miR-22-vermittelte Regulation des Wnt/β-Catenin-Signalwegs durch Curcumin beim Retinoblastom

Peng Li; Li Zheng; Qing Yang; Wanrong Huang; Xinlin Yan

doi:10.3791/69300

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Forschungsartikel

miR-22-vermittelte Regulation des Wnt/β-Catenin-Signalwegs durch Curcumin beim Retinoblastom

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DOI:

10.3791/69300

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26. September 2025

Peng Li^*¹ , Li Zheng^*² , Qing Yang^*² , Wanrong Huang¹ , Xinlin Yan³^,⁴

¹Department of Cataract, Tianjin Eye Hospital, ²Academy of Medical Engineering and Translational Medicine, Tianjin University, ³School of Medicine, Nankai University Affiliated Eye Hospital, ⁴Tianjin Key Laboratory of Ophthalmology and Visual Science, Tianjin Eye Institute, Tianjin Eye Hospital

^* These authors contributed equally

In diesem Artikel

Zusammenfassung

In dieser Studie wird ein Protokoll zur Bewertung der Auswirkungen von Curcumin auf das Zellverhalten von Retinoblastomen durch Modulation des Wnt/β-Catenin-Signalwegs und der miR-22-Expression vorgestellt.

Zusammenfassung

Das Retinoblastom (RB) ist ein häufiger intraokularer bösartiger Tumor, der Säuglinge und Kinder betrifft, dessen genaue Ätiologie und Pathogenese jedoch noch nicht vollständig verstanden sind. Curcumin, ein bioaktives Polyphenol, hemmt das Fortschreiten des Tumors durch microRNA-vermittelte Modulation der Wnt/β-Catenin-Signalkaskade. Ziel dieser Studie war es zu klären, wie Curcumin seine Antitumorwirkung bei RB vermittelt, indem die Regulation der miRNA-22 (miR-22)-Expression und die zugrunde liegenden molekularen Mechanismen untersucht wurden. Zwei validierte Retinoblastommodelle (SO-RB50/WERI-Rb-1) wurden mit Curcumin in unterschiedlichen Konzentrationen behandelt. Um die Regulation des Wnt/β-Catenin-Signalwegs durch miR-22 zu beschreiben, wurden die Zielzellen entweder mit einem miR-22-imitierten Lentivirus oder einem nicht-funktionellen Kontroll-Lentivirus transduziert. Xenotransplantat-Tumormodelle wurden an Mäusen unter Verwendung menschlicher RB-Zellen etabliert, um die in vivo Auswirkungen von Curcumin auf die Tumorgröße, die miR-22-Expression und die Wnt/β-Catenin-Proteinspiegel zu beobachten. Zelluläre Proliferation, Invasion und Apoptose wurden mit dem CCK-8-, Transwell- bzw. Annexin V-APC-PI-Dual-Färbeassay bewertet. Die miR-22-Spiegel wurden mittels RT-PCR quantifiziert, und die Wnt1- und β-Catenin-Expressionsprofile wurden durch Western-Blot-Analyse bestimmt. Die Behandlung mit Curcumin führte zu einer verminderten Proliferation und Invasivität in RB-Zellen, während sie die Apoptose verbesserte und die miR-22-Expression erhöhte. Die Hemmung von miR-22 verringerte die Wirkung von Curcumin auf den Wnt/β-Catenin-Signalweg. In Xenotransplantat-Studien reduzierte Curcumin die Tumorgröße signifikant und erhöhte die miR-22-Expression in den Tumoren, wodurch die Wnt/β-Catenin-Signalgebung effektiv unterdrückt wurde. Diese Ergebnisse zeigen, dass Curcumin die Proliferation und Invasivität von RB-Zellen hemmt und gleichzeitig die Apoptose fördert, die hauptsächlich durch die Hochregulierung von miR-22 und die anschließende Hemmung des Wnt/β-Catenin-Signalwegs vermittelt wird.

Einleitung

Das Retinoblastom (RB), eine pädiatrische Malignerkrankung mit hoher Aggressivität, die im Netzhautgewebe auftritt, stellt eine erhebliche Gesundheitsbedrohung dar, insbesondere für Kinder unter fünf Jahren. Genetische Mutationen, insbesondere solche, die das RB1-Gen betreffen, sind eng mit der Entwicklung dieser Krankheit^{verbunden 1}. In Anbetracht der signifikanten Prävalenz des Retinoblastoms (RB) bei Säuglingen und Kindern und der Tatsache, dass jährlich etwa 9000 neue Fälle gemeldet werden, vor allem in einkommensschwachen Ländern und Entwicklungsländern, ist ein umfassendes Verständnis der Krankheitsmechan....