Name: Steuerbare in vivo Reprogrammierung von Tumorzellen zu konventionellen dendritischen zellähnlichen Zellen vom Typ 1 (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-08-01T14:35:00.000+00:00
Duration: 10 min 4 s
Description: Erfahren Sie die in vivo Reprogrammierung von Krebszellen zu immunogenen cDC1-ähnlichen Zellen durch PU.1, IRF8 und BATF3. Diese Methode wandelt immunologisch kalte Tumoren in heiße um und ermöglicht personalisierte Krebsimmuntherapien.

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<ol><li>Oliveira, G., Wu, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dynamics+and+specificities+of+T+cells+in+cancer+immunotherapy%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Cancer%22%5BJournal%5D)">Dynamics and specificities of T cells in cancer immunotherapy.</a> Nat Rev Cancer. 23 (5), 295-316 (2023).</li>
<li>Larkin, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Five-year+survival+with+combined+nivolumab+and+ipilimumab+in+advanced+melanoma%5BTitle%5D)+AND+%22N+Engl+J+Med%22%5BJournal%5D)">Five-year survival with combined nivolumab and ipilimumab in advanced melanoma.</a> N Engl J Med. 381 (16), 1535-1546 (2019).</li>
<li>Adams, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pembrolizumab+monotherapy+for+previously+untreated%2C+PD-L1-positive%2C+metastatic+triple-negative+breast+cancer%3A+cohort+B+of+the+phase+II+KEYNOTE-086+study%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Oncol%22%5BJournal%5D)">Pembrolizumab monotherapy for previously untreated, PD-L1-positive, metastatic triple-negative breast cancer: cohort B of the phase II KEYNOTE-086 study.</a> Ann Oncol. 30 (3), 405-411 (2019).</li>
<li>Patel, M. R., Falchook, G. S., Hamada, K., Makris, L., Bendell, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+phase+2+trial+of+trifluridine%2Ftipiracil+plus+nivolumab+in+patients+with+heavily+pretreated+microsatellite-stable+metastatic+colorectal+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Med%22%5BJournal%5D)">A phase 2 trial of trifluridine/tipiracil plus nivolumab in patients with heavily pretreated microsatellite-stable metastatic colorectal cancer.</a> Cancer Med. 10 (4), 1183-1190 (2021).</li>
<li>Reardon, D. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Randomized+phase+3+study+evaluating+the+efficacy+and+safety+of+nivolumab+vs+bevacizumab+in+patients+with+recurrent+glioblastoma%3A+CheckMate+143%5BTitle%5D)+AND+%22Neuro+Oncol%22%5BJournal%5D)">Randomized phase 3 study evaluating the efficacy and safety of nivolumab vs bevacizumab in patients with recurrent glioblastoma: CheckMate 143.</a> Neuro Oncol. 19 (suppl_3), iii21-iii21 (2017).</li>
<li>Sharma, P., Hu-Lieskovan, S., Wargo, J. A., Ribas, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Primary%2C+adaptive%2C+and+acquired+resistance+to+cancer+immunotherapy%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Primary, adaptive, and acquired resistance to cancer immunotherapy.</a> Cell. 168 (4), 707-723 (2017).</li>
<li>Heras-Murillo, I., Adán-Barrientos, I., Galán, M., Wculek, S. K., Sancho, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dendritic+cells+as+orchestrators+of+anticancer+immunity+and+immunotherapy%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Clin+Oncol%22%5BJournal%5D)">Dendritic cells as orchestrators of anticancer immunity and immunotherapy.</a> Nat Rev Clin Oncol. 21 (4), 257-277 (2024).</li>
<li>Heras-Murillo, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immunotherapy+with+conventional+type-1+dendritic+cells+induces+immune+memory+and+limits+tumor+relapse%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Immunotherapy with conventional type-1 dendritic cells induces immune memory and limits tumor relapse.</a> Nat Commun. 16 (1), 3369(2025).</li>
<li>Theisen, D. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((WDFY4+is+required+for+cross-presentation+in+response+to+viral+and+tumor+antigens%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">WDFY4 is required for cross-presentation in response to viral and tumor antigens.</a> Science. 362 (6415), 694-699 (2018).</li>
<li>Meiser, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+distinct+stimulatory+cDC1+subpopulation+amplifies+CD8%2B+T+cell+responses+in+tumors+for+protective+anti-cancer+immunity%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Cell%22%5BJournal%5D)">A distinct stimulatory cDC1 subpopulation amplifies CD8+ T cell responses in tumors for protective anti-cancer immunity.</a> Cancer Cell. 41 (8), 1498-1515.e10 (2023).</li>
<li>Spranger, S., Dai, D., Horton, B., Gajewski, T. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tumor-residing+Batf3+dendritic+cells+are+required+for+effector+T+cell+trafficking+and+adoptive+T+cell+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Cell%22%5BJournal%5D)">Tumor-residing Batf3 dendritic cells are required for effector T cell trafficking and adoptive T cell therapy.</a> Cancer Cell. 31 (5), 711-723.e4 (2017).</li>
<li>Hubert, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((IFN-III+is+selectively+produced+by+cDC1+and+predicts+good+clinical+outcome+in+breast+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Immunol%22%5BJournal%5D)">IFN-III is selectively produced by cDC1 and predicts good clinical outcome in breast cancer.</a> Sci Immunol. 5 (46), eaav3942(2020).</li>
<li>Mahadevan, K. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Type+I+conventional+dendritic+cells+facilitate+immunotherapy+in+pancreatic+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Type I conventional dendritic cells facilitate immunotherapy in pancreatic cancer.</a> Science. 384 (6703), eadh4567(2024).</li>
<li>Ascic, E., Pereira, C. -F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transcription+factor-mediated+reprogramming+to+antigen-presenting+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Genet+Dev%22%5BJournal%5D)">Transcription factor-mediated reprogramming to antigen-presenting cells.</a> Curr Opin Genet Dev. 90, 102300(2025).</li>
<li>Silk, K. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cross-presentation+of+tumour+antigens+by+human+induced+pluripotent+stem+cell-derived+CD141%2B+XCR1%2B+dendritic+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Gene+Ther%22%5BJournal%5D)">Cross-presentation of tumour antigens by human induced pluripotent stem cell-derived CD141+ XCR1+ dendritic cells.</a> Gene Ther. 19 (10), 1035-1040 (2012).</li>
<li>Nair, S., Archer, G. E., Tedder, T. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+and+generation+of+human+dendritic+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Protoc+Immunol%22%5BJournal%5D)">Isolation and generation of human dendritic cells.</a> Curr Protoc Immunol. Chapter 7, 7.32.1-7.32.23 (2012).</li>
<li>Makino, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Generation+of+cDC-like+cells+from+human+induced+pluripotent+stem+cells+via+Notch+signaling%5BTitle%5D)+AND+%22J+Immunother+Cancer%22%5BJournal%5D)">Generation of cDC-like cells from human induced pluripotent stem cells via Notch signaling.</a> J Immunother Cancer. 10 (1), e003827(2022).</li>
<li>Balan, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Large-scale+human+dendritic+cell+differentiation+revealing+Notch-dependent+lineage+bifurcation+and+heterogeneity%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Rep%22%5BJournal%5D)">Large-scale human dendritic cell differentiation revealing Notch-dependent lineage bifurcation and heterogeneity.</a> Cell Rep. 24 (7), 1902-1915.e6 (2018).</li>
<li>Kirkling, M. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Notch+signaling+facilitates+in+vitro+generation+of+cross-presenting+classical+dendritic+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Rep%22%5BJournal%5D)">Notch signaling facilitates in vitro generation of cross-presenting classical dendritic cells.</a> Cell Rep. 23 (12), 3658-3672.e6 (2018).</li>
<li>Ascic, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+dendritic+cell+reprogramming+for+cancer+immunotherapy%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">In vivo dendritic cell reprogramming for cancer immunotherapy.</a> Science. 386 (6719), eadn9083(2024).</li>
<li>Rosa, F. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Direct+reprogramming+of+fibroblasts+into+antigen-presenting+dendritic+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Immunol%22%5BJournal%5D)">Direct reprogramming of fibroblasts into antigen-presenting dendritic cells.</a> Sci Immunol. 3 (30), 1-16 (2018).</li>
<li>Rosa, F. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single-cell+transcriptional+profiling+informs+efficient+reprogramming+of+human+somatic+cells+to+cross-presenting+dendritic+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Immunol%22%5BJournal%5D)">Single-cell transcriptional profiling informs efficient reprogramming of human somatic cells to cross-presenting dendritic cells.</a> Sci Immunol. 7 (69), eabg5539(2022).</li>
<li>Zimmermannova, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Restoring+tumor+immunogenicity+with+dendritic+cell+reprogramming%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Immunol%22%5BJournal%5D)">Restoring tumor immunogenicity with dendritic cell reprogramming.</a> Sci Immunol. 8 (85), eadd4817(2023).</li>
<li>Bouquet, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((RapaCaspase-9-based+suicide+gene+applied+to+the+safety+of+IL-1RAP+CAR-T+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Gene+Ther%22%5BJournal%5D)">RapaCaspase-9-based suicide gene applied to the safety of IL-1RAP CAR-T cells.</a> Gene Ther. 30 (9), 706-713 (2023).</li>
<li>Huangfu, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Induction+of+pluripotent+stem+cells+from+primary+human+fibroblasts+with+only+Oct4+and+Sox2%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Induction of pluripotent stem cells from primary human fibroblasts with only Oct4 and Sox2.</a> Nat Biotechnol. 26 (11), 1269-1275 (2008).</li>
<li>Rojas, L. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Personalized+RNA+neoantigen+vaccines+stimulate+T+cells+in+pancreatic+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Personalized RNA neoantigen vaccines stimulate T cells in pancreatic cancer.</a> Nature. 618 (7963), 144-150 (2023).</li>
<li>Guan, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chemical+reprogramming+of+human+somatic+cells+to+pluripotent+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Chemical reprogramming of human somatic cells to pluripotent stem cells.</a> Nature. 605 (7909), 325-331 (2022).</li>
<li>Ferreira, A. G., Zimmermannova, O., Kurochkin, I., Ascic, E., Åkerström, F., Pereira, C. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reprogramming+cancer+cells+to+antigen-presenting+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Bio+Protoc%22%5BJournal%5D)">Reprogramming cancer cells to antigen-presenting cells.</a> Bio Protoc. 13 (22), 1-25 (2023).</li>
<li>Cabrita, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tertiary+lymphoid+structures+improve+immunotherapy+and+survival+in+melanoma%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Tertiary lymphoid structures improve immunotherapy and survival in melanoma.</a> Nature. 577 (7791), 561-565 (2020).</li>
<li>Ng, K. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antibodies+against+endogenous+retroviruses+promote+lung+cancer+immunotherapy%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Antibodies against endogenous retroviruses promote lung cancer immunotherapy.</a> Nature. 616 (7957), 563-573 (2023).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>0,45 &mu; m Bindungsfilter mit niedrigem Proteingehalt, 150 mL Vakuumfilter mit Flaschenaufsatz</td><td>Fischer wissenschaftlich</td><td>15983297</td><td></td></tr><tr><td>2-Mercaptoethanol 50 mM</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>31350010</td><td></td></tr><tr><td>Monoklonaler Anti-Maus-CD45-Antikörper (Klon: 30-F11), Ratten-IgG2b und Kappa;</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>14-0451-82</td><td></td></tr><tr><td>B6. SJL-PtprcaPepcb/BoyCrl (CD45.1)</td><td>Das Jackson-Labor</td><td>002014</td><td></td></tr><tr><td>BD Micro-Fine U-100 Insulinspritzen (0,5 mL)</td><td>Fisher Scientific</td><td>11395751</td><td></td></tr><tr><td>C57BL/6J Mäuse</td><td>Das Jackson-Labor</td><td>000664</td><td></td></tr><tr><td>Kollagenase D</td><td>Sigma Aldrich</td><td>11088882001</td><td></td></tr><tr><td>Corning Falcon Zellsieb zur Verwendung mit konischen 50-ml-Röhrchen</td><td>Sigma Aldrich</td><td>CLS352340</td><td></td></tr><tr><td>Corning Deckgläser 24 x 50 mm&nbsp;</td><td>Sigma Aldrich</td><td>CLS2975245</td><td></td></tr><tr><td>DAPI (4',6-Diamidino-2-phenylindol, Dihydrochlorid)</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>Nr. D1306</td><td></td></tr><tr><td>DNase I</td><td>Sigma Aldrich</td><td>10104159001</td><td></td></tr><tr><td>eBioscience Fixierbarer Viabilitätsfarbstoff eFluor 450</td><td>Invitrogen</td><td>65-0863-14</td><td></td></tr><tr><td>eBioscience IHC Antigen-Rückgewinnungslösung - Niedriger pH-Wert (10x)</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>00-4955-58</td><td></td></tr><tr><td>Fötales Rinderserum (FBS)</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>A5256701</td><td></td></tr><tr><td>Fluoromount-G Eindeckmedium</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>00-4958-02</td><td></td></tr><tr><td>GFP Antikörper [Alexa Fluor 594]</td><td>Novus Biologicals</td><td>NB600-308AF594</td><td></td></tr><tr><td>Gibco DMEM/Nährstoffmischung F-12 (DMEM/F-12)</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>31331028</td><td></td></tr><tr><td>Gibco MEM Lösung für nicht-essentielle Aminosäuren (100x)</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>11140035</td><td></td></tr><tr><td>Gibco Opti-MEM I</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>11058021</td><td></td></tr><tr><td>Gibco Roswell Park Memorial Institute (RPMI) 1640 Mittel</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>52400025</td><td></td></tr><tr><td>Gibco Natriumpyruvat (100 mM)</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>11360070</td><td></td></tr><tr><td>Gibco Trypanblaue Lösung, 0,4 %</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>15250061</td><td></td></tr><tr><td>GlutaMAX Ergänzung&nbsp;</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>35050061</td><td></td></tr><tr><td>Ziegen-Anti-Ratten-IgG (H+L) kreuzadsorbierter Sekundärantikörper, polyklonal, Alexa Fluor 488</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>Nr. A-11006</td><td></td></tr><tr><td>HEK 293T Zellen</td><td>ATTC</td><td>CRL-11268</td><td></td></tr><tr><td>Hexadimethrinbromid (Polybrene)</td><td>Sigma Aldrich</td><td>Nr. H9268</td><td></td></tr><tr><td>HyClone Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) mit hohem Glukosegehalt</td><td>Cytiva</td><td>SH30243.01</td><td></td></tr><tr><td>HyClone Penicillin Streptomycin 100x Lösung (Pen/Strepto)</td><td>Cytiva</td><td>SV30010</td><td></td></tr><tr><td>HyClone Phosphat gepufferte Kochsalzlösung (PBS)</td><td>Cytiva</td><td>SH30028.02</td><td></td></tr><tr><td>Ketaminol Tierarzt. Injektionslösung 100 mg/ml</td><td>MSD Animal Health Schweden</td><td>QN01AX03</td><td></td></tr><tr><td>Mikrotom-Klinge - C35</td><td>pfm medical</td><td>207500005</td><td></td></tr><tr><td>Maus Anti-CD45.2 (104), Oberfläche, APC, monoklonal</td><td>Biolegende</td><td>109814</td><td></td></tr><tr><td>Maus-Anti-MHCII (M5/114.15.2), Oberfläche, PE-Cy7, monoklonal</td><td>Biolegende</td><td>107630</td><td></td></tr><tr><td>Normales Ziegenserum</td><td>Abcam (Englisch)</td><td>AB7481</td><td></td></tr><tr><td>Normales Rattenserum (steril)</td><td>Abcam (Englisch)</td><td>AB7488</td><td></td></tr><tr><td>Dünnwandige Polypropylen-Rohre mit offenem Oberkörper</td><td>Beckman Coulter Biowissenschaften</td><td>326823</td><td></td></tr><tr><td>Paraformaldehyd, 16 % w/v aq. Soln., methanolfrei</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>043368.9M</td><td></td></tr><tr><td>pFUW-tetO-Batf3, eine monocistronic Kassettenkodierungsmaus Batf3</td><td>Addgene</td><td>139837</td><td></td></tr><tr><td>pFUW-tetO-Irf8, eine monocistronic Kassettenkodierungsmaus Irf8</td><td>Addgene</td><td>139838</td><td></td></tr><tr><td>pFUW-tetO-Pu.1, eine monocistronische Kassettenkodierungsmaus Pu.1</td><td>Addgene</td><td>139839</td><td></td></tr><tr><td>Plasmid pMD2.G</td><td>Addgene</td><td>12259</td><td></td></tr><tr><td>Plasmid psPAX2</td><td>Addgene</td><td>12260</td><td></td></tr><tr><td>Plasmid SFFV-eGFP (eGFP)</td><td>Inhouse-Klonen</td><td>-</td><td></td></tr><tr><td>Plasmid SFFV-mCherry (mCherry)</td><td>Inhouse-Klonen</td><td>-</td><td></td></tr><tr><td>Plasmid SFFV-PIB-eGFP,&nbsp; eine Polycistronic-Kassettenkodierung der Maus PU.1, IRF8 und BATF3 (PIB) &nbsp;</td><td>Inhouse-Klonen</td><td>-</td><td>Konstrukte und Vektoren, die für die Reprogrammierung verwendet werden, sind von Asgard Therapeutics im Rahmen einer Materialtransfervereinbarung mit dem Unternehmen erhältlich</td></tr><tr><td>Polyethylenimin (PEI), linear, MW 25000, Transfektionsqualität</td><td>Polywissenschaften</td><td>23966</td><td></td></tr><tr><td>ReadyProbes Hydrophober Barriere-Pap-Stift</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>Nr. R3777</td><td></td></tr><tr><td>Natriumbutyrat</td><td>Sigma Aldrich</td><td>303410</td><td></td></tr><tr><td>Saccharose</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>Nr. S7903</td><td></td></tr><tr><td>SuperFrost Plus Adhäsionsmikroskop-Objektträger</td><td>Epredia</td><td>J1800AMNZ</td><td></td></tr><tr><td>Tissue-Tek O.C.T. Compound</td><td>Sakura Finetek</td><td>4583</td><td></td></tr><tr><td>TrypLE Express Enzym (1x) ohne Phenolrot</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>12604021</td><td></td></tr><tr><td>TT Cryomold Intermediate, quadratisch (15 x 15 x 5 mm)</td><td>Sakura Finetek</td><td>4566</td><td></td></tr><tr><td>UltraPure 0,5 M EDTA, pH 8,0</td><td>Invitrogen</td><td>15575020</td><td></td></tr><tr><td>Xysol Tierarzt. Injektionslösung 20 mg/ml</td><td>VM Pharma</td><td>QN05CM92</td><td></td></tr><tr><td>YUMM1.7 Zellen</td><td>Antineo</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

steuerbare in vivo reprogrammierung von tumorzellen zu konventionellen dendritischen zellähnlichen zellen vom typ 1

Tractable In Vivo Reprogramming of Tumor Cells to Type 1 Conventional Dendritic Cell-like Cells

Eine schematische Übersicht über das steuerbare in vivo Reprogrammierungsprotokoll ist in Abbildung 1 dargestellt. Zuerst stellten wir den polycistronischen lentiviralen Vektor SFFV-PIB-IRES-eGFP (PIB-eGFP) her, der für die cDC1-instruktiven Reprogrammierungsfaktoren PU.1, IRF8, BATF3 kodiert, gefolgt von einer internen ribosomalen Eintrittsstelle (IRES) und einem verstärkten grün fluoreszierenden Protein (eGFP) in der HEK 293T-Verpackungszelllinie. Um die Lentivirus-vermittelte Immunogenität zu kontrollieren, haben wir einen leeren SFFV-MCS-eGFP (eGFP)-Vektor hergestellt, der eine multiple Klonierungsstelle (MCS) und IRES-eGFP enthält, aber die Reprogrammierungsfaktoren ausschließt. Nach der Virusproduktion haben wir den Lentivirus-haltigen Überstand geerntet und durch Ultrazentrifugation konzentriert. Wir titrierten das Virus funktionell, um die Menge zu bestimmen, die erforderlich ist, um ein 1:1-Verhältnis von transduzierten (eGFP+) zu nicht transduzierten (eGFP-) Zellen zu erreichen, das wir an Tag 3 nach der Transduktion evaluierten. Dann verwendeten wir die resultierende Virusmenge, um die ausgewählte Krebszelllinie an Tag -1 zu transduzieren. Nach 24 Stunden sammelten wir die Zellen und implantierten sie subkutan, um Tumore zu etablieren. Diese Strategie stellte sicher, dass transduzierte Zellen in vivo innerhalb der TME in cDC1-ähnliche Zellen umprogrammiert wurden. Zu den angegebenen Zeitpunkten nach der Transplantation exzidierten und bearbeiteten wir Tumore für nachgelagerte Analysen, einschließlich der Durchflusszytometrie dissoziierter Tumorzellen, um die in vivo Reprogrammierungseffizienz zu quantifizieren, oder der Immunfluoreszenzfärbung von kryokonservierten Tumorschnitten zur Charakterisierung von Veränderungen in der TME.
Um die Produktion hoher lentiviraler Titer sicherzustellen, überwachten wir zunächst HEK 293T-Zellen vor der Transfektion, um eine Konfluenz von 70-80% zu erreichen, und 24 Stunden später bewerteten wir die Transfektionseffizienz durch eGFP-Expression mittels Fluoreszenzmikroskopie (Abbildung 2A). Als nächstes sammelten wir virushaltiges Medium 48 h und 60 h nach der Transfektion, ultrazentrifugierten es und lagerten es in Aliquoten bei -80 °C (Abbildung 2B). Anschließend ermittelten wir die optimale Virusmenge, die erforderlich ist, um ein 1:1-Verhältnis von eGFP+- zu eGFP-Zellen in YUMM1.7-Melanomzellen zu erreichen. Wir säten 105 YUMM1,7-Zellen pro Well in eine 6-Well-Platte, transduzierten die Zellen mit zunehmendem Lentivirus-Volumen und ersetzten den virushaltigen Überstand nach 24 h durch frisches DMEM/F12-Komplettmedium (Abbildung 2C). An Tag 3 untersuchten wir die eGFP-Expression mittels Fluoreszenzmikroskopie, bevor wir mit der Quantifizierung der genauen Prozentsätze von eGFP+-Zellen durch Durchflusszytometrie fortfuhren (Abbildung 2C). Um das Verhältnis von eGFP+- zu eGFP-Zellen zu quantifizieren, haben wir lebende Einzelzellen eingeschlossen, um tote Zellen und Dubletten auszuschließen (Abbildung 2D). Das optimale Volumen der produzierten Lentivirus-Charge wurde sowohl für PIB-eGFP als auch für das Kontroll-eGFP-Virus mit 2 μl pro 105 YUMM1,7 Zellen bestimmt, was zu 50,0 ± 0,3% bzw. 63,0 ± 0,9% eGFP+ Zellen führte (Abbildung 2E).
Um die Effizienz der In-vivo-Reprogrammierung zu bewerten, erzeugten wir als Nächstes eine fluoreszenzmarkierte (mCherry+) Krebszelllinie (YUMM1,7-mCherry). Dies stellte sicher, dass wir zwischen Krebszellen und Stroma- oder Immunzellen unterscheiden konnten, indem wir lebende mCherry+-Zellen in der Durchflusszytometrie-Analyse eingruben (Abbildung 3A,B). Anschließend transduzierten wir YUMM1,7-mCherry-Zellen mit 2 μl PIB-eGFP oder Kontroll-eGFP-Viren pro 105 Zellen, um ein Verhältnis von 1:1 eGFP+ zu eGFP- zu erreichen. Wir implantierten subkutan 1,6 × 106 Zellen pro Tumor in CD45.1-Mäuse und bewahrten ein Aliquot von Zellen auf, um sie in vitro zum Vergleich zu kultivieren. Wir untersuchten die Effizienz der Reprogrammierung mittels Durchflusszytometrie, indem wir lebende mCherry+ eGFP+ und CD45.1-Zellen gatingten, um Immunzellen des Wirts auszuschließen, die eGFP oder mCherry verschlungen haben (Abbildung 3B). Von Tag 1 bis 9 beobachteten wir den allmählichen Erwerb der CD45.2- und/oder MHC-II-Expression, wobei teilweise reprogrammierte cDC1-ähnliche Zellen (CD45.2+ MHC-II- oder CD45.2-MHC-II+) und vollständig reprogrammierte cDC1-ähnliche Zellen (CD45+ MHC-II+) markiert wurden (Abbildung 3C). Wir validierten, dass die Reprogrammierung von Mauskrebszellen in vivo zu einem höheren Prozentsatz von cDC1-ähnlichen Zellen an Tag 9 im Vergleich zu in vitro Bedingungen führte (9,54 ± 1,54% CD45+ MHC-II+in vivo vs. 4,72 ± 1,1 % CD45+ MHC-II+in vitro, P = 0,018). Die Kinetik der Reprogrammierung wurde ebenfalls beschleunigt, da wir bereits an Tag 4 einen höheren Prozentsatz an cDC1-ähnlichen Zellen beobachteten (8,7 ± 3,3% CD45+ MHC-II+in vivo vs. 0,3 ± 0,1 % CD45+ MHC-II+in vitro, P = 0,05), was darauf hindeutet, dass das Vorhandensein von Umweltreizen eine schnellere und effizientere Reprogrammierung in Richtung cDC1-ähnlicher Zellen fördert19. Während in vitro reprogrammierte cDC1-ähnliche Zellen bis zum 15. Tag vorhanden waren, blieben in vivo cDC1-ähnliche Zellen 9 Tage lang bestehen, waren aber am 15. Tag nicht entdeckt, was auf eine Depletion der TME durch das Immunsystem des Wirts hindeutet (Abbildung 3C). 
Schließlich zielten wir darauf ab, frühe Veränderungen der TME als Ergebnis der in vivo cDC1-Reprogrammierung in den ersten 9 Tagen zu charakterisieren. Wir führten eine Immunfluoreszenzfärbung von kryokonservierten und geschnittenen Tumorgeweben sowohl von eGFP- als auch von PIB-eGFP-Tumoren nach 3 und 9 Tagen in vivo-Reprogrammierung durch, wobei wir uns auf die Infiltration von Immunzellen konzentrierten, die durch den pan-hämatopoetischen Marker CD45 markiert sind. Bemerkenswert ist, dass cDC1-ähnliche Zellen an Tag 3 im Vergleich zu eGFP-Tumoren signifikant mehr CD45-Zellen für die TME rekrutierten (49,6 ± 17,0 vs. 8,0 ± 5,8 eGFP mittlere Fluoreszenzintensität der CD45-Färbung pro Tumorbereich; Abbildung 4A,B). Interessanterweise konnten wir TLS innerhalb der TME von Tumoren nach 9 Tagen in vivo Reprogrammierung nachweisen. Dies deutet darauf hin, dass cDC1-ähnliche Zellen die TME innerhalb von 3 Tagen schnell von einer "immunkalten" zu einer "immunheißen" Umgebung umgestalten können, was dann am 9. Tag zur TLS-Bildung führt.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/68739/68739fig1.jpg"> 
Abbildung 1: Überblick über das Protokoll zur Generierung von cDC1-ähnlichen Zellen durch in vivo Reprogrammierung von Krebszellen. Lentivirale Vektoren SFFV-PIB-IRES-eGFP-kodierende PU.1, IRF8 und BATF3 in einer polycistronischen Kassette unter der Kontrolle des Milzfokus-bildenden Viruspromotors (SFFV) und eGFP nach einer internen Ribosomeneintrittsstelle (IRES) zur Verfolgung transduzierter Zellen mittels Durchflusszytometrie und Fluoreszenzmikroskopie - werden in der HEK 293T-Verpackungszelllinie hergestellt. Anschließend werden lentivirale Vektoren ultrazentrifugiert und funktionell titriert, um die Menge an Viren zu bestimmen, die für die Transduzierung von Krebszellen in einem Verhältnis von 1:1 transduzierten eGFP+ zu nicht transduzierten eGFP-Zellen erforderlich ist. Für In-vivo-Reprogrammierungsexperimente werden Krebszellen an Tag -1 mit der optimalen Menge an Lentivirus plattiert. Am nächsten Tag wird diese 1:1-Mischung aus transduzierten GFP+- und nicht transduzierten GFP-Zellen gewaschen und für die subkutane Tumoretablierung in Mäusen gesammelt. Parallele In-vitro-Kulturen werden aufrechterhalten, um die Transduktion an Tag 3 durch Durchflusszytometrie zu validieren. Die Tiere werden alle 2-3 Tage auf Tumorwachstum und Überleben überwacht. Tumore werden zu definierten Zeitpunkten gesammelt, dissoziiert und für die Oberflächenmarkerexpression für die Durchflusszytometrie-Analyse gefärbt. Alternativ werden ganze Gewebe fixiert, kryokonserviert und für die Immunfluoreszenzfärbung und konfokale Mikroskopieanalyse geschnitten. Die Effizienz der In-vivo-Reprogrammierung wird durch Durchflusszytometrie bewertet, während Veränderungen in der Tumormikroumgebung durch konfokale Bildgebung charakterisiert werden. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/68739/68739fig1large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/68739/68739fig2.jpg"> 
Abbildung 2: Produktion und funktionelle Titration von Lentiviren für die in vivo cDC1-Reprogrammierung. (A) Wenn HEK 293T-Zellen eine Konfluenz von ~70-80 % erreichen, werden sie mit einer Mischung transfiziert, die 10 μg Transferplasmid entweder SFFV-PIB-eGFP (PIB-eGFP) oder leere lentivirale Vektorkontrolle SFFV-eGFP (eGFP) enthält, zusammen mit 7,5 μg psPAX2 und 2,5 μg mPD2.G und 60 μl 1 mg/ml PEI. Hellfeld- und Fluoreszenzmikroskopie-Bilder von HEK 293T-Zellen zeigen die eGFP-Expression 24 h nach der Transfektion, was auf eine erfolgreiche Plasmidabgabe hinweist. Maßstabsbalken = 200 μm. (B) Schematische Darstellung des Arbeitsablaufs bei der Ultrazentrifugation zur Konzentration von Lentiviren. Der Lentivirus-haltige Überstand der HEK 293T-Zellen wird 48 h und 60 h nach der Transfektion gesammelt, durch einen 0,45 μm PES-Filter mit geringer Proteinbindung filtriert und 37 g in Open-Top-Dünnwand-Polypropylen-Röhrchen mit einer Tischwaage gewogen. Die Röhrchen werden in einem Ausschwingrotor ultrazentrifugiert, der Überstand wird angesaugt und das Pellet 5 min lang getrocknet. Die Pellets werden dann in eiskaltem, HEPES-haltigem DMEM resuspendiert und über Nacht inkubiert, bevor sie aliquotieren und bei -80 °C gelagert werden. (C) Experimentelle Strategie der funktionellen Titration zur Bestimmung der optimalen Virusdosis für das Erreichen eines 1:1-Verhältnisses von GFP+- zu GFP-Zellen. Hellfeld- und Fluoreszenzmikroskopie-Bilder zeigen die eGFP-Expression in YUMM1.7-Melanomzellen, 72 h nach der Transduktion, was auf eine erfolgreiche Verabreichung der Reprogrammierungsfaktoren und des eGFP hinweist. Maßstabsbalken = 100 μm. (D) Repräsentative Diagramme der Durchflusszytometrie, die die Gating-Strategie zur Quantifizierung des Verhältnisses von eGFP+ -Zellen zeigen. Lebende Zellen wurden auf Viabilitätsfarbstoff-negative Population (DAPI) untersucht, gefolgt von einem Dublett-Ausschluss. (E) Durchflusszytometrische Quantifizierung der Transduktionseffizienz mit steigenden Virusdosen, um das optimale Volumen für das Erreichen von 1:1 GFP+/GFP-Zellen zu bestimmen. Sowohl für PIB-eGFP als auch für eGFP-Lentiviren erreichten 2 μl Volumen pro 105 Zellen das gewünschte Verhältnis. Abkürzungen: cDC1s = konventionelle dendritische Zellen vom Typ 1; DAPI = 4',6-Diamidino-2-phenylindol; PIB = PU.1, IRF8 und BATF3; PEI = Polyethylenimin. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/68739/68739fig2large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/68739/68739fig3.jpg"> 
Abbildung 3: Bewertung der in vivo cDC1-Reprogrammierungseffizienz. (A) Schematische Darstellung des experimentellen Arbeitsablaufs zur Bewertung der in vivo cDC1-Reprogrammierungseffizienz. Krebszellen werden zunächst mit einem Lentivirus transduziert, das mCherry exprimiert, um eine fluoreszenzmarkierte Zelllinie (YUMM1,7-mCherry) zu erzeugen, gefolgt von der Transduktion mit der optimierten Dosis des PIB-eGFP-Lentivirus an Tag -1. Die Zellen werden dann am Tag 0 subkutan mit einem 1:1-Verhältnis von eGFP+/eGFP-Zellen injiziert, um Tumore in CD45.1-Mäusen zu etablieren und es den PIB-transduzierten Zellen zu ermöglichen, sich innerhalb der TME in cDC1-ähnliche Zellen umzuprogrammieren. Die Tumore werden dann zu den angegebenen Zeitpunkten isoliert, dissoziiert und mittels Durchflusszytometrie auf CD45.1, CD45.2 und MHC-II gefärbt. Dies ermöglicht den Ausschluss von CD45.1-Wirtsimmunzellen, um die in vivo cDC1-Reprogrammierungseffizienz durch Expression von CD45.2 und MHC-II zu quantifizieren. Parallele in vitro Kulturen werden als Vergleich zur in vivo Reprogrammierung über die gesamten Zeitpunkte aufbewahrt. (B) Repräsentative Durchflusszytometrie-Diagramme, die die Gating-Strategie an Tag 9 veranschaulichen. Die Zellen wurden auf mCherry+ und GFP+ gestoppt, um erfolgreich transduzierte Krebszellen zu identifizieren. Immunzellen des Wirts wurden ausgeschlossen, indem CD45.1+-Zellen ausgeschaltet wurden. (C) Quantifizierung der in vivo Reprogrammierungseffizienz (links) von YUMM1,7-mCherry-Zellen mittels Durchflusszytometrie als prozentualer Anteil von CD45+ MHC-II+ Zellen (vollständig reprogrammiert) und CD45.2+ HLA-DR- oder CD45.2-HLA-DR+ cDC1-ähnlichen Zellen (teilweise reprogrammiert), die innerhalb von eGFP+ mCherry+ gesteuert sind Zellen. Repräsentative Diagramme der Durchflusszytometrie (rechts), die den allmählichen Erwerb der CD45.2- und MHC-II-Expression in PIB-eGFP-transduzierten YUMM1.7-mCherry-Zellen während der angegebenen Zeitpunkte zeigen. Als Kontrolle wurden eGFP-transduzierte YUMM1,7-mCherry-Zellen verwendet und in vitro wurden reprogrammierte cDC1-ähnliche Zellen zum Vergleich verwendet. Die Daten in (C) geben die mittlere ± SD von 3-5 biologischen Replikatexperimenten an. Die statistische Analyse in (C) wurde für CD45+ MHC-II+ Zellen mit dem Mann-Whitney-Test durchgeführt. *P &lt; 0,05. Abkürzungen: cDC1s = konventionelle dendritische Zellen vom Typ 1; PIB = PU.1, IRF8 und BATF3; TME = Tumor-Mikroumgebung. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/68739/68739fig3large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/68739/68739fig4.jpg"> 
Abbildung 4: Analyse der Immuninfiltration in der Tumormikroumgebung nach in vivo cDC1-Reprogrammierung. (A) Repräsentative konfokale Bilder, die CD45+ -Zellen in YUMM1.7-Tumoren nach subkutaner Implantation von PIB-eGFP- oder Kontroll-eGFP-transduzierten Zellen (1:1-Verhältnis von transduzierten zu elterlichen Zellen) an den Tagen 3 und 9 zeigen. Maßstabsbalken = 500 μm. (B) Quantifizierung des MFI für die CD45-Färbung in PIB-behandelten und kontrollierten eGFP-transduzierten YUMM1.7-Tumoren an den Tagen 3 und 9. Die Daten in (B) zeigen die mittlere ± SD von 3-6 biologischen Replikatexperimenten. Die statistische Analyse in (B) wurde mit dem Mann-Whitney-Test durchgeführt. *P &lt; 0,05 und ***P &lt; 0,001. Abkürzungen: cDC1s = konventionelle dendritische Zellen vom Typ 1; PIB = PU.1, IRF8 und BATF3; MFI = mittlere Fluoreszenzintensität. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/68739/68739fig4large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.</a>

Steuerbare in vivo Reprogrammierung von Tumorzellen zu konventionellen dendritischen zellähnlichen Zellen vom Typ 1

The efficacy of cancer immunotherapy relies on the recruitment and activation of cytotoxic T cell responses against solid tumors by type 1 conventional ...

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Research

Forschung

JoVE Journal

Cancer Research

Krebsforschung

Generierung von T-Lymphozyten aus induzierten pluripotenten Stammzellen (iPS-Zellen) gibt einen alternativen Ansatz der Verwendung von embryonalen Stammzellen für die T-Zell-basierten Immuntherapie. Verfahren zeigt, dass durch Verwendung von...

Gerichtete Differenzierung von induzierten pluripotenten Stammzellen in Richtung T-Lymphozyten

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Eine ex vivo-Technik zur Erzeugung tumorspezifischer chimärer Antigenrezeptor-T-Zellen

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