Maus

Dieses Protokoll stellt und beschreibt Schritte zur Isolierung, Dissektion, Kultivierung und Färbung von Netzhautexplantaten, die aus einer erwachsenen Maus gewonnen wurden. Diese Methode ist als Ex-vivo-Modell für die Untersuchung verschiedener neurovaskulärer Netzhauterkrankungen wie der diabetischen Retinopathie von Vorteil.

Netzhautexplantat der adulten Mausnetzhaut als Ex-vivo-Modell zur Untersuchung neurovaskulärer Netzhauterkrankungen

Diese Arbeit demonstriert eine Methode zur Visualisierung und Quantifizierung der Mikroglia-Motilität und des Kontakts mit postsynaptischen Puncta in der Netzhaut mittels rotierender Scheiben-Konfokalmikroskopie.

Live-Bildgebung und Charakterisierung der Mikroglia-Dynamik und Wechselwirkungen mit Synapsen in erkrankter Maus-Netzhaut

Lernen Sie ein ex vivo Explantatmodell zur Untersuchung glialer Wechselwirkungen in der Mausnetzhaut. Diese Methode ermöglicht präzisere Studien zur Neuroinflammation bei Glaukom.

Ein ex vivo Explantatmodell zur Untersuchung von glialen Wechselwirkungen in der Netzhaut der Maus

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