Name: Ex vivo Kultur menschlicher Plazenta-Explants zur Untersuchung der viralen Übertragung über die mütterlich-fetale Grenzfläche (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-12-30T14:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 22 s
Description: Lernen Sie die Kultivierung menschlicher Plazenta-Explants an der Luft-Flüssig-Grenzfläche zur Untersuchung viraler Replikation und vertikaler Übertragung. Diese Methode ermöglicht Langzeitstudien zur mütterlich-fetalen Infektion.

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<ol><li>Leruez-Ville, M., Foulon, I., Pass, R., Ville, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cytomegalovirus+infection+during+pregnancy%3A+State+of+the+science%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Obstet+Gynecol%22%5BJournal%5D)">Cytomegalovirus infection during pregnancy: State of the science.</a> Am J Obstet Gynecol. 223 (3), 330-349 (2020).</li>
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<li>Karvas, R. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stem-cell-derived+trophoblast+organoids+model+human+placental+development+and+susceptibility+to+emerging+pathogens%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Stem+Cell%22%5BJournal%5D)">Stem-cell-derived trophoblast organoids model human placental development and susceptibility to emerging pathogens.</a> Cell Stem Cell. 29 (5), 810-825.e8 (2022).</li>
<li>Ozarslan, N., Li, L., Buarpung, S., Robinson, J. F., Gaw, S. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+ex+vivo+human+placental+explant+model+for+controlled+exposure+studies%5BTitle%5D)+AND+%22STAR+Protoc%22%5BJournal%5D)">An ex vivo human placental explant model for controlled exposure studies.</a> STAR Protoc. 6 (3), 104055(2025).</li>
<li>Ruiz-Morales, E. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protocol+for+a+human+placental+explant+model+to+study+acute+responses+to+pathogens%5BTitle%5D)+AND+%22STAR+Protoc%22%5BJournal%5D)">Protocol for a human placental explant model to study acute responses to pathogens.</a> STAR Protoc. 6 (4), 104097(2025).</li>
<li>López-Guzmán, C., García, A. M., Marín, P., Vásquez, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessment+of+the+integrity+and+function+of+human+term+placental+explants+in+short-term+culture%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Protoc%22%5BJournal%5D)">Assessment of the integrity and function of human term placental explants in short-term culture.</a> Methods Protoc. 7 (1), 16(2024).</li>
<li>Grivel, J. C., Margolis, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+human+tissue+explants+to+study+human+infectious+agents%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">Use of human tissue explants to study human infectious agents.</a> Nat Protoc. 4 (2), 256-269 (2009).</li>
<li>Lopez, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Novel+model+of+placental+tissue+explants+infected+by+cytomegalovirus+reveals+different+permissiveness+in+early+and+term+placentae+and+inhibition+of+indoleamine+2%2C3-dioxygenase+activity%5BTitle%5D)+AND+%22Placenta%22%5BJournal%5D)">Novel model of placental tissue explants infected by cytomegalovirus reveals different permissiveness in early and term placentae and inhibition of indoleamine 2,3-dioxygenase activity.</a> Placenta. 32 (7), 522-530 (2011).</li>
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<li>Martin, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Usutu+virus+infects+human+placental+explants+and+induces+congenital+defects+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Viruses%22%5BJournal%5D)">Usutu virus infects human placental explants and induces congenital defects in mice.</a> Viruses. 14 (8), 1619(2022).</li>
<li>Howard-Jones, A. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Arthropod-borne+flaviviruses+in+pregnancy%5BTitle%5D)+AND+%22Microorganisms%22%5BJournal%5D)">Arthropod-borne flaviviruses in pregnancy.</a> Microorganisms. 11 (2), 433(2023).</li>
<li>Benard, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+cytomegalovirus+infection+induces+leukotriene+B4+and+5-lipoxygenase+expression+in+human+placentae+and+umbilical+vein+endothelial+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Placenta%22%5BJournal%5D)">Human cytomegalovirus infection induces leukotriene B4 and 5-lipoxygenase expression in human placentae and umbilical vein endothelial cells.</a> Placenta. 35 (6), 345-350 (2014).</li>
<li>Hamilton, S. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+cytomegalovirus+induces+cytokine+changes+in+the+placenta+with+implications+for+adverse+pregnancy+outcomes%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Human cytomegalovirus induces cytokine changes in the placenta with implications for adverse pregnancy outcomes.</a> PLoS One. 7 (12), e52899(2012).</li>
<li>Tabata, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+cytomegalovirus+infection+interferes+with+the+maintenance+and+differentiation+of+trophoblast+progenitor+cells+of+the+human+placenta%5BTitle%5D)+AND+%22J+Virol%22%5BJournal%5D)">Human cytomegalovirus infection interferes with the maintenance and differentiation of trophoblast progenitor cells of the human placenta.</a> J Virol. 89 (9), 5134-5147 (2015).</li>
<li>Ribeiro, M. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Zika-virus-infected+human+full-term+placental+explants+display+pro-inflammatory+responses+and+undergo+apoptosis%5BTitle%5D)+AND+%22Arch+Virol%22%5BJournal%5D)">Zika-virus-infected human full-term placental explants display pro-inflammatory responses and undergo apoptosis.</a> Arch Virol. 163 (10), 2687-2699 (2018).</li>
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<li>Petitt, M., Tabata, T., Puerta-Guardo, H., Harris, E., Pereira, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Zika+virus+infection+of+first-trimester+human+placentas%3A+utility+of+an+explant+model+of+replication+to+evaluate+correlates+of+immune+protection+ex+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Virol%22%5BJournal%5D)">Zika virus infection of first-trimester human placentas: utility of an explant model of replication to evaluate correlates of immune protection ex vivo.</a> Curr Opin Virol. 27, 48-56 (2017).</li>
<li>Gouilly, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genotype-specific+pathogenicity+of+hepatitis+E+virus+at+the+human+maternal-fetal+interface%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Genotype-specific pathogenicity of hepatitis E virus at the human maternal-fetal interface.</a> Nat Commun. 9 (1), 4748(2018).</li>
<li>Jacquet, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+highly+potent+trimeric+derivative+of+artesunate+shows+promising+treatment+profiles+in+experimental+models+for+congenital+HCMV+infection+in+vitro+and+ex+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Antiviral+Res%22%5BJournal%5D)">A highly potent trimeric derivative of artesunate shows promising treatment profiles in experimental models for congenital HCMV infection in vitro and ex vivo.</a> Antiviral Res. 175, 104700(2020).</li>
<li>Coste Mazeau, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Potential+of+anti-CMV+immunoglobulin+Cytotect+CP+in+vitro+and+ex+vivo+in+a+first-trimester+placenta+model%5BTitle%5D)+AND+%22Microorganisms%22%5BJournal%5D)">Potential of anti-CMV immunoglobulin Cytotect CP in vitro and ex vivo in a first-trimester placenta model.</a> Microorganisms. 10 (4), 694(2022).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Amphotericin B (250 & Mikro; g/mL)</td><td>Gibco</td><td>15290026</td><td>Explantationskultur</td></tr><tr><td>Kryoröhren</td><td>Greiner</td><td>123280</td><td>Um Gewebe und Aliquoten von Supernatanten zu lagern</td></tr><tr><td>Schüssel 15 cm</td><td>Sarstedt</td><td>83.3903</td><td>Für die Sektion und Bearbeitung von Explants</td></tr><tr><td>DMEM [1X] 4,5 g/L D-Glukose mit Glutamax I, Pyr. de Sodium</td><td>Invitrogen</td><td>31966047</td><td>Explantationskultur</td></tr><tr><td>Fotales Rinderserum</td><td>Sigma</td><td>F7524</td><td>Explantierende Kultur, nicht während der Infektionsphase verwenden</td></tr><tr><td>Normocin (50 mg/mL)</td><td>Invivogen</td><td>ANT-NR-2</td><td>Explantationskultur</td></tr><tr><td>Penicillin-Streptomycin-Lösung, flüssig, (10.000 Einheiten/mL)</td><td>Invitrogen</td><td>15140122</td><td>Explantationskultur</td></tr><tr><td>Phosphatpuffer-Kochsalzlösung (PBS)</td><td>Sigma</td><td>D8537</td><td>Für Sektions- und Waschschritte</td></tr><tr><td>Edelstahl-Sezierzange, Länge 11 cm</td><td>Dutscher</td><td>5086</td><td>Für die Sektion und Bearbeitung von Explants</td></tr><tr><td>Gerade Schere mit spitzen Klingen</td><td>Dutscher</td><td>711193</td><td>Um die Zerlegung durchzuführen und Schwämme zu schneiden</td></tr><tr><td>Siebe 100 & Mikro; m</td><td>Falcon</td><td>352360</td><td>Für den Waschschritt</td></tr><tr><td>SURGIFOAM Absorbable Gelatine Schwämme nach Ethicon Size (12-7), 12/CS</td><td>Ethicon</td><td>ETH-1972</td><td>Vertrieb: Medex Supply</td></tr></tbody></table>

ex vivo kultur menschlicher plazenta-explants zur untersuchung der viralen Übertragung über die mütterlich-fetale grenzfläche

Ex vivo Culture of Human Placental Explants for the Study of Viral Transmission Across the Maternal-Fetal Interface

Ex vivo Kultur menschlicher Plazenta-Explants zur Untersuchung der viralen Übertragung über die mütterlich-fetale Grenzfläche

The placenta plays a critical role during pregnancy, enabling maternal-fetal exchange while serving as a barrier against pathogens. However, some viruses, ...

ex-vivo-culture-human-placental-explants-for-study-viral-transmission

Research

Forschung

JoVE Journal

Immunology and Infection

Immunologie und Infektion

Dieses Video zeigt die Etablierung von primären humanen Plazenta-Zotten und Dezidualorgankulturen unter ex vivo-Bedingungen. Diese Modelle eignen sich gut für die Untersuchung der Pathogenese an der Schnittstelle zwischen Mensch und Mutter-Fötus.

Etablierung von Zotten- und Dezidualorgankulturen als ex vivo Modelle der menschlichen Maternal-Fetal-Schnittstelle

Dieses Video zeigt eine Methode zur Etablierung eines Infektionsmodells in Plazentagewebe, um die Ausbreitung von Infektionen zu untersuchen. Eine ex vivo Plazenta-Organkultur wird mit Listeria monocytogenes, einem fakultativen intrazellulären Parasiten, infiziert. Die Bakterien dringen in extravillöse Trophoblasten (EVTs) ein, um in das Plazentagewebe einzudringen und sich dann über Zell-zu-Zell-Ausbreitung auf andere Zellen zu vermehren.

Eine Technik zur Etablierung eines bakteriellen Infektionsmodells in einer ex vivo Organkultur

Bestimmung der Transport von Xenobiotika und Nanomaterialien über die Plazenta mit dem<em&gt; Ex vivo</em&gt; Menschliche Plazentaperfusion Modell

Dieses Protokoll beschreibt ein Verfahren zur siRNA effizient transfizieren in frisch isolierten menschlichen villöse Zytotrophoblasten Verwendung Mikroporation und Identifizieren von DNA-Protein-Komplexe in diesen Zellen. Transfizierte Zellen können durch Western-Blot überwacht werden und EMSA-Analysen während der 4-tägigen Kulturzeit.

siRNA-Transfektion und EMSA-Analysen auf frisch isolierten menschlichen Villöse Cytotrophoblasten

Eine einfache Methode, primäre menschliche Plazenta (Villi) und dezidualen Organkulturen zu etablieren beschrieben. Villöse und dezidualen Organkulturen sind wertvolle Werkzeuge Pathogenese an der menschlichen Mutter und Fötus-Schnittstelle für das Studium. Eine Infektion mit dem Bakterium fakultativ intrazellulären Listeria monocytogenes nachgewiesen wird .

Menschliche Plazenta und Deziduale Organkulturen Infektionen zu studieren an der Maternal-fetale Schnittstelle

Hier wird ein Protokoll der ex vivo mütterlich-fetalen Gefäßperfusion vorgestellt, um die Verabreichung eines Testartikels in die mütterliche Vaskulatur zu ermöglichen und die plazentale Übertragung von xenobiotischen Partikeln oder pharmakologischen Wirkstoffen zu bewerten, zusätzlich zu den Veränderungen in Plazentale Physiologie.

Ex Vivo Perfusion der Rodent Placenta

Es wird ein Protokoll vorgestellt, um zu evaluieren, ob kleine EVs (sEVs), die aus Plazenta-Explantaten isoliert wurden, die unter hypoxischen Bedingungen kultiviert wurden (ein Aspekt der Präeklampsie modellierend), die Blut-Hirn-Schranke bei nicht schwangeren erwachsenen weiblichen Mäusen stören.

Störung der Blut-Hirn-Schranke der Maus durch kleine extrazelluläre Vesikel aus hypoxischen menschlichen Plazenta

Hier ist ein Protokoll für die Kultivierung von Plazenta-Explantaten unter konstanten Flussbedingungen. Dieser Ansatz verbessert traditionelle statische Zottenkultursysteme, indem er die Replikation dynamischer physiologischer Umgebungen ermöglicht.

Ex Vivo Plazenta-Explantat-Flow-Kultur - Nachahmung der dynamischen Bedingungen in utero

Dieses Protokoll ermöglicht die Reinigung, Charakterisierung und Kultivierung primärer HLA-G+-extravillöser Trophoblasten (EVT) aus der Decidua basalis und der chorionischen Membran menschlicher Term-Plazentas. Primäre EVT-Kulturen erhalten die Lebensfähigkeit 96 Stunden lang aufrecht, was eine Kokultivierung mit probengematchten mütterlichen Immunzellen sowie eine anschließende zytometrische und molekulare Analyse ihrer Interaktionen ermöglicht.

Reinigung von HLA-G+ -Extravillen-Trophoblasten aus menschlichen Term-Plazentageweben für Phänotypisierung und funktionelle Analyse

Die Erkenntnisse und Schlussfolgerungen in diesem Bericht sind die der Autoren und stellen nicht notwendigerweise die Ansichten der Centers for Disease Control and Prevention.

Aufbau einer Liquid-bedeckten Kultur Polarized Menschliche Airway Epithelial Calu-3-Zellen, um Host-Zell-Antwort, um Atemwegspathogene Studie<em&gt; In-vitro-</em

Lernen Sie die Kultivierung menschlicher Plazenta-Explants an der Luft-Flüssig-Grenzfläche zur Untersuchung viraler Replikation und vertikaler Übertragung. Diese Methode ermöglicht Langzeitstudien zur mütterlich-fetalen Infektion.

Ex vivo Kultur menschlicher Plazenta-Explants zur Untersuchung der viralen Übertragung über die mütterlich-fetale Grenzfläche

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