30. Dezember 2025
Diese Studie präsentiert ein Protokoll zur Etablierung eines reproduzierbaren, minimalinvasiven Rattenmodells einer durch Eisenchlorid induzierten superioren sagittalen Sinusthrombosen, wobei eine Seidennahtmethode in Kombination mit Laser-Speckle-Kontrastbildgebung und hochauflösendem Ultraschall zur Untersuchung eingesetzt wird.
In unserem Fachgebiet werden verschiedene Modellierungsmethoden für die superiore sagittale Sinusthrombose verwendet. Die Ferrikchlorid-Induktionsmethode wird jedoch aufgrund ihrer Einfachheit und niedrigen Kosten weit verbreitet verwendet. Wir wollen das mit Ferrikchlorid induzierte Modell der superioren sagittalen Sinusthrombose verfeinern, indem wir kortikale Schäden reduzieren und den Sinusthrombus visualisieren.
Zu Beginn tragen Sie eine Augensalbe auf beide Augen einer betäubten Ratte auf und rasieren Sie die Kopfhaare sorgfältig. Dann sichern Sie die Ratte mit medizinischem Klebeband in einer Bauchlage auf einer Nagetier-Operationsplattform. Halten Sie die Körpertemperatur mit einem Heizkissen bei etwa 37 Grad Celsius.
Desinfizieren Sie die rasierte Kopfhaut gründlich mit 5 % Povidon-Jod, gefolgt von 75 % Alkohol, und wiederholen Sie das jeweils dreimal. Nach Bestätigung der Anästhesietiefe durch den Zehenkneifreflex machen Sie einen 15-Millimeter-perimedianen Hautschnitt auf der Kopfhaut. Durch eine stumpfe Dissektion trennen Sie die darunterliegende Faszie und das Periost, um den Schädel vollständig freizulegen.
Dünnen Sie den Schädel mit einem Schädelbohrer, bis die obere sagittale Sinus klar freiliegt, beginnend mit der Lambda und 10 Millimeter nach vorne entlang der sagittalen Naht. Wenden Sie eine intermittierende Bohrtechnik an, um Schäden an der darunterliegenden Dura Mater und dem oberen sagittalen Sinus zu vermeiden, und bewässern Sie den Bohrer wiederholt mit normalem Kochsalzlösung, um thermische Schäden am Kortex zu vermeiden. Nach der Bildgebung der Ausgangsbedingungen wird ein 10-Millimeter-Stück 2-0 Seidennaht, das mit 40 % Eisenchloridlösung getränkt ist, für fünf Minuten auf die freiliegende obere sagittale Sinusoberfläche aufgetragen.
Ersetze die Naht durch ein frisch eingeweichtes Segment und trage weitere fünf Minuten auf. Anschließend wird das Operationsfeld dreimal mit 0,5 Millilitern Kochsalzlösung gespült, um das restliche Eisenchlorid zu entfernen. Schließen Sie die Haut mit unterbrochenen Nähten mit 4-0 Seidennaht und desinfizieren Sie die Stelle mit Povidon-Jod.
Beobachte die Ratte, bis sie vollständig wach ist, und bring sie dann zurück in ihren Käfig. Aktivieren Sie das Laser-Speckle-Kontrastbildsystem und die entsprechende Software, RF LSI Version fünf. Drücken Sie den Online-Modus-Knopf, um Live-Imaging zu aktivieren.
Stellen Sie Höhe und Position des Instruments ein, bis der Indikatorlaser im Sichtfeld zentriert ist. Setzen Sie die Ratte auf eine Schaumstoffplattform und passen Sie ihre Position an, bis der Sinus sagittalis superior mit dem Indikatorlaser ausgerichtet ist. Passen Sie die Vergrößerung und den Fokus an, bis das Bild klar dargestellt wird.
Setzen Sie die unteren und oberen Grenzen der Pseudofarbschwelle, um das visuelle Erscheinungsbild des Pseudofarbbilds zu optimieren. Setzen Sie einen kreisförmigen ROI über dem superior sagittalen Sinus, registrieren Sie den venösen Fluss und speichern Sie die Original- und Pseudocolor-Bilder. Bereiten Sie Isofluran, Ultraschallgel, Einwegrasierklingen, medizinische Klebebänder vor und überprüfen Sie alle erforderlichen Instrumente.
Installieren Sie den dreidimensionalen Aufnahmemotor am Bildgebungssystem. Dann installiere den UHF 57X-Wandler und initialisiere den Motor. Nach der Betäubung der Ratte legen Sie sie in eine Bauchlage auf die auf 37 Grad Celsius eingestellte Thermostatbildplatte und sichern Kopf und Gliedmaßen vorsichtig mit medizinischen Klebebanden.
Trage Ultraschallgel gleichmäßig auf die freiliegende Kopfhaut auf. Stellen Sie die Position und Ausrichtung der Ratte relativ zum Transducer an, bis der superior sagittale Sinus und der intraluminale Thrombus deutlich sichtbar sind. Aufnehmen Sie sequentielle tomografische Bilder des superioren sagittalen Sinus in der sagittalen Ebene mittels dreidimensionaler Bildgebung im B-Modus mit einer Schrittweite von 0,04 Millimetern, gefolgt von tomografischen Bildern in der koronalen Ebene mit denselben Einstellungen.
Verwenden Sie den Farb-Doppler-Modus, um den Blutfluss im oberen sagittalen Sinus zu beobachten, und wenden Sie den pulsierten Doppler-Modus an, um die Blutflussgeschwindigkeit zu messen. Beenden Sie die Anästhesie und beobachten Sie die Ratte, bis sie vollständig wach ist. Dann bring die Ratte zurück in ihren Käfig.
Exportieren Sie schließlich die aufgenommenen Bilder und analysieren Sie sie mit der Vevo LAB-Software. Zeichnen Sie die maximalen sagittalen und koronalen Querschnittsflächen sowie das Volumen des Thrombos im Sinus sagittalis superior sowie die maximale Durchblutungsgeschwindigkeit des Sinus. Nach lokaler Anwendung von Eisenchlorid zeigte die Laser-Speckle-Kontrastbildgebung eine signifikante Verringerung des lokalen Blutflusses im superioren sagittalen Sinus im Vergleich zum Ausgangswert.
Am postoperativen Tag sieben bestätigte der Ultraschall eines Kleintiers die Thrombusbildung in der superioren sagittalen Sinus mit partieller Luminalrekanalisation. Der pulsierte Doppler-Ultraschall zeigte eine messbare Durchblutungsgeschwindigkeit im Restlumen der superioren sagittalen Sinus. Die dreidimensionale Ultraschallbildgebung ermöglichte die volumetrische Messung des superioren sagittalen Sinusthrombus mittels serieller Bildschnitte mit einer Dicke von 0,04 Millimetern.
Unser verfeinertes Modell ist weniger invasiv und besser mit Ultraschallbildgebung kompatibel, was eine zuverlässigere, direktere therapeutische Entwicklung und Bewertung ermöglicht. Stellen Sie sicher, dass die interoperative Laser-Speckle-Kontrastbildgebung den Erfolg des Modells bestätigt und postoperativer hochauflösender Ultraschall die Thrombusbildung, Lyse und Lumenrekanalisation dynamisch überwacht.
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In diesem Artikel wird ein optimiertes Rattenmodell für die Thrombose des oberen sagittalen Sinus (SSS) mithilfe einer mit FeCl3 getränkten Nahttechnik vorgestellt. Das Protokoll minimiert kortikale Verletzungen und verbessert die Verträglichkeit mit bildgebenden Verfahren, wodurch eine reproduzierbare und minimalinvasive Plattform zur Untersuchung der zerebralen venösen Thrombose (CVT) und zur Bewertung potenzieller Therapien bereitgestellt wird.
Zuverlässige präklinische Modelle der zerebralen venösen Thrombose (CVT) sind entscheidend für die translationale Forschung und die therapeutische Bewertung in der neurovaskulären Arzneimittelforschung. Das modifizierte FeCl3-induzierte Modell der Thrombose im oberen sagittalen Sinus ermöglicht reproduzierbare, minimalinvasive und bildgebungskompatible Untersuchungen und stärkt so das Vorhersagevertrauen bei der Validierung früher Wirkstoffziele und der mechanistischen Risikominderung. Diese Plattform verbessert die Portfolio-Entscheidungsfindung, indem sie quantitative, longitudinale Daten zur Thrombusbildung und Rekanalisation bereitstellt.
Dieses Modell ist in die Entwicklungs- bis präklinische Kontinuum integriert und verbindet frühe mechanistische Studien mit der translationalen Wirksamkeitsbewertung für neurovaskuläre Indikationen.