Mausmodelle der durch pathogenassoziierten molekularen Muster induzierten Epididymitis
12. Dezember 2025
Hier werden zwei verschiedene chirurgische Injektionsmodelle beschrieben, um entzündliche Reize im Anfangssegment (interstitielle Injektion) und Cauda epididymidis (intravasale Injektion) bei Mäusen auszulösen. Diese Methoden ermöglichen Untersuchungen der regionsspezifischen Reaktionen in den verschiedenen Regionen der Nebenhöhle.
Wir untersuchen die Auswirkungen von Entzündungen auf die Physiologie der Epididymis bei der männlichen Fruchtbarkeit. Präzise, kompartimentierte Injektion von Entzündungseinlösern ohne Schäden. Der Nebensächsgang in Mausmodellen erfordert eine fortgeschrittene Kombination aus chirurgischen Fähigkeiten und Ausbildung.
Zunächst legen Sie das betäubte Tier in Rückenlage auf das Operationsfeld. Mit einem elektrischen Trimmerstift führen Sie eine Trichotomie des Mäuseabdomens durch, um das Fell vollständig zu entfernen. Anschließend verwenden Sie sterile Baumwolle, die mit 0,25 % Chlorhexidinlösung getränkt ist.
Und dann mit Alkohol, um eine Bauchesepsis durchzuführen. Mit einem Skalpell Größe 15 machen Sie einen etwa vier Millimeter großen vertikalen Schnitt an der rechten Seite der Bauchwand. Trennen Sie nun vorsichtig die Haut mit schrägen stumpfen Operationszangen.
Anschließend wird mit demselben Skalpell ein weiterer etwa vier Millimeter großer vertikaler Schnitt am Peritoneum an der Seite des ersten Schnitts gemacht. Heben Sie vorsichtig die Epididymis im Hoden aus der Bauchhöhle, indem Sie vorsichtig die rechte Seite des Hodensacks drücken. Mit einer gebogenen chirurgischen Zange ziehen Sie vorsichtig das biedeldymale weiße Fettgewebe, um das Anfangssegment der Nebenhoheit zu lokalisieren.
Mit Hilfe des epididymalen weißen Fettgewebes wird das erste Segment an der Schnittstelle freigelegt. Anschließend wird die Hamilton-Spritze, vorgeladen mit der Injektionslösung, in einem Winkel von etwa 90 Grad parallel zum ersten Segment des Anfangssegments positioniert. Führe die Nadel vorsichtig in den Zwischenraum ein, wobei die Fase nach unten ausgerichtet ist.
Dann positionieren Sie die gebogene chirurgische Zange an der Nadelstichstelle und kneifen Sie vorsichtig die Epididymalkapsel und die Nadel. Langsam den Spritzenkolben abdrücken, bis die gesamte Stimuluslösung injiziert wurde. Halten Sie die gebogene chirurgische Pinzette an Ort und Stelle, entfernen Sie vorsichtig die Nadel und lösen Sie die gebogene chirurgische Zange nach etwa 30 Sekunden.
Als Nächstes werden das Hodengewebe mit dem weißen Epididymalgewebe vorsichtig in die Bauchhöhle zurückgeführt. Identifizieren Sie das Peritoneum und schließen Sie es, indem Sie zwei Nähte mit einem Nadelhalter und einer chirurgischen Naht Größe 5-0 anfertigen und den Hautschnitt mit zwei Nahtnähten schließen. Nach der Operation beobachten Sie die Maus, um eine angemessene postoperative Genesung sicherzustellen.
Nach der Verabreichung der Betäubung wird die Maus in Rückenposition auf das Operationsfeld gelegt. Legen Sie Zeigefinger und Daumen unter den Hodensack, um zu tasten und die Position der Hoden und der Nebenhoden zu bestätigen. Falls nötig, massieren Sie vorsichtig die Seiten des Bauches in Richtung Hodensack, um die Hoden und die Nebenhoden in Position zu führen.
Mit einem elektrischen Trimmerstift führen Sie eine Trichotomie des Hodensacks durch, um das Haar vollständig zu entfernen und den Bereich mit steriler Baumwolle zu desinfizieren, die in 0,25%iger Chlorhexidinlösung getränkt und anschließend mit Alkohol eingeweicht ist. Dehnen Sie mit Zeigefinger und Daumen unterhalb des Hodensacks vorsichtig die Haut des Hodensacks. Mit einem Skalpell der Größe 15 wird ein etwa zwei Millimeter großer vertikaler Schnitt im medialen Teil des Hodensacks gemacht.
Führen Sie nun vorsichtig den linken Hoden und die Nebenhöhle zurück in die Bauchhöhle, während der rechte Hoden und die Nebenhoden im Hodensack bleiben. Mit Zeigefinger und Daumen unterhalb des rechten Hoden und der Nebenhöhle halten Sie die Haut des Hodensacks sanft gestreckt. Dann öffnen und schließen Sie mit schräg, stumpfenden, chirurgischen Zwangen vorsichtig die Spitzen über der internen Samenfaszie, um die innere Samenfaszie und die vaginale Tunika zu platzen.
Als Nächstes entlasten Sie den Druck von Zeigefinger und Daumen und führen Sie die schräg geneigte chirurgische Zange durch die Öffnung der Vaginalatunika zur Basis des Hodensacks ein. Mit der Pinzette zieht man vorsichtig das distale Epididymalfett ab, um das Cauda epididymis zu lokalisieren. Lokalisieren Sie nun den Samenleiter und positionieren Sie die gerade chirurgische Zange darunter.
Setzen Sie die Bulldoggen-Pinzette auf den Samenleiter und sorgen Sie für ausreichenden Abstand zwischen der Epididymis Cauda und der Klemme. Dann wird die mit der Injektionslösung vorgeladene Hamilton-Spritze in einem Winkel von etwa 10 bis 15 Grad parallel zum Samenleiter positioniert und die Nadel mit nach oben gezeigter Fasen in den Samenleiter eingeführt. Drücken Sie vorsichtig die gerade chirurgische Pinzette, um den Samenleiter zu lösen, und drücken Sie langsam den Spritzenkolben ab, um die gesamte Stimuluslösung zu injizieren.
Jetzt entferne die gerade chirurgische Pinzette. Mit der gebogenen chirurgischen Pinzette kneifen Sie vorsichtig die Region um die Nadelstichstelle und ziehen Sie dann vorsichtig die Spritzennadel heraus. Nach etwa 30 Sekunden werden die gebogene chirurgische Pinzette und die Bulldoggen-Pinzette entfernt und die Samenleiter vorsichtig wieder in den Hodensack zurückgeführt.
Als Nächstes identifizieren Sie die vaginale Tunika und schließen sie mit einer Naht mit einem Nadelhalter und einer chirurgischen Naht in Größe 5-0. Mit dem Zeigefinger schieben Sie vorsichtig den rechten Hoden und die Nebenhoden zurück in den Bauch und bewegen Sie den linken Hoden und die Nebenhoden in den Hodensack. Schließen Sie schließlich den Schnitt in der Hodensackhaut mit zwei Nahtnähten mit einem Nadelhalter und chirurgischen Nähten Größe 5-0 und beobachten Sie die Maus, um eine ordnungsgemäße postoperative Genesung sicherzustellen.
Die interstitielle Injektion im Anfangssegment führte dazu, dass der injizierte blaue Evans-Farbstoff hauptsächlich auf Segment eins für bis zu 30 Minuten nach der Injektion beschränkt wurde und später in benachbarte Segmente des Anfangssegments und in die Epididymis diffundierte. Die intravasale Injektion in die Samenleiter beschränkte den blauen Evans-Farbstoff bis zu 30 Minuten nach der Injektion im Lumen von Segment 10. Histologische Fotomikroskopographien bestätigten, dass Kochsalzkontrollinjektionen die Epididymalmorphologie 72 Stunden nach der Behandlung nicht veränderten.
Die interstitielle LPS-Injektion im initialen Segment verursacht ein interstitielles Ödem sowie intensive interstitielle, intraepihilale und intraluminale Immunzellen infiltrieren 72 Stunden nach der Behandlung. Die intevasale Injektion von LPS oder LTA in die cauda epididymis verursachte interstitielle Ödeme, und Immunzellen infiltrieren 72 Stunden nach der Behandlung in interstitielle und intraluminale Kompartimente. Fehlende reproduzierbare Tiermodelle, die lokale Epididymalentzündungen und deren Auswirkungen auf männliche Fruchtbarkeit untersuchen.
Die direkte regionale Injektion entzündungsauslösender Chemikalien ermöglicht eine präzise Analyse regionsspezifischer Immunantworten bei Epididymis-Ergebnissen.
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Übersicht
In diesem Artikel werden zwei unterschiedliche chirurgische Injektionsmodelle beschrieben, mit denen entzündliche Reize in spezifischen Bereichen des Nebenhodens von Mäusen ausgelöst werden können. Die interstitielle Injektion zielt auf das Anfangssegment ab, während die intravasale Injektion den Cauda epididymidis fokussiert. Diese Methoden ermöglichen die Untersuchung regionspezifischer Reaktionen im Nebenhoden.
Wesentliche Studienkomponenten
Bereich der Wissenschaft
- Neurowissenschaften
- Biologie
- Entzündliche Reaktion
Hintergrund
- Das Verständnis entzündlicher Reaktionen im Nebenhoden ist entscheidend für die Fortpflanzungsgesundheit.
- Unterschiedliche Regionen des Nebenhodens können variabel auf entzündliche Reize reagieren.
- Bestehende Modelle erfassen möglicherweise regionsspezifische Reaktionen unzureichend.
- Neuartige chirurgische Techniken können die Untersuchung dieser Reaktionen verbessern.
Zweck der Studie
- Chirurgische Modelle zur Untersuchung der Entzündung im Nebenhoden zu entwickeln.
- Reaktionen zwischen verschiedenen Regionen des Nebenhodens zu vergleichen.
- Einblicke in die Mechanismen von Entzündungen in reproduktiven Geweben zu liefern.
Verwendete Methoden
- Interstitielle Injektion zur Induktion einer Entzündung im Anfangsabschnitt des Nebenhodens.
- Intravasale Injektion zur gezielten Behandlung des Nebenhoden Schwanzes.
- Beurteilung der entzündlichen Reaktionen in beiden Modellen.
- Analyse der regionspezifischen Auswirkungen auf die Nebenhodenfunktion.
Hauptergebnisse
- Beide Injektionsmodelle induzierten erfolgreich eine Entzündung.
- Es wurden unterschiedliche entzündliche Reaktionen im Anfangsabschnitt im Vergleich zum Ductus epididymidis caudal beobachtet.
- Die Ergebnisse deuten darauf hin, dass der Nebenhoden regionsspezifische Mechanismen zur Bewältigung von Entzündungen besitzt.
- Diese Modelle können für weitere Untersuchungen zur Fortpflanzungsgesundheit verwendet werden.
Schlussfolgerungen
- Die entwickelten chirurgischen Modelle eignen sich zur Untersuchung von Entzündungen im Nebenhoden.
- Regionsspezifische Reaktionen verdeutlichen die Komplexität entzündlicher Prozesse in reproduktiven Geweben.
- Zukünftige Forschungsarbeiten können auf diesen Erkenntnissen aufbauen, um therapeutische Maßnahmen zu erforschen.
Häufig gestellte Fragen
Ausschlaggebende Bedeutung für die Industrie
Regionsspezifische Mausmodelle der Epididymitis, die durch pathogenassoziierte molekulare Muster (PAMPs) induziert werden, bieten eine kontrollierte Plattform zur Aufklärung inflammatorischer Mechanismen, die für die männliche Unfruchtbarkeit relevant sind. Diese Modelle ermöglichen die mechanistische Absicherung und Zielvalidierung von Interventionen, die darauf abzielen, infektionsbedingte reproduktive Dysfunktionen zu verringern. Ihr strategischer Wert liegt darin, die Vorhersagekraft für translationsmedizinische Forschung und die Prüfung von therapeutischen Hypothesen in frühen Entwicklungsstadien zu unterstützen.
Strategische Anwendungen in der Biopharma-Forschung und -Entwicklung
Frühe Entdeckung und Zielvalidierung
- Ermöglicht die Untersuchung entzündlicher Signalwege, die mit der männlichen Fortpflanzungsgesundheit in Verbindung gebracht werden.
- Unterstützt die funktionelle Validierung von Zielstrukturen durch die Isolierung regionspezifischer Immunantworten.
- Erleichtert die mechanistische Risikominderung für Kandidatenziele, die mit Unfruchtbarkeit assoziiert sind.
- Bietet eine Plattform für die hypothesengeleitete Erforschung von Pathogen-Epididymis-Interaktionen.
Screening und Assay-Entwicklung
- Etabliert validierte In-vivo-Systeme zur Quantifizierung entzündlicher und funktioneller Endpunkte.
- Unterstützt die Assay-Standardisierung durch reproduzierbare Induktion einer regionspezifischen Entzündung.
- Ermöglicht die quantitative Beurteilung von Spermienparametern und Gewebeantworten.
- Bereitet Modelle für die nachgeschaltete Wirkstoff-Screening-Untersuchung, die auf entzündliche Mediatoren abzielt, vor.
Translationale und präklinische Forschung
- Erfasst krankheitsrelevante Mechanismen, die der infektionsbedingten männlichen Unfruchtbarkeit zugrunde liegen.
- Bietet eine lückenlose Überleitung von der mechanistischen Entdeckung zur präklinischen Bewertung entzündungshemmender Interventionen.
- Unterstützt die risikoadjustierte Weiterentwicklung therapeutischer Kandidaten, die auf Entzündungen im Fortpflanzungstrakt abzielen.
- Ermöglicht die Identifizierung von Biomarkern für translationale Studien zur männlichen Fortpflanzungsgesundheit.
Pipeline- und Workflow-Integration
Diese Mausmodelle sind in den Bereich von der frühen Entdeckung bis zur präklinischen Phase einzuordnen und ermöglichen die Hypothesenprüfung, Zielvalidierung und translationale Kontinuität in der Forschung zur reproduktiven Entzündung.
- Entdeckungsbiologie: Ermöglicht die hypothesengeleitete Untersuchung von PAMP-induzierten entzündlichen Wegen in unterschiedlichen Nebenhodenregionen.
- Screening: Bietet reproduzierbare, quantitative Messgrößen zur Bewertung von entzündungshemmenden Substanzen.
- Analytik: Ermöglicht die Messung regionsspezifischer Entzündungsmarker und Parameter der Spermienqualität.
- Translationale Forschung: Verbindet mechanistische Erkenntnisse mit der präklinischen Validierung therapeutischer Strategien bei männlicher Unfruchtbarkeit.
- Unternehmensweite Wiederverwendung: Stellt eine wiederverwendbare In-vivo-Plattform für vielfältige Studien zu infektionsbedingten reproduktiven Funktionsstörungen bereit.
Operative und unternehmerische Auswirkungen
- Wissenschaftlicher Wert: Erhöht die Vorhersagesicherheit und verringert mechanistische Unschärfen in der Forschung zur reproduktiven Entzündung.
- Operativer Wert: Standardisiert die Induktion und Messung ortspezifischer entzündlicher Reaktionen.
- Strategischer Wert: Unterstützt Entscheidungen über die Weiterentwicklung oder Einstellung von entzündungshemmenden und fruchtbarkeitserhaltenden Interventionen.
- Portfolio-Wirkung: Ermöglicht die risikoadjustierte Priorisierung von Zielstrukturen und Kandidaten im Bereich der Fortpflanzungsgesundheit.
Durchführungsaspekte
- Erfordert Fachkenntnisse in mikrochirurgischen Techniken und der Fortpflanzungsbiologie von Nagetieren.
- Setzt Zugang zu tierexperimentellen Einrichtungen und quantitativer analytischer Infrastruktur für entzündliche Parameter und Spermienmerkmale voraus.
- Erfordert eine standardisierte Vorgehensweise zwischen verschiedenen Arbeitsgruppen hinsichtlich Injektionsprotokolle und Analysemethoden der Endpunkte.
- Die Übertragung auf andere Nagetiermodelle kann eine Optimierung der Protokolle aufgrund anatomischer Unterschiede notwendig machen.
- Zu den Einschränkungen gehören artenspezifische Reaktionen und die Notwendigkeit einer sorgfältigen Interpretation der translationalen Relevanz.
