Name: Funktionelle Beurteilung der Maus-Gingival-Epithelbarriere mit fluoreszierenden Traceren (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-02-27T13:35:00.000+00:00
Duration: 7 min
Description: Erfahren Sie eine Methode zur funktionellen Beurteilung der Gingivaepithelbarriere bei Mäusen mit fluoreszierenden Dextranen. Dieses Protokoll ermöglicht die Quantifizierung der Barrierenintegrität für Studien zur oralen Entzündung und Wundheilung.

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<ol><li>Zhang, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Study+on+the+protection+of+gingival+epithelial+barrier+by+interleukin-22+through+regulating+microbiota+and+E-cadherin+expression%5BTitle%5D)+AND+%22Zhonghua+Kou+Qiang+Yi+Xue+Za+Zhi%22%5BJournal%5D)">Study on the protection of gingival epithelial barrier by interleukin-22 through regulating microbiota and E-cadherin expression.</a> Zhonghua Kou Qiang Yi Xue Za Zhi. 59 (7), 653-662 (2024).</li>
<li>Presland, R. B., Jurevic, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Making+sense+of+the+epithelial+barrier%3A+what+molecular+biology+and+genetics+tell+us+about+the+functions+of+oral+mucosal+and+epidermal+tissues%5BTitle%5D)+AND+%22J+Dent+Educ%22%5BJournal%5D)">Making sense of the epithelial barrier: what molecular biology and genetics tell us about the functions of oral mucosal and epidermal tissues.</a> J Dent Educ. 66 (4), 564-574 (2002).</li>
<li>Costello, E. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bacterial+community+variation+in+human+body+habitats+across+space+and+time%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Bacterial community variation in human body habitats across space and time.</a> Science. 326 (5960), 1694-1697 (2009).</li>
<li>Aas, J. A., Paster, B. J., Stokes, L. N., Olsen, I., Dewhirst, F. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Defining+the+normal+bacterial+flora+of+the+oral+cavity%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Defining the normal bacterial flora of the oral cavity.</a> J Clin Microbiol. 43 (11), 5721-5732 (2005).</li>
<li>Meyle, J., Chapple, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+aspects+of+the+pathogenesis+of+periodontitis%5BTitle%5D)+AND+%22Periodontol+2000%22%5BJournal%5D)">Molecular aspects of the pathogenesis of periodontitis.</a> Periodontol 2000. 69 (1), 7-17 (2015).</li>
<li>Oriuchi, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Porphyromonas+gingivalis+lipopolysaccharide+damages+mucosal+barrier+to+promote+gastritis-associated+carcinogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Dig+Dis+Sci%22%5BJournal%5D)">Porphyromonas gingivalis lipopolysaccharide damages mucosal barrier to promote gastritis-associated carcinogenesis.</a> Dig Dis Sci. 69 (1), 95-111 (2024).</li>
<li>Takeuchi, H., Nakamura, E., Yamaga, S., Amano, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Porphyromonas+gingivalis+infection+induces+lipopolysaccharide+and+peptidoglycan+penetration+through+gingival+epithelium%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Oral+Health%22%5BJournal%5D)">Porphyromonas gingivalis infection induces lipopolysaccharide and peptidoglycan penetration through gingival epithelium.</a> Front Oral Health. 3, 845002(2022).</li>
<li>Abe, T., Hajishengallis, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimization+of+the+ligature-induced+periodontitis+model+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Immunol+Methods%22%5BJournal%5D)">Optimization of the ligature-induced periodontitis model in mice.</a> J Immunol Methods. 394 (1-2), 49-54 (2013).</li>
<li>Chatterjee, A., Bhattacharya, H., Kandwal, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Probiotics+in+periodontal+health+and+disease%5BTitle%5D)+AND+%22J+Indian+Soc+Periodontol%22%5BJournal%5D)">Probiotics in periodontal health and disease.</a> J Indian Soc Periodontol. 15 (1), 23-28 (2011).</li>
<li>Shin, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Photon-efficient+imaging+with+a+single-photon+camera%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Photon-efficient imaging with a single-photon camera.</a> Nat Commun. 7, 12046(2016).</li>
<li>Yang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeting+endothelial+tight+junctions+to+predict+and+protect+thoracic+aortic+aneurysm+and+dissection%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+Heart+J%22%5BJournal%5D)">Targeting endothelial tight junctions to predict and protect thoracic aortic aneurysm and dissection.</a> Eur Heart J. 44 (14), 1248-1261 (2023).</li>
<li>Cai, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Foxf1+maintains+endothelial+barrier+function+and+prevents+edema+after+lung+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Signal%22%5BJournal%5D)">Foxf1 maintains endothelial barrier function and prevents edema after lung injury.</a> Sci Signal. 9 (424), ra40(2016).</li>
<li>Hou, A., Mohamed Ali, S., Png, E., Hunziker, W., Tong, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transglutaminase-2+is+critical+for+corneal+epithelial+barrier+function+via+positive+regulation+of+claudin-1%5BTitle%5D)+AND+%22Ocul+Surf%22%5BJournal%5D)">Transglutaminase-2 is critical for corneal epithelial barrier function via positive regulation of claudin-1.</a> Ocul Surf. 28, 155-164 (2023).</li>
<li>Kitsuki, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enhanced+junctional+epithelial+permeability+in+trpv4-deficient+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Periodontal+Res%22%5BJournal%5D)">Enhanced junctional epithelial permeability in trpv4-deficient mice.</a> J Periodontal Res. 55 (1), 51-60 (2020).</li>
<li>Chen, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Porphyromonas+gingivalis+impairs+oral+epithelial+barrier+through+targeting+grhl2%5BTitle%5D)+AND+%22J+Dent+Res%22%5BJournal%5D)">Porphyromonas gingivalis impairs oral epithelial barrier through targeting grhl2.</a> J Dent Res. 98 (10), 1150-1158 (2019).</li>
<li>Lemaitre, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Periodontal+tissue+regeneration+using+syngeneic+adipose-derived+stromal+cells+in+a+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cells+Transl+Med%22%5BJournal%5D)">Periodontal tissue regeneration using syngeneic adipose-derived stromal cells in a mouse model.</a> Stem Cells Transl Med. 6 (2), 656-665 (2017).</li>
<li>Takahashi, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gingival+epithelial+barrier%3A+regulation+by+beneficial+and+harmful+microbes%5BTitle%5D)+AND+%22Tissue+Barriers%22%5BJournal%5D)">Gingival epithelial barrier: regulation by beneficial and harmful microbes.</a> Tissue Barriers. 7 (3), e1651158(2019).</li>
<li>Ye, P., Chapple, C. C., Kumar, R. K., Hunter, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expression+patterns+of+E-cadherin%2C+involucrin%2C+and+connexin+gap+junction+proteins+in+the+lining+epithelia+of+inflamed+gingiva%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pathol%22%5BJournal%5D)">Expression patterns of E-cadherin, involucrin, and connexin gap junction proteins in the lining epithelia of inflamed gingiva.</a> J Pathol. 192 (1), 58-66 (2000).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>40 kDa FITC-markiertes Dextran</td><td>Sigma Aldrich</td><td>78331</td><td></td></tr><tr><td>70 kDa Rhodamin B-markiertes Dextran</td><td>Sigma Aldrich</td><td>R9379</td><td></td></tr><tr><td>Blunte Gewebetrennung Nickel</td><td>Bejinghuabo Company</td><td>NZW28</td><td></td></tr><tr><td>Carboxymethylcellulose</td><td>MREDA</td><td>M049898</td><td></td></tr><tr><td>Einmalige sterile Spritze</td><td>Zhiyu Company</td><td></td><td>1 mL</td></tr><tr><td>ImageJ-Software</td><td>National Institutes of Health</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Mikrotuben</td><td>Axygen</td><td>MCT-150-C</td><td>1,5 mL</td></tr><tr><td>NIS-Elements AR Bildsoftware</td><td>Nikon</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Phosphat gepufferte Kochsalzlösung 1x</td><td>Servicebio</td><td>G4207-500</td><td></td></tr><tr><td>Einphotonenmikroskop Nikon A1 MP+</td><td>Nikon</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Gewebeschere</td><td>Bejinghuabo Company</td><td>M286-05</td><td></td></tr></tbody></table>

funktionelle beurteilung der maus-gingival-epithelbarriere mit fluoreszierenden traceren

Functional Assessment of Mouse Gingival Epithelial Barrier Using Fluorescent Tracers

Funktionelle Beurteilung der Maus-Gingival-Epithelbarriere mit fluoreszierenden Traceren

The gingival epithelial barrier serves as a critical frontline defense in oral immunity and homeostasis. An intact epithelial barrier effectively prevents ...

functional-assessment-mouse-gingival-epithelial-barrier-using

Research

Forschung

JoVE Journal

Biology

Biologie

Die endotheliale Glykokalyx / endothelial Oberflächenschicht ist ideal studiert mit Intravitalmikroskopie. Intravitalmikroskopie ist technisch anspruchsvoll in einem sich bewegenden Organ wie der Lunge. Wir zeigen, wie die gleichzeitige Hellfeld und Fluoreszenzmikroskopie verwendet werden, um Endotheloberfläche Schichtdicke in einem frei beweglichen...

In vivo Messung der Maus Pulmonary Endothelial Surface Layer

Hier präsentieren wir einen Maus Gehirn vaskulären Permeabilität Assay mit intraperitonealer Injektion von Fluoreszenz Tracer gefolgt von Perfusion, die auf Tiermodelle der Blut - Hirn-Schranke Dysfunktion anwendbar ist. Ein Hemi-Gehirn dient zur Durchlässigkeit quantitativ bewerten und die andere für die Tracer Visualisierung/Immunostaining. Der Eingriff dauert ca. 5-6 h für 10 Mäuse.

Eine In Vivo Blut - Hirn-Schranke Permeabilität Assay bei Mäusen mit Gewebekulturen beschriftet Tracer

Unter Ausnutzung der intravitalen Mikroskopie ermöglicht die hier vorgestellte Methode die Echtzeit-Visualisierung des Darmepithelzellvergießens bei lebenden Tieren. Daher wird topisch gefärbte Darmschleimhaut (Acriflavine und RhodamineB-Dextran) von anästhesierten Mäusen bis zur einzelzelligen Auflösung mittels konfokaler Mikroskopie abgebildet.

Ein intravitaler, auf Mikroskopie basierender Ansatz zur Bewertung der Darmdurchlässigkeit und der Epithelzellvergießen-Performance

Hier beschreiben wir die Herstellung von humanen Organoid-abgeleiteten intestinalen Epithel-Monolayern zur Untersuchung der Darmbarrierefunktion, Permeabilität und des Transports. Da Organoide die ursprüngliche Reaktion des Epithelgewebes auf äußere Reize darstellen, kombinieren diese Modelle die Vorteile der Erweiterbarkeit von Zelllinien und die Relevanz und Komplexität von Primärgewebe.

Organoid-abgeleitete Epithel-Monolayer: Ein klinisch relevantes In-vitro-Modell für die Darmbarrierefunktion

Dysregulierte intestinale epitheliale Barrierefunktion und Immunantworten sind Kennzeichen entzündlicher Darmerkrankungen, die aufgrund fehlender physiologischer Modelle noch schlecht untersucht sind. Hier beschreiben wir ein Maus-Darmschleifenmodell, das ein gut vaskularisiertes und exteriorisiertes Darmsegment verwendet, um die Schleimhautpermeabilität und die Leukozytenrekrutierung in vivo zu untersuchen.

Funktionelle Beurteilung der Intestinalpermeabilität und der neutrophilen transepithelialen Migration bei Mäusen mit einem standardisierten Darmschleifenmodell

Im vorliegenden Protokoll wurde die endotheliale Barrierefunktion der submandibulären Drüse (SMG) durch Injektion verschiedener molekulargewichteter Fluoreszenztracer in die Winkelvenen von Versuchstiermodellen in vivo unter einem Zwei-Photonen-Laser-Scanning-Mikroskop bewertet.

Im lebenden Organismus Nachweis der vaskulären Permeabilität in der submandibulären Drüse der Maus

In der vorliegenden Studie wird Fluorescein-Isothiocyanat-markiertes (FITC) Dextran Mäusen über eine orale Sonde verabreicht, um die Darmpermeabilität sowohl in vivo als auch in Plasma- und Kotproben zu bewerten. Da die Barrierefunktion des Darms bei vielen Krankheitsprozessen beeinträchtigt ist, kann dieser direkte und quantitative Assay in verschiedenen Forschungsbereichen eingesetzt werden.

Beurteilung der Integrität der Darmbarriere bei Mäusen unter Verwendung von Fluorescein-Isothiocyanat-markiertem Dextran

Die Ex-vivo-Live-Bildgebung ist eine leistungsfähige Technik zur Untersuchung der dynamischen Prozesse zellulärer Bewegungen und Interaktionen in lebendem Gewebe. Hier stellen wir ein Protokoll vor, das die Zwei-Photonen-Mikroskopie implementiert, um dentale Epithelzellen in kultivierten ganzen erwachsenen Mausschneidezähnen live zu verfolgen.

Verwendung von Ex-vivo-Live-Bildgebung zur Untersuchung von Zellteilungen und -bewegungen während der Zahnerneuerung von Mäusen

Wir beschreiben eine zuverlässige Methode zur Immunolokalisation in der Epidermis sowohl für gefrorene und Paraffinschnitte, die wir verwenden sehr routinemäßig in unserem Labor modifiziert.

Immunhistochemie auf Paraffinschnitten von Mouse Epidermis unter Verwendung von fluoreszierenden Antikörper

Dieses Video zeigt Techniken für die Kennzeichnung von menschlichen embryonalen Stammzellen und mesenchymalen Stammzellen mit fluoreszierenden Farbstoffen. Diese Technik kann für eine in vivo Verfolgung der transplantierten Stammzellen mit optischen Bildgebung und zur histopathologischen Korrelation mit Fluoreszenzmikroskopie eingesetzt werden.

Labeling Stammzellen mit fluoreszierenden Farbstoffen zur nicht-invasiven Detektion mit Optical Imaging

Erfahren Sie eine Methode zur funktionellen Beurteilung der Gingivaepithelbarriere bei Mäusen mit fluoreszierenden Dextranen. Dieses Protokoll ermöglicht die Quantifizierung der Barrierenintegrität für Studien zur oralen Entzündung und Wundheilung.

Funktionelle Beurteilung der Maus-Gingival-Epithelbarriere mit fluoreszierenden Traceren

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