Name: Eine einfache Mikroaspirationstechnik zur Isolierung somatischer Zellen aus kryokonserviertem Pferdesamen als Kernspender für das Klonieren (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-12-19T13:05:00.000+00:00
Duration: 4 min 36 s
Description: Erfahren Sie die Mikroaspirationstechnik zur Isolierung somatischer Zellen aus kryokonserviertem Pferdesamen. Diese Methode ermöglicht die sofortige Verwendung für das Klonieren ohne lange Kulturzeiten und reduziert Spermienkontamination effektiv.

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<ol><li>Pandey, A., Gupta, S. C., Gupta, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparative+potential+of+cultured+skin+fibroblast%2C+cumulus%2C+and+granulosa+cell+to+produce+somatic+cell+nuclear+transfer+%28SCNT%29+preimplantation+embryos+in+buffaloes+%28Bubalus+bubalis%29+in+relation+to+gene+expressions%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Reprogram%22%5BJournal%5D)">Comparative potential of cultured skin fibroblast, cumulus, and granulosa cell to produce somatic cell nuclear transfer (SCNT) preimplantation embryos in buffaloes (Bubalus bubalis) in relation to gene expressions.</a> Cell Reprogram. 12 (3), 357-368 (2010).</li>
<li>Galli, C., Duchi, R., Moor, R. M., Lazzari, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mammalian+leukocytes+contain+all+the+genetic+information+necessary+for+the+development+of+a+new+individual%5BTitle%5D)+AND+%22Cloning%22%5BJournal%5D)">Mammalian leukocytes contain all the genetic information necessary for the development of a new individual.</a> Cloning. 1 (3), 161-170 (1999).</li>
<li>Olsson, P. O., Yeonwoo, J., Park, K., Yoo, Y. M., Hwang, W. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Live+births+from+urine+derived+cells%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Live births from urine derived cells.</a> PLoS One. 18 (1), e0278607(2023).</li>
<li>Vignon, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Developmental+potential+of+bovine+embryos+reconstructed+from+enucleated+matured+oocytes+fused+with+cultured+somatic+cells%5BTitle%5D)+AND+%22C+R+Acad+Sci+III%22%5BJournal%5D)">Developmental potential of bovine embryos reconstructed from enucleated matured oocytes fused with cultured somatic cells.</a> C R Acad Sci III. 321 (9), 735-745 (1998).</li>
<li>Nel-Themaat, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation%2C+culture+and+characterisation+of+somatic+cells+derived+from+semen+and+milk+of+endangered+sheep+and+eland+antelope%5BTitle%5D)+AND+%22Reprod+Fertil+Dev%22%5BJournal%5D)">Isolation, culture and characterisation of somatic cells derived from semen and milk of endangered sheep and eland antelope.</a> Reprod Fertil Dev. 19 (4), 576-584 (2007).</li>
<li>Kjelland, M. E., Liu, J., Hyatt, D., Kraemer, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Collection%2C+isolation%2C+and+culture+of+somatic+cells+from+avian+semen%5BTitle%5D)+AND+%22Avian+Biol+Res%22%5BJournal%5D)">Collection, isolation, and culture of somatic cells from avian semen.</a> Avian Biol Res. 6 (4), 255-260 (2013).</li>
<li>Nel-Themaat, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cloned+embryos+from+semen.+Part+1%3A+in+vitro+proliferation+of+epithelial+cells+on+embryonic+fibroblasts+after+isolation+from+semen+by+gradient+centrifugation%5BTitle%5D)+AND+%22Cloning+Stem+Cells%22%5BJournal%5D)">Cloned embryos from semen. Part 1: in vitro proliferation of epithelial cells on embryonic fibroblasts after isolation from semen by gradient centrifugation.</a> Cloning Stem Cells. 10 (1), 143-160 (2008).</li>
<li>Liu, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+culture+systems+for+attachment+and+proliferation+of+epithelial+cells+cultured+from+ovine+semen%5BTitle%5D)+AND+%22Anim+Reprod+Sci%22%5BJournal%5D)">Evaluation of culture systems for attachment and proliferation of epithelial cells cultured from ovine semen.</a> Anim Reprod Sci. 115 (1-4), 49-57 (2009).</li>
<li>Liu, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Embryo+production+and+possible+species+preservation+by+nuclear+transfer+of+somatic+cells+isolated+from+bovine+semen%5BTitle%5D)+AND+%22Theriogenology%22%5BJournal%5D)">Embryo production and possible species preservation by nuclear transfer of somatic cells isolated from bovine semen.</a> Theriogenology. 74 (9), 1629-1635 (2010).</li>
<li>Saini, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+and+culture+of+epithelial+cells+from+stored+buffalo+semen+and+their+use+for+the+production+of+cloned+embryos%5BTitle%5D)+AND+%22Reprod+Fertil+Dev%22%5BJournal%5D)">Isolation and culture of epithelial cells from stored buffalo semen and their use for the production of cloned embryos.</a> Reprod Fertil Dev. 31 (10), 1581-1588 (2019).</li>
<li>Brom-de-Luna, J. G., Canesin, H. S., Wright, G., Hinrichs, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Culture+of+somatic+cells+isolated+from+frozen-thawed+equine+semen+using+fluorescence-assisted+cell+sorting%5BTitle%5D)+AND+%22Anim+Reprod+Sci%22%5BJournal%5D)">Culture of somatic cells isolated from frozen-thawed equine semen using fluorescence-assisted cell sorting.</a> Anim Reprod Sci. 190, 10-17 (2018).</li>
<li>Ramos, B., Rodríguez, A. A., Rosales, A. M., Montiel, A. J., Hernández, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+of+somatic+cell+populations+in+cryopreserved+equine+semen+as+a+source+of+donor+nuclei+for+somatic+cloning%3A+preliminary+results%5BTitle%5D)+AND+%22Reprod+Fertil+Dev%22%5BJournal%5D)">Identification of somatic cell populations in cryopreserved equine semen as a source of donor nuclei for somatic cloning: preliminary results.</a> Reprod Fertil Dev. 37 (1), (2025).</li>
<li>Moulavi, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interspecies+somatic+cell+nuclear+transfer+in+Asiatic+cheetah+using+nuclei+derived+from+post-mortem+frozen+tissue+in+absence+of+cryo-protectant+and+in+vitro+matured+domestic+cat+oocytes%5BTitle%5D)+AND+%22Theriogenology%22%5BJournal%5D)">Interspecies somatic cell nuclear transfer in Asiatic cheetah using nuclei derived from post-mortem frozen tissue in absence of cryo-protectant and in vitro matured domestic cat oocytes.</a> Theriogenology. 90, 197-203 (2017).</li>
<li>Wakayama, S., Ito, D., Ooga, M., Wakayama, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Production+of+mouse+offspring+from+zygotes+fertilized+with+freeze-dried+spermatids%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Production of mouse offspring from zygotes fertilized with freeze-dried spermatids.</a> Sci Rep. 12 (1), 18430(2022).</li>
<li>Wakayama, S., Ito, D., Hayashi, E., Ishiuchi, T., Wakayama, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Healthy+cloned+offspring+derived+from+freeze-dried+somatic+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Healthy cloned offspring derived from freeze-dried somatic cells.</a> Nat Commun. 13 (1), 3666(2022).</li>
<li>Loi, P., Fulka, J., Hildebrand, T., Ptak, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genome+of+non-living+cells%3A+Trash+or+recycle%5BTitle%5D)+AND+%22Reproduction%22%5BJournal%5D)">Genome of non-living cells: Trash or recycle.</a> Reproduction. 142 (4), 497-503 (2011).</li>
<li>Wakayama, S., Wakayama, T., Wells, D. N. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aWakayama%2C+S+%22Encyclopedia+of+Life+Sciences%22">Encyclopedia of Life Sciences</a>. , 1-10 (2023).</li>
<li>Lanza, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Extension+of+cell+life-span+and+telomere+length+in+animals+cloned+from+senescent+somatic+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Extension of cell life-span and telomere length in animals cloned from senescent somatic cells.</a> Science. 288, 665-669 (2000).</li>
<li>González-Bermúdez, B., Guinea, G. V., Plaza, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advances+in+micropipette+aspiration%3A+applications+in+cell+biomechanics%2C+models%2C+and+extended+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Biophys+J%22%5BJournal%5D)">Advances in micropipette aspiration: applications in cell biomechanics, models, and extended studies.</a> Biophys J. 116 (4), 587-594 (2019).</li>
<li>Hochmuth, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Micropipette+aspiration+of+living+cells%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biomech%22%5BJournal%5D)">Micropipette aspiration of living cells.</a> J Biomech. 33 (1), 15-22 (2000).</li>
<li>Vajta, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Production+of+a+healthy+calf+by+somatic+cell+nuclear+transfer+without+micromanipulators+and+carbon+dioxide+incubators+using+the+handmade+cloning+%28HMC%29+and+the+submarine+incubation+system+%28SIS%29%5BTitle%5D)+AND+%22Theriogenology%22%5BJournal%5D)">Production of a healthy calf by somatic cell nuclear transfer without micromanipulators and carbon dioxide incubators using the handmade cloning (HMC) and the submarine incubation system (SIS).</a> Theriogenology. 62 (8), 1465-1472 (2004).</li>
<li>Alteri, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Revisiting+embryo+assisted+hatching+approaches%3A+A+systematic+review+of+the+current+protocols%5BTitle%5D)+AND+%22J+Assist+Reprod+Genet%22%5BJournal%5D)">Revisiting embryo assisted hatching approaches: A systematic review of the current protocols.</a> J Assist Reprod Genet. 35 (3), 367-391 (2018).</li>
<li>Briski, O., Salamone, D. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Past%2C+present+and+future+of+ICSI+in+livestock+species%5BTitle%5D)+AND+%22Anim+Reprod+Sci%22%5BJournal%5D)">Past, present and future of ICSI in livestock species.</a> Anim Reprod Sci. 246, 106925(2022).</li>
<li>Wall, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pronuclear+microinjection%5BTitle%5D)+AND+%22Cloning+Stem+Cells%22%5BJournal%5D)">Pronuclear microinjection.</a> Cloning Stem Cells. 3 (4), 209-220 (2001).</li>
<li>Selokar, N. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hope+for+restoration+of+dead+valuable+bulls+through+cloning+using+donor+somatic+cells+isolated+from+cryopreserved+semen%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Hope for restoration of dead valuable bulls through cloning using donor somatic cells isolated from cryopreserved semen.</a> PLoS One. 9 (3), e90755(2014).</li>
<li>Selokar, N. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Buffalo+%28Bubalus+bubalis%29+SCNT+embryos+produced+from+somatic+cells+isolated+from+frozen-thawed+semen%3A+Effect+of+trichostatin+A+on+the+in+vitro+and+in+vivo+developmental+potential%2C+quality+and+epigenetic+status%5BTitle%5D)+AND+%22Zygote%22%5BJournal%5D)">Buffalo (Bubalus bubalis) SCNT embryos produced from somatic cells isolated from frozen-thawed semen: Effect of trichostatin A on the in vitro and in vivo developmental potential, quality and epigenetic status.</a> Zygote. 24 (4), 549-553 (2016).</li>
<li>Guevorkian, K., Maître, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Micropipette+aspiration%3A+A+unique+tool+for+exploring+cell+and+tissue+mechanics+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Micropipette aspiration: A unique tool for exploring cell and tissue mechanics in vivo.</a> Methods Cell Biol. 139, 187-201 (2017).</li>
<li>Duah, E. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Production+of+hand-made+cloned+buffalo+%28Bubalus+bubalis%29+embryos+from+nonviable+somatic+cells%5BTitle%5D)+AND+%22In+Vitro+Cell+Dev+Biol+Anim%22%5BJournal%5D)">Production of hand-made cloned buffalo (Bubalus bubalis) embryos from nonviable somatic cells.</a> In Vitro Cell Dev Biol Anim. 52 (10), 983-988 (2016).</li>
<li>Loi, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nuclei+of+nonviable+ovine+somatic+cells+develop+into+lambs+after+nuclear+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Biol+Reprod%22%5BJournal%5D)">Nuclei of nonviable ovine somatic cells develop into lambs after nuclear transplantation.</a> Biol Reprod. 67 (1), 126-132 (2002).</li>
<li>Fahrudin, M., Otoi, T., Suzuki, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Developmental+competence+of+bovine+embryos+reconstructed+by+the+transfer+of+somatic+cells+derived+from+frozen+tissues%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vet+Med+Sci%22%5BJournal%5D)">Developmental competence of bovine embryos reconstructed by the transfer of somatic cells derived from frozen tissues.</a> J Vet Med Sci. 63 (10), 1151-1154 (2001).</li>
<li>Podico, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single-layer+colloid+centrifugation+as+a+method+to+process+urine-contaminated+stallion+semen+after+freezing-thawing%5BTitle%5D)+AND+%22J+Equine+Vet+Sci%22%5BJournal%5D)">Single-layer colloid centrifugation as a method to process urine-contaminated stallion semen after freezing-thawing.</a> J Equine Vet Sci. 87, 102910(2020).</li>
<li>Zhang, Y. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+porcine+urine-derived+cells+as+nuclei+donor+for+somatic+cell+nuclear+transfer%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vet+Sci%22%5BJournal%5D)">Evaluation of porcine urine-derived cells as nuclei donor for somatic cell nuclear transfer.</a> J Vet Sci. 23 (2), e40(2022).</li>
<li>Mizutani, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Generation+of+cloned+mice+and+nuclear+transfer+embryonic+stem+cell+lines+from+urine-derived+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Generation of cloned mice and nuclear transfer embryonic stem cell lines from urine-derived cells.</a> Sci Rep. 6, 23808(2016).</li>
<li>Long, S., Kenworthy, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Round+cells+in+diagnostic+semen+analysis%3A+a+guide+for+laboratories+and+clinicians%5BTitle%5D)+AND+%22Br+J+Biomed+Sci%22%5BJournal%5D)">Round cells in diagnostic semen analysis: a guide for laboratories and clinicians.</a> Br J Biomed Sci. 79, 10129(2022).</li>
<li>Johanisson, E., Campana, A., Luthi, R., de Agostini, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+%27round+cells%27+in+semen+analysis%3A+a+comparative+study%5BTitle%5D)+AND+%22Hum+Reprod+Update%22%5BJournal%5D)">Evaluation of 'round cells' in semen analysis: a comparative study.</a> Hum Reprod Update. 6 (4), 404-412 (2000).</li>
<li>Graber, M., Lane, B., Lamia, R., Pastoriza-Munoz, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bubble+cells%3A+Renal+tubular+cells+in+the+urinary+sediment+with+characteristics+of+viability%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Soc+Nephrol%22%5BJournal%5D)">Bubble cells: Renal tubular cells in the urinary sediment with characteristics of viability.</a> J Am Soc Nephrol. 1 (7), 999-1004 (1991).</li>
<li>Rahmanian, N., Bozorgmehr, M., Torabi, M., Akbari, A., Zarnani, A. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cell+separation%3A+Potentials+and+pitfalls%5BTitle%5D)+AND+%22Prep+Biochem+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Cell separation: Potentials and pitfalls.</a> Prep Biochem Biotechnol. 47 (1), 38-51 (2017).</li>
<li>Håård, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+frozen+stallion+semen+in+Europe%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Vet+Scand+Suppl%22%5BJournal%5D)">Use of frozen stallion semen in Europe.</a> Acta Vet Scand Suppl. 88, 123-127 (1992).</li>
<li>Klug, E., Treu, H., Hillmann, H., Heinze, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Results+of+insemination+of+mares+with+fresh+and+frozen+stallion+semen%5BTitle%5D)+AND+%22J+Reprod+Fertil+Suppl%22%5BJournal%5D)">Results of insemination of mares with fresh and frozen stallion semen.</a> J Reprod Fertil Suppl. 23, 107-110 (1975).</li>
<li>Pukazhenthi, B., Comizzoli, P., Travis, A. J., Wildt, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Applications+of+emerging+technologies+to+the+study+and+conservation+of+threatened+and+endangered+species%5BTitle%5D)+AND+%22Reprod+Fertil+Dev%22%5BJournal%5D)">Applications of emerging technologies to the study and conservation of threatened and endangered species.</a> Reprod Fertil Dev. 18 (1-2), 77-90 (2006).</li>
<li>Swanson, W. F., Magarey, G. M., Herrick, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sperm+cryopreservation+in+endangered+felids%3A+developing+linkage+of+in+situ-ex+situ+populations%5BTitle%5D)+AND+%22Soc+Reprod+Fertil+Suppl%22%5BJournal%5D)">Sperm cryopreservation in endangered felids: developing linkage of in situ-ex situ populations.</a> Soc Reprod Fertil Suppl. 65, 417-432 (2007).</li>
<li>Lagutina, I., Fulka, H., Lazzari, G., Galli, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interspecies+somatic+cell+nuclear+transfer%3A+Advancements+and+problems%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Reprogram%22%5BJournal%5D)">Interspecies somatic cell nuclear transfer: Advancements and problems.</a> Cell Reprogram. 15 (5), 374-384 (2013).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>2-Beta-Mercaptoethanol</td><td>SIGMA</td><td>M7522</td><td>Somatische Zellkultur</td></tr><tr><td>1x DPBS</td><td>GIBCO</td><td>REF-21600010</td><td>Somatische Zellmanipulation</td></tr><tr><td>Absolutes Ethanol</td><td>HYCEL</td><td>EL CRISOL 50181-1L73</td><td>Zur Herstellung von Pipetten</td></tr><tr><td>Antibiotikum-antimikotikum 100x</td><td>INVITRO SA. M&eakut; xico</td><td></td><td>Somatische Zellkultur</td></tr><tr><td>Borosilikat-Kapillaren (1,0 mm O.D. & Times; 0,78 mm I.D. & Times; 100 mm Länge)</td><td>HARVARD-APPARAT, USA</td><td>EC1-30-0035</td><td>Zur Herstellung von Pipetten</td></tr><tr><td>BSA</td><td>SIGMA</td><td>A3311</td><td>Somatische Zellkultur</td></tr><tr><td>DMEM/F12 Medium</td><td>GIBCO</td><td>REF-12500-062</td><td>Somatische Zellkultur</td></tr><tr><td>Kryokonservierte Samenprobe des Pferdes</td><td></td><td></td><td>Die kryokonservierten Samenproben wurden von einem kommerziellen Händler bezogen und waren seit mehr als 19 Jahren in flüssigem Stickstoff konserviert. Alle gefrorenen Pferdesamenproben wurden von kommerziellen Vertriebspartnern erhalten, die von den zuständigen veterinärmedizinischen Behörden in Mexiko gemäß dem mexikanischen Offiziellen Standard NOM-027-ZOO-1995, Zoosanitary Process of Semen from Domestic Animals, genehmigt sind.</td></tr><tr><td>Okular-Fadenkreuz</td><td></td><td>Werkzeug zur Herstellung von Pipetten</td><td>Erforderliche Ausrüstung</td></tr><tr><td>Fetales Rinderserum</td><td>GIBCO</td><td>REF-26140-079</td><td>Somatische Zellkultur</td></tr><tr><td>Wassersäure</td><td>SIGMA-ALDRICH</td><td>339261</td><td>Zur Herstellung von Pipetten</td></tr><tr><td>Invertoptisches optisches Mikroskop</td><td>Finsternis, TE 200</td><td>NIKON</td><td>Somatische Zellen-Mikromanipulation</td></tr><tr><td>Labor&nbsp; Trockenofen</td><td></td><td>Werkzeug zur Herstellung von Pipetten</td><td>Erforderliche Ausrüstung</td></tr><tr><td>Microforge</td><td></td><td>Werkzeug zur Herstellung von Pipetten</td><td>Erforderliche Ausrüstung</td></tr><tr><td>Mikromanipulator-Set für Invertiertes Mikroskop</td><td></td><td>Mikromanipulation von Zellen</td><td>Erforderliche Ausrüstung</td></tr><tr><td>Mikropipettenzieher</td><td>P-97, SUTTER-INSTRUMENT</td><td>Werkzeug zur Herstellung von Pipetten</td><td>Verwenden Sie folgende Einstellungen&mdash; Vorlauf: 720; Zug: 30; Geschwindigkeit: 50; Zeit: 220; Druck</td></tr><tr><td>Mineralöl</td><td>SIGMA</td><td>M8410</td><td>Somatische Zellmanipulation</td></tr><tr><td>Nunklon & Nunclon; Zellkulturschalen, Durchmesser & Times; H 35 mm & mal; 10 mm</td><td>NUNCLON</td><td>Nunc 153066</td><td></td></tr><tr><td>PVA</td><td>SIGMA</td><td>P8136</td><td>Somatische Zellkultur</td></tr><tr><td>PVP</td><td>SIGMA</td><td>P5288</td><td>Somatische Zellkultur</td></tr><tr><td>Trypan-blaue Lösung 0,4 %</td><td>GIBCO</td><td>REF- 15250061</td><td>Zellfarbe</td></tr></tbody></table>

eine einfache mikroaspirationstechnik zur isolierung somatischer zellen aus kryokonserviertem pferdesamen als kernspender für das klonieren

A Simple Microaspiration Technique for Isolating Somatic Cells from Cryopreserved Equine Semen as Nuclear Donors for Cloning

Tabelle 1 zeigt, dass die Mikroaspirationstechnik somatische Zellen effizient aus kryokonserviertem Pferdesamen zurückgewinnt, mit Fangraten von 317,7 ± 9,60 bis 424,7 ± 33,65 Zellen pro Stunde bei drei Hengsten. Hengst #03 erzielte die höchste Erträge, was die Wirksamkeit der Methode auch bei langfristig gelagerten Proben zeigt. Die Daten zeigen, dass die Technik somatische Zellen konsistent und effektiv vom Sperma isoliert, und die mittleren Abfangraten sowie Standardab...

Eine einfache Mikroaspirationstechnik zur Isolierung somatischer Zellen aus kryokonserviertem Pferdesamen als Kernspender für das Klonieren

Semen is a complex fluid that, in addition to spermatozoa, contains other cell populations, including immune cells, immature male germ cells, epithelial ...

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Ein neuartiges Protokoll für die mechanische Aufbereitung von Hoden Zellsuspensionen von Nagetier Material, die Vermeidung Enzyme und Reinigungsmittel, beschrieben. Das Verfahren ist sehr einfach, schnell, reproduzierbar und macht gute Qualität Zellsuspensionen, die sich für Durchfluss Sortier-und RNA-Extraktion sind.

Einfache und effiziente Technik zur Herstellung von Hodenkrebs Zellsuspensionen

MicroSecure Vitrification wurde als nicht-kommerzielles, aseptisches, geschlossenes Vitrifikationssystem entwickelt, das den guten Herstellungs- und Gewebehandhabungspraktiken der FDA entspricht. Aufgrund der Rücknahme von hydrophoben verstopften Embryonalhalmen aus der Industrie wurde das Vitrifikationsverfahren dahingehend geändert, dass eine innere Versiegelung vor dem standardmäßigen internen Baumwollstopfen vorgesehen ist.

Modifizierte MicroSecure Vitrifikation: Eine sichere, einfache und sehr effektive Kryokonservierung Verfahren für Human Blastozysten

Dieses Protokoll beschreibt Blasenekstrophie Massage, eine nicht-invasive manuelle Technik zum Sammeln von Samen von Vögel und DNA-Extraktion aus Vogelgrippe Spermien mit einem kommerziellen Extraktion Kit mit Modifikationen.

Vogelgrippe Samengewinnung von Blasenekstrophie Massage und Isolierung von DNA aus Spermien

Wir beschreiben eine dramatisch verbesserte Methode für Maus Klonen mit entionisiertem Rinderserumalbumin Trichostatin A und Vitamin C. Wir zeigen eine vereinfachte, reproduzierbare Protokoll, die effiziente Entwicklung von geklonten Embryonen unterstützt. Diese Methode könnte daher ein standardisiertes Verfahren zum Klonen von Maus geworden.

Kombinatorische Behandlung von Trichostatin A und Vitamin C verbessert die Effizienz des Klonens Mäuse durch Kerntransfer somatischer Zellen

Dieser Artikel zielt darauf ab, die Verwendung von parthenogenetischen haploiden embryonalen Stammzellen als Ersatz für Spermien für den Aufbau von halbgeklonten Embryonen zu demonstrieren.

Anwendung von Maus parthenogenetischen Haploid embryonalen Stammzellen als Ersatz für Sperma

Hier stellen wir ein Protokoll vor, das die Präparation von Zellkernen beschreibt. Nach Mikrodissektion und enzymatischer Dissoziation von Herzgewebe in Einzelzellen wurden die Vorläuferzellen eingefroren, gefolgt von der Isolierung von reinen lebensfähigen Zellen, die für die Einzelkern-RNA-Sequenzierung und den Einzelkern-Assay für Transposase-zugängliches Chromatin mit Hochdurchsatz-Sequenzierungsanalysen verwendet wurden.

Zellkernisolierung aus kardialen Vorläuferzellen der Maus für die Erstellung von Epigenom- und Genexpressionsprofilen mit Einzelzellauflösung

Die Studie beschreibt ein einfaches, schnelles und teilautomatisiertes Protokoll zur Isolierung hochwertiger Zellkerne aus gefrorenem Säugetiergewebe für die nachgeschaltete Einzelkern-RNA-Sequenzierung.

Ein einfaches, schnelles und teilautomatisiertes Protokoll für die Isolierung von Einzelkernen aus gefrorenem Säugetiergewebe für die Einzelkernsequenzierung

Wir beschreiben ein Protokoll zur Extraktion hochwertiger Zellkerne aus kryokonservierten induzierten pluripotenten Stammzelltypen, die aus Stroma-/Endothel- und Blutzelltypen gewonnen wurden, um Einzelkern-Sequenzierungsanalysen der nächsten Generation zu unterstützen. Die Herstellung hochwertiger, intakter Kerne ist für Multiomics-Experimente unerlässlich, kann aber für einige Labore ein Hindernis für den Einstieg in das Feld darstellen.

Kernisolierung aus kryokonservierten in vitro gewonnenen Blutzellen

Koronare Endarteriektomie-Gewebeproben wurden mit einem optimierten Dissoziationsprotokoll untersucht, um einzelne Kerne zu isolieren. Die Integrität der isolierten Kerne wurde durch drei komplementäre Ansätze validiert: Trypan-blaue Ausschlussfärbung zur Bewertung der Membranintegrität, DAPI-basierte konfokale Mikroskopie zur Bestätigung der Kernmorphologie und Durchflusszytometrie zur Quantifizierung von Kernausbeute und Reinheit.

Einzelzellenisolierung aus koronarem Endarteriektomiegewebe bei Patienten mit koronarem Bypass-Transplantat

Erfahren Sie die Mikroaspirationstechnik zur Isolierung somatischer Zellen aus kryokonserviertem Pferdesamen. Diese Methode ermöglicht die sofortige Verwendung für das Klonieren ohne lange Kulturzeiten und reduziert Spermienkontamination effektiv.

Eine einfache Mikroaspirationstechnik zur Isolierung somatischer Zellen aus kryokonserviertem Pferdesamen als Kernspender für das Klonieren (Video) | JoVE Journal

Eine einfache Mikroaspirationstechnik zur Isolierung somatischer Zellen aus kryokonserviertem Pferdesamen als Kernspender für das Klonieren

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