Name: Erzeugung von humanen induzierten pluripotenten Stammzell-abgeleiteten planaren haartragenden Hautorganoiden unter Verwendung eines Luft-Flüssig-Grenzflächenkultursystems (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-10-17T14:10:00.000+00:00
Duration: 4 min 37 s
Description: Erfahren Sie die Erzeugung von Hautorganoiden mit Haarfollikeln aus humanen induzierten pluripotenten Stammzellen mithilfe eines Luft-Flüssig-Grenzflächenkultursystems. Diese Methode ermöglicht die Untersuchung von Xeroderma pigmentosum.

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<ol><li>Kolarsick, P. A. J., Kolarsick, M. A., Goodwin, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anatomy+and+physiology+of+the+skin%5BTitle%5D)+AND+%22J+Dermatol+Nurses+Assoc%22%5BJournal%5D)">Anatomy and physiology of the skin.</a> J Dermatol Nurses Assoc. 3 (4), 203-213 (2011).</li>
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</ol>

<table><tbody><tr><td>Fortgeschrittenes DMEM/F12</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>#12634010</td><td>im Text als Advanced Medium bezeichnet.</td></tr><tr><td>ALK5, Inhib. TGFb Typ 1, SB431542</td><td>Tocris Bioscience</td><td>#1614</td><td>Aliquot, Laden Sie bei -20 &°F ein; C and&nbsp; Bleiben Sie bei 4 & Grad; C für maximal 7 Tage&nbsp;</td></tr><tr><td>Anti-CD104-Rattenmonoklonaler 439-9B-Antikörper</td><td>BD Biosciences</td><td>#555719</td><td>NA</td></tr><tr><td>Antikollagen-Typ-IV-Polyklonaler Antikörper</td><td>MerckMillipore</td><td>#Ab769</td><td>NA</td></tr><tr><td>Anti-Cytokeratin 10 polyklonaler Kaninchenantikörper</td><td>Biolegende</td><td>#905401</td><td>NA</td></tr><tr><td>Anti-lorricrin-Kaninchen-Polyklonaler Antikörper</td><td>Biolegende</td><td>#905101</td><td>NA</td></tr><tr><td>anti-PMEL-Maus-monoklonaler Antikörper</td><td>Novus Biologicals</td><td>#NBP2-29407&nbsp;</td><td>NA</td></tr><tr><td>B-27-Präparat ohne Vitamin A</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>#12587010</td><td>Aliquot, Laden Sie bei -20 &°F ein; C&nbsp;</td></tr><tr><td>Zellkultur-Einsätze</td><td>Greiner Bio-one</td><td>#665641</td><td>12-Well, Porengröße 0,4 & Mikro; m; transparent (48 Einsätze pro Box) ; https://shop.gbo.com/en/row/products/bioscience/3d-cell-culture/thincert/3d-thincert-cell-culture-inserts/665641.html</td></tr><tr><td>Kollagen Typ I</td><td>Corning</td><td>#354249</td><td>Lagerlösung auf 4 °F halten; C</td></tr><tr><td>Einwegskalpell steril 0507 Nr. 21</td><td>Swann Morton</td><td>#0507</td><td>NA</td></tr><tr><td>Dulbecco' s Phosphatgepufferte Kochsalzlösung (DPBS)</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>#14190094</td><td>NA</td></tr><tr><td>Essential 6 (E6) Medium</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>#A1516401</td><td>bezeichnet als hiPSC Minimalmedium (hiMinM)&nbsp; im Text.</td></tr><tr><td>Fasudil</td><td>LC Labs</td><td>#F-4660</td><td>Aliquot eine 1000-fache Lagerlösung und lagere bei -20 °C. Nach dem Auftauen bei 4 & Grad; C für maximal 14 Tage&nbsp;</td></tr><tr><td>Sanfte Zelldissoziation&nbsp; Reagenz</td><td>Stemcell-Technologien</td><td>#100-0485</td><td>NA</td></tr><tr><td>GlutaMAX-Ergänzungsmittel</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>#35050038</td><td>NA</td></tr><tr><td>Menschliche FGF-2 Basis-Prenium-Qualität</td><td>Miltenyi Biotec</td><td>#130-093-842</td><td>Aliquot, lagern Sie bei -80 °C; C and&nbsp; Bleiben Sie bei 4 & Grad; C für maximal 7 Tage&nbsp;</td></tr><tr><td>LDN 193189 Dihydrochlorid</td><td>Tocris</td><td>#6053</td><td>Aliquot, lichtempfindlich, bei -20 °C gelagert; C&nbsp;</td></tr><tr><td>Matrigel Growth Factor reduzierte Basementmembranmatrix</td><td>Corning</td><td>#354230</td><td>Aliquot, Laden Sie bei -20 &°F ein; C and&nbsp; Bleiben Sie bei 4 & Grad; C für maximal 7 Tage&nbsp;</td></tr><tr><td>2-Mercaptoethanol</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>#21985023</td><td>Gefährliche Substanzen, giftige, korrosive, reizende, Gesundheits- und Umweltgefahr.</td></tr><tr><td>NaOH</td><td>Merck</td><td>#567530-250MG</td><td>Gefährliche Substanz, ätzend und reizend. Bereite spontan eine Lösung vor.</td></tr><tr><td>Neurobasalmedium</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>#21103049</td><td>bezeichnet als Neuralbasalmedium&nbsp; im Text.</td></tr><tr><td>Normocin 50 mg/ml</td><td>Invivogen</td><td>#ant-nr-1</td><td>Im Test wird es als antibiotisch-antimykotisches Präparat bezeichnet. Aliquot, Laden Sie bei -20 &°F ein; C and&nbsp; Bleiben Sie bei 4 & Grad; C für maximal 14 Tage&nbsp;</td></tr><tr><td>Nunclon Sphera 96-WellU-Bottom Mikroplatte</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>#174929</td><td>NA</td></tr><tr><td>Nunclon Sphera 174930 24-Brunnen-Multidish</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>#174930</td><td>NA</td></tr><tr><td>N2-Ergänzung</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>#17502048</td><td>Aliquot, Laden Sie bei -20 & Grad ein; C&nbsp;</td></tr><tr><td>Orbitalshaker</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>#88881102</td><td>NA</td></tr><tr><td>Penicillin-Streptomycin</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>#15070063</td><td>NA</td></tr><tr><td>Rekombinantes humanes BMP4-Protein</td><td>R& D-Systeme</td><td>#314-BP-010</td><td>Aliquot, lagern Sie bei -80 °C; C and&nbsp; Bleiben Sie bei 4 & Grad; C für maximal 7 Tage&nbsp;</td></tr><tr><td>StemFlex (SF) Medium</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>#A3349401</td><td>bezeichnet als hiPSC Maintenance Medium (hiMM)&nbsp; im Text.</td></tr><tr><td>SteriMax smart&nbsp;- Infrarot-Loop-Sterilisator</td><td>WLD-TEC</td><td>#4.002.000&nbsp;</td><td>Wahlfrei</td></tr><tr><td>Pinzette</td><td>Merck</td><td>#T4537-1EA</td><td>Stil 5; Feinnadelscharfer, antimagnetischer Edelstahl</td></tr><tr><td>Vitronektin</td><td>Stemcell-Technologien</td><td>#07180</td><td>NA</td></tr></tbody></table>

erzeugung von humanen induzierten pluripotenten stammzell-abgeleiteten planaren haartragenden hautorganoiden unter verwendung eines luft-flüssig-grenzflächenkultursystems

Generation of Human Induced Pluripotent Stem Cell-derived Planar Hair-bearing Skin Organoids Using an Air-Liquid Interface Culture System

Die Optimierung und die Checkpoints für die Erzeugung zystischer SOs wurden ausführlich beschrieben14. Die hier vorgestellte Methode konzentriert sich daher auf die wichtigsten Kontrollpunkte, die während der Entwicklung zystischer Organoide zu bewerten sind (Abbildung 2A), die Auswahl derjenigen, die für den Übergang in planare SOs geeignet sind (Abbildung 2B), und die Kriterien, die zur Bewertung der Qualität der resultierenden planaren SOs verwendet werden (Abbildung 1B-D und Abbildung 4).
Der erste wichtige Schritt bei der Entwicklung zystischer SOs ist die Bildung eines einzelnen, dichten zellulären Aggregats, das die Mehrheit der Zellen umfasst, die an Tag 0 in der Vertiefung vorhanden sind (Abbildung 2A). Dies wird durch eine sorgfältige und schnelle Handhabung der hiPS-Zellen in Kombination mit einer effizienten Zentrifugation erreicht, was zu einer homogenen Verteilung der Zellen in der Mitte der Vertiefung führt (Abbildung 2A, Tag -2). Die richtige Induktion des Oberflächenektoderms führt zur Bildung eines dünnen, klaren Epithels auf der äußersten Schicht des Aggregats bis zum Tag 3 (Abbildung 2A), das sich anschließend nach der Induktion mesenchymaler Zellen bis zum 8. Tag zu transparenten zystischen Aggregaten entwickelt, die einen dunklen Kern aus mesenchymalen Zellen enthalten. Zwischen dem 12. und 20. Tag wird die Epithelzyste von einer dünnen Schicht mesenchymaler Zellen bedeckt, die sich an einem Pol der Zyste ansammeln (Abbildung 2A, Tag 12). Die erfolgreiche Co-Induktion von Epithel- und Mesenchymzellen führt schließlich zu einem geschichteten Epithel, das die Bildung von Haarplakoden und -stiften ermöglicht, die zwischen dem 50. und 80. Tag sichtbar werden (Abbildung 2A,B). Durch die Auswahl geeigneter SOs auf der Grundlage dieser Entwicklungs-Checkpoints kann die morphologische und Größenvariabilität zum Zeitpunkt des Übergangs zu planaren SOs minimiert werden.
Das Vorhandensein von Haarplakoden oder -pegs ist das primäre Einschlusskriterium für die Selektion zystischer SOs für die Weiterentwicklung zu planaren SOs. Das Fehlen sichtbarer Plakoden resultiert in der Regel aus einem Defekt in der epidermalen Schichtung, die dann extrem dünn erscheint (Abbildung 2B, Tag 50, mittleres Bild). Für die Abflachung werden nur große Zysten (mindestens 5 mm Durchmesser) mit Nebenprodukten, die an einem Pol konzentriert sind, und insgesamt minimalen Nebenprodukten verwendet, während solche mit nicht polarisierten Nebenprodukten ausgeschlossen werden (Abbildung 2B).
Sobald sie sich in ihrer planaren Konfiguration befinden, beruht die primäre Qualitätsprüfung von SOs auf der makroskopischen Überwachung des HF-Wachstums unter einem Stereomikroskop. HFs verlängern sich im Laufe der 27 Tage der ALI-Kultur fortschreitend, wobei die Talgdrüsen um den 14. Tag herum sichtbar werden und die Pigmentierung im Laufe der Zeit allmählich zunimmt (Abbildung 1B, C). Aufgrund der räumlichen Einschränkungen, die durch die Insertionsmembran auferlegt werden, die direkt unter dem dünnen Kollagengel liegt, können nur HFs, die sich an der Peripherie des planaren SO befinden, vollständig wachsen, und zwar in einer Orientierung parallel zum Insert (Abbildung 1C). Bemerkenswert ist, dass der Haarschaft selten über die Hautoberfläche hinausragt. Um die Qualität der entwickelten planaren SOs weiter zu beurteilen, können sie in Paraffin oder OCT eingebettet, geschnitten und gefärbt werden, um ihre Zusammensetzung und Morphologie zu untersuchen. Die H&amp;E-Färbung zeigt, dass ihre Struktur der menschlichen Haut sehr ähnlich ist (Abbildung 4A), mit einem vollständig geschichteten Epithel und einer Dermis, die durch eine Basalmembran getrennt sind. Die Immunfluoreszenzfärbung mit spezifischen Markern für die verschiedenen Epidermisschichten, Talgdrüsen und Melanozyten bestätigt die menschliche hautähnliche Gewebearchitektur der planaren SOs (Abbildung 1D und Abbildung 4B).
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/69088/69088fig1.jpg"> 
Abbildung 1: Arbeitsablauf zur Generierung von planaren SOs, die HFs aus hiPSCs enthalten, unter Verwendung eines ALI-Kultursystems. Es werden schematische Darstellungen und repräsentative Bilder der wichtigsten Schritte gezeigt. (A) Bildung von zystischen SOs, im Wesentlichen wie zuvor beschrieben10, bis sich um Tag 80 herum sichtbare Haarplakoden/-stifte bilden. (B) Zystische SOs werden mit der Epidermisseite nach oben auf einem mit Kollagen beschichteten Zellkultureinsatz vom Typ I eingeschnitten und abgeflacht. ALI-Kulturen werden 21 Tage lang unter befeuchteten Bedingungen aufbewahrt, gefolgt von 6 Tagen unter trockenen Bedingungen. (C) Ansicht einer in (B) gezeigten Region mit hoher Vergrößerung, die das Wachstum der Haarfollikel, die Entwicklung der talgdrüsenartigen Struktur (Pfeilspitzen) und die fortschreitende Pigmentierung im Laufe der Zeit zeigt. (D) Konfokale Bilder von planaren SO-Schnitten an Tag 27 nach der Abflachung, markiert mit Anti-Typ-IV-Kollagen-Antikörpern zusammen mit entweder Nilrot, das talgdrüsenähnliche Strukturen markiert, oder Anti-PMEL-Antikörper, der Melanozyten färbt. Die Zellkerne werden mit DAPI gegengefärbt. Maßstabsleisten: 200 μm (A); 500 μm (B,C); 50 μm (D). Abkürzungen: SOs = Hautorganoide; HFs = Haarfollikel; hiPSCs = humane induzierte pluripotente Stammzellen; ALI = Luft-Flüssigkeits-Grenzfläche; Col IV = Kollagen Typ IV; PMEL = Prämelanasomenprotein; DAPI = 4',6-diamidino-2-phenylindol. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/69088/69088fig1large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/69088/69088fig2.jpg"> 
Abbildung 2: Repräsentative Bilder der Morphologie von Zellaggregaten bei Schlüsselschritten während der SO-Produktion. (A) Repräsentative Bilder von zystischen SOs mit geeigneten (linkes Bild) und unzureichenden (mittleres und rechtes Bild) Morphologien in verschiedenen Stadien. An Tag -2 sollten die Zellaggregate eine gleichmäßige Verteilung aufweisen (linkes Bild), während eine unsachgemäße Handhabung der Platte nach der Zentrifugation die Zellverteilung stören kann (rechtes Bild). An Tag 0 erscheinen wohlgeformte Aggregate als kompakte, dichte zelluläre Cluster (linkes Bild), während eine geringe Zellviabilität zu einem weit verbreiteten Zelltod und Verlust der kompakten 3D-Strukturen führt (rechtes Bild). An Tag 3 wird eine deutliche äußere Epithelschicht sichtbar (linkes Bild), deren Fehlen darauf hindeuten könnte, dass die BMP4-Konzentration optimiert werden muss (rechtes Bild). An Tag 12 akkumulieren sich mesenchymale Zellen an einem Pol und wandern, um die Epithelzyste zu umhüllen (linkes Bild), während eine übermäßige epitheliale (mittleres Feld) oder mesenchymale (rechtes Bild) Differenzierung die korrekte epitheliale Stratifizierung behindert. An Tag 50 zeigen die SOs eine bipolare Morphologie mit zystischer Haut auf der einen Seite und Nebenprodukten, hauptsächlich Knorpel, auf der anderen Seite (linkes Bild). Eine übermäßige epitheliale (mittleres Feld) oder mesenchymale (rechtes Bild) Differenzierung behindert die richtige Hautentwicklung. (B) Repräsentative Bilder von zystischen SOs mit sichtbaren Haarklammern um den 80. Tag. Beachten Sie den variablen Anteil von Nebenprodukten (links neben der gestrichelten Kurve) im Verhältnis zur Haut. Die drei Panels ganz links erlauben die Erzeugung von 2-4 planaren SOs, während das Panel ganz rechts ein SO von unzureichender Qualität für die Abflachung zeigt. Maßstabsleisten: 500 μm für Tag -2, Tag 50 und Tag 80; 200 μm für Tag 0, Tag 3 und Tag 12. Abkürzung: SO = Hautorganoid. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/69088/69088fig2large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/69088/69088fig3.jpg"> 
Abbildung 3: Schematische Darstellung der technischen Schritte zur Herstellung planarer SOs. Führen Sie die Abflachung von zystischen SOs unter einem Stereomikroskop in einer LAF-Haube durch. (A) Der Pol, an dem sich Nebenprodukte aus der zystischen SO ansammeln, wird mit einem sterilen Skalpell herausgeschnitten. (B) Trimmen Sie die oberen und unteren Extremitäten des SO, um die Gewebeentfaltung zu erleichtern. (C) Schneiden Sie das planare Gewebe in 2-4 Stücke. Übertragen und glätten Sie jedes Stück mit der epidermalen Seite nach oben mit einer sterilen Pinzette auf eine kollagenbeschichtete Einlage. (D) Setzen Sie den Kultureinsatz mit dem abgeflachten Gewebe in eine Standard-12-Well-Platte mit 600 μl Medium ein. (E) Die Platte wird bei 37 °C mit 5 % CO2 inkubiert. (F) Schematische Queransicht des in (B) dargestellten Hautorganoids. (G) Schematische Querschnittsansicht des in (C) dargestellten Hautorganoids. (H) Bild einer planaren SO, die auf ein Typ-I-Kollagengel aufgebracht wurde, das auf einen Zellkultureinsatz gegossen wurde, der in einer 12-Well-Platte mit 600 μl Medium positioniert war. Abkürzungen: SO = Hautorganoid; LAF = laminare Luftströmung. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/69088/69088fig3large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/69088/69088fig4.jpg"> 
Abbildung 4: Charakterisierung von hiPSC-abgeleiteten planaren SOs. (A) Repräsentative Hellfeldbilder von H&amp;E-gefärbtem planarem SO an den Tagen 1 und 27 nach der Abflachung. Am 27. Tag zeigen die planaren SOs eine Hautreifung mit einer pluristratifizierten Epidermis und HFs, die talgdrüsenartige Strukturen (Pfeilspitzen) enthalten. (B) Konfokale Bilder von planaren SO-Schnitten, die mit Anti-β4-Integrin und entweder Anti-Keratin 10- oder Anti-Loricrin-Antikörpern gefärbt wurden, zeigen eine frühe suprabasale Differenzierung (KRT10+ -Zellen) an Tag 1 und eine späte Differenzierung (LOR+ -Schicht) an Tag 27. Die Zellkerne werden mit DAPI gegengefärbt. Maßstabsleisten: 50 μm (A); 100 μm (B). Abkürzungen: SO = Hautorganoid; hiPSC = humane induzierte pluripotente Stammzelle; H&amp;E = Hämatoxylin und Eosin; β4 = B4 Integrin; KRT10 = Keratin 10; LOR = Loricrin; DAPI = 4',6-diamidino-2-phenylindol. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/69088/69088fig4large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.</a>

Erzeugung von humanen induzierten pluripotenten Stammzell-abgeleiteten planaren haartragenden Hautorganoiden unter Verwendung eines Luft-Flüssig-Grenzflächenkultursystems

Human induced pluripotent stem cell (hiPSC)-derived skin organoids (SOs) containing hair follicles provide a sophisticated in vitro model for ...

generation-human-induced-pluripotent-stem-cell-derived-planar-hair

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Biology

Biologie

Dieses Video beschreibt das detaillierte Protokoll zur Erstellung von in vitro 3D-Organotyp-Hautrekonstruktionen zur Untersuchung des Melanomverlaufs. Dieses Hautmodell ahmt sowohl die Architektur als auch die multizelluläre Komplexität von Organen in vivo nach.

Generierung organotypischer Vollhautrekonstruktionen: Ein Verfahren zur Erstellung eines 3D-Hautmodells anhand menschlicher Hautproben

Dieses Video zeigt einen Assay zur Erzeugung von zerebralen Organoiden aus induzierten pluripotenten Stammzellen (iPSCs). Humane iPSCs werden dazu angeregt, Embryoidkörper (EBs) zu bilden. Die EBs werden unter Verwendung eines Induktionsmediums über einem Polymergerüst kultiviert, wodurch die Differenzierung in neurale Stammzellen, Vorläuferzellen und unreife Neuronen gefördert wird. Schließlich werden die EBs in eine Matrix eingebettet und in ein Erhaltungsmedium für die Bildung von zerebralen...

Generierung von induzierten pluripotenten Stammzell-abgeleiteten zerebralen Organoiden

Dieses Manuskript bietet ein Schritt-für-Schritt-Verfahren für die Gewinnung und Erhaltung menschlicher Keratinozyten aus gezupftem Haar und die anschließende Erzeugung von integrationsfreien humanen induzierten pluripotenten Stammzellen (hiPSCs) durch episomale Vektoren.

Generation der Integration freie Menschen induzierten pluripotenten Stammzellen Mit Haarstamm Keratinozyten

Wir schlagen eine Protokoll, die zeigt, wie man differenzieren induzierten pluripotenten Stammzellen abgeleitet Keratinozyten und Fibroblasten und generieren eine organoide 3D Haut mit diesen Keratinozyten und Fibroblasten. Dieses Protokoll enthält einen zusätzlichen Schritt einem humanisierten Mäuse-Modell zu erzeugen. Die hier vorgestellten Technik verbessert die dermatologische Forschung.

Generation von 3D Haut organoide aus Cord Blood-abgeleitete induzierte pluripotente Stammzellen

Dieses Protokoll ermöglicht die Differenzierung menschlicher pluripotenter Zellen in Darmorganoide. Das Protokoll ahmt die normale menschliche Entwicklung nach, indem es Zellen in eine Population von definitivem Endoderm, Hinterdarm-Endoderm und dann Darmepithel differenziert. Dadurch eignet sich das Protokoll sowohl für die Untersuchung der Darmentwicklung als auch für Anwendungen zur Modellierung von Krankheiten.

Generierung von hiPSC-abgeleiteten Darmorganoiden für Entwicklungs- und Krankheitsmodellierungsanwendungen

Hier beschreiben wir ein Protokoll zur Erzeugung von Hirnorganoiden aus humanen induzierten pluripotenten Stammzellen (iPS-Zellen). Um Gehirnorganoide in großen Mengen und von hoher Qualität zu erhalten, verwenden wir hausgemachte Mini-Bioreaktoren.

Gehirnorganoid-Erzeugung aus induzierten pluripotenten Stammzellen in hausgemachten Mini-Bioreaktoren

Das vorliegende Protokoll beschreibt humane induzierte pluripotente Stammzell-abgeleitete alveoläre Epithel-ähnliche Zellen (iAT2s) vom Typ 2. Diese Zellen können als selbsterneuernde Kugeln in 3D-Kultur kultiviert oder an die Luft-Flüssigkeits-Interface-Kultur (ALI) angepasst werden.

Erzeugung von 3D-Kugeln und 2D-Luft-Flüssig-Grenzflächenkulturen von humanen induzierten pluripotenten Stammzell-abgeleiteten alveolären Epithelzellen vom Typ 2

Jüngste Fortschritte bei humaninduzierten pluripotenten Stammzelldifferenzierungsprotokollen ermöglichen die schrittweise Ableitung organspezifischer Zelltypen. Hier stellen wir detaillierte Schritte zur Erhaltung und Expansion von iPSC-abgeleiteten Atemwegsbasalzellen und deren Differenzierung zu einem mukoziliären Epithel in Luft-Flüssigkeits-Grenzflächenkulturen zur Verfügung.

Erzeugung von Atemwegs-Epithelzell-Luft-Flüssig-Grenzflächenkulturen aus humanen pluripotenten Stammzellen

Dieses Protokoll beschreibt die Erzeugung von selbstorganisierenden Blutgefäßen aus humanen pluripotenten und induzierten pluripotenten Stammzellen. Diese Blutgefäßnetzwerke weisen ein ausgedehntes und verbundenes Endothelnetzwerk auf, das von Perizyten, Aktin der glatten Muskulatur und einer durchgehenden Basalmembran umgeben ist.

Erzeugung menschlicher Blutgefäß-Organoide aus pluripotenten Stammzellen

Dieses Protokoll stellt ein Verfahren zur Erzeugung von Gefäßorganoiden unter Verwendung menschlicher pluripotenter Stammzellen vor.

Generierung von Gefäßorganoiden aus humaninduzierten pluripotenten Stammzellen

Erfahren Sie die Erzeugung von Hautorganoiden mit Haarfollikeln aus humanen induzierten pluripotenten Stammzellen mithilfe eines Luft-Flüssig-Grenzflächenkultursystems. Diese Methode ermöglicht die Untersuchung von Xeroderma pigmentosum.

Erzeugung von humanen induzierten pluripotenten Stammzell-abgeleiteten planaren haartragenden Hautorganoiden unter Verwendung eines Luft-Flüssig-Grenzflächenkultursystems (Video) | JoVE Journal

Erzeugung von humanen induzierten pluripotenten Stammzell-abgeleiteten planaren haartragenden Hautorganoiden unter Verwendung eines Luft-Flüssig-Grenzflächenkultursystems

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