Name: Live-Imaging-Charakterisierung von Zentromerbewegungen während der männlichen meiotischen Prophase in Arabidopsis thaliana (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-10-24T13:45:00.000+00:00
Duration: 7 min 18 s
Description: Erfahren Sie Live-Imaging-Methoden zur Quantifizierung von Zentromerbewegungen während der männlichen meiotischen Prophase in Arabidopsis thaliana. Diese Technik ermöglicht die Analyse homologer Chromosomenpaarung und liefert Einblicke in die Mechanismen der Pflanzenmeiose.

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<ol><li>Zickler, D., Kleckner, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Meiotic+chromosomes%3A+Integrating+structure+and+function%5BTitle%5D)+AND+%22Annu+Rev+Genet%22%5BJournal%5D)">Meiotic chromosomes: Integrating structure and function.</a> Annu Rev Genet. 33 (1), 603-754 (1999).</li>
<li>Zickler, D., Kleckner, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Meiosis%3A+Dances+between+homologs%5BTitle%5D)+AND+%22Annu+Rev+Genet%22%5BJournal%5D)">Meiosis: Dances between homologs.</a> Annu Rev Genet. 57 (1), 1-63 (2023).</li>
<li>Kim, H. J., Liu, C., Dernburg, A. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((How+and+why+chromosomes+interact+with+the+cytoskeleton+during+meiosis%5BTitle%5D)+AND+%22Genes+%28Basel%29%22%5BJournal%5D)">How and why chromosomes interact with the cytoskeleton during meiosis.</a> Genes (Basel). 13 (5), 901(2022).</li>
<li>Harline, K., Roeder, A. H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+optimized+pipeline+for+live+imaging+whole+Arabidopsis+leaves+at+cellular+resolution%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Methods%22%5BJournal%5D)">An optimized pipeline for live imaging whole Arabidopsis leaves at cellular resolution.</a> Plant Methods. 19 (1), 10(2023).</li>
<li>Prunet, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Live+confocal+imaging+of+developing+Arabidopsis+flowers%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Live confocal imaging of developing Arabidopsis flowers.</a> J Vis Exp. (122), e55156(2017).</li>
<li>Peng, Z., Jiao, Y., Wang, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Live+imaging+of+Arabidopsis+shoot+primordia+via+a+confocal+laser+scanning+microscope%5BTitle%5D)+AND+%22STAR+Protoc%22%5BJournal%5D)">Live imaging of Arabidopsis shoot primordia via a confocal laser scanning microscope.</a> STAR Protoc. 4 (2), 102217(2023).</li>
<li>Prusicki, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Live+cell+imaging+of+meiosis+in+Arabidopsis+thaliana%5BTitle%5D)+AND+%22eLife%22%5BJournal%5D)">Live cell imaging of meiosis in Arabidopsis thaliana.</a> eLife. 8, e42834(2019).</li>
<li>Valuchova, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Imaging+plant+germline+differentiation+within+Arabidopsis+flowers+by+light+sheet+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22ELife%22%5BJournal%5D)">Imaging plant germline differentiation within Arabidopsis flowers by light sheet microscopy.</a> ELife. 9, e52546(2020).</li>
<li>Ravi, M., Chan, S. W. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Haploid+plants+produced+by+centromere-mediated+genome+elimination%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Haploid plants produced by centromere-mediated genome elimination.</a> Nature. 464 (7288), 615-618 (2010).</li>
<li>Cromer, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rapid+meiotic+prophase+chromosome+movements+in+Arabidopsis+thaliana+are+linked+to+essential+reorganization+at+the+nuclear+envelope%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Rapid meiotic prophase chromosome movements in Arabidopsis thaliana are linked to essential reorganization at the nuclear envelope.</a> Nat Commun. 15 (1), 5964(2024).</li>
<li>R: A language and environment for statistical computing. , at
 <a target="_blank" href="https://www.R-project.org/">https://www.R-project.org/</a> (2021).</li>
<li>RStudio: Integrated development environment for R. , at
 <a target="_blank" href="http://www.posit.co/">http://www.posit.co/</a> (2025).</li>
<li>Wickham, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Data+Analysis%5BTitle%5D)+AND+%22ggplot2%22%5BJournal%5D)">Data Analysis.</a> ggplot2. , 189-201 (2016).</li>
<li>Wortel, I. M. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CelltrackR%3A+An+R+package+for+fast+and+flexible+analysis+of+immune+cell+migration+data%5BTitle%5D)+AND+%22Immunoinformatics%22%5BJournal%5D)">CelltrackR: An R package for fast and flexible analysis of immune cell migration data.</a> Immunoinformatics. 1 - 2, 100003(2021).</li>
<li>Lee, C. -Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanism+and+regulation+of+rapid+telomere+prophase+movements+in+mouse+meiotic+chromosomes%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Rep%22%5BJournal%5D)">Mechanism and regulation of rapid telomere prophase movements in mouse meiotic chromosomes.</a> Cell Rep. 11 (4), 551-563 (2015).</li>
<li>Nozaki, T., Weiner, B., Kleckner, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rapid+homologue+juxtaposition+during+meiotic+chromosome+pairing%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Rapid homologue juxtaposition during meiotic chromosome pairing.</a> Nature. 634 (8036), 1221-1228 (2024).</li>
<li>Fang, Y., Spector, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Centromere+positioning+and+dynamics+in+living+Arabidopsis+plants%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Biol+Cell%22%5BJournal%5D)">Centromere positioning and dynamics in living Arabidopsis plants.</a> Mol Biol Cell. 16 (12), 5710-5718 (2005).</li>
<li>Arpòn, J., Gaudin, V., Andrey, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+method+for+testing+random+spatial+models+on+nuclear+object+distributions%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Chromatin+Dynamics%3A+Methods+and+Protocols%22%5BJournal%5D)">A method for testing random spatial models on nuclear object distributions.</a> Plant Chromatin Dynamics: Methods and Protocols. 1675, 493-507 (2018).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Brutgebiet</td><td>TREF (Jiffy)</td><td>101820/02227861</td><td></td></tr><tr><td>Konfokalmikroskop</td><td>Leica</td><td>TCS SP8 AOBS (Akusto-optischer Strahlspalter)</td><td></td></tr><tr><td>Konfokal-Software</td><td>Leica</td><td>LAS X 3.5.0.18371 Software</td><td></td></tr><tr><td>Deckzettel</td><td>Paul Marienfeld GmbH</td><td>107052</td><td>22x22 Nr. 1,5H</td></tr><tr><td>Pinzette</td><td>Ideal-Tek</td><td>4.SA.0</td><td>Hochpräzise Pinzetten</td></tr><tr><td>GFP:CENH3</td><td></td><td>Ravi et al. 2010</td><td>Hier verwendete Arabidopsis thaliana-Samen</td></tr><tr><td>ggplot2</td><td></td><td>&nbsp; ggplot2: Elegante Grafiken für Datenanalyse&nbsp; Reference13</td><td>https://ggplot2.tidyverse.org</td></tr><tr><td>Griff für Nadeln</td><td>Hammacher</td><td>Griff für Schlaufe, Länge 170 mm</td><td></td></tr><tr><td>Imaris</td><td>Oxford-Instrumente</td><td>Imaris 9.7.2</td><td>Bildanalyse – "Spot"-Modul</td></tr><tr><td>Linse</td><td>Leica</td><td>HC PL APO CS2 20&times;/0.75 IMM</td><td></td></tr><tr><td>Blitz</td><td>Leica</td><td>Adaptive Dekonvolution</td><td>Automatisierte intelligente Informationsextraktion aus konfokalen Daten</td></tr><tr><td>Lichter</td><td>VEGELED</td><td>Apollo LL252-Gen2</td><td></td></tr><tr><td>Nadeln</td><td>Watkins& Doncaster</td><td>E3-Pins 0,0124" (0,31 mm) x 25 mm</td><td></td></tr><tr><td>NUP54:RFP</td><td></td><td>Cromer et al. 2024</td><td>Hier verwendete Arabidopsis thaliana-Samen</td></tr><tr><td>Töpfe</td><td>TEKU (POPPELMANN)</td><td>VDF 7x7x6,5 cm</td><td></td></tr><tr><td>R</td><td>RCore-Team</td><td>R: Eine Sprache und Umgebung für statistical&nbsp; &nbsp; Informatik. R Foundation for Statistical Computing, Wien, Österreich.&nbsp; Reference11</td><td>https://www.R-project.org/&nbsp;&nbsp;</td></tr><tr><td>Rstudio</td><td>Posit-Team</td><td>&nbsp; RStudio: Integrierte Entwicklungsumgebung für R. Posit Software, PBC, Boston, MA. Reference12</td><td>http://www.posit.co/</td></tr><tr><td>Folien</td><td>STRICKGLAS</td><td>100003</td><td>26x76x1,0mm</td></tr><tr><td>Abstandshalter</td><td>Thermofischer</td><td>Secure-Seal-Abstandshalter, 8 Brunnen, 9 mm Durchmesser, 0,12 mm tief</td><td>Schneiden Sie jeden Abstandshalter einzeln</td></tr><tr><td>Stereomikroskope</td><td>Nikon</td><td>SMZ800</td><td></td></tr></tbody></table>

live-imaging-charakterisierung von zentromerbewegungen während der männlichen meiotischen prophase in arabidopsis thaliana

Live Imaging Characterization of Centromere Movements During Male Meiotic Prophase in Arabidopsis thaliana

Live-Imaging-Charakterisierung von Zentromerbewegungen während der männlichen meiotischen Prophase in Arabidopsis thaliana

Meiosis is a cellular division, essential for sexual reproduction. During meiotic prophase, homologous chromosomes of maternal and paternal origin ...

live-imaging-characterization-centromere-movements-during-male

Research

Forschung

JoVE Journal

Biology

Biologie

Wir beschreiben ein Protokoll mit Kammer-Objektträgern und Medien zu pflanzen Keimblätter für die konfokale Bildgebung der Epidermis über mehrere Tage der Entwicklung immobilisieren, zu dokumentieren stomatal Differenzierung. Fluorophor-markierte Proteine ​​können dynamisch durch Expression und subzelluläre Lokalisation verfolgt werden, das Verständnis ihrer möglichen Rollen bei der Zellteilung und Zelltyp-Differenzierung.

Langfristige, High-Resolution Konfokale Zeitraffer Bildgebung<em&gt; Arabidopsis Cotyledon</em&gt; Epidermis während der Keimung

Imaging von zentrosomale Proteine ​​während der Drosophila Spermatogenese ist eine leistungsfähige Methode, um neue Proteine ​​von entscheidender Bedeutung für die Biologie Zentrosom zu identifizieren sowie die besondere Funktion der bekannten Akteure in diesem Prozess aufzuklären.

Imaging Zentrosomen in Fly Hoden

Wir bieten hier eine effiziente und zuverlässige Protokoll für die Immunfärbung, Fluoreszenz-in-situ-Hybridisierung, DNA-Färbung, gefolgt von quantitativen und hochauflösende Bildgebung in der whole-mount Arabidopsis thaliana Samenanlagen. Diese Methode wurde erfolgreich eingesetzt, um Chromatin-Modifikationen und Zellkernarchitektur zu analysieren.

Eine effiziente Methode zur quantitativen, Einzel-Zell-Analyse von Chromatin Modifikation und Reaktor Architektur in Whole-Mount-Samenanlagen in<em&gt; Arabidopsis</em

Dieses Protokoll beschreibt eine Methode zur Beobachtung der Embryogenese in Arabidopsis über Ovulum Abstand gefolgt von der Inspektion der Embryo Musterbildung unter dem Mikroskop.

Eine Methode zur Charakterisierung der Embryogenese in Arabidopsis

Dieses Manuskript beschreibt eine in-vitro- Ovulum Anbaumethode, die live Cell Imaging von Arabidopsis Zygoten und Embryonen ermöglicht. Diese Methode wird genutzt, um die intrazellulären Dynamik während der Zygote Polarisation und die Zelle Schicksal Spezifikation bei der Entwicklung von Embryonen zu visualisieren.

In-vitro- Ovulum Anbau für Live Cell Imaging der Zygote Polarisation und Embryo Musterung in Arabidopsis thaliana

Diese Röhrchen-Squash-Technik soll rasch zytologischen Merkmale entwickeln Maus Spermatozyten unter Beibehaltung der zellulären Integrität zu beurteilen. Diese Methode ermöglicht die Untersuchung von allen Stufen der Spermatogenese und neben anderen biochemischen und molekularen biologischen Ansätze zur Erforschung der Maus Meiose leicht umgesetzt werden kann.

Eine Seminiferous Röhrchen-Squash-Technik für die zytologische Analyse der Spermatogenese mit dem Maus-Modell

Dieses Protokoll beschreibt eine einfache und bequeme Methode zum Beschriften und visualisieren live Chromosomen in mitotischen Zellen mit Histone2B-GFP BacMam 2.0-Gütezeichen und einer drehenden Scheibe konfokalen Mikroskopie System.

Live Cell Imaging der Segregation der Chromosomen während der Mitose

Hier beschreiben wir ein Protokoll zur Live-Zell-Bildgebung des kortikalen Mikrotubule-Zytoskeletts am triebförmigen Meristem und die Überwachung seiner Reaktion auf Veränderungen der physikalischen Kräfte.

Live Cell Imaging von Microtubule Cytoskeleton und mikromechanische Manipulation der Arabidopsis Schießen apical Meristem

Hier wird ein Protokoll für die hochauflösende Bildgebung von Lebendzellen in intaktem Gewebe vorgestellt. Wir haben die Bedingungen für die Abbildung einer hochempfindlichen adulten Stammzellpopulation in ihrer nativen Gewebeumgebung standardisiert. Diese Technik beinhaltet das Ausbalancieren der zeitlichen und räumlichen Auflösung, um die direkte Beobachtung biologischer Phänomene in lebendem Gewebe zu ermöglichen.

Hochauflösende Live-Cell-Bildgebung subzellulärer Strukturen

Dieses Immunlokalisationsprotokoll bei männlichen Maismeiozyten erhält während der Meiose die dreidimensionale Integrität der Zellen. Es ermöglicht die dynamische Verfolgung der intrazellulären Lokalisierung von bis zu drei unabhängigen Antikörpern in konserviertem, paraformaldehydfixiertem Material, zusätzlich zu DAPI, das DNA färbt.

Dreidimensionale Immunlokalisation bei Maismeiocyten

Dieser Prozess verwendet die Konfokalmikroskopie in Verbindung mit einer fluoreszenzmarkierten Kern- und Chromatinmarkerlinie bei Arabidopsis thaliana, um gleichzeitig die Kern- und Chromatindynamik in Arabidopsis-Wurzeln aufzuzeichnen und Veränderungen in dieser Dynamik als Reaktion auf Entwicklungs- und Umweltsignale zu untersuchen.

Quantitative lebende Zellbildgebung der Kernform und der Chromatindynamik während der Entwicklung und Umweltstress in der Wurzel Arabidopsis thaliana

Erfahren Sie Live-Imaging-Methoden zur Quantifizierung von Zentromerbewegungen während der männlichen meiotischen Prophase in Arabidopsis thaliana. Diese Technik ermöglicht die Analyse homologer Chromosomenpaarung und liefert Einblicke in die Mechanismen der Pflanzenmeiose.

Live-Imaging-Charakterisierung von Zentromerbewegungen während der männlichen meiotischen Prophase in Arabidopsis thaliana

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