Name: Beurteilung der mitochondrialen Spaltungs-/Fusionsdynamik in proximalen tubulären Zellen der Niere (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-11-14T14:40:00.000+00:00
Duration: 6 min 14 s
Description: Erfahren Sie, wie Sie mitochondriale Spaltungs- und Fusionsdynamik in proximalen tubulären Nierenzellen mit konfokaler Mikroskopie und Dendra2-Fluoreszenz analysieren. Diese Methode ermöglicht die präzise Verfolgung transplantierter Mitochondrien.

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<ol><li>Liesa, M., Palacin, M., Zorzano, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mitochondrial+dynamics+in+mammalian+health+and+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Rev%22%5BJournal%5D)">Mitochondrial dynamics in mammalian health and disease.</a> Physiol Rev. 89 (3), 799-845 (2009).</li>
<li>Chen, Z., Berquez, M., Luciani, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mitochondria%2C+mitophagy%2C+and+metabolic+disease%3A+towards+assembling+the+puzzle%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Stress%22%5BJournal%5D)">Mitochondria, mitophagy, and metabolic disease: towards assembling the puzzle.</a> Cell Stress. 4 (6), 147-150 (2020).</li>
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<li>Jiao, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mitocytosis%2C+a+migrasome-mediated+mitochondrial+quality-control+process%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Mitocytosis, a migrasome-mediated mitochondrial quality-control process.</a> Cell. 184 (11), 2896-2910.e13 (2021).</li>
<li>Kraus, F., Roy, K., Pucadyil, T. J., Ryan, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Function+and+regulation+of+the+divisome+for+mitochondrial+fission%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Function and regulation of the divisome for mitochondrial fission.</a> Nature. 590 (7844), 57-66 (2021).</li>
<li>He, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((GTPBP8+modulates+mitochondrial+fission+through+a+Drp1-dependent+process%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Sci%22%5BJournal%5D)">GTPBP8 modulates mitochondrial fission through a Drp1-dependent process.</a> J Cell Sci. 137 (8), jcs261612(2024).</li>
<li>San-Millán, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+key+role+of+mitochondrial+function+in+health+and+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Antioxidants%22%5BJournal%5D)">The key role of mitochondrial function in health and disease.</a> Antioxidants. 12 (4), 782(2023).</li>
<li>Ponte, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Drp1-mediated+mitochondrial+fission+regulates+calcium+and+F-actin+dynamics+during+wound+healing%5BTitle%5D)+AND+%22Biol+Open%22%5BJournal%5D)">Drp1-mediated mitochondrial fission regulates calcium and F-actin dynamics during wound healing.</a> Biol Open. 9 (5), bio048629(2020).</li>
<li>Sabouny, R., Shutt, T. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+mitochondrial+dynamics+in+mtDNA+maintenance%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Sci%22%5BJournal%5D)">The role of mitochondrial dynamics in mtDNA maintenance.</a> J Cell Sci. 134 (24), jcs258944(2021).</li>
<li>Huang, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mitochondrial+dynamics+tracking+with+two-photon+phosphorescent+terpyridyl+iridium%28III%29+complexes%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Mitochondrial dynamics tracking with two-photon phosphorescent terpyridyl iridium(III) complexes.</a> Sci Rep. 6, 20887(2016).</li>
<li>Chen, W., Zhao, H., Li, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mitochondrial+dynamics+in+health+and+disease%3A+mechanisms+and+potential+targets%5BTitle%5D)+AND+%22Signal+Transduct+Target+Ther%22%5BJournal%5D)">Mitochondrial dynamics in health and disease: mechanisms and potential targets.</a> Signal Transduct Target Ther. 8 (1), 333(2023).</li>
<li>Sabouny, R., Shutt, T. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reciprocal+regulation+of+mitochondrial+fission+and+fusion%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+Biochem+Sci%22%5BJournal%5D)">Reciprocal regulation of mitochondrial fission and fusion.</a> Trends Biochem Sci. 45 (7), 564-577 (2020).</li>
<li>Jin, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mitochondrial+adaptation+in+cancer+drug+resistance%3A+prevalence%2C+mechanisms%2C+and+management%5BTitle%5D)+AND+%22J+Hematol+Oncol%22%5BJournal%5D)">Mitochondrial adaptation in cancer drug resistance: prevalence, mechanisms, and management.</a> J Hematol Oncol. 15 (1), 97(2022).</li>
<li>Wai, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+membrane+scaffold+SLP2+anchors+a+proteolytic+hub+in+mitochondria+containing+PARL+and+the+i-AAA+protease+YME1L%5BTitle%5D)+AND+%22EMBO+Rep%22%5BJournal%5D)">The membrane scaffold SLP2 anchors a proteolytic hub in mitochondria containing PARL and the i-AAA protease YME1L.</a> EMBO Rep. 17 (12), 1844-1856 (2016).</li>
<li>Schiavon, C. R., Shadel, G. S., Manor, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impaired+mitochondrial+mobility+in+Charcot-Marie-Tooth+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Cell+Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">Impaired mitochondrial mobility in Charcot-Marie-Tooth disease.</a> Front Cell Dev Biol. 9, 624823(2021).</li>
<li>Sivakumar, A., Shanmugarajan, S., Subbiah, R., Balakrishnan, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiac+mitochondrial+PTEN-L+determines+cell+fate+between+apoptosis+and+survival+during+chronic+alcohol+consumption%5BTitle%5D)+AND+%22Apoptosis%22%5BJournal%5D)">Cardiac mitochondrial PTEN-L determines cell fate between apoptosis and survival during chronic alcohol consumption.</a> Apoptosis. 25 (7-8), 590-604 (2020).</li>
<li>Simula, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mitochondrial+metabolism+sustains+CD8%2B+T+cell+migration+for+an+efficient+infiltration+into+solid+tumors%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Mitochondrial metabolism sustains CD8+ T cell migration for an efficient infiltration into solid tumors.</a> Nat Commun. 15 (1), 2203(2024).</li>
<li>Kopek, B. G., Shtengel, G., Xu, C. S., Clayton, D. A., Hess, H. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Correlative+3D+superresolution+fluorescence+and+electron+microscopy+reveal+the+relationship+of+mitochondrial+nucleoids+to+membranes%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Correlative 3D superresolution fluorescence and electron microscopy reveal the relationship of mitochondrial nucleoids to membranes.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 109 (16), 6136-6141 (2012).</li>
<li>Whelan, D. R., Bell, T. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Image+artifacts+in+single+molecule+localization+microscopy%3A+why+optimization+of+sample+preparation+protocols+matters%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Image artifacts in single molecule localization microscopy: why optimization of sample preparation protocols matters.</a> Sci Rep. 5, 7924(2015).</li>
<li>Palmer, C. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Super-resolution+microscopy+reveals+the+arrangement+of+inner+membrane+protein+complexes+in+mammalian+mitochondria%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Sci%22%5BJournal%5D)">Super-resolution microscopy reveals the arrangement of inner membrane protein complexes in mammalian mitochondria.</a> J Cell Sci. 134 (13), jcs252197(2021).</li>
<li>Liu, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+interactome+of+intact+mitochondria+by+cross-linking+mass+spectrometry+provides+evidence+for+coexisting+respiratory+supercomplexes%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Cell+Proteomics%22%5BJournal%5D)">The interactome of intact mitochondria by cross-linking mass spectrometry provides evidence for coexisting respiratory supercomplexes.</a> Mol Cell Proteomics. 17 (2), 216-232 (2018).</li>
<li>Karbowski, M., Cleland, M. M., Roelofs, B. A. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aKarbowski%2C+M+%22Methods+Enzymol%22">Methods Enzymol</a>. , Elsevier. Netherlands. (2014).</li>
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<li>Bouchareb, R., Yu, L., Lassen, E., Daehn, I. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+of+conditionally+immortalized+mouse+glomerular+endothelial+cells+with+fluorescent+mitochondria%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Isolation of conditionally immortalized mouse glomerular endothelial cells with fluorescent mitochondria.</a> J Vis Exp. (187), e64147(2022).</li>
<li>Chu, C. H., Tseng, W. W., Hsu, C. M., Wei, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Image+analysis+of+the+mitochondrial+network+morphology+with+applications+in+cancer+research%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Phys%22%5BJournal%5D)">Image analysis of the mitochondrial network morphology with applications in cancer research.</a> Front Phys. 10, 855775(2022).</li>
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<li>Gaspar, M. L., Chang, Y. F., Jesch, S. A., Aregullin, M., Henry, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interaction+between+repressor+Opi1p+and+ER+membrane+protein+Scs2p+facilitates+transit+of+phosphatidic+acid+from+the+ER+to+mitochondria+and+is+essential+for+INO1+gene+expression+in+the+presence+of+choline%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biol+Chem%22%5BJournal%5D)">Interaction between repressor Opi1p and ER membrane protein Scs2p facilitates transit of phosphatidic acid from the ER to mitochondria and is essential for INO1 gene expression in the presence of choline.</a> J Biol Chem. 292 (45), 18713-18728 (2017).</li>
<li>Karbowski, M. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aKarbowski%2C+M+%22Adv+Exp+Med+Biol%22">Adv Exp Med Biol</a>. , Springer, US. (2010).</li>
<li>Yang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mitochondrial+dynamics+quantitatively+revealed+by+STED+nanoscopy+with+an+enhanced+squaraine+variant+probe%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Mitochondrial dynamics quantitatively revealed by STED nanoscopy with an enhanced squaraine variant probe.</a> Nat Commun. 11 (1), 3699(2020).</li>
<li>Opstad, I. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Three-dimensional+structured+illumination+microscopy+data+of+mitochondria+and+lysosomes+in+cardiomyoblasts+under+normal+and+galactose-adapted+conditions%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Data%22%5BJournal%5D)">Three-dimensional structured illumination microscopy data of mitochondria and lysosomes in cardiomyoblasts under normal and galactose-adapted conditions.</a> Sci Data. 9 (1), 98(2022).</li>
<li>Kunz, T. C., Götz, R., Gao, S., Sauer, M., Kozjak-Pavlovic, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Using+expansion+microscopy+to+visualize+and+characterize+the+morphology+of+mitochondrial+cristae%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Cell+Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">Using expansion microscopy to visualize and characterize the morphology of mitochondrial cristae.</a> Front Cell Dev Biol. 8, 617(2020).</li>
<li>Teixeira, P., Galland, R., Chevrollier, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Super-resolution+microscopies%2C+technological+breakthrough+to+decipher+mitochondrial+structure+and+dynamic%5BTitle%5D)+AND+%22Semin+Cell+Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">Super-resolution microscopies, technological breakthrough to decipher mitochondrial structure and dynamic.</a> Semin Cell Dev Biol. 159 - 160, 38-51 (2024).</li>
<li>Kirchweger, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Snapshots+of+mitochondrial+fission+imaged+by+cryo-scanning+transmission+electron+tomography%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Sci%22%5BJournal%5D)">Snapshots of mitochondrial fission imaged by cryo-scanning transmission electron tomography.</a> J Cell Sci. 138 (9), jcs263639(2025).</li>
<li>Collins, H. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mitochondrial+morphology+and+mitophagy+in+heart+diseases%3A+qualitative+and+quantitative+analyses+using+transmission+electron+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Aging%22%5BJournal%5D)">Mitochondrial morphology and mitophagy in heart diseases: qualitative and quantitative analyses using transmission electron microscopy.</a> Front Aging. 2, 670267(2021).</li>
<li>Marshall, A. G., Damo, S. M., Hinton, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Revisiting+focused+ion+beam+scanning+electron+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+Biochem+Sci%22%5BJournal%5D)">Revisiting focused ion beam scanning electron microscopy.</a> Trends Biochem Sci. 48 (6), 585-586 (2023).</li>
<li>Adebayo, M., Singh, S., Singh, A. P., Dasgupta, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mitochondrial+fusion+and+fission%3A+the+fine-tune+balance+for+cellular+homeostasis%5BTitle%5D)+AND+%22FASEB+J%22%5BJournal%5D)">Mitochondrial fusion and fission: the fine-tune balance for cellular homeostasis.</a> FASEB J. 35 (6), e21620(2021).</li>
<li>Munro, D., Baldy, C., Pamenter, M. E., Treberg, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+exceptional+longevity+of+the+naked+mole-rat+may+be+explained+by+mitochondrial+antioxidant+defenses%5BTitle%5D)+AND+%22Aging+Cell%22%5BJournal%5D)">The exceptional longevity of the naked mole-rat may be explained by mitochondrial antioxidant defenses.</a> Aging Cell. 18 (3), e12916(2019).</li>
<li>Varuzhanyan, G., Chan, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mitochondrial+dynamics+during+spermatogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Sci%22%5BJournal%5D)">Mitochondrial dynamics during spermatogenesis.</a> J Cell Sci. 133 (14), jcs235937(2020).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td><stark>Zellkultur&nbsp; </stark></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>DMEM/F12&nbsp;</td><td>Basalmedium&nbsp;</td><td>(Gibco/Katze. Nr.11320033 )&nbsp;</td><td>Proximale tubuläre Zellkultur&nbsp;</td></tr><tr><td>Fetal Bovine Serum (FBS)&nbsp;</td><td>5–10 % Supplementierung&nbsp;</td><td>(Biowest/Cat. Nr.S181B)&nbsp;</td><td>Kulturmittelanreicherung&nbsp;</td></tr><tr><td>Penicillin-Streptomycin&nbsp;</td><td>100X&nbsp;</td><td>(Gibco/Katze. Nr.15140122)&nbsp;</td><td>Antibiotikaschutz&nbsp;</td></tr><tr><td>Kollagen IV&nbsp;</td><td>Beschichtung&nbsp;</td><td>(Sigma-C5533-5M)&nbsp;</td><td>Ibidi-Plattenbeschichtung&nbsp;</td></tr><tr><td>Trypsin-EDTA&nbsp;</td><td>0,25 % Lösung&nbsp;</td><td>(Gibco/Katze. Nr.25200056)&nbsp;</td><td>Zellablösung &nbsp;</td></tr><tr><td>Phosphatgepufferte Kochsalzlösung (PBS)&nbsp;</td><td></td><td>(Gibco/Katze. Nr.10010023 )&nbsp;</td><td>Zellreinigung&nbsp;</td></tr><tr><td><stark>Behandlungen&nbsp; </stark></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Cisplatin&nbsp;</td><td>2 & Mikro; M Arbeitsschwerpunkt &nbsp;</td><td>(Selleck Chemicals/Cat. Nr.S1166)&nbsp;</td><td>Spannungseinduktion&nbsp; &nbsp;</td></tr><tr><td>Dimethylsulfoxid (DMSO)&nbsp;</td><td>Fahrzeugsteuerung&NBSP;</td><td>(Fisher Scientific/Cat. Nr.D1391)&nbsp;</td><td>Cisplatin-Lösungsmittelkontrolle&nbsp;</td></tr><tr><td>Imaging&nbsp; </stark></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Phenolrotfreies Medium&nbsp;</td><td>Live Imaging&nbsp;</td><td>(Gibco/Katze. Nr.21041025)&nbsp;</td><td>Reduzierte Hintergrundfluoreszenz&nbsp;</td></tr><tr><td>Molekularbiologie&nbsp;</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>TRIzol&reg; &nbsp;</td><td>RNA-Extraktion&nbsp;</td><td>(Gibco/Katze. Nr.15596018)&nbsp;</td><td>Totale RNA-Isolation &nbsp;</td></tr><tr><td>SYBR Green Master Mix&nbsp;</td><td>qPCR-Chemie&nbsp;</td><td>(Thermowissenschaftlich/Katzen. Nr.K0221)&nbsp;</td><td>Genexpression der Mitochondriendynamik (DNM1L, FIS1, MFN1, MFN2, OPA1)&nbsp;</td></tr><tr><td>Fluoreszierende Werkzeuge&nbsp;</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Dendra2&nbsp;</td><td>Mitochondrienmatrix-Tag&nbsp;</td><td>Jacson Laboratory(PhAMentfernt)&nbsp;</td><td>Foto-umschaltbarer Reporter (405nm-Umwandlung, 488/561nm-Bildgebung)&nbsp;</td></tr><tr><td><stark>Mikroskope&nbsp; </stark></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Konfokalmikroskop&nbsp;</td><td>Leica DMi8&nbsp;</td><td>Lebendzellbildgebung und FRAP&nbsp;</td><td>405nm/488nm/561nm Laser&nbsp;</td></tr><tr><td>Bild J&nbsp;</td><td></td><td>https://imagej.net/software/fiji/downloads&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>RGB Profiler Plugin&nbsp;</td><td></td><td>https://imagej.net/ij/plugins/rgb-profiler.html.&nbsp;</td><td>Analyse von Fusionsereignissen (Rot/Grün-Signal-Überlappung)&nbsp;</td></tr></tbody></table>

beurteilung der mitochondrialen spaltungs-/fusionsdynamik in proximalen tubulären zellen der niere

Assessment of Mitochondrial Fission/Fusion Dynamics in Kidney Proximal Tubular Cells

Beurteilung der mitochondrialen Spaltungs-/Fusionsdynamik in proximalen tubulären Zellen der Niere

Mitochondria are best recognized for their role in ATP synthesis and serve as key regulators of cellular metabolism. Mitochondrial dynamics comprehend the ...

assessment-mitochondrial-fissionfusion-dynamics-kidney-proximal

Research

Forschung

JoVE Journal

Biology

Biologie

Mitochondrien-Fusion wurde durch das Verfolgen der Äquilibrierung von photokonvertiertem Matrix-bezogenen GFP über die mitochondriale Netzes über die Zeit gemessen. Bisher konnte nur eine Zelle zu einer Stunde lange kinetische Analyse bei einer Zeit unterworfen werden. Wir präsentieren eine Methode, die misst gleichzeitig mehrere Zellen und beschleunigt so den Prozess der Datensammlung.

Der schnellere, Hohe Auflösung, MTPA-GFP-basierte Mitochondriale Fusion Assay Acquiring Kinetische Daten mehrerer Zellen parallel mit Hilfe der konfokalen Mikroskopie

Die Wirkungen der Aktivierung der Proteinkinase C (PKC) Isozyme auf die mitochondriale Atmung und Funktionen mit oxidativen Phosphorylierung und auf Lebensfähigkeit der Zellen assoziiert werden beschrieben. Der Ansatz paßt adenoviralen Technik, um selektiv überexprimieren PKC-Isozyme in primären Zellkultur und einer Vielzahl von Assays, um mitochondriale Funktionen und Energiezustand der Zelle zu bestimmen.

Beurteilung der mitochondrialen Funktionen und Zellviabilität in Renal Überexpression Protein Kinase C-Isoenzyme

Hier skizzieren wir, wie man die mitochondriale Lokalisation einer (Zellzyklus-)Kinase untersucht und wie man ihre submitochondriale Position sowie potenzielle mitochondriale Substrate/Ziele bestimmt. Die erzwungene Expression von Proteinen in die Mitochondrien stellt ein nützliches Werkzeug dar, um die funktionellen Konsequenzen der mitochondrialen Lokalisierung eines Proteins von Interesse zu untersuchen.

Experimentelle Ansätze zur Untersuchung Mitochondriale Lokalisation und Funktion eines Kernzellzyklus-Kinase, Cdk1

Dieses Protokoll bietet eine kostengünstige Möglichkeit zu isolieren und zu charakterisieren Maus primäre renale tubuläre Zellen, die anschließend südlich kultiviert werden können, um renale biologischen Funktionen ex Vivo, einschließlich der mitochondrialen Bioenergetik zu beurteilen.

Isolierung, Charakterisierung und hohem Durchsatz extrazelluläre Flux-Analyse der Maus primäre renale tubuläre Epithelzellen

In dieser Arbeit stellen wir ein Protokoll zur Analyse von Veränderungen der mitochondrialen Dichte und der longitudinalen Verteilung mittels Live-Skelettmuskel-Bildgebung unter Verwendung konfokaler Mikroskopie für das mitochondriale Netzwerkscanning vor.

Analyse der mitochondrialen Dichte und Längsverteilung in lebenden Skelettmuskelfasern von Ratten mittels konfokaler Mikroskopie

In dieser Studie beschreiben wir ein Schritt-für-Schritt-Protokoll und betonen die wichtigsten Details zur Bestimmung morphologischer Eigenschaften von Mitochondrien in lebenden Zellen, einschließlich Probenvorbereitung, Bildaufnahme und Datenanalyse. Diese Methode wird häufig verwendet, um die mitochondriale Morphologie zur Untersuchung verschiedener Erkrankungen zu untersuchen.

Bestimmung der mitochondrialen Morphologie in lebenden Zellen mittels konfokaler Mikroskopie

Hier beschreiben wir den mitochondrial event localizer (MEL), ein ImageJ-Plugin, das bei der Quantifizierung der 3-dimensionalen Veränderungen der mitochondrialen Spaltung und Fusionsaktivität im Laufe der Zeit nützlich ist. Wir beschreiben auch eine Bildverarbeitungspipeline, die für die Bereinigung von Schliffbildern vor der Analyse in ImageJ nützlich ist.

Verständnis der Veränderungen in der mitochondrialen Morphologie durch dynamische und dreidimensionale Fluoreszenzmikroskopische Aufnahmen

Hier beschreiben wir ein in-vitro-Protokoll zur Modellierung von Hypoxie/Reoxygenierungsschäden in den hochmetabolischen proximalen tubulären Epithelzellen. Dieses Modell ist darauf ausgelegt, durch metabolischen Stress verursachten Schaden zu induzieren, was durch die Expression proximaler Tubulusschadenmarker und die Beurteilung der mitochondrialen Atemfunktion gemessen werden kann.

Modellierung von Hypoxie/Reoxygenationsschäden in proximalen tubulären Epithelzellen

Lokale Injektionen einer mitochondrialen Farbstoffbeschriftung terminaler Schwann-Zellmitochondrien in vivo zur konfokalen Mikroskopie. Diese Methode nutzt einen Proof of Concept, der im Skelettgewebe von Mäusen mit gesunden oder kranken Muskeln demonstriert wurde, um eine hochauflösende mitochondriale Visualisierung zu ermöglichen.

Methoden zur In-situ-Quantifizierung der mitochondrialen Morphologie in Muskel- und terminalen Schwannzellen von Mäusen

In diesem Video zeigen wir Ihnen, wie der mitochondrialen Atmungskette Komplexe von humanen embryonalen Stammzellen analysiert werden mit in Gel-Aktivitäts-Assays werden.

Probing für Mitochondriale komplexe Aktivität in humanen embryonalen Stammzellen

Erfahren Sie, wie Sie mitochondriale Spaltungs- und Fusionsdynamik in proximalen tubulären Nierenzellen mit konfokaler Mikroskopie und Dendra2-Fluoreszenz analysieren. Diese Methode ermöglicht die präzise Verfolgung transplantierter Mitochondrien.

Beurteilung der mitochondrialen Spaltungs-/Fusionsdynamik in proximalen tubulären Zellen der Niere

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