Name: Entwicklung und Standardisierung einer ex vivo Mikromethode zur intrazellulären Quantifizierung von Vincristin in primären ALLEN Zellen mittels LC-MS/MS (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-01-23T13:30:00.000+00:00
Duration: 8 min 24 s
Description: Erfahren Sie die LC-MS/MS-Quantifizierung von Vincristin in pädiatrischen ALL-Zellen. Diese Methode ermöglicht präzise Messungen der Arzneimittelakkumulation und verbessert das therapeutische Monitoring in der klinischen Praxis.

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<ol><li>Inaba, H., Pui, C. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advances+in+the+diagnosis+and+treatment+of+pediatric+acute+lymphoblastic+leukemia%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Med%22%5BJournal%5D)">Advances in the diagnosis and treatment of pediatric acute lymphoblastic leukemia.</a> J Clin Med. 10 (9), 1926(2021).</li>
<li>Pui, C. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Childhood+acute+lymphoblastic+leukemia%3A+progress+through+collaboration%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Oncol%22%5BJournal%5D)">Childhood acute lymphoblastic leukemia: progress through collaboration.</a> J Clin Oncol. 33 (27), 2938-2948 (2015).</li>
<li>Gaudichon, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanisms+of+extramedullary+relapse+in+acute+lymphoblastic+leukemia%3A+reconciling+biological+concepts+and+clinical+issues%5BTitle%5D)+AND+%22Blood+Rev%22%5BJournal%5D)">Mechanisms of extramedullary relapse in acute lymphoblastic leukemia: reconciling biological concepts and clinical issues.</a> Blood Rev. 36, 40-56 (2019).</li>
<li>Dhyani, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anticancer+potential+of+alkaloids%3A+a+key+emphasis+on+colchicine%2C+vinblastine%2C+vincristine%2C+vindesine%2C+vinorelbine+and+vincamine%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Cell+Int%22%5BJournal%5D)">Anticancer potential of alkaloids: a key emphasis on colchicine, vinblastine, vincristine, vindesine, vinorelbine and vincamine.</a> Cancer Cell Int. 22, 206(2022).</li>
<li>Mateus, A., Matsson, P., Artursson, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rapid+measurement+of+intracellular+unbound+drug+concentrations%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Pharmaceutics%22%5BJournal%5D)">Rapid measurement of intracellular unbound drug concentrations.</a> Mol Pharmaceutics. 10 (6), 2467-2478 (2013).</li>
<li>Chien, H. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rapid+method+to+determine+intracellular+drug+concentrations+in+cellular+uptake+assays%3A+application+to+metformin+in+organic+cation+transporter+1-transfected+human+embryonic+kidney+293+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Drug+Metab+Dispos%22%5BJournal%5D)">Rapid method to determine intracellular drug concentrations in cellular uptake assays: application to metformin in organic cation transporter 1-transfected human embryonic kidney 293 cells.</a> Drug Metab Dispos. 44 (3), 356-364 (2016).</li>
<li>Calcagno, A. M., Ambudkar, S. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Analysis+of+expression+of+drug+resistance-linked+ABC+transporters+in+cancer+cells+by+quantitative+RT-PCR%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Analysis of expression of drug resistance-linked ABC transporters in cancer cells by quantitative RT-PCR.</a> Methods Mol Biol. 637, 121-132 (2010).</li>
<li>Richter, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((From+donor+to+the+lab%3A+a+fascinating+journey+of+primary+cell+lines%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Cell+Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">From donor to the lab: a fascinating journey of primary cell lines.</a> Front Cell Dev Biol. 9, 648272(2021).</li>
<li>Borgmann, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Childhood+ALL+blasts+retain+phenotypic+and+genotypic+characteristics+upon+long-term+serial+passage+in+NOD%2FSCID+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Pediatr+Hematol+Oncol%22%5BJournal%5D)">Childhood ALL blasts retain phenotypic and genotypic characteristics upon long-term serial passage in NOD/SCID mice.</a> Pediatr Hematol Oncol. 17 (8), 635-650 (2000).</li>
<li>Rosati, M. M., Corrêa, J. R., de Sousa Mariano, S., Cardoso, A., Andrés Yunes, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Murine+model+of+leukemia+relapse+to+induction+chemotherapy+for+acute+lymphoblastic+leukemia%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Murine model of leukemia relapse to induction chemotherapy for acute lymphoblastic leukemia.</a> J Vis Exp. (224), e68797(2025).</li>
<li>Dams, R., Huestis, M. A., Lambert, W. E., Murphy, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Matrix+effect+in+bioanalysis+of+illicit+drugs+with+LC-MS%2FMS%3A+influence+of+ionization+type%2C+sample+preparation%2C+and+biofluid%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Soc+Mass+Spectrom%22%5BJournal%5D)">Matrix effect in bioanalysis of illicit drugs with LC-MS/MS: influence of ionization type, sample preparation, and biofluid.</a> J Am Soc Mass Spectrom. 14 (11), 1290-1294 (2003).</li>
<li>Yang, Y., Cruickshank, C., Armstrong, M., Mahaffey, S., Reisdorph, R., Reisdorph, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+sample+preparation+approach+for+mass+spectrometry-based+profiling+of+plasma+results+in+improved+coverage+of+metabolome%5BTitle%5D)+AND+%22J+Chromatogr+A%22%5BJournal%5D)">New sample preparation approach for mass spectrometry-based profiling of plasma results in improved coverage of metabolome.</a> J Chromatogr A. 1300, 217-226 (2013).</li>
<li>Zhang, J., Dasgupta, A., Ayala, R., Bonapace, C., Kassim, S., Faustino, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Internal+standard+variability%3A+root+cause+investigation%2C+parallelism+for+evaluating+trackability+and+practical+considerations%5BTitle%5D)+AND+%22Bioanalysis%22%5BJournal%5D)">Internal standard variability: root cause investigation, parallelism for evaluating trackability and practical considerations.</a> Bioanalysis. 16 (15), 771-776 (2024).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>2,0 mL Schraubdeckel-Fläschchen</td><td>Durchflussversorgung</td><td>8-2400</td><td>Verwendet mit Glaseinsätzen mit Feder (5 x 29 mm) derselben Firma (Kat. 5-29015)</td></tr><tr><td>2,0 mL Schraubdeckel-Fläschchen</td><td>Durchflussversorgung</td><td>8-2400</td><td>Verwendet mit Glaseinsätzen mit Feder (5 x 29 mm) derselben Firma (Kat. 5-29015)</td></tr><tr><td>Acetonitril</td><td>Merck (Sigma-Aldrich)</td><td>100030</td><td></td></tr><tr><td>Acetonitril</td><td>Merck (Sigma-Aldrich)</td><td>24010152</td><td></td></tr><tr><td>ZIEL V</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>12055091</td><td></td></tr><tr><td>Chromatographisches System Acquity UPLC H-Klasse</td><td>Waters Co.</td><td>https://www.waters.com/nextgen/br/pt/products/chromatography/chromatography-systems/acquity-uplc-h-class-plus-system.html?srsltid=AfmBOoo0mjNgaucBI-Exv97cEmWE96_lVkqKi2IR0IPtA-h1feG-WvtW</td><td></td></tr><tr><td>Gräfin 3 FL</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>A49892</td><td></td></tr><tr><td>DMSO</td><td>Merck (Sigma-Aldrich)</td><td>D 8418</td><td></td></tr><tr><td>Falcon 50 mL</td><td>Sarstedt</td><td>62.547.254</td><td></td></tr><tr><td>Ameisensäure</td><td>Merck (Sigma-Aldrich)</td><td>F0507</td><td></td></tr><tr><td>Glasflasche</td><td>Merck (Sigma-Aldrich)</td><td>41121800</td><td></td></tr><tr><td>Inkubator</td><td>PHCBI</td><td>MCO-50M-PE</td><td></td></tr><tr><td>Methanol</td><td>Merck (Sigma-Aldrich)</td><td>34860</td><td></td></tr><tr><td>Mikroröhre 1,5 mL</td><td>Eppendorf</td><td>41121702</td><td></td></tr><tr><td>Mikroröhre 2,0 mL</td><td>Eppendorf</td><td>30120094</td><td></td></tr><tr><td>PBS</td><td>Merck (Sigma-Aldrich)</td><td>PPB006</td><td></td></tr><tr><td>Speevac miVac</td><td>Fisher Scientific</td><td>56340</td><td></td></tr><tr><td>Die Software zur Datenerfassung</td><td>Waters Co.</td><td>MassLynx</td><td></td></tr><tr><td>Dreifach-Quadrupol-Massenspektrometer Xevo TQ-S micro</td><td>Waters Co.</td><td>https://www.waters.com/nextgen/us/en/products/mass-spectrometry/mass-spectrometry-systems/xevo-tq-s-micro.html?srsltid=AfmBOoqqmLRNfHGqvtnwaL7xYOOEXPV3NJ9qYNH9HAwqXKXrMvLRQXSW</td><td></td></tr><tr><td>Ultraschall-Sonikator</td><td>Quimis</td><td>Q335D</td><td></td></tr><tr><td>Vinblastin 1 mg/mL</td><td>Libbs</td><td>https://www.libbs.com.br/nossos-produtos/antineoplasico-faulblastina/</td><td>Vinblastinsulfat</td></tr><tr><td>Vincristin</td><td>Cayman Chemicals</td><td>11764</td><td></td></tr></tbody></table>

entwicklung und standardisierung einer ex vivo mikromethode zur intrazellulären quantifizierung von vincristin in primären allen zellen mittels lc-ms/ms

Development and Standardization of an Ex Vivo Micromethod for Intracellular Quantification of Vincristine in Primary ALL Cells by LC-MS/MS

Repräsentative chromatografische Ergebnisse nach intrazellulären Akkumulationstests mit primären ALLEN PDX-Zellen, die mit VCR und VINB inkubiert wurden, sind in Abbildung 1 dargestellt. Die Proben wurden mit 2,5 × 106 Zellen pro Bedingung hergestellt. Unter den beschriebenen chromatografischen Bedingungen wurde der Videorekorder konstant bei 2,85 Minuten mit minimalem Matrixeffekt gehalten, und die Spitzenform war symmetrisch und gut aufgelöst. Diese Profile veranschaulichen das ...

Entwicklung und Standardisierung einer ex vivo Mikromethode zur intrazellulären Quantifizierung von Vincristin in primären ALLEN Zellen mittels LC-MS/MS

Quantifying intracellular vincristine (VCR) in primary pediatric acute lymphoblastic leukemia (ALL) cells is essential for understanding sample-specific ...

Unser Ziel ist es, intrazelluläres Vincristin in klinisch relevanten Proben zu messen und Wechselwirkungen von Arzneimittelzellen zu untersuchen. Die aktuelle experimentelle Herausforderung ist die Optimierung der Inkubationszeit im gesamten Modell. Darüber hinaus begrenzt die modellabhängige Arzneimittelanpassung die Robustheit, insbesondere in Primärpatientenproben.Zu Beginn tauen Sie die kryokonservierte Zellprobe auf, indem Sie das Fläschchen vorsichtig in einem Becher mit 15 Millilitern destilliertem Wasser bei 37 Grad Celsius schwenken, bis der Inhalt vollständig aufgetaut ist. Übertragen Sie den Inhalt des Fläschchens in ein 50-Milliliter-konisches Rohr mit 15 Millilitern sterilem 1X PBS mit einer sterilen Einweg-Pasteur-Pipette. Setze das Rohr für fünf Minuten bei Zimmertemperatur in die auf 300 G eingestellte Zentrifuge.Nach der Zentrifugation wird der Überstand durch Invertieren des Rohrs in einer einzigen gleichmäßigen Bewegung entsorgt. Nun wird das Zellpellet in 10 Millilitern AIM V Medium mit einer Einweg-Pasteur-Pipette wieder suspendiert. Zähle lebensfähige Zellen mit einem automatischen Zähler und messe die durchschnittliche Zellgröße.Berechnen Sie das benötigte Volumen, um 2,5 mal 10 hoch zur Potenz von sechs lebensfähigen Zellen mit einem einfachen Verhältnis basierend auf der gemessenen Zellkonzentration zu erhalten. Vortex die Vincristin-Fondlösung lange vor der Verwendung. Gib AIM V Medium zu einem zwei Milliliter Mikrorohr, gefolgt von 2,5 mal 10 auf die Leistung von sechs Zellen, und dann das erforderliche Volumen Vincristinlösung.Vortex kurz und das Rohr fünf Sekunden lang drehen, um Flüssigkeit aus der Kappe zu sammeln. Als Nächstes inkubieren Sie die offenen Mikroröhren bei 37 Grad Celsius mit 5 % Kohlendioxid für drei Stunden. Nach der Inkubation schließen Sie die Rohrdeckel und zentrifugieren Sie die Proben bei 300 G für fünf Minuten bei Raumtemperatur.Entsorge das Supernatant vorsichtig mit einer Pipette. Gib dann einen Milliliter PBS bei Raumtemperatur in die Tube. Nachdem Sie die Zentrifugations- und Waschschritte wiederholt haben, entfernen Sie vorsichtig alle verbleibenden Supernatanten mit einer Pipelette.Das Pellet in 100 Mikrolitern PBS und Vortex wieder suspendieren, bis das Pellet vollständig wieder suspendiert ist. Gib nun 400 Mikroliter kaltes Methanol mit 0,1 mikromolaren Vinblastin bei minus 20 Grad Celsius direkt zur Probe und vermeide dabei den Kontakt mit den Röhrenwänden. Lagern Sie die Proben über Nacht bei minus 80 Grad Celsius.Kühlen Sie die Zentrifuge auf vier Grad Celsius vor, bevor Sie die Proben aus dem Minus-80-Grad-Gefrierschrank entnehmen. Unmittelbar nach dem Herausnehmen der Proben aus dem Gefrierschrank zentrifugieren Sie sie bei 13.000 G für 20 Minuten bei vier Grad Celsius. Anschließend werden 300 Mikroliter des Supernatanten mit einer Pipette in ein 1,5-Milliliter-Mikrorohr übertragen.Trocknen Sie die Proben vollständig, indem Sie sie für eine Stunde und 40 Minuten in einen Vakuumkonzentrator mit 45 Grad Celsius legen. Nach dem Trocknen werden Sie jedes Pellet mit einer Pipette in 400 Mikrolitern Wasser mit 0,1 % Ameisensäure wieder suspendiert. Vortexen vorsichtig, bis das Pellet vollständig aufgelöst ist.Zentrifugiere die Proben jetzt erneut bei 13.000 G für 20 Minuten bei vier Grad Celsius. Übertragen Sie 300 Mikroliter des Supernatanten in ein zwei-Milliliter-Schraubfläschchen zur Flüssigkeitschromatographie-Tandem-Massenspektrometrie-Analyse. Auf dem Startbildschirm der Software öffnen Sie die Musterliste und erstellen Sie eine neue Liste, indem Sie die Probennamen, Injektionsvolumina, Fährchenpositionen und die zu verwendende Methode eingeben.Stellen Sie ein Fläschchen mit ultrareinem Wasser in das Autosampler-Tray und markieren Sie dieses Fläschchen als Leerlauf in der Probenliste. Führe die Leerlaufbahn zwischen jedem Satz dreifacher Injektionen durch, um eine Übertragung zu vermeiden. Wählen Sie die gewünschten Zeilen in der Beispielliste aus und beginnen Sie mit der Datenerfassung, indem Sie auf Ausführen klicken und mit OK bestätigen. Nach Abschluss des Durchlaufs wählen Sie eine Probe aus den Ergebnissen aus und sehen Sie sich die Chromatogramme an, indem Sie im oberen Menü auf das Chromatogramm klicken.Schließlich klickt man auf dem Startbildschirm auf Ziel-Links. Wähle die Dateien aus, die gerade ausgeführt wurden, und klicke auf Bearbeiten. Wählen Sie die Vincristine-Methode und klicken Sie auf OK, um Ausgabetabellen zu erstellen.Die chromatographische Analyse primärer akuter lymphoblastischer Leukämie, von Patienten abgeleiteter Xenograftzellen, die drei Stunden lang mit einem mikromolaren Vincristin inkubiert wurden, zeigte konstant einen symmetrischen und gut aufgelösten VCR-Peak nach 2,85 Minuten, was eine angemessene Retention und minimale Matrixinterferenz bestätigte. Kalibrierungskurven für Vincristin, die in AIM V Media erzeugt wurden, zeigten eine starke Linearität über Konzentrationen von 0,001 bis 10 Mikromolar. Ähnlich gilt: Wenn zweimal zehn hoch in die Potenz von sechs RS4 ist; Es wurden 11 Zellen hinzugefügt, eine lineare Reaktion von 0,01 auf ein Mikromolar wurde beobachtet.Die Zeitverlaufanalyse der Vincristinakkumulation ergab, dass RS4; 11 Zellen zeigten ein Plateau im Vincristin-Vinblastin-Verhältnis zwischen zwei und drei Stunden mit einem moderaten Anstieg nach vier und fünf Stunden, während primäre PDX-Zellen bei zwei Stunden ihren Höhepunkt erreichten und danach abnahmen, was die Auswahl von drei Stunden als ausgewogene Inkubationszeit unterstützte. Die normalisierte Vincristin-Akkumulation variierte über sechs PDX-Patientenproben, und es wurde eine positive Korrelation zwischen unnormalisiertem Vincristin und Vinblastin-Verhältnissen und dem durchschnittlichen Zellvolumen beobachtet. Die Fragmentierungsanalyse bestätigte, dass der Basis-Peak von Vincristin mit dem Vorläufer-Ion bei einem Masterladungsverhältnis von 413,38 entsprach, was ein Quantifizierungsion von 392,47 und eine Bestätigungsion bei 383,38 bei 40 Volt Kegelenergie und 16 Volt Kollisionsenergie erzeugte.Unser Protokoll überwindet die Einschränkungen indirekter Ansätze, indem es eine direkte und sensitive intrazelluläre Arzneimittelmessung hauptsächlich in Leukämiezellen ermöglicht. Unser Ansatz erleichtert die direkte Messung des intrazellulären Vincristin, selbst wenn die Zellstimmen gering sind. Zukünftig werden wir untersuchen, ob Unterschiede in der intrazellulären Arzneimittelakkumulation mit In-vitro-Resistenzen assoziiert sind, und verwandte Mechanismen untersuchen.

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Wir beschreiben ein Verfahren zum Verfolgen der endomembrane Bruch hervorgerufen durch die intrazelluläre...

Single Cell Messungen Vacuolar Rupture durch intrazelluläre Erreger verursacht

Metabolic Kompetenz von in vitro - Systemen ist eine wesentliche Voraussetzung für die Biotransformation und Disposition von Drogen und Giften. In diesem Protokoll beschreiben wir die Anwendung von Referenzstoffwechselsonden Phase I in Zellkulturen des Stoffwechsel zu bewerten.

Massenspektrometrie und luminogenes-basierte Ansätze zur Charakterisierung von Phase I Metabolic Competency von<em&gt; In Vitro</em&gt; Zellkulturen

Hier wurde die multispektrale bildgebende Durchflusszytometrie mit einem analytischen Merkmal, das helle Detailbilder von 3 Autophagie-Markern vergleicht und deren Co-Lokalisierung zusammen mit der LC3-Spotzählung quantifiziert, verwendet, um Autophagie objektiv, quantitativ und statistisch robust zu messen.

Assessing Autophagic Flux durch Messung von LC3, p62 und LAMP1 Co-Lokalisierung mittels Multispektral Imaging Flow Cytometry

Für den Einsatz in Verbindung mit einem Einzelsonden-Massenspektrometrie-Setup wird eine integrierte Zellmanipulationsplattform für die Online-Analyse einzelner Suspensionszellen unter Umgebungsbedingungen entwickelt.

Integrierte Zellmanipulationsplattform gekoppelt mit der Single-Sonde zur Massenspektrometrie-Analyse von Medikamenten und Metaboliten in einzelförmigen Suspensionszellen

Hier stellen wir ein Protokoll zur Kennzeichnung von extrazellulären Vesikeln aus Thrombozytenlysat vor, um ihre Migration und Aufnahme in Knorpelexplantaten zu überwachen, die als Modell für Osteoarthritis verwendet werden.

Markierung extrazellulärer Vesikel zur Überwachung der Migration und Aufnahme in Knorpelexplantaten

Dieses Manuskript beschreibt, wie die In-vivo-Immunogenität von extrazellulären Vesikeln (EVs) aus Tumorzellen mittels Durchflusszytometrie beurteilt werden kann. EVs, die von Tumoren stammen, die einem behandlungsinduzierten immunogenen Zelltod unterzogen werden, scheinen in der Tumorimmunüberwachung besonders relevant zu sein. Dieses Protokoll veranschaulicht die Beurteilung von Oxaliplatin-induzierten immunstimulierenden Tumor-EVs, kann aber an verschiedene Einstellungen angepasst werden.

Im lebenden Organismus Immunogenitätsscreening von tumorabgeleiteten extrazellulären Vesikeln durch Durchflusszytometrie von Milz-T-Zellen

Extrazelluläre Vesikel (EVs) tragen zur Zellbiologie und interzellulären Kommunikation bei. Es besteht ein Bedarf an praktischen Assays, um die Aufnahme von Elektrofahrzeugen durch die Zellen zu visualisieren und zu quantifizieren. Das aktuelle Protokoll schlägt den EV-Aufnahmeassay vor, indem eine dreidimensionale Fluoreszenzbildgebung mittels konfokaler Mikroskopie verwendet wird, nachdem die EV-Isolierung durch ein mikrofluidisches Gerät auf Nanofiltrationsbasis erfolgt.

Extrazellulärer Vesikelaufnahme-Assay mittels konfokaler Mikroskop-Bildgebungsanalyse

Hier stellen wir ein Protokoll vor, um Metaboliten in seltenen Zelltypen genau und zuverlässig zu messen. Technische Verbesserungen, darunter eine modifizierte Mantelflüssigkeit zur Zellsortierung und die Generierung relevanter Blindproben, ermöglichen eine umfassende Quantifizierung von Metaboliten mit einem Input von nur 5000 Zellen pro Probe.

Gezielte Metabolomik an seltenen Primärzellen

Dieses Protokoll beschreibt die Isolierung kleiner extrazellulärer Vesikel aus Mausskelettmuskeln und Knochenmark mittels enzymatischer Verdauung und Größenausschlusschromatographie, wodurch reproproduzierbare Rückgewinnung von vesikelangereicherten Fraktionen aus strukturell komplexen, leistungsarmen Geweben für die nachgelagerte molekulare Analyse ermöglicht wird.

Isolierung kleiner extrazellulärer Vesikel aus Mausskelettmuskulatur und Knochenmark mittels Größenausschlusschromatographie

Dieses Protokoll zeigt , wie fluoreszierend markiert, genetisch definierten klonalen Tumoren im Auge von Drosophila melanogaster / antennal Imaginalscheiben (EAD) zu erzeugen. Es beschreibt, wie der EAD und Gehirn aus dem dritten Larvenstadium zu sezieren und wie sie zu verarbeiten, zu visualisieren und zu Veränderungen der Genexpression und Tumorinvasivität quantifizieren.

Das<em&gt; Drosophila</em&gt; Imaginalscheibe Tumormodell: Visualisierung und Quantifizierung von Genexpression und Tumorinvasivität mit Genetischen Mosaiken

Erfahren Sie die LC-MS/MS-Quantifizierung von Vincristin in pädiatrischen ALL-Zellen. Diese Methode ermöglicht präzise Messungen der Arzneimittelakkumulation und verbessert das therapeutische Monitoring in der klinischen Praxis.

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