Name: Peroxisom-Färbung in Säugetierzellen mittels peroxisom-spezifischen Sonden (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-12-19T13:20:00.000+00:00
Duration: 5 min 57 s
Description: Lernen Sie die Peroxisom-Färbung in Säugetierzellen mit PeroxiSPY-Sonden für lebende und fixierte Zellen. Diese Methode ermöglicht die Untersuchung von Peroxisomen-Dynamik und -Dysfunktion.

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<ol><li>Kassmann, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Myelin+peroxisomes+-+essential+organelles+for+the+maintenance+of+white+matter+in+the+nervous+system%5BTitle%5D)+AND+%22Biochimie%22%5BJournal%5D)">Myelin peroxisomes - essential organelles for the maintenance of white matter in the nervous system.</a> Biochimie. 98, 111-118 (2014).</li>
<li>van den Bosch, H., Schutgens, R. B., Wanders, R. J., Tager, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biochemistry+of+peroxisomes%5BTitle%5D)+AND+%22Annu+Rev+Biochem%22%5BJournal%5D)">Biochemistry of peroxisomes.</a> Annu Rev Biochem. 61, 157-197 (1992).</li>
<li>Aubourg, P., Wanders, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Peroxisomal+disorders%5BTitle%5D)+AND+%22Handb+Clin+Neurol%22%5BJournal%5D)">Peroxisomal disorders.</a> Handb Clin Neurol. 113, 1593-1609 (2013).</li>
<li>Honsho, M., Okumoto, K., Tamura, S., Fujiki, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Peroxisome+biogenesis+disorders%5BTitle%5D)+AND+%22Adv+Exp+Med+Biol%22%5BJournal%5D)">Peroxisome biogenesis disorders.</a> Adv Exp Med Biol. 1299, 45-54 (2020).</li>
<li>Korotkova, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fluorescent+fatty+acid+conjugates+for+live+cell+imaging+of+peroxisomes%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Fluorescent fatty acid conjugates for live cell imaging of peroxisomes.</a> Nat Commun. 15, 4314(2024).</li>
<li>Bezman, L., Moser, H. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Incidence+of+X-linked+adrenoleukodystrophy+and+the+relative+frequency+of+its+phenotypes%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Med+Genet%22%5BJournal%5D)">Incidence of X-linked adrenoleukodystrophy and the relative frequency of its phenotypes.</a> Am J Med Genet. 76 (5), 415-419 (1998).</li>
<li>Visser, W. F., van Roermund, C. W., Ijlst, L., Waterham, H. R., Wanders, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metabolite+transport+across+the+peroxisomal+membrane%5BTitle%5D)+AND+%22Biochem+J%22%5BJournal%5D)">Metabolite transport across the peroxisomal membrane.</a> Biochem J. 401 (2), 365-375 (2007).</li>
<li>Matsuzono, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+PEX19%3A+cDNA+cloning+by+functional+complementation%2C+mutation+analysis+in+a+patient+with+Zellweger+syndrome%2C+and+potential+role+in+peroxisomal+membrane+assembly%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Human PEX19: cDNA cloning by functional complementation, mutation analysis in a patient with Zellweger syndrome, and potential role in peroxisomal membrane assembly.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 96 (5), 2116-2121 (1999).</li>
<li>Borisyuk, A., Howman, C., Pattabiraman, S., Kaganovich, D., Amen, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protein+Kinase+C+promotes+peroxisome+biogenesis+and+peroxisome-endoplasmic+reticulum+interaction%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Protein Kinase C promotes peroxisome biogenesis and peroxisome-endoplasmic reticulum interaction.</a> J Cell Biol. 224 (9), e202505040(2025).</li>
<li>Gould, S. G., Keller, G. A., Subramani, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+of+a+peroxisomal+targeting+signal+at+the+carboxy+terminus+of+firefly+luciferase%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Identification of a peroxisomal targeting signal at the carboxy terminus of firefly luciferase.</a> J Cell Biol. 105 (6 Pt 2), 2923-2931 (1987).</li>
<li>Lukinavicius, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+near-infrared+fluorophore+for+live-cell+super-resolution+microscopy+of+cellular+proteins%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Chem%22%5BJournal%5D)">A near-infrared fluorophore for live-cell super-resolution microscopy of cellular proteins.</a> Nat Chem. 5 (2), 132-139 (2013).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Anti-PEX14-Antikörper</td><td>Proteintech</td><td>10594-1-AP</td><td></td></tr><tr><td>Konfokalmikroskop</td><td>Nikon</td><td>A1r</td><td>Jedes konfokale Mikroskop mit hohem NA-Objektiv, z. B. 60x Öl NA1.4</td></tr><tr><td>DMEM</td><td>Pan Biotech</td><td>&nbsp; P04-03590</td><td>Zellkulturmedien</td></tr><tr><td>Glasboden-Bildplatten</td><td>Cellvis</td><td>D35C4-20-1.5-N</td><td></td></tr><tr><td>Ziegen-Anti-Kaninchen-Alexa Fluor 488&nbsp;</td><td>ABCAM</td><td>ab150081</td><td></td></tr><tr><td>HEK293T</td><td>ATCC</td><td>CRL-3216&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>PeroxiSPY555</td><td>Spirochrom</td><td>https://spirochrome.com/product/peroxi_spy555/</td><td>&nbsp; https://doi.org/10.1038/s41467-024-48679-2</td></tr><tr><td>PeroxisPY650</td><td>Spirochrom</td><td>https://spirochrome.com/product/peroxi_spy650/</td><td>&nbsp; https://doi.org/10.1038/s41467-024-48679-2</td></tr></tbody></table>

peroxisom-färbung in säugetierzellen mittels peroxisom-spezifischen sonden

Peroxisome Staining in Mammalian Cells Using Peroxisome-Specific Probes

Peroxisom-Färbung in Säugetierzellen mittels peroxisom-spezifischen Sonden

Peroxisomes are ubiquitous organelles with essential roles in human health, and their dysfunction leads to a spectrum of genetic disorders. Visualization ...

peroxisome-staining-mammalian-cells-using-peroxisome-specific

Research

Forschung

JoVE Journal

Developmental Biology

Entwicklungsbiologie

Die Glykosomendynamik in afrikanischen Trypanosomen ist mit traditionellen zellbiologischen Techniken wie Elektronen- und Fluoreszenzmikroskopie schwer zu untersuchen.  Um das Verhalten dynamischer Organellen zu beobachten, wurde ein Fluoreszenz-Organellen-Reportersystem in Verbindung mit der Durchflusszytometrie verwendet, um die Echtzeit-Glykosomendynamik in lebenden Parasiten zu überwachen.

Mit fluoreszierenden Proteinen zu Glycosome Dynamics in der afrikanischen Trypanosomen auf Monitor

Wir präsentieren ein Protokoll zur Untersuchung der Verteilung von Mitochondrien und endoplasmatischem Retikulum in ganzen Zellen nach genetischer Veränderung mittels korrelativer Licht- und Volumenelektronenmikroskopie einschließlich Ascorbatperoxidase 2 und Meerrettichperoxidase-Färbung, serielle Steilerstellung von Zellen mit und ohne Zielgen im selben Abschnitt und serielle Bildgebung mittels Elektronenmikroskopie.

Mitochondrien und Endoplasmatische Retikulum-Bildgebung durch korrelative Licht- und Volumenelektronenmikroskopie

Dieses Protokoll beschreibt die Bewertung des subzellulären Kompartiment-spezifischen Redoxstatus innerhalb der Zelle. Eine redoxempfindliche Fluoreszenzsonde ermöglicht eine komfortable ratiometrische Analyse in intakten Zellen.

Bewertung der zellulären Oxidation mit einem subzellulären Kompartiment-spezifischeredox-sensitivegrüne fluoreszierende Protein

Das vorliegende Protokoll beschreibt eine Methode zum Nachweis reaktiver Sauerstoffspezies (ROS) in den intestinalen murinen Organoiden unter Verwendung qualitativer Bildgebung und quantitativer Zytometrie-Assays. Diese Arbeit kann möglicherweise auf andere fluoreszierende Sonden ausgedehnt werden, um die Wirkung ausgewählter Verbindungen auf ROS zu testen.

Analyse von oxidativem Stress in murinen Darmorganoiden mit reaktiver Sauerstoffspezies-sensitiver fluorogener Sonde

Mitophagie ist der primäre Mechanismus der mitochondrialen Qualitätskontrolle. Die Bewertung der Mitophagie in vivo wird jedoch durch das Fehlen zuverlässiger quantitativer Assays behindert. Hier wird ein Protokoll zur Beobachtung der Mitophagie in lebenden Zellen unter Verwendung eines zellpermierten grün-fluoreszierenden Mitochondrienfarbstoffs und eines rot fluoreszierenden Lysosomenfarbstoffs vorgestellt.

Visualisierung der Mitophagie mit Fluoreszenzfarbstoffen für Mitochondrien und Lysosomen

Dieses Protokoll enthält Anweisungen zum Auslösen und Überwachen der Stub1-vermittelten Pexophagie in lebenden Zellen.

Überwachung der Stub1-vermittelten Pexophagie

Die Erforschung der Mitophagie durch Elektronenmikroskopie, genetische Sensoren und Immunfluoreszenz erfordert kostspielige Geräte, qualifiziertes Personal und einen erheblichen Zeitaufwand. Hier demonstrieren wir die Wirksamkeit eines kommerziellen Fluoreszenzfarbstoff-Kits bei der Quantifizierung des Mitophagie-Prozesses sowohl in Caenorhabditis elegans als auch in einer Leberkrebszelllinie.

Nachweis von Mitophagie in Caenorhabditis elegans und Säugetierzellen mit organellenspezifischen Farbstoffen

Wasserstoffperoxid (H2O2) ist sowohl eine Quelle oxidativer Schäden als auch ein Signalmolekül. Dieses Protokoll beschreibt, wie mitochondrialesH2O2mit Hilfe von HyPer7 (mtHyPer7), einem genetisch kodierten ratiometrischen Biosensor, in lebender Hefe gemessen werden kann. Es wird beschrieben, wie die Bildgebungsbedingungen optimiert und quantitative zelluläre und subzelluläre Analysen mit frei verfügbarer Software durchgeführt werden können.

Bildgebung von mtHyPer7, einem ratiometrischen Biosensor für mitochondriales Peroxid, in lebenden Hefezellen

Dieses Protokoll stellt einen Arbeitsablauf für die Vermehrung, Differenzierung und Färbung von kultivierten SH-SY5Y-Zellen und primären Hippocampusneuronen der Ratte für die Visualisierung und Analyse der mitochondrialen Ultrastruktur unter Verwendung der stimulierten Emissionsverarmungsmikroskopie (STED) dar.

Verwendung von Lebendzell-STED-Bildgebung zur Visualisierung der mitochondrialen Innenmembran-Ultrastruktur in neuronalen Zellmodellen

Der Gehalt an Lipidhydroperoxid ist der am häufigsten verwendete Indikator für den feroptotischen Zelltod. Dieser Artikel zeigt die Schritt-für-Schritt-Durchflusszytometrie-Analyse des Lipidhydroperoxidgehalts in Zellen nach Ferroptose-Induktion.

Entschlüsselung des ferroptotischen Phänotyps des Medulloblastoms

Lernen Sie die Peroxisom-Färbung in Säugetierzellen mit PeroxiSPY-Sonden für lebende und fixierte Zellen. Diese Methode ermöglicht die Untersuchung von Peroxisomen-Dynamik und -Dysfunktion.

Peroxisom-Färbung in Säugetierzellen mittels peroxisom-spezifischen Sonden

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