Name: Orale Gavage bei neonatalen Mauswelpen und funktionelle Beurteilung der Integrität der Darmbarriere mittels Ussing-Kammern (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-01-09T14:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 18 s
Description: Lernen Sie orale Gavage bei neonatalen Mauswelpen und die Beurteilung der Darmbarriereintegrität mittels Ussing-Kammern. Diese Methode ermöglicht die Untersuchung molekularer Einflüsse auf die frühe Darmentwicklung.

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</ol>

<table><tbody><tr><td>10x DPBS OHNE CA & Mg</td><td>Dulbeccos</td><td>14200091</td><td></td></tr><tr><td>Anti-HRP-Antikörper</td><td>Nordisches Biosite</td><td>GTX10183</td><td>Monoklonale Maus-Meerrettichperoxidase IgG [2H11]</td></tr><tr><td>Fernrohr-Lupe</td><td>Olympus&nbsp;</td><td>SZ61</td><td>Keine Spezifikation erforderlich.</td></tr><tr><td>Schwarze 96-Wellen-Platte mit flachem Boden</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>137101</td><td>Die Platten müssen schwarz sein und an Fluoresenzwerte angepasst sein. Der Deckel muss beim Lesen abgenommen werden.</td></tr><tr><td>BSA</td><td>Merck</td><td>A4503</td><td></td></tr><tr><td>C57BL/6J-Mäuse</td><td>Charles River</td><td>632C57BL/6J&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>CaCl2</td><td>Merck</td><td>2382</td><td></td></tr><tr><td>Durchsichtige 96-Bohrloch-Klarer Flachboden-Hochbindung</td><td>Corning</td><td>9018</td><td></td></tr><tr><td>D-(+)-Glukose</td><td>Merck</td><td>G8270&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Destillierte H2O</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>D-Mannitol</td><td>Merck</td><td>M4125</td><td></td></tr><tr><td>Feine Pinzette</td><td>FST</td><td>11445-12</td><td></td></tr><tr><td>Feine Schere</td><td>FST</td><td>14058-09</td><td></td></tr><tr><td>FITC-Dextran 4Kd</td><td>FD4</td><td>TdB Labs</td><td>Empfindlich gegenüber Photodegradation.</td></tr><tr><td>Heizpolster</td><td>Minerve</td><td>20 031 01</td><td></td></tr><tr><td>HRP</td><td>Merck</td><td>P8375</td><td></td></tr><tr><td>MgCl2, 6H2O</td><td>Merck</td><td>M2670&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Milli-Q H2O</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>P2300 EasyMount Ussing-System & Kammern</td><td>Physiologische Instrumente</td><td>EM6-C-CE</td><td>Systeme, Kammern und Schieber müssen alle kompatibel sein.</td></tr><tr><td>P2306 Ussing-Kammerschieber</td><td>Physiologische Instrumente</td><td>PI-P2306</td><td>Verschiedene Modelle von Slider sind für unterschiedliche Gewebegrößen und -formen erhältlich.</td></tr><tr><td>QuantaBlu Fluorogenperoxidase-Substrat-Kit</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>15169</td><td></td></tr><tr><td>Wiederverwendbare Futternadeln Runde Spitze</td><td>FST</td><td>18061-24</td><td>24 Gauge, 1,25 mm Spitzendurchmesser, runde Spitze. Sie muss mit sterilem Wasser, 70 % Ethanol gewaschen und vor der Anwendung autoklaviert werden.</td></tr><tr><td>Natriumbicarbonat</td><td>Merck</td><td>S6297</td><td></td></tr><tr><td>Natriumcarbonat</td><td>Merck</td><td>S7795</td><td></td></tr><tr><td>Spektrophotometer</td><td>TECAN&nbsp;</td><td>Spark 10M</td><td>Ein Kennzeichenleser mit Top-Erfassung ist erforderlich, wenn die 137101 schwarzen Platten verwendet werden.</td></tr><tr><td>Tween-20</td><td>Merck</td><td>P7949</td><td></td></tr></tbody></table>

orale gavage bei neonatalen mauswelpen und funktionelle beurteilung der integrität der darmbarriere mittels ussing-kammern

Oral Gavage in Neonatal Mouse Pups and Functional Assessment of Gut Barrier Integrity Using Ussing Chambers

Standardkurven- und Brunnenkonzentrationsquantifizierung Der durchschnittliche Wert der Rohlinge wurde von jedem Brunnen der Platte abgezogen. Mit Absorptionswerten auf der Y-Achse und Konzentrationen auf der X-Achse wurde eine Standardkurve mit der Funktion "Interpolieren einer Standardkurve" aus GraphPad Prism erstellt. Wenn alle Standardpunkte ausgerichtet sind, liefert das "Linien"-Modell die besten Ergebnisse. Alternativ bietet das Modell "Sigmoidal, 4 PL, X ist Konzentration" große Flexibilität ...

Orale Gavage bei neonatalen Mauswelpen und funktionelle Beurteilung der Integrität der Darmbarriere mittels Ussing-Kammern

Growing evidence underscores the importance of the first 1,000 days of life in shaping the gut-microbiome axis. This early-life window is critical in the ...

oral-gavage-neonatal-mouse-pups-functional-assessment-gut-barrier

Research

Forschung

JoVE Journal

Biology

Biologie

Postoperativen Ileus (POI) ist eine Komplikation der Bauchchirurgie führt zu einer erhöhten Morbidität und einen längeren Krankenhausaufenthalt. Da prophylaktische oder therapeutische Strategien fehlen verstärkte Forschung notwendig ist. Deshalb haben wir eine standardisierte und machbar Mausmodell, um die Pathophysiologie von POI zu untersuchen und mögliche therapeutische Optionen zu studieren.

Functional Assessment of Darmmotilität und Darmwand Entzündung in Nagetiere: Analysen in einem standardisierten Modell der intestinalen Manipulation

Dieses Protokoll beschreibt die Verwendung von exzidierten Darmgewebepräparaten oder "Darmsäcken" als ex vivo Modell der Darmbarrierefunktion. Dieses Modell kann verwendet werden, um die Integrität sowohl der Epithelbarriere als auch der Schleimhautgelschicht an spezifischen Darmstellen in Tiermodellen für Verdauungserkrankungen zu beurteilen.

Ex vivo-Darm-Sacs zu beurteilen Durchlässigkeit der Schleimhaut in Modelle von Magen-Darm-Krankheit

Diese Studie beschreibt den Prozess der Gavaging genauen Mengen von Probiotika mit Neugeborenen Mäusen. Der Versuchsaufbau wurde optimiert, um gehören aber nicht beschränkt auf probiotische Dosierung, Methoden der Verwaltung und Quantifizierung der Bakterien im Darm.

Probiotische Studien an neugeborenen Mäusen mit Magensonde

Unter Ausnutzung der intravitalen Mikroskopie ermöglicht die hier vorgestellte Methode die Echtzeit-Visualisierung des Darmepithelzellvergießens bei lebenden Tieren. Daher wird topisch gefärbte Darmschleimhaut (Acriflavine und RhodamineB-Dextran) von anästhesierten Mäusen bis zur einzelzelligen Auflösung mittels konfokaler Mikroskopie abgebildet.

Ein intravitaler, auf Mikroskopie basierender Ansatz zur Bewertung der Darmdurchlässigkeit und der Epithelzellvergießen-Performance

Dysregulierte intestinale epitheliale Barrierefunktion und Immunantworten sind Kennzeichen entzündlicher Darmerkrankungen, die aufgrund fehlender physiologischer Modelle noch schlecht untersucht sind. Hier beschreiben wir ein Maus-Darmschleifenmodell, das ein gut vaskularisiertes und exteriorisiertes Darmsegment verwendet, um die Schleimhautpermeabilität und die Leukozytenrekrutierung in vivo zu untersuchen.

Funktionelle Beurteilung der Intestinalpermeabilität und der neutrophilen transepithelialen Migration bei Mäusen mit einem standardisierten Darmschleifenmodell

Das Darmepithel verleiht nicht nur Nährstoffaufnahme, sondern auch Schutz vor schädlichen Substanzen. Die apikal-epithelste interzelluläre Verbindung, d. h. die Tight Junction, reguliert die parazelluläre Durchlässigkeit von gelösten Stoffen und Ionen. Hier wird ein Protokoll zur Herstellung von Schleimhautblättern und zur Beurteilung der Ionenselektivität von Tight Junctions mittels Ussing-Kammertechnik beschrieben.

Funktionelle Beurteilung der intestinalen Tight-Junction-Barriere und der Ionenpermeabilität im heimischen Gewebe durch Ussing-Chamber-Technik

Nekrotisierende Enterokolitis (NEC) ist die schwerste gastrointestinale (GI) Erkrankung, die häufig bei Frühgeborenen auftritt, insbesondere bei Säuglingen mit sehr niedrigem Geburtsgewicht, mit hoher Mortalität und unklarer Pathogenese. Die Ursache von NEC kann mit entzündlichen Anomalien des Immunregulationssystems zusammenhängen. Ein NEC-Tiermodell ist ein unverzichtbares Werkzeug für die Immunforschung von NEC-Erkrankungen. NEC-Tiermodelle verwenden normalerweise C57BL/6J-Neugeborenenmäuse;...

Ein neonatales BALB/c-Mausmodell der nekrotisierenden Enterokolitis

Um zu untersuchen, wie der Dünndarm mit Partikeln unterschiedlicher Größe umgeht, haben wir eine etablierte in vivo-Methode zur Bestimmung des Dünndarmtransits modifiziert.

Untersuchung der Mechanosensorik von luminalen Partikeln im murinen Dünndarm

In der vorliegenden Studie wird Fluorescein-Isothiocyanat-markiertes (FITC) Dextran Mäusen über eine orale Sonde verabreicht, um die Darmpermeabilität sowohl in vivo als auch in Plasma- und Kotproben zu bewerten. Da die Barrierefunktion des Darms bei vielen Krankheitsprozessen beeinträchtigt ist, kann dieser direkte und quantitative Assay in verschiedenen Forschungsbereichen eingesetzt werden.

Beurteilung der Integrität der Darmbarriere bei Mäusen unter Verwendung von Fluorescein-Isothiocyanat-markiertem Dextran

Dieses Protokoll skizziert ein neonatales Mausmodell der nekrotisierenden Enterokolitis (NEC) und die anschließende Isolierung von Immunzellen der Lamina propria aus dem neonatalen Dünndarm der Maus.

Ein neonatales Mausmodell der nekrotisierenden Enterokolitis und der Isolierung von Lamina propria für die Erstellung von Immunzellprofilen

Ziel dieses Protokolls ist es, einen standardisierten Ansatz zur quantitativen Bewertung der Integrität der murinen gingivalen Epithelbarriere zu bieten, indem fluoreszenzmarkierte Dextrans unterschiedlicher Molekülgröße in vivo auf die Gingivaloberfläche topisch aufgetragen werden, gefolgt von einer ex-vivo-Bildgebung mit einem Einzelphotonenmikroskopiesystem.

Funktionelle Beurteilung der Maus-Gingival-Epithelbarriere mit fluoreszierenden Traceren

Lernen Sie orale Gavage bei neonatalen Mauswelpen und die Beurteilung der Darmbarriereintegrität mittels Ussing-Kammern. Diese Methode ermöglicht die Untersuchung molekularer Einflüsse auf die frühe Darmentwicklung.

Orale Gavage bei neonatalen Mauswelpen und funktionelle Beurteilung der Integrität der Darmbarriere mittels Ussing-Kammern

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