Name: Messung der Einzelzellalterung mit einem bildgebenden Biomarker von Chromatin und epigenetischer Alterung (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-01-30T13:15:00.000+00:00
Duration: 9 min 10 s
Description: Erfahren Sie die bildbasierte Chromatin- und epigenetische Alterung (ImAge) zur Quantifizierung von Zellalterung und Verjüngung in Einzelzellen. Diese nicht-destruktive Methode ermöglicht groß angelegte und longitudinale Studien.

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<ol><li>Alvarez-Kuglen, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ImAge+quantitates+aging+and+rejuvenation%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Aging%22%5BJournal%5D)">ImAge quantitates aging and rejuvenation.</a> Nat Aging. 4, 1308-1327 (2024).</li>
<li>Zampino, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biomarkers+of+aging+in+real+life%3A+three+questions+on+aging+and+the+comprehensive+geriatric+assessment%5BTitle%5D)+AND+%22GeroScience%22%5BJournal%5D)">Biomarkers of aging in real life: three questions on aging and the comprehensive geriatric assessment.</a> GeroScience. 44 (6), 2611-2622 (2022).</li>
<li>Moqri, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biomarkers+of+aging+for+the+identification+and+evaluation+of+longevity+interventions%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Biomarkers of aging for the identification and evaluation of longevity interventions.</a> Cell. 186 (18), 3758-3775 (2023).</li>
<li>Bell, C. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((DNA+methylation+aging+clocks%3A+challenges+and+recommendations%5BTitle%5D)+AND+%22Genome+Biol%22%5BJournal%5D)">DNA methylation aging clocks: challenges and recommendations.</a> Genome Biol. 20 (1), 249(2019).</li>
<li>Horvath, S., Raj, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((DNA+methylation-based+biomarkers+and+the+epigenetic+clock+theory+of+ageing%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Genet%22%5BJournal%5D)">DNA methylation-based biomarkers and the epigenetic clock theory of ageing.</a> Nat Rev Genet. 19 (6), 371-384 (2018).</li>
<li>Field, A. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((DNA+methylation+clocks+in+aging%3A+Categories%2C+causes%2C+and+consequences%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Cell%22%5BJournal%5D)">DNA methylation clocks in aging: Categories, causes, and consequences.</a> Mol Cell. 71 (6), 882-895 (2018).</li>
<li>Galow, A. M., Peleg, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((How+to+slow+down+the+ticking+clock%3A+Age-associated+epigenetic+alterations+and+related+interventions+to+extend+life+span%5BTitle%5D)+AND+%22Cells%22%5BJournal%5D)">How to slow down the ticking clock: Age-associated epigenetic alterations and related interventions to extend life span.</a> Cells. 11 (3), 468(2022).</li>
<li>Westneat, D. F., Wright, J., Dingemanse, N. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+biology+hidden+inside+residual+within-individual+phenotypic+variation%5BTitle%5D)+AND+%22Biol+Rev+Camb+Philos+Soc%22%5BJournal%5D)">The biology hidden inside residual within-individual phenotypic variation.</a> Biol Rev Camb Philos Soc. 90 (3), 729-743 (2015).</li>
<li>Lähnemann, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Eleven+grand+challenges+in+single-cell+data+science%5BTitle%5D)+AND+%22Genome+Biol%22%5BJournal%5D)">Eleven grand challenges in single-cell data science.</a> Genome Biol. 21 (1), 31(2020).</li>
<li>Ninomiya, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ImAge%3A+quantifying+epigenetic+ageing+with+single-cell+images%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Cancer%22%5BJournal%5D)">ImAge: quantifying epigenetic ageing with single-cell images.</a> Nat Rev Cancer. 25, 755(2025).</li>
<li>Stepanov, A. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetically+encoded+epigenetic+sensors+for+visualization+of+H3K9me3%2C+H3K9ac+and+H3K4me1+histone+modifications+in+living+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Biochem+Biophys+Res+Commun%22%5BJournal%5D)">Genetically encoded epigenetic sensors for visualization of H3K9me3, H3K9ac and H3K4me1 histone modifications in living cells.</a> Biochem Biophys Res Commun. 733, 150715(2024).</li>
<li>Farhy, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improving+drug+discovery+using+image-based+multiparametric+analysis+of+the+epigenetic+landscape%5BTitle%5D)+AND+%22Elife%22%5BJournal%5D)">Improving drug discovery using image-based multiparametric analysis of the epigenetic landscape.</a> Elife. 8, e49683(2019).</li>
<li>ImAge_workflow. , 
 <a target="_blank" href="https://github.com/terskikh-lab/ImAge_workflow">https://github.com/terskikh-lab/ImAge_workflow</a> (2025).</li>
<li>Chondronasiou, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multi-omic+rejuvenation+of+naturally+aged+tissues+by+a+single+cycle+of+transient+reprogramming%5BTitle%5D)+AND+%22Aging+Cell%22%5BJournal%5D)">Multi-omic rejuvenation of naturally aged tissues by a single cycle of transient reprogramming.</a> Aging Cell. 21 (3), e13578(2022).</li>
<li>Linkert, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metadata+matters%3A+access+to+image+data+in+the+real+world%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Metadata matters: access to image data in the real world.</a> J Cell Biol. 189 (5), 777-782 (2010).</li>
<li>The Open Microscopy Environment. , bioformats. 
 <a target="_blank" href="https://github.com/ome/bioformats">https://github.com/ome/bioformats</a> (2025).</li>
<li>González-Ramírez, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differential+contribution+to+gene+expression+prediction+of+histone+modifications+at+enhancers+or+promoters%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Comput+Biol%22%5BJournal%5D)">Differential contribution to gene expression prediction of histone modifications at enhancers or promoters.</a> PLoS Comput Biol. 17 (9), e1009368(2021).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Rinderserum-Albumin</td><td>Sigma-Aldrich&nbsp;</td><td>A9647</td><td></td></tr><tr><td>Donkey Anti-Maus IgG (H+L) hoch kreuzadsorbierter sekundärer Antikörper, Alexa 488&nbsp;</td><td>Invitrogen</td><td>A-21202</td><td></td></tr><tr><td>Donkey Anti-Rabbit IgG (H+L) Stark kreuzadsorbierter sekundärer Antikörper, Alexa 555</td><td>Invitrogen</td><td>A-31572</td><td></td></tr><tr><td>Glycin</td><td>Bio-Rad</td><td>161-0718</td><td></td></tr><tr><td>Histon H3K27ac-Antikörper (mAb)&nbsp;</td><td>Aktives Motiv</td><td>39685</td><td></td></tr><tr><td>Histon H3K27me3 Antikörper (pAb)&nbsp;</td><td>Aktives Motiv</td><td>39155</td><td></td></tr><tr><td>Hoechst 33342</td><td>Invitrogen</td><td>H3570</td><td></td></tr><tr><td>Kern-Isolationskit: Nuclei EZ Prep</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>NUC101</td><td></td></tr><tr><td>Operetta CLS High Content Imager</td><td>Revvity</td><td>https://www.revvity.com/au-en/product/operetta-cls-system-hh16000020</td><td></td></tr><tr><td>Paraformaldehyd 16% wässrige Lösung EM-Grade</td><td>Elektronenmikroskopiewissenschaften</td><td>15710-S</td><td></td></tr><tr><td>PBS</td><td>Thermo Fisher</td><td>AM9624</td><td></td></tr><tr><td>PhenoPlate 384-Well-Mikroplatte</td><td>Revvity</td><td>6057302</td><td></td></tr><tr><td>Triton-X</td><td>Sigma</td><td>T8787</td><td></td></tr><tr><td>Trypan Blue Solution, 0,4 %&nbspoon;</td><td>Gibco&nbsp;</td><td>15250061&nbsp;</td><td></td></tr></tbody></table>

messung der einzelzellalterung mit einem bildgebenden biomarker von chromatin und epigenetischer alterung

Measuring Single-Cell Aging with an Imaging-based Biomarker of Chromatin and Epigenetic Aging

Messung der Einzelzellalterung mit einem bildgebenden Biomarker von Chromatin und epigenetischer Alterung

To advance personalized healthcare and assess potential rejuvenation strategies, biomarkers reflecting biological age are crucial. We have introduced ...

measuring-single-cell-aging-with-an-imaging-based-biomarker-chromatin

Research

Forschung

JoVE Journal

Biology

Biologie

Wir beschreiben photobleaching Methoden einschließlich Fluorescence Recovery After Photobleaching (FRAP) und Fluoreszenz-Loss In Photobleaching (FLIP) zu Chromatin Protein Dynamik in embryonale Stammzellen (ES-Zellen) zu überwachen. Chromatin Protein Dynamik, die als eines der Mittel, um das Chromatin Plastizität zu studieren, ist in pluripotente Zellen verbessert.

Photobleaching Assays (FRAP &amp; FLIP) zu Chromatin Protein Dynamics in Living embryonalen Stammzellen Measure

Dieser Artikel stellt ein Protokoll für die Herstellung von Mikrofluidik-Chips und der Aufbau von mikrofluidischen Experimenten optimiert, um die Lebensdauer und zellulären Phänotypen einzelner Hefezellen zu messen.

Mikrofluidik-Geräte mit Measure Lebensdauer und Cellular Phänotypen in Einzel Budding Hefezellen

Zelluläre Seneszenz, der irreversible Zustand der Zellzyklusarrest, kann durch verschiedene Zellspannungen induziert werden. Hier beschreiben wir Protokolle zelluläre Seneszenz und Methoden zu induzieren Marker für Seneszenz zu beurteilen.

Techniken zur Induktion und Quantify Zelluläre Seneszenz

Dieses Protokoll beschreibt eine Methode zum Bestimmen von Protein in einzelne lebende adhärente Zellen, Halbwertszeiten mit Puls Kennzeichnung und Zeitraffer Fluoreszenz-Bildgebung von Fusionsproteinen SNAP-Tag.

Einzellige Quantifizierung der Protein-Abbauraten von Time-Lapse Fluoreszenzmikroskopie in adhärente Zellkultur

Hier diskutieren wir eine Reihe von Protokollen für die Induktion und Validierung der zellulären Seneszenz in kultivierten Zellen. Wir konzentrieren uns auf unterschiedlichen Seneszenz-induzierende Stimuli und beschreiben die Quantifizierung der gemeinsamen Seneszenz-assoziierten Marker. Wir bieten technische Details mit Fibroblasten als Modell, aber die Protokolle können verschiedene zelluläre Modelle angepasst werden.

Induktion und Validierung der zellulären Seneszenz in primären humanen Zellen

Zelluläre Seneszenz ist der Schlüsselfaktor bei der Entwicklung chronischer altersbedingter Pathologien. Die Identifizierung von Therapeutika, die auf seneszente Zellen abzielen, verspricht, eine gesunde Alterung zu verlängern. Hier präsentieren wir einen neuartigen Test zur Identifizierung von Senotherapeutika auf der Grundlage der Messung der seneszenzassoziierten Galactosidase-Aktivität in Einzelzellen.

SA--Galactosidase-basierter Screening-Test zur Identifizierung von Senotherapeutischen Arzneimitteln

Hier stellen wir ein Protokoll zur Beurteilung der Dynamik der Spindelbildung und der mitotischen Progression vor. Unsere Anwendung der Zeitraffer-Bildgebung ermöglicht es dem Anwender, Zellen in verschiedenen Stadien der Mitose zu identifizieren, mitotische Defekte zu verfolgen und zu identifizieren und die Spindeldynamik und das mitotische Zellschicksal bei Exposition gegenüber Anti-Mitotik-Medikamenten zu analysieren.

Live Cell Imaging zur Bewertung der Dynamik von Metaphasen-Timing und Zellschicksal nach mitotischen Spindelstörungen

Das vorliegende Protokoll beschreibt eine Einzelzellmethode für iterative epigenomische Analysen unter Verwendung einer wiederverwendbaren Einzelzelle. Die wiederverwendbare Einzelzelle ermöglicht die Analyse mehrerer epigenetischer Markierungen in derselben Einzelzelle und die statistische Validierung der Ergebnisse.

Wiederverwendbare Einzelzelle für iterative epigenomische Analysen

Hier stellen wir eine auf Durchflusszytometrie basierende Methode zur Visualisierung und Quantifizierung mehrerer seneszenzassoziierter Marker in einzelnen Zellen vor.

Simultane Bildgebung und Durchflusszytometrie-basierte Detektion mehrerer fluoreszierender Seneszenzmarker in therapieinduzierten seneszenten Krebszellen

Multiplexierte Immunfluoreszenz ermöglicht die sequentielle Markierung mehrerer Antikörpermarker innerhalb eines einzelnen Gewebeschnitts, um die räumliche Analyse der Gewebearchitektur und Zellpopulationen zu unterstützen. Hier wird ein Arbeitsablauf zur Multiplexerkennung von seneszenzassoziierten, strukturellen und immunen Markern präsentiert, einschließlich manueller und automatisierter Objektträgervorbereitung, iterativer Bildgebung und Einzelzellanalyse mit digitaler Pathologiesoftware.

Multiplexierter Immunfluoreszenz-Assay zur räumlichen Bewertung von Altersmarkern in vivo

Dieser Artikel stellt ein lebendzelliges LysoTracker-Protokoll zur Messung der lysosomalen Remodellierung während der Seneszenz in humanen Fibroblasten von IMR-90 vor.

Lysosomales Profiling mit LysoTracker zur quantitativen Bewertung der zellulären Seneszenz bei humanen Fibroblasten

Erfahren Sie die bildbasierte Chromatin- und epigenetische Alterung (ImAge) zur Quantifizierung von Zellalterung und Verjüngung in Einzelzellen. Diese nicht-destruktive Methode ermöglicht groß angelegte und longitudinale Studien.

Messung der Einzelzellalterung mit einem bildgebenden Biomarker von Chromatin und epigenetischer Alterung

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