Mausmodelle der durch pathogenassoziierten molekularen Muster induzierten Epididymitis
12. Dezember 2025
Hier werden zwei verschiedene chirurgische Injektionsmodelle beschrieben, um entzündliche Reize im Anfangssegment (interstitielle Injektion) und Cauda epididymidis (intravasale Injektion) bei Mäusen auszulösen. Diese Methoden ermöglichen Untersuchungen der regionsspezifischen Reaktionen in den verschiedenen Regionen der Nebenhöhle.
Wir untersuchen die Auswirkungen von Entzündungen auf die Physiologie der Epididymis bei der männlichen Fruchtbarkeit. Präzise, kompartimentierte Injektion von Entzündungseinlösern ohne Schäden. Der Nebensächsgang in Mausmodellen erfordert eine fortgeschrittene Kombination aus chirurgischen Fähigkeiten und Ausbildung.
Zunächst legen Sie das betäubte Tier in Rückenlage auf das Operationsfeld. Mit einem elektrischen Trimmerstift führen Sie eine Trichotomie des Mäuseabdomens durch, um das Fell vollständig zu entfernen. Anschließend verwenden Sie sterile Baumwolle, die mit 0,25 % Chlorhexidinlösung getränkt ist.
Und dann mit Alkohol, um eine Bauchesepsis durchzuführen. Mit einem Skalpell Größe 15 machen Sie einen etwa vier Millimeter großen vertikalen Schnitt an der rechten Seite der Bauchwand. Trennen Sie nun vorsichtig die Haut mit schrägen stumpfen Operationszangen.
Anschließend wird mit demselben Skalpell ein weiterer etwa vier Millimeter großer vertikaler Schnitt am Peritoneum an der Seite des ersten Schnitts gemacht. Heben Sie vorsichtig die Epididymis im Hoden aus der Bauchhöhle, indem Sie vorsichtig die rechte Seite des Hodensacks drücken. Mit einer gebogenen chirurgischen Zange ziehen Sie vorsichtig das biedeldymale weiße Fettgewebe, um das Anfangssegment der Nebenhoheit zu lokalisieren.
Mit Hilfe des epididymalen weißen Fettgewebes wird das erste Segment an der Schnittstelle freigelegt. Anschließend wird die Hamilton-Spritze, vorgeladen mit der Injektionslösung, in einem Winkel von etwa 90 Grad parallel zum ersten Segment des Anfangssegments positioniert. Führe die Nadel vorsichtig in den Zwischenraum ein, wobei die Fase nach unten ausgerichtet ist.
Dann positionieren Sie die gebogene chirurgische Zange an der Nadelstichstelle und kneifen Sie vorsichtig die Epididymalkapsel und die Nadel. Langsam den Spritzenkolben abdrücken, bis die gesamte Stimuluslösung injiziert wurde. Halten Sie die gebogene chirurgische Pinzette an Ort und Stelle, entfernen Sie vorsichtig die Nadel und lösen Sie die gebogene chirurgische Zange nach etwa 30 Sekunden.
Als Nächstes werden das Hodengewebe mit dem weißen Epididymalgewebe vorsichtig in die Bauchhöhle zurückgeführt. Identifizieren Sie das Peritoneum und schließen Sie es, indem Sie zwei Nähte mit einem Nadelhalter und einer chirurgischen Naht Größe 5-0 anfertigen und den Hautschnitt mit zwei Nahtnähten schließen. Nach der Operation beobachten Sie die Maus, um eine angemessene postoperative Genesung sicherzustellen.
Nach der Verabreichung der Betäubung wird die Maus in Rückenposition auf das Operationsfeld gelegt. Legen Sie Zeigefinger und Daumen unter den Hodensack, um zu tasten und die Position der Hoden und der Nebenhoden zu bestätigen. Falls nötig, massieren Sie vorsichtig die Seiten des Bauches in Richtung Hodensack, um die Hoden und die Nebenhoden in Position zu führen.
Mit einem elektrischen Trimmerstift führen Sie eine Trichotomie des Hodensacks durch, um das Haar vollständig zu entfernen und den Bereich mit steriler Baumwolle zu desinfizieren, die in 0,25%iger Chlorhexidinlösung getränkt und anschließend mit Alkohol eingeweicht ist. Dehnen Sie mit Zeigefinger und Daumen unterhalb des Hodensacks vorsichtig die Haut des Hodensacks. Mit einem Skalpell der Größe 15 wird ein etwa zwei Millimeter großer vertikaler Schnitt im medialen Teil des Hodensacks gemacht.
Führen Sie nun vorsichtig den linken Hoden und die Nebenhöhle zurück in die Bauchhöhle, während der rechte Hoden und die Nebenhoden im Hodensack bleiben. Mit Zeigefinger und Daumen unterhalb des rechten Hoden und der Nebenhöhle halten Sie die Haut des Hodensacks sanft gestreckt. Dann öffnen und schließen Sie mit schräg, stumpfenden, chirurgischen Zwangen vorsichtig die Spitzen über der internen Samenfaszie, um die innere Samenfaszie und die vaginale Tunika zu platzen.
Als Nächstes entlasten Sie den Druck von Zeigefinger und Daumen und führen Sie die schräg geneigte chirurgische Zange durch die Öffnung der Vaginalatunika zur Basis des Hodensacks ein. Mit der Pinzette zieht man vorsichtig das distale Epididymalfett ab, um das Cauda epididymis zu lokalisieren. Lokalisieren Sie nun den Samenleiter und positionieren Sie die gerade chirurgische Zange darunter.
Setzen Sie die Bulldoggen-Pinzette auf den Samenleiter und sorgen Sie für ausreichenden Abstand zwischen der Epididymis Cauda und der Klemme. Dann wird die mit der Injektionslösung vorgeladene Hamilton-Spritze in einem Winkel von etwa 10 bis 15 Grad parallel zum Samenleiter positioniert und die Nadel mit nach oben gezeigter Fasen in den Samenleiter eingeführt. Drücken Sie vorsichtig die gerade chirurgische Pinzette, um den Samenleiter zu lösen, und drücken Sie langsam den Spritzenkolben ab, um die gesamte Stimuluslösung zu injizieren.
Jetzt entferne die gerade chirurgische Pinzette. Mit der gebogenen chirurgischen Pinzette kneifen Sie vorsichtig die Region um die Nadelstichstelle und ziehen Sie dann vorsichtig die Spritzennadel heraus. Nach etwa 30 Sekunden werden die gebogene chirurgische Pinzette und die Bulldoggen-Pinzette entfernt und die Samenleiter vorsichtig wieder in den Hodensack zurückgeführt.
Als Nächstes identifizieren Sie die vaginale Tunika und schließen sie mit einer Naht mit einem Nadelhalter und einer chirurgischen Naht in Größe 5-0. Mit dem Zeigefinger schieben Sie vorsichtig den rechten Hoden und die Nebenhoden zurück in den Bauch und bewegen Sie den linken Hoden und die Nebenhoden in den Hodensack. Schließen Sie schließlich den Schnitt in der Hodensackhaut mit zwei Nahtnähten mit einem Nadelhalter und chirurgischen Nähten Größe 5-0 und beobachten Sie die Maus, um eine ordnungsgemäße postoperative Genesung sicherzustellen.
Die interstitielle Injektion im Anfangssegment führte dazu, dass der injizierte blaue Evans-Farbstoff hauptsächlich auf Segment eins für bis zu 30 Minuten nach der Injektion beschränkt wurde und später in benachbarte Segmente des Anfangssegments und in die Epididymis diffundierte. Die intravasale Injektion in die Samenleiter beschränkte den blauen Evans-Farbstoff bis zu 30 Minuten nach der Injektion im Lumen von Segment 10. Histologische Fotomikroskopographien bestätigten, dass Kochsalzkontrollinjektionen die Epididymalmorphologie 72 Stunden nach der Behandlung nicht veränderten.
Die interstitielle LPS-Injektion im initialen Segment verursacht ein interstitielles Ödem sowie intensive interstitielle, intraepihilale und intraluminale Immunzellen infiltrieren 72 Stunden nach der Behandlung. Die intevasale Injektion von LPS oder LTA in die cauda epididymis verursachte interstitielle Ödeme, und Immunzellen infiltrieren 72 Stunden nach der Behandlung in interstitielle und intraluminale Kompartimente. Fehlende reproduzierbare Tiermodelle, die lokale Epididymalentzündungen und deren Auswirkungen auf männliche Fruchtbarkeit untersuchen.
Die direkte regionale Injektion entzündungsauslösender Chemikalien ermöglicht eine präzise Analyse regionsspezifischer Immunantworten bei Epididymis-Ergebnissen.
Sehen Sie sich das vollständige Transkript an und erhalten Sie Zugang zu Tausenden wissenschaftlicher Videos
Überblick
Dieser Artikel beschreibt zwei unterschiedliche chirurgische Injektionsmodelle zur Induktion von Entzündungsreizen in spezifischen Regionen des Nebenhodens von Mäusen. Die interstitielle Injektion zielt auf das Anfangssegment ab, während die intravasale Injektion sich auf die Schwanzregion des Nebenhodens konzentriert. Diese Methoden ermöglichen die Untersuchung regionspezifischer Reaktionen im Nebenhoden.
Wichtige Studienkomponenten
Wissenschaftsbereich
- Neurowissenschaften
- Biologie
- Entzünliche Reaktion
Hintergrund
- Das Verständnis von Entzündungsreaktionen im Nebenhoden ist entscheidend für die reproduktive Gesundheit.
- Verschiedene Regionen des Nebenhodens können unterschiedlich auf Entzündungsreize reagieren.
- Bestehende Modelle berücksichtigen möglicherweise nicht angemessen regionspezifische Reaktionen.
- Neue chirurgische Techniken können die Untersuchung dieser Reaktionen verbessern.
Zweck der Studie
- Entwicklung chirurgischer Modelle zur Untersuchung von Entzündungen im Nebenhoden.
- Vergleich der Reaktionen zwischen verschiedenen Regionen des Nebenhodens.
- Bereitstellung von Einblicken in die Mechanismen der Entzündung in reproduktiven Geweben.
Verwendete Methoden
- Interstitielle Injektion zur Induktion von Entzündungen im Anfangssegment des Nebenhodens.
- Intravasale Injektion zur Zielsetzung auf die Schwanzregion des Nebenhodens.
- Bewertung der Entzündungsreaktionen in beiden Modellen.
- Analyse der regionspezifischen Auswirkungen auf die Nebenhodenfunktion.
Hauptergebnisse
- Beide Injektionsmodelle induzierten erfolgreich Entzündungen.
- Unterschiedliche Entzündungsreaktionen wurden im Anfangssegment im Vergleich zur Schwanzregion des Nebenhodens beobachtet.
- Die Ergebnisse deuten darauf hin, dass der Nebenhoden regionspezifische Mechanismen zur Bewältigung von Entzündungen hat.
- Diese Modelle können für weitere Studien zur reproduktiven Gesundheit verwendet werden.
Schlussfolgerungen
- Die entwickelten chirurgischen Modelle sind effektiv für die Untersuchung von Entzündungen im Nebenhoden.
- Regionspezifische Reaktionen unterstreichen die Komplexität der Entzündungsprozesse in reproduktiven Geweben.
- Zukünftige Forschung kann auf diesen Erkenntnissen aufbauen, um therapeutische Interventionen zu erforschen.
Häufig gestellte Fragen
Executive Industry Relevance
Region-specific mouse models of epididymitis induced by pathogen-associated molecular patterns (PAMPs) provide a controlled platform for dissecting inflammatory mechanisms relevant to male infertility. These models enable mechanistic de-risking and target validation for interventions aimed at mitigating infection-driven reproductive dysfunction. Their strategic value lies in supporting predictive confidence for translational research and early-stage therapeutic hypothesis testing.
Strategic Applications in Biopharma R&D
Early Discovery & Target Validation
- Enables interrogation of inflammatory pathways implicated in male reproductive health.
- Supports functional target validation by isolating region-specific immune responses.
- Facilitates mechanistic de-risking for candidate targets linked to infertility.
- Provides a platform for hypothesis-driven exploration of pathogen-epididymis interactions.
Screening & Assay Development
- Establishes validated in vivo systems for quantifying inflammatory and functional endpoints.
- Supports assay standardization by enabling reproducible induction of region-specific inflammation.
- Enables quantitative assessment of sperm parameters and tissue responses.
- Prepares models for downstream compound screening targeting inflammatory mediators.
Translational & Preclinical Research
- Aligns with disease-relevant mechanisms underlying infection-induced male infertility.
- Provides continuity from mechanistic discovery to preclinical evaluation of anti-inflammatory interventions.
- Supports risk-adjusted advancement of therapeutic candidates targeting reproductive tract inflammation.
- Enables biomarker identification for translational studies in male reproductive health.
Pipeline & Workflow Integration
These mouse models position within the early discovery to preclinical continuum, enabling hypothesis testing, target validation, and translational continuity for reproductive inflammation research.
- Discovery Biology: Facilitates hypothesis-driven testing of PAMP-induced inflammatory pathways in distinct epididymal regions.
- Screening: Provides reproducible, quantitative readouts for evaluating anti-inflammatory compounds.
- Analytics: Enables measurement of region-specific inflammatory markers and sperm quality metrics.
- Translational Research: Bridges mechanistic findings to preclinical validation of therapeutic strategies for male infertility.
- Enterprise Reuse: Offers a reusable in vivo platform for diverse studies on infection-driven reproductive dysfunction.
Operational & Enterprise Impact
- Scientific Value: Increases predictive confidence and reduces mechanistic ambiguity in reproductive inflammation research.
- Operational Value: Standardizes induction and measurement of region-specific inflammatory responses.
- Strategic Value: Informs go/no-go decisions for anti-inflammatory and fertility-preserving interventions.
- Portfolio Impact: Supports risk-adjusted prioritization of reproductive health targets and candidates.
Implementation Considerations
- Requires expertise in microsurgical techniques and rodent reproductive biology.
- Demands access to animal facilities and quantitative analytical infrastructure for inflammatory and sperm metrics.
- Necessitates cross-team standardization of injection protocols and endpoint analyses.
- Adaptation to other rodent models may require protocol optimization for anatomical differences.
- Limitations include species-specific responses and the need for careful interpretation of translational relevance.
