Name: Radiochemische Bewertung der Aktivität von Glykogensynthase-Enzymen in tierischem Gewebe (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-10-24T14:50:00.000+00:00
Duration: 2 min 30 s
Description: Lernen Sie die radiochemische Bewertung der Glykogensynthase-Aktivität in murinem Skelettmuskel mittels nuklearer Szintillationsdetektion. Diese Methode ermöglicht direkte, hochsensitive Messungen für Stoffwechselforschung.

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<li>Gomes, F. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glycogen+storage+and+muscle+glucose+transporters+%28GLUT-4%29+of+mice+selectively+bred+for+high+voluntary+wheel+running%5BTitle%5D)+AND+%22J+Exp+Biol%22%5BJournal%5D)">Glycogen storage and muscle glucose transporters (GLUT-4) of mice selectively bred for high voluntary wheel running.</a> J Exp Biol. 212 (Pt 2), 238-248 (2009).</li>
<li>Greenberg, C. C., Jurczak, M. J., Danos, A. M., Brady, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glycogen+branches+out%3A+new+perspectives+on+the+role+of+glycogen+metabolism+in+the+integration+of+metabolic+pathways%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Endocrinol+Metab%22%5BJournal%5D)">Glycogen branches out: new perspectives on the role of glycogen metabolism in the integration of metabolic pathways.</a> Am J Physiol Endocrinol Metab. 291 (1), E1-E8 (2006).</li>
<li>Bradford, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+rapid+and+sensitive+method+for+the+quantitation+of+microgram+quantities+of+protein+utilizing+the+principle+of+protein-dye+binding%5BTitle%5D)+AND+%22Anal+Biochem%22%5BJournal%5D)">A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding.</a> Anal Biochem. 72, 248-254 (1976).</li>
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</ol>

<table><tbody><tr><td>[14C] Uridin-5-Diphosphoglukose</td><td>Amerikanische radiolabelte Chemikalien</td><td>ARC 0154</td><td></td></tr><tr><td>31 ETCHR-Chromatographiepapier</td><td>Whatman</td><td>3031 915</td><td></td></tr><tr><td>Benzamidinhydrochloridhydrat</td><td>Sigma</td><td>B6506</td><td></td></tr><tr><td>Beta-Mercapptoethanol</td><td>Sigma</td><td>M3148</td><td></td></tr><tr><td>Trockenbad</td><td>Torey Pines Scientific</td><td>SC25</td><td></td></tr><tr><td>Ethanol (200 Proof)</td><td>PharmcoAaper</td><td>111000200</td><td></td></tr><tr><td>Ethylenglykol-Tetraessigsäure (EGTA)</td><td>Sigma</td><td>E4378</td><td></td></tr><tr><td>Ethylendiamintetraessigsäure (EDTA)</td><td>Sigma</td><td>E5134</td><td></td></tr><tr><td>Glukose-6-phosphat-Natriumsalz</td><td>Sigma</td><td>G7879</td><td></td></tr><tr><td>Glykogen aus Kaninchenleber (Typ III)</td><td>Sigma</td><td>G8876</td><td></td></tr><tr><td>Mikroplatten, flacher Boden, 96-Brunnen</td><td>Greiner</td><td>655101</td><td></td></tr><tr><td>Mikroplatten-, PCR-, 96-Brunnen</td><td>DOT Wissenschaftlich</td><td>951-PCR</td><td></td></tr><tr><td>Mehrzweck-Szintillationszähler</td><td>Beckman Coulter</td><td>LS 6500</td><td></td></tr><tr><td>Kaliumfluoriddihydrat</td><td>Sigma</td><td>221872</td><td></td></tr><tr><td>Proteaseinhibitor-Cocktail</td><td>GoldBio</td><td>GB-108-2</td><td></td></tr><tr><td>Scintillationscocktail</td><td>Reasearch Products International</td><td>111195</td><td></td></tr><tr><td>Szintillationsphiolen</td><td>Reasearch Products International</td><td>125509</td><td></td></tr><tr><td>Natriumfluorid</td><td>Sigma</td><td>S7920</td><td></td></tr><tr><td>Gewebereißer</td><td>Biospec-Produkte</td><td>Modell 398</td><td></td></tr><tr><td>Tosyllysinchloromethylketon (TLCK)</td><td>Sigma</td><td>T7254</td><td></td></tr><tr><td>Trizma-Basis (99,9 %)</td><td>Sigma</td><td>T1503</td><td></td></tr><tr><td>Trizmahydrochlorid</td><td>Sigma</td><td>T3253</td><td></td></tr><tr><td>Uridin-5-Diphospo-Glukose</td><td>Sigma</td><td>U-4625</td><td></td></tr></tbody></table>

radiochemische bewertung der aktivität von glykogensynthase-enzymen in tierischem gewebe

Radiochemical Assessment of Glycogen Synthase Enzyme Activity in Animal Tissue

Radiochemische Bewertung der Aktivität von Glykogensynthase-Enzymen in tierischem Gewebe

Glycogen is an important metabolite to many eukaryotic cells, integral to energy storage and quick energy release. The building of the molecule is ...

radiochemical-assessment-glycogen-synthase-enzyme-activity-animal

Research

Forschung

JoVE Journal

Biochemistry

Biochemie

Dieses Video beschreibt einen spektrophotometrischen Assay zur Abschätzung der Glykogensynthase-Aktivität. Die Methode beruht auf der Verringerung der Absorption von NADH mit der Zeit und zeigt die Aktivität der Glykogensynthase an.

Spektrophotometrischer Assay zur Bestimmung der Glykogensynthase-Aktivität

In diesem Video beschreiben wir einen qualitativen spektrophotometrischen Assay, um das Ausmaß der Verzweigung in einer Glykogenprobe mit einer nicht charakterisierten Struktur zu bestimmen. Der Vergleich der Absorptionsmaxima der uncharakterisierten Probe mit denen von Polysacchariden mit bekannten verzweigten Strukturen deutet auf das Vorhandensein von Verzweigungen in der nicht charakterisierten Probe hin.

Glykogenverzweigungsassay zur Messung des Grades der Glykogenverzweigung

Wir beschreiben hier eine genaue, reproduzierbare und bequem biochemische Methode zur Titration von Glykogen in vitro. Diese Technik nutzt die Abcam Glykogen-Assay-Kit und ist auf aufeinander folgende Hydrolyse von Glykogen durch Fluoreszenz Glukose und Glukose-Titration.

Biochemische Titration von Glykogen<em&gt; In-vitro-</em

Die periodische Säure-Schiff-Färbung ist eine Technik, die den Polysaccharidgehalt von Geweben sichtbar macht. Dieser Artikel zeigt das periodische Säure-Schiff-Färbeprotokoll, das für die Anwendung auf mononukleären Zellen des peripheren Blutes angepasst ist, die aus menschlichem venösem Blut gereinigt wurden. Solche Proben werden für Lymphozyten und andere weiße Blutkörperchen des Immunsystems angereichert.

Erkennen von Glykogen in peripheren mononukleären Blutzellen mit Perjodsäure-Schiff-Färbung

Hier stellen wir einen zuverlässigen und einfachen Assay vor, um den Glykogengehalt in Cyanobakterienzellen zu messen. Das Verfahren beinhaltet die Ausfällung, die selektierbare Depolymerisation und den Nachweis von Glukoseresten. Diese Methode eignet sich sowohl für Wildtyp- als auch für gentechnisch veränderte Stämme und kann das metabolische Engineering von Cyanobakterien erleichtern.

Bestimmung des Glykogengehalts in Cyanobakterien

Eine intakte Regulierung der Muskelglukoseaufnahme ist wichtig für die Aufrechterhaltung der Ganzkörperglukose-Homöostase. Dieses Protokoll stellt die Bewertung der insulin- und kontraktionsstimulierten Glukoseaufnahme in isolierten und inkubierten reifen Skelettmuskeln dar, wenn die Auswirkungen verschiedener physiologischer Interventionen auf den Glukosestoffwechsel des ganzen Körpers beschrieben werden.

Messung der insulin- und kontraktionsstimulierten Glukoseaufnahme in isolierten und inkubierten reifen Skelettmuskeln von Mäusen

Techniken zur Messung der Aktivität von Schlüsselenzymen des Glykogenstoffwechsels werden vorgestellt, wobei ein einfaches Spektralphotometer verwendet wird, das im sichtbaren Bereich arbeitet.

Spektrophotometrische Methoden zur Untersuchung des eukaryotischen Glykogenstoffwechsels

Für die Extraktion von Leberglykogen wurde mittels Saccharosedichtegradientenzentrifugation eine optimale Saccharosekonzentration bestimmt. Die Zugabe eines 10-minütigen Siedeschritts zur Hemmung von Glykogen-abbauenden Enzymen erwies sich als vorteilhaft.

Die Extraktion von Leberglykogenmolekülen zur Glykogenstrukturbestimmung

Ein modifiziertes Postfixationsverfahren erhöht den Kontrast von Glykogenpartikeln im Gewebe. Dieses Papier bietet ein Schritt-für-Schritt-Protokoll, das beschreibt, wie man mit dem Gewebe umgeht, die Bildgebung durchführt und sterelorische Methoden verwendet, um unvoreingenommene und quantitative Daten über die fasertypspezifische subzelluläre Glykogenverteilung in der Skelettmuskulatur zu erhalten.

Quantifizierung der subzellulären Glykogenverteilung in Skelettmuskelfasern mittels Transmissionselektronenmikroskopie

Da Mitochondrien nur ein kleiner Prozentsatz der Pflanzenzelle sind, benötigen sie für eine Reihe von Studien gereinigt werden. Mitochondrien können aus einer Vielzahl von Pflanzenorganen durch Homogenisierung, gefolgt von Differential und Dichte Gradienten Zentrifugation zu einem hochgereinigten mitochondriale Bruchteil isoliert werden.

Isolation und Atemwege Messungen der Mitochondrien von Arabidopsis thaliana

Lernen Sie die radiochemische Bewertung der Glykogensynthase-Aktivität in murinem Skelettmuskel mittels nuklearer Szintillationsdetektion. Diese Methode ermöglicht direkte, hochsensitive Messungen für Stoffwechselforschung.

Radiochemische Bewertung der Aktivität von Glykogensynthase-Enzymen in tierischem Gewebe

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