Name: Präparation meiotischer Chromosomenspreizungen aus Maus-Eizellen zur Beurteilung von Synapse und Rekombination (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-07-18T15:30:00.000+00:00
Duration: 9 min 24 s
Description: Lernen Sie die Präparation meiotischer Chromosomenspreizungen aus Maus-Eizellen zur Analyse von Synapse und Rekombination. Diese Methode ermöglicht die detaillierte Untersuchung meiotischer Prozesse in vivo.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<table><tbody><tr><td>0,45 &mu; m Spritzenfilter</td><td>Millipore Sigma</td><td>SLHAR33SB</td><td>zur Herstellung von mundbetriebener Pipette</td></tr><tr><td>0,5 M EDTA, pH 8,0</td><td>Corning</td><td>46-034-CI&nbsp;</td><td>für HEB</td></tr><tr><td>1 ml sterile Spritze mit 25-Gauge, 16 mm Nadel</td><td>Fisher Scientific</td><td>14-817-125&nbsp;</td><td>Für das Platzen der Eierstöcke</td></tr><tr><td>100 x 15 mm Petrischüssel</td><td>VWR</td><td>25384-302&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>14,6 cm Einweg-Borosilikatglas-Pasteur-Pipetten</td><td>Fisher Scientific</td><td>13-678-20B&nbsp;</td><td>zur Herstellung von mundbetriebener Pipette</td></tr><tr><td>35 x 10 mm Petrischale</td><td>Corning</td><td>351008</td><td></td></tr><tr><td>40 mm x 0,45 mm #3 Edelstahlstifte für Entomologie</td><td>Amazon</td><td>B0CSSPW5S7</td><td>zum Feststecken von fetalen Mäusen zur Dissektion</td></tr><tr><td>Essigsäure, glazial</td><td>Fisher Scientific</td><td>A38-212</td><td>für Carnoys Fixativ</td></tr><tr><td>Aspiratorrohr-Baugruppen für kalibrierte Mikrokapillarpipetten</td><td>Millipore Sigma</td><td>A5177-5EA</td><td>zur Herstellung von mundbetriebener Pipette</td></tr><tr><td>B.P.I. Watch Glass</td><td>NDS Technologies&nbsp;</td><td>1580-00</td><td>Alternativ verwenden Sie eine 30 mm breite x 12 mm tiefe Embryoschale (Electron Microscopy Sciences SKU: 70543-30).</td></tr><tr><td>Borsäure</td><td>Fisher Scientific</td><td>BP168-1</td><td>zur Anpassung des pH-Werts von HEB, PFA</td></tr><tr><td>Rinderserum-Albumin</td><td>Millipore Sigma</td><td>A7906-100G</td><td>für ADB</td></tr><tr><td>CO2-Tank</td><td></td><td></td><td>für den Inkubator</td></tr><tr><td>Corning-Mikroskop-Objektträger</td><td>Millipore Sigma</td><td>CLS294875X25</td><td>L x W 75 mm x 25 mm, eine Seite mattiert</td></tr><tr><td>Corning-Mikroskop-Objektträger, mit Frost an einer Seite, an einem Ende</td><td>VWR</td><td>294875X25</td><td></td></tr><tr><td>Deckglas rechteckig. 60 x 24 mm, #1,5</td><td>VWR</td><td>48393-251</td><td></td></tr><tr><td>Sezierteller</td><td>Elektronenmikroskopiewissenschaften</td><td>70540</td><td></td></tr><tr><td>Sektionsmikroskop</td><td></td><td></td><td>Jedes Standardmodell</td></tr><tr><td>Sektionsschere, scharfe Spitze, 10,5 cm</td><td>VWR</td><td>82027-578</td><td></td></tr><tr><td>Besonders feine, scharfe Spitzen-Tangen</td><td>VWR</td><td>76548-836</td><td></td></tr><tr><td>Giemsa Stain</td><td>Millipore Sigma</td><td>GS500-500</td><td>Zur Färbung von Chiasmaten-Ausbreitungen</td></tr><tr><td>ImmEdge hydrophobe Barriere PAP-Stift</td><td>Vektorlabore</td><td>H-4000</td><td></td></tr><tr><td>Inkubator</td><td></td><td></td><td>Jedes Standardmodell mit CO2- und wasserummantelter Technologie</td></tr><tr><td>IVF-Arbeitsstation</td><td>K-Systems</td><td></td><td>Jedes Modell mit beheizter Arbeitsplatte</td></tr><tr><td>Kodak Photo-Flo 200 Lösung</td><td>BH Foto & Video</td><td>1464510</td><td>für Slide-Washes</td></tr><tr><td>Methanol</td><td>Fisher Scientific</td><td>A412-4</td><td>für Carnoys Fixativ</td></tr><tr><td>MP Biomedicals Coplin-Färbeglas</td><td>Fisher Scientific</td><td>ICN17006201</td><td></td></tr><tr><td>Normales Ziegenserum</td><td>Gibco</td><td>16210-072</td><td>für ADB</td></tr><tr><td>Paraformaldehyd, EM-Qualität, gereinigter Prill</td><td>Elektronenmikroskopiewissenschaften</td><td>19200</td><td></td></tr><tr><td>Permount</td><td>Fisher Scientific</td><td>SP15-100</td><td>for&nbsp; Montage-Objektträger für Chiasmata-Spreads</td></tr><tr><td>ProLong Glass Antifade Mountant mit NucBlue Stain</td><td>Thermowissenschaftlich</td><td>P36985</td><td>zum Anbringen immungefärbter Objektträger</td></tr><tr><td>Silikonrohr, Innendurchmesser: 0,125", Außendurchmesser: 0,25"</td><td>VWR</td><td>89068-474</td><td>zur Herstellung von mundbetriebener Pipette</td></tr><tr><td>Natriumcitrat-Dihydrat</td><td>Fisher Scientific</td><td>S279-500</td><td>für HEB, hypotonische Lösung</td></tr><tr><td>StainTray Folien-Färbesystem</td><td>Elektronenmikroskopiewissenschaften</td><td>71396-B</td><td>Zur Nutzung als befeuchtete Kammer. Man muss den schwarzen Deckel für die Immunfluoreszenzfärbung verwenden. Alternativ kann man den Boden einer undurchsichtigen Folienbox oder Tupper-Ware mit feuchten Papiertüchern auslegen, um sie als befeuchtete Kammer zu verwenden;</td></tr><tr><td>Stripper-Spitzen – 100</td><td>Cooper Chirurgie</td><td>MXL3-100</td><td>für mundbetriebene Pipette</td></tr><tr><td>Stripper-Spitzen – 150</td><td>Cooper Chirurgie</td><td>MXL3-150</td><td>für mundbetriebene Pipette</td></tr><tr><td>Sucrose</td><td>Millipore Sigma</td><td>S-8501</td><td>für HEB, sukkrosagenhypotonische Lösung</td></tr><tr><td>Tris Base</td><td>Fisher Scientific</td><td>BP152-5</td><td>für HEB</td></tr><tr><td>Triton X-100</td><td>Fisher Scientific</td><td>BP151-100&nbsp;</td><td>für PFA, ADB und Triton-PBS</td></tr><tr><td>United Scientific Coplin-Färbeglas</td><td>Fisher Scientific</td><td>S17495A</td><td>Undurchsichtiger weißer Kunststoff für Washes und Blockieren von Objektträgern nach Zugabe photosensitiver sekundärer Antikörper</td></tr><tr><td>United Scientific Glas-Konkavitäts-Objektträger</td><td>Fisher Scientific</td><td>S139533</td><td>1,3 mm dick, 2 Brunnen zählen</td></tr><tr><td>Vannas Mikrodissektionsschere 5 mm gerade</td><td>VWR</td><td>76457-358</td><td></td></tr><tr><td>Zeiss Axio Imager.Z2, Colibri 7</td><td>Carl Zeiss</td><td>000000-2624-307</td><td></td></tr><tr><td>Zen Blue 3.11 Software</td><td>Carl Zeiss</td><td></td><td>Bildaufnahme- und Analysesoftware</td></tr><tr><td>Antikörper</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Alexa Fluor 488 AffiniPure F(ab')? Fragment-Ziegen-Anti-Maus-IgG, Fc-Fragment-spezifisch</td><td>Jackson ImmunoResearch Laboratories Inc.</td><td>115-546-071</td><td>verwendete 1:1.000-Verdünnung</td></tr><tr><td>Alexa Fluor 488 AffiniPure F(ab')? Fragment Ziegen-Anti-Kaninchen-IgG, Fc-Fragment-spezifisch</td><td>Jackson ImmunoResearch Laboratories Inc.</td><td>111-546-046</td><td>verwendete 1:1.000-Verdünnung</td></tr><tr><td>Alexa Fluor 647 AffiniPure F(ab')? Fragmentziegen-antimenschliches IgG, Fc&gamma; fragmentspezifisch</td><td>Jackson ImmunoResearch Laboratories Inc.</td><td>109-606-170</td><td>verwendete 1:1.000-Verdünnung</td></tr><tr><td>Alexa Fluor 647 AffiniPure Goat Anti-Meerschweinchen IgG, Fc-Fragment-Spezifikation</td><td>Jackson ImmunoResearch Laboratories Inc.</td><td>106-605-008</td><td>verwendete 1:1.000-Verdünnung</td></tr><tr><td>Meerschweinchen anti-MLH3 pAb</td><td></td><td></td><td>maßgefertigt mit Thermo-Fisher, verwendet 1:500 Verdünnung</td></tr><tr><td>Meerschweinchen anti-SYCP1 pAb</td><td></td><td></td><td>von Christer H&ouml; &ouml; g (Kouznetsova et al. 2005), verwendete 1:200-Verdünnung</td></tr><tr><td>Humanes Anti-Centromer-Protein pAb</td><td>Antikörper Inc.</td><td>15-234</td><td>verwendete 1:1.000-Verdünnung</td></tr><tr><td>Maus anti-MLH1 mAb</td><td>BD Biosciences</td><td>550838</td><td>Verwendete 1:100-Verdünnung</td></tr><tr><td>Maus anti-SYCP3 mAb</td><td>Abcam</td><td>ab97672</td><td>verwendete 1:1.000-Verdünnung</td></tr><tr><td>Kaninchen-Anti-HORMAD1 pAb</td><td>Proteintech</td><td>13917-1-AP</td><td>verwendete 1:500-Verdünnung</td></tr><tr><td>Kaninchen-Anti-MSH4 pAb</td><td>Abklonal</td><td>A8556</td><td>Verwendete 1:100-Verdünnung</td></tr><tr><td>Kaninchen anti-RAD51 pAb</td><td>Millipore</td><td>PC130</td><td>verwendete 1:500-Verdünnung</td></tr><tr><td>Kaninchen anti-SYCP3 pAb</td><td>Abcam</td><td>ab15093</td><td>verwendete 1:1.000-Verdünnung</td></tr><tr><td>Rhodamin Red-X (RRX) AffiniPure F(ab')? Fragment-Ziegen-Anti-Maus-IgG, Fc-Fragment-spezifisch</td><td>Jackson ImmunoResearch Laboratories Inc.</td><td>115-296-071</td><td>verwendete 1:1.000-Verdünnung</td></tr><tr><td>Rhodamin Red-X (RRX) AffiniPure F(ab')? Fragment Ziegen-Anti-Kaninchen-IgG, Fc-Fragment-spezifisch</td><td>Jackson ImmunoResearch Laboratories Inc.</td><td>111-296-046</td><td>verwendete 1:1.000-Verdünnung</td></tr></tbody></table>

präparation meiotischer chromosomenspreizungen aus maus-eizellen zur beurteilung von synapse und rekombination

Preparation of Meiotic Chromosome Spreads from Mouse Oocytes for Assessment of Synapsis and Recombination

Präparation meiotischer Chromosomenspreizungen aus Maus-Eizellen zur Beurteilung von Synapse und Rekombination

Three critical and interdependent processes define meiotic prophase I: homologous chromosomes must pair together, a proteinaceous structure called the ...

preparation-meiotic-chromosome-spreads-from-mouse-oocytes-for

Research

Forschung

JoVE Journal

Developmental Biology

Entwicklungsbiologie

Eizellen sind anfällig für Aneuploidie aufgrund von Fehlern in Chromosomensegregation während meiotischen Reifung. Aneuploiden Eier können zu Unfruchtbarkeit, Fehlgeburten oder Entwicklungsstörungen wie dem Down-Syndrom. Hier beschreiben wir Methoden, um Material der Wahl in Oozyten und Methoden zur meiotischen Reifung zu studieren und zu bewerten Ploidie einzuführen.

Maus Oocyte Mikroinjektion, Reifung und Ploidie Beurteilung

Hier präsentieren wir ein Protokoll für spezifische siRNA-vermittelten mRNA-Abbau, gefolgt von Immunfluoreszenz-Analyse, um meiotische Spindel-Anordnung und Organisation in der Maus-Oozyten zu bewerten. Dieses Protokoll ist für die in vitro-Abreicherung von Transkripten und funktionale Bewertung verschiedener Spindel und / oder MTOC-assoziierten Faktoren in Oocyten.

Meiotischen Spindel Assessment in Maus-Oozyten von siRNA-vermittelte Silencing

Meiose ist der Entwicklungsprozess durch den Gameten durch eine einzelne Runde der DNA-Replikation und zwei aufeinanderfolgenden Runden Chromosom Segregation gebildet werden. Säugetier-Meiose kann untersucht werden, durch die Verwendung einer Technik um meiotische Chromosomen breitet sich vorzubereiten. Hier zeigen wir einen Weg der Vorbereitung der Oberfläche verbreitet Kerne aus Maus Spermatozyten.

Vorbereitung der meiotischen Chromosom erstreckt sich von Maus Spermatozyten

Oogenese bei Säugetieren ist bekanntermaßen anfällig für Fehler, vor allem auf Chromosom Missegregation. Dieses Manuskript beschreibt Chromatin verteilt Präparationsmethoden für Maus Prophase, Metaphase I und II inszeniert Eizellen. Diese grundlegenden Techniken ermöglichen die Untersuchung der Chromatin-gebundene Proteine und Chromosom Morphologie in Säugetieren Oogenese.

Chromatin verteilt die Vorbereitungen für die Analyse der Maus Eizelle Progression von Prophase, Metaphase II

Wie die genetischen Varianten, verbunden mit der menschlichen Krankheit beginnen, aufgedeckt zu werden, ist es immer wichtiger, Systeme, um schnell die biologische Bedeutung dieser identifizierten Varianten bewerten zu entwickeln. Dieses Protokoll beschreibt Methoden zur Bewertung der menschlichen Genfunktion während weibliche Meiose ich benutze Maus Eizellen.

Mit Maus Eizellen menschliche Gen-Funktion während der Meiose zu beurteilen ich

Nukleare Oberflächenausbreitungen sind ein unverzichtbares Werkzeug, um Chromosomenereignisse während der Meiose zu untersuchen. Hier zeigen wir eine Methode zur Vorbereitung und Visualisierung meiotischer Chromosomen während der Prophase I aus Zebrafisch-Spermatozyten.

Zubereitung von meiotischen Chromosomenaufstrichen aus Zebrafisch Spermatozyten

Fehler in der Chromosomentrennung sind ein häufiges Merkmal bei Eizellen. Daher gibt die Untersuchung des Spindelanordnungs-Checkpoints wichtige Hinweise auf die Mechanismen, die zur Produktion gesunder Eier erforderlich sind. Das vorliegende Protokoll beschreibt drei komplementäre Assays zur Beurteilung der Integrität des Spindelaufbau-Checkpoints in Maus-Oozyten.

Evaluation der Integrität des Spindel-Assemblierungs-Checkpoints in Maus-Eizellen

Dieses Protokoll beschreibt eine Technik zur Beurteilung von Veränderungen im mütterlichen Gefäßsystem während der Schwangerschaft bei Mäusen. Mit stereologischen Methoden wird der Umbau der dezidualen Spiralarterien quantitativ beurteilt und die Ergebnisse immunhistochemisch qualitativ bestätigt.

Beurteilung der Maternal Vascular Remodeling während der Schwangerschaft in der Gebärmutter Maus

Hier präsentieren wir ein Protokoll für die Charakterisierung von Maus antralen Oozyten basierend auf nucleolar Organisation.

Isolierung und Charakterisierung von Maus Antral Oozyten Basierend auf Nucleolar Chromatinorganisation

Dieses Manuskript beschreibt einen experimentellen Ansatz zur morphologischen und biochemischen Charakterisierung von Pferdostozyten. Speziell veranschaulicht die vorliegende Arbeit, wie man unreife und reife Pferdoozyten durch Ultraschall-geführte Ovum-Pick-up (OPU) sammelt und wie man Chromosomensegregation, Spindelmorphologie, globale Histonacetylierung und mRNA-Expression untersucht.

Analyse der Chromosomensegregation, Histonacetylierung und Spindelmorphologie in Pferdeozyten

Lernen Sie die Präparation meiotischer Chromosomenspreizungen aus Maus-Eizellen zur Analyse von Synapse und Rekombination. Diese Methode ermöglicht die detaillierte Untersuchung meiotischer Prozesse in vivo.

Präparation meiotischer Chromosomenspreizungen aus Maus-Eizellen zur Beurteilung von Synapse und Rekombination

Weitere Videos entdecken