Name: Ein mikroskopischer 2,3,5-Triphenyltetrazoliumchlorid-Test für eine genaue und zuverlässige Analyse der Myokardinverletzung (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-11-28T12:30:00.000+00:00
Duration: 11 min 17 s
Description: Erfahren Sie die mikroskopische TTC-Färbung zur präzisen Analyse von Myokardverletzungen. Diese optimierte Methode ermöglicht eine genaue Bestimmung der Infarktgröße und der Kardiomyozytenviabilität.

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<ol><li>Bolli, R., Becker, L., Gross, G., Mentzer, R., Balshaw, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Myocardial+protection+at+a+crossroads%3A+the+need+for+translation+into+clinical+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Circ+Res%22%5BJournal%5D)">Myocardial protection at a crossroads: the need for translation into clinical therapy.</a> Circ Res. 95 (2), 125-134 (2004).</li>
<li>Murphy, E., Steenbergen, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanisms+underlying+acute+protection+from+cardiac+ischemia-reperfusion+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Rev%22%5BJournal%5D)">Mechanisms underlying acute protection from cardiac ischemia-reperfusion injury.</a> Physiol Rev. 88 (2), 581-609 (2008).</li>
<li>Bohl, S., Medway, D. J., Schulz-Menger, J., Schneider, J. E., Neubauer, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Refined+approach+for+quantification+of+in+vivo+ischemia-reperfusion+injury+in+the+mouse+heart%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Heart+Circ+Physiol%22%5BJournal%5D)">Refined approach for quantification of in vivo ischemia-reperfusion injury in the mouse heart.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 297 (6), H2054-H2058 (2009).</li>
<li>Liepinsh, E., Kuka, J., Zvejniece, L., Vilskersts, R., Dambrova, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rodent+heart+and+brain+tissue+preparation+for+digital+macro+photography+after+ischemia-reperfusion%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Rodent heart and brain tissue preparation for digital macro photography after ischemia-reperfusion.</a> J Vis Exp. (180), e62942(2022).</li>
<li>Kim, S. -C., Boehm, O., Meyer, R., Hoeft, A., Knüfermann, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+murine+closed-chest+model+of+myocardial+ischemia+and+reperfusion%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">A murine closed-chest model of myocardial ischemia and reperfusion.</a> J Vis Exp. (65), e3896(2012).</li>
<li>Lindsey, M. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Guidelines+for+experimental+models+of+myocardial+ischemia+and+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Heart+Circ+Physiol%22%5BJournal%5D)">Guidelines for experimental models of myocardial ischemia and infarction.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 314 (4), H812-H838 (2018).</li>
<li>Ding, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+refined+TTC+assay+precisely+detects+cardiac+injury+and+cellular+viability+in+the+infarcted+mouse+heart%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">A refined TTC assay precisely detects cardiac injury and cellular viability in the infarcted mouse heart.</a> Sci Rep. 14 (1), 25214(2024).</li>
<li>Zhu, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((IL-6+coaxes+cellular+dedifferentiation+as+a+pro-regenerative+intermediate+that+contributes+to+pericardial+ADSC-induced+cardiac+repair%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cell+Res+Ther%22%5BJournal%5D)">IL-6 coaxes cellular dedifferentiation as a pro-regenerative intermediate that contributes to pericardial ADSC-induced cardiac repair.</a> Stem Cell Res Ther. 13 (1), 44(2022).</li>
<li>Zhu, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sfrp1+as+a+pivotal+paracrine+factor+in+the+trained+pericardial+stem+cells+that+foster+reparative+activity%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cells+Transl+Med%22%5BJournal%5D)">Sfrp1 as a pivotal paracrine factor in the trained pericardial stem cells that foster reparative activity.</a> Stem Cells Transl Med. 13 (2), 137-150 (2023).</li>
<li>Yellon, D. M., Hausenloy, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Myocardial+reperfusion+injury%5BTitle%5D)+AND+%22N+Engl+J+Med%22%5BJournal%5D)">Myocardial reperfusion injury.</a> N Engl J Med. 357, 1121-1135 (2007).</li>
<li>Li, C., Chen, M., Zhang, D., Xu, T., Wang, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiac+injury+induced+by+obstructive+jaundice%3A+a+comprehensive+review%5BTitle%5D)+AND+%22Perioper+Precis+Med%22%5BJournal%5D)">Cardiac injury induced by obstructive jaundice: a comprehensive review.</a> Perioper Precis Med. 28 (1), 28-38 (2025).</li>
<li>Chang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((%C3%9F-tubulin+contributes+to+Tongyang+Huoxue+decoction-induced+protection+against+hypoxia%2Freoxygenation-induced+injury+of+sinoatrial+node+cells+through+SIRT1-mediated+regulation+of+mitochondrial+quality+surveillance%5BTitle%5D)+AND+%22Phytomedicine%22%5BJournal%5D)">ß-tubulin contributes to Tongyang Huoxue decoction-induced protection against hypoxia/reoxygenation-induced injury of sinoatrial node cells through SIRT1-mediated regulation of mitochondrial quality surveillance.</a> Phytomedicine. 108, 154502(2023).</li>
<li>Li, Z., Hu, B., Zou, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Research+advances+in+understanding+the+role+and+mechanism+of+pyroptosis+in+myocardial+ischemia-reperfusion+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Perioper+Precis+Med%22%5BJournal%5D)">Research advances in understanding the role and mechanism of pyroptosis in myocardial ischemia-reperfusion injury.</a> Perioper Precis Med. 2 (2), 52-63 (2024).</li>
<li>Ouyang, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+immunostaining-based+approach+for+assessing+myocardial+viability+in+the+infarcted+mouse+hearts%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Cardiovasc+Med%22%5BJournal%5D)">An immunostaining-based approach for assessing myocardial viability in the infarcted mouse hearts.</a> Front Cardiovasc Med. 12, 1598314(2025).</li>
<li>Benedek, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+TTC+staining+for+the+evaluation+of+tissue+injury+in+the+early+phases+of+reperfusion+after+focal+cerebral+ischemia+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Use of TTC staining for the evaluation of tissue injury in the early phases of reperfusion after focal cerebral ischemia in rats.</a> Brain Res. 1116 (1), 159-165 (2006).</li>
<li>Lindsey, M. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Guidelines+for+in+vivo+mouse+models+of+myocardial+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Heart+Circ+Physiol%22%5BJournal%5D)">Guidelines for in vivo mouse models of myocardial infarction.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 321 (6), H1056-H1073 (2021).</li>
<li>Lujan, H. L., Janbaih, H., Feng, H. -Z., Jin, J. -P., DiCarlo, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Myocardial+ischemia%2C+reperfusion%2C+and+infarction+in+chronically+instrumented%2C+intact%2C+conscious%2C+and+unrestrained+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Regul+Integr+Comp+Physiol%22%5BJournal%5D)">Myocardial ischemia, reperfusion, and infarction in chronically instrumented, intact, conscious, and unrestrained mice.</a> Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol. 302 (12), R1384-R1400 (2012).</li>
<li>Redfors, B., Shao, Y., Omerovic, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Myocardial+infarct+size+and+area+at+risk+assessment+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Clin+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Myocardial infarct size and area at risk assessment in mice.</a> Exp Clin Cardiol. 17 (4), 268-272 (2012).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>1,25x Ziel</td><td>Olympus</td><td>PlanApo 1.25X/0.04</td><td>Bildgebung</td></tr><tr><td>10-mL-Spritzen</td><td>B.Braum</td><td>4617100V</td><td>Retro-Perfusion</td></tr><tr><td>2,3,5-Triphenyltetrazoliumchlorid</td><td>Milipore</td><td>1.08380.0100</td><td>Chemikalien</td></tr><tr><td>20-G-Kanüle</td><td>BD</td><td>305895</td><td>Retro-Perfusion</td></tr><tr><td>3&nbsp; mL-Spritzen</td><td>B.Braum</td><td>4617022V</td><td>Retro-Perfusion</td></tr><tr><td>3-Wege-Absperrhahn</td><td>B.Braum</td><td>16494C</td><td>Retro-Perfusion</td></tr><tr><td>Aquamount&nbsp;</td><td>BDH</td><td>362262H</td><td>Zyrosektion</td></tr><tr><td>Gleichgewicht</td><td>Ohaus</td><td>N/A</td><td>Chemikalien abwägen</td></tr><tr><td>Fernglas-Mikkroskop</td><td>Leica</td><td>MZ6</td><td>Kanulation</td></tr><tr><td>C57BL/6J</td><td>Janvier</td><td>N/A</td><td>Tiere</td></tr><tr><td>Kamera</td><td>Olympus</td><td>UC30</td><td>Bildgebung</td></tr><tr><td>Deckblätter</td><td>Epredia</td><td>BB02400500A113MN20</td><td>Zyrosektion</td></tr><tr><td>Kryostat</td><td>Leica</td><td>M850</td><td>Zyrosektion</td></tr><tr><td>Doppelt destilliertes Wasser</td><td>MIlipore</td><td>N/A</td><td>Lösende Chemikalien</td></tr><tr><td>Feine Sezierschere</td><td>AESCULAP</td><td>BC702R</td><td>Chirurgische Instrumente</td></tr><tr><td>Feine mikrodissektionierende Zange &nbsp;</td><td>AESCULAP</td><td>FM001R</td><td>Chirurgische Instrumente</td></tr><tr><td>Glasmikroskop-Objektträger</td><td>Engelbrecht</td><td>11102</td><td>Zyrosektion</td></tr><tr><td>ImageJ</td><td>NIH</td><td>1,54g</td><td>Bildverarbeitung</td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>Piramal</td><td>14150097146754</td><td>Chemikalien</td></tr><tr><td>Isopropanol</td><td>Roth</td><td>&nbsp; 0733.1</td><td>Chemikalien</td></tr><tr><td>Lichtmikroskop</td><td>Olympus</td><td>BX61</td><td>Bildgebung</td></tr><tr><td>Mikro-dissektionierende Zange &nbsp;</td><td>F.S.T</td><td>11152-10</td><td>Chirurgische Instrumente</td></tr><tr><td>OCT-Verbindung</td><td>Sakura</td><td>4583</td><td>Chemikalien</td></tr><tr><td>Petrischale</td><td>Therno Scientific</td><td>172931</td><td>Retro-Perfusion</td></tr><tr><td>Phosphatgepufferte Kochsalzlösung</td><td>Roth</td><td>9143.1</td><td>Chemikalien</td></tr><tr><td>Rstudio</td><td>Posit Software</td><td>2024.09.0</td><td>Bildverarbeitung</td></tr><tr><td>Seidennaht</td><td>F.S.T</td><td>18020-60</td><td>Retro-Perfusion</td></tr><tr><td>Software</td><td>Olympus</td><td>CellSens V3.2</td><td>Bildgebung</td></tr><tr><td>Edelstahl-Sezierscheren</td><td>AESCULAP</td><td>BC257R</td><td>Chirurgische Instrumente</td></tr><tr><td>Zamboni-Lösung</td><td>Morphisto</td><td>12773.0050</td><td>Chemikalien</td></tr></tbody></table>

ein mikroskopischer 2,3,5-triphenyltetrazoliumchlorid-test für eine genaue und zuverlässige analyse der myokardinverletzung

A Microscopic 2,3,5-Triphenyltetrazolium Chloride Assay for Accurate and Reliable Analysis of Myocardial Injury

Ein mikroskopischer 2,3,5-Triphenyltetrazoliumchlorid-Test für eine genaue und zuverlässige Analyse der Myokardinverletzung

In this protocol, we present a refined 2,3,5-Triphenyltetrazolium Chloride (TTC)-based method for the accurate and reliable analysis of myocardial ...

a-microscopic-235-triphenyltetrazolium-chloride-assay-for-accurate

Research

Forschung

JoVE Journal

Medicine

Medizin

Messung von Biomarkern in komplexen biologischen Proben wird zunehmend Führung klinische Entscheidungsfindung. Wir beschreiben eine sehr empfindliche Methode, um gleichzeitig die Herzmyosin bindendes Protein-C, Creatin-Kinase-MB und Troponin I im Serum von Patienten mit Myokardinfarkt und gesunden Kontrollpersonen.

Eine empfindliche und spezifische Quantifizierung Methode zur Bestimmung der Serum Cardiac Myosin Binding Protein-C durch Elektrochemilumineszenz Immunoassay

Ein hochgradig reproduzierbares Modell für Myokardinfarkt bei Mäusen mit minimalinvasiven Manipulationen wird beschrieben. Das Modell kann einfach durchgeführt werden, was zu einer hohen Reproduzierbarkeit und Überlebensrate führt. Somit wird das beschriebene Modell die Anzahl der benötigten Tiere reduzieren, wie es das 3R-Prinzip (Replacement, Refinement and Reduction) verlangt.

Minimal-invasive chirurgische Verfahren zur Induktion Myokardinfarkt in Mice

Diese Methode beschreibt die Verwendung der Quanten-Mikro-Computertomographie (MicroCT) zur Beurteilung der kardialen Morphologie, Funktion, Durchblutung, des Stoffwechsels und der Lebensfähigkeit mit jodiertem Kontrastmittel bei Mäusen mit experimentell induzierter myokardialer Ischämie. Die Technik kann für die zerstörungsfreie longitudinale Hochdurchsatz-Bildgebung in vivo verschiedener Tiermodelle menschlicher Herzerkrankungen eingesetzt werden.

In Vivo quantitative Bewertung der myokardialen Struktur, Funktion, Perfusion und Lebensfähigkeit Mit Herz Micro-Computertomographie

Ein Rattenmodell der abdominalen Aortenverengung, das Herzhypertrophie und Umbau induziert, wird beschrieben. Eine effiziente, hochgradig reproduzierbare und minimal-invasive Methode wird verwendet, um eine einfache, aber nützliche Plattform für die Erforschung von Myokardhypertrophie und -dysfunktion bereitzustellen.

Ein Modell der kardialen Remodeling Durch Zusammenziehen der Bauchaorta bei Ratten

Die postmortale Beurteilung des Myokardinfarkts (MI) bei Nagetieren basiert auf der Quantifizierung des Infarkts an gefärbten Herzschnitten. Wir beschreiben eine genaue Methode zur Quantifizierung der Infarktgröße unter Verwendung systematischer Probenahmen von entnommenen Rattenherzen von der Basis bis zur Spitze und Bildanalysen von trichromgefärbten histologischen Schnitten.

Die histologische Quantifizierung der chronischen Myokardinfarktes bei Ratten

Dieses Protokoll beschreibt ein neues Verfahren für den 3D-Vergleich von ganzem Herzen Herzmuskelgewebe mit MRI. Dies ist für die genaue Beurteilung der intramyokardialer Injektionen in der Infarktrandzone eines chronischen Schweinemodell eines Myokardinfarkts entworfen.

3D Whole-Herz Myocardial Gewebeanalyse

Hier zeigen wir ein Protokoll zur Stichprobenverfahren eine etablierte porcinen Modell der akuten Myokardinfarkt zu standardisieren, um der translationalen Wertsteigerung für das Verständnis der Pathophysiologie der myokardialen Ischämie/Reperfusion Verletzungen und neuartige Medikamenten-Kandidaten zu testen.

Verbesserung der einen geschlossenen Kasten porcinen Myokardinfarkt Modell durch Standardisierung der Gewebe und Blut Stichprobenverfahren

Hier präsentieren wir eine Protokoll, die JC-1 Farbstoff verwendet, um die Mitochondrien-Membran-Potential der Zellen beurteilen nach Hypoxie/flussbettfilters mit oder ohne einem Schutzmittel ausgesetzt wird.

Ein Flow Cytometry-basierten Test zur Messung der Mitochondrien-Membran-Potential in kardialen Myozyten nach Hypoxie/Flussbettfilters

Unter angemessener Anästhesie wurde das Mäuseherz durch den Interkostalraum externalisiert, und der Myokardinfarkt wurde erfolgreich durch Ligatur der linken vorderen absteigenden Arterie (LAD) unter Verwendung von Materialien induziert, die in den meisten Labors leicht verfügbar sind.

Eine modifizierte einfache Methode zur Induktion von Myokardinfarkt bei Mäusen

In dieser Studie werden die kardioprotektiven Wirkungen von Munziq, einem traditionellen uigurischen Kräuterpräparat, auf die myokardiale Ischämie-Reperfusionsschädigung (MIRI) bei Ratten mit abnormaler Körperflüssigkeit untersucht. Mit umfassenden experimentellen Methoden zeigen wir das Potenzial von Munziq, MIRI durch Unterdrückung des NF-κB-Signalwegs zu schwächen.

Pflanzliches Munziq lindert myokardiale Ischämie-Reperfusionsschäden durch Hemmung von Entzündungen

Die dreidimensionale (3D) Rekonstruktion von Herzschäden bei reperfundiertem akutem Myokardinfarkt (repAMI) ermöglicht eine getreue Quantifizierung und Co-Lokalisierung von assoziierten krankheitsbeeinflussenden Mustern. Hier wird ein automatisierbarer, lichtblattgeführter Bildgebungsansatz für die gleichzeitige Messung von Herzschäden, Risikobereichen und Immunzellantworten bereitgestellt.

Simultane 3D-Analyse von Herzschädigung und Immunantwort bei reperfundiertem akutem Myokardinfarkt mittels Lichtblatt-Fluoreszenzmikroskopie

Erfahren Sie die mikroskopische TTC-Färbung zur präzisen Analyse von Myokardverletzungen. Diese optimierte Methode ermöglicht eine genaue Bestimmung der Infarktgröße und der Kardiomyozytenviabilität.

Ein mikroskopischer 2,3,5-Triphenyltetrazoliumchlorid-Test für eine genaue und zuverlässige Analyse der Myokardinverletzung

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