Name: Superauflösende Bildgebung und gemeinsames Management: Ein Protokoll für konfokale Mikroskopie mit Multiplex-Detektion (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-02-24T14:10:00.000+00:00
Duration: 7 min 42 s
Description: Erfahren Sie ein Protokoll zur konfokalen Superauflösungsmikroskopie mit Multiplex-Detektion für hochaufgelöste Zellbildgebung. Diese Methode ermöglicht etwa 120 nm Auflösung bei lebenden und fixierten Zellen.

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<ol><li>Prakash, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Resolution+in+super-resolution+microscopy+-+definition%2C+trade-offs+and+perspectives%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Mol+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Resolution in super-resolution microscopy - definition, trade-offs and perspectives.</a> Nat Rev Mol Cell Biol. 25, 677-682 (2024).</li>
<li>Schermelleh, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Super-resolution+microscopy+demystified%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Super-resolution microscopy demystified.</a> Nat Cell Biol. 21, 72-84 (2019).</li>
<li>Bond, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Technological+advances+in+super-resolution+microscopy+to+study+cellular+processes%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Cell%22%5BJournal%5D)">Technological advances in super-resolution microscopy to study cellular processes.</a> Mol Cell. 82, 315-332 (2022).</li>
<li>Huff, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+new+2D+super-resolution+mode+for+ZEISS+Airyscan%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">The new 2D super-resolution mode for ZEISS Airyscan.</a> Nat Methods. 14, 1223(2017).</li>
<li>Wu, X., Hammer, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ZEISS+Airyscan%3A+Optimizing+Usage+for+Fast+Gentle%2C+Super-Resolution+Imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">ZEISS Airyscan: Optimizing Usage for Fast Gentle, Super-Resolution Imaging.</a> Methods Mol Biol. 2304, 111-130 (2021).</li>
<li>Yin, W., Liu, S. S., Zhao, Q. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimization+strategy+for+fast+super-resolution+imaging+parameters+based+on+LSM+900%5BTitle%5D)+AND+%22Chin+J+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Optimization strategy for fast super-resolution imaging parameters based on LSM 900.</a> Chin J Cell Biol. 47, 1644-1655 (2025).</li>
<li>Moore, A. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Actin+cables+and+comet+tails+organize+mitochondrial+networks+in+mitosis%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Actin cables and comet tails organize mitochondrial networks in mitosis.</a> Nature. 591, 659-664 (2021).</li>
<li>Ranjan, R., Chen, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Super-resolution+live+cell+imaging+of+subcellular+structures%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Super-resolution live cell imaging of subcellular structures.</a> J Vis Exp. (167), e61563(2021).</li>
<li>Harmer, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Airyscan+super+resolution+microscopy+to+study+trypanosomatid+cell+biology%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Airyscan super resolution microscopy to study trypanosomatid cell biology.</a> Methods Mol Biol. 2116, 449-461 (2020).</li>
<li>Lin, M. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advanced+functions+and+management+of+laser+scanning+confocal+microscopy+LSM880+with+Airyscan%5BTitle%5D)+AND+%22J+Chin+Electron+Microsc+Soc%22%5BJournal%5D)">Advanced functions and management of laser scanning confocal microscopy LSM880 with Airyscan.</a> J Chin Electron Microsc Soc. 38, 271-275 (2019).</li>
<li>Li, H. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparative+study+on+imaging+characteristics+and+applications+of+LSCM880+with+Airyscan+and+spinning+disk+confocal+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Technol+Innov+Appl%22%5BJournal%5D)">Comparative study on imaging characteristics and applications of LSCM880 with Airyscan and spinning disk confocal microscopy.</a> Technol Innov Appl. 32, 4-8 (2020).</li>
<li>Huff, J., Bergter, A., Luebbers, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multiplex+mode+for+the+LSM+9+series+with+Airyscan+2%3A+fast+and+gentle+confocal+super-resolution+in+large+volumes%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">Multiplex mode for the LSM 9 series with Airyscan 2: fast and gentle confocal super-resolution in large volumes.</a> Nat Methods. 16, 1159-1163 (2019).</li>
<li>Chen, C. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Depletion+of+Vasohibin+1+speeds+contraction+and+relaxation+in+failing+human+cardiomyocytes%5BTitle%5D)+AND+%22Circ+Res%22%5BJournal%5D)">Depletion of Vasohibin 1 speeds contraction and relaxation in failing human cardiomyocytes.</a> Circ Res. 127, 14-27 (2020).</li>
<li>Sandin, J. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Near+simultaneous+laser+scanning+confocal+and+atomic+force+microscopy+%28conpokal%29+on+live+cells%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Near simultaneous laser scanning confocal and atomic force microscopy (conpokal) on live cells.</a> J Vis Exp. (162), e61433(2020).</li>
<li>Castagnini, D., Palma, K., Jara Wilde, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Super-resolution+Imaging+of+Proteus+mirabilis+biofilm+by+expansion+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Super-resolution Imaging of Proteus mirabilis biofilm by expansion microscopy.</a> J Vis Exp. (221), e67932(2025).</li>
<li>Wolf, D. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Method+for+live-cell+super-resolution+imaging+of+mitochondrial+cristae+and+quantification+of+submitochondrial+membrane+potentials%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Method for live-cell super-resolution imaging of mitochondrial cristae and quantification of submitochondrial membrane potentials.</a> Methods Cell Biol. 155, 545-555 (2020).</li>
<li>Wu, Z. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Near-infrared+perylene+carboximide+fluorophores+for+live-cell+super-resolution+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Chem+Soc%22%5BJournal%5D)">Near-infrared perylene carboximide fluorophores for live-cell super-resolution imaging.</a> J Am Chem Soc. 146, 7135-7139 (2024).</li>
<li>Pfanzelter, J., Mostowy, S., Way, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Septins+suppress+the+release+of+vaccinia+virus+from+infected+cells%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Septins suppress the release of vaccinia virus from infected cells.</a> J Cell Biol. 217, 2911-2929 (2018).</li>
<li>Kolossov, V. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Airyscan+super-resolution+microscopy+of+mitochondrial+morphology+and+dynamics+in+living+tumor+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Microsc+Res+Tech%22%5BJournal%5D)">Airyscan super-resolution microscopy of mitochondrial morphology and dynamics in living tumor cells.</a> Microsc Res Tech. 81, 115-128 (2018).</li>
<li>He, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Renal+macrophages+monitor+and+remove+particles+from+urine+to+prevent+tubule+obstruction%5BTitle%5D)+AND+%22Immunity%22%5BJournal%5D)">Renal macrophages monitor and remove particles from urine to prevent tubule obstruction.</a> Immunity. 57, 106-123 (2024).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>&nbsp; COS7-Zellen</td><td>ATCC (oder ähnlich)</td><td>CRL-1651</td><td>Afrikanische grüne Affen-Nieren-Fibroblast-Zelllinie. Verwendet zur Herstellung von Proben mit festen Zellen für mehrfarbige Superauflösungsbildgebung&nbsp;</td></tr><tr><td>&nbsp; Esel-Antimaus-IgG, Alexa Fluor 568 konjugiert</td><td>Invitrogen (oder ähnlich)</td><td>A10037</td><td>Sekundärer Antikörper gegen Mikrotubuli-Färbung. Verwendet bei 1:500 Verdünnung</td></tr><tr><td>&nbsp; Dulbecco' s modifiziertes Adlermedium (DMEM), hoher Glukosespiegel</td><td>Gibco (oder ähnlich)</td><td>11965092</td><td>Standardkulturmedium für COS7-Zellen, ergänzt mit 10 % FBS.</td></tr><tr><td>&nbsp; Fetales Rinderserum (FBS), hitzeinaktiviert</td><td>Gibco (oder ähnlich)</td><td>10082147</td><td>Serumpräparat wird mit 10 % (v/v) in allen Zellkulturmedien verwendet.</td></tr><tr><td>&nbsp; Glasboden-Bildbildschüssel (35 mm, &micro-Dish, #1,5 Polymer-Deckmantel, 0,17 mm Dicke)</td><td>Ibidi (oder ähnlich)</td><td>81156</td><td>Substrat für Zellbeschichtung und Bildgebung. Entscheidend für die Kompatibilität mit Hoch-NA-Ölimmersionsobjektiven.</td></tr><tr><td>&nbsp; Bildverarbeitung & Analysesoftware (ZEN-Module)</td><td>Carl Zeiss AG</td><td>ZEN 3.5 (blau)</td><td>Verwendet für 3D-Rekonstruktion, Superauflösungsverarbeitung (z. B. Airyscan-Verarbeitung), PSF-Messung und SNR-Analyse.</td></tr><tr><td>&nbsp; ImageJ / Fiji</td><td>Open Source</td><td>N/A</td><td>Verwendet für zusätzliche 3D-Rekonstruktion, Erzeugung orthogonaler Ansichten und allgemeine Bildanalyse.</td></tr><tr><td>&nbsp; Immersionsöl (Brechungsindex = 1,518)</td><td>Carl Zeiss (oder ähnlich)</td><td>444960-0000-000</td><td>Für den Einsatz mit Ölimmersionsobjektiven (z. B. 63x/1,4 NA).</td></tr><tr><td>&nbsp; Laser-scannendes konfokales Mikroskopsystem mit Multiplex-Array-Detektor (z. B. ZEISS LSM 900 mit Airyscan 2)</td><td>Carl Zeiss AG</td><td>LSM 900 (Airyscan 2)</td><td>Die primäre Bildverarbeitungsplattform, die für alle im Protokoll beschriebenen Konfokal- und Superauflösungsmodi verwendet wird.</td></tr><tr><td>&nbsp; Minimum Essential Medium (MEM) mit Earle' s Salts</td><td>Gibco (oder ähnlich)</td><td>11095080</td><td>Standardkulturmedium für Hep3B-Zellen, ergänzt mit 10 % FBS.</td></tr><tr><td>&nbsp; Maus anti-&alpha;-tubulin monoklonaler Antikörper (Klon DM1A)</td><td>Sigma-Aldrich (oder ähnlich)</td><td>T6199</td><td>Primärer Antikörper zur Markierung von Mikrotubuli. Verwendet bei 1:500 Verdünnung</td></tr><tr><td>&nbsp; Paraformaldehyd (PFA), 4 % in PBS</td><td>&nbsp; Jinpan&nbsp; (oder ähnlich)</td><td>TBS5083</td><td>Fixativ für Zellen. 15 Minuten bei Zimmertemperatur verwenden. Behandle sie mit angemessenen Vorsichtsmaßnahmen.</td></tr><tr><td>&nbsp; Phenol-rotfreies Bildgebungsmedium</td><td>Gibco (oder ähnlich)</td><td>21063029</td><td>Low-Autofluoreszenzmedium, das für die Live-Cell-Bildgebung verwendet wird. Vorausgeglichen mit 5 % CO2 bei 37 °C; C vor der Nutzung.</td></tr><tr><td>&nbsp; Phosphatgepufferte Kochsalzlösung (PBS), 1X, pH 7,4</td><td>CellWorld (oder ähnlich)</td><td>C0162-311</td><td>Wird während des gesamten Protokolls als Wasch- und Verdünnungspuffer verwendet.</td></tr><tr><td>&nbsp; ProLong-Gold-Antifade-Mountant</td><td>Invitrogen (oder ähnlich)</td><td>P36930</td><td>Gehärtetes Montagemedium zur Erhaltung der Fluoreszenz in festen Proben.</td></tr><tr><td>&nbsp; Triton X-100</td><td>Sigma-Aldrich (oder ähnlich)</td><td>T8787</td><td>Verwendet mit 0,1 % (v/v) zur Zellpermeabilisierung</td></tr><tr><td>&nbsp; Tween-20</td><td>Sigma-Aldrich (oder ähnlich)</td><td>P9416</td><td>Verwendet mit 0,05 % (v/v) in PBS (PBST) für Waschschritte nach Antikörperinkubationen.</td></tr><tr><td>Rinderserumalbumin (BSA), Fraktion V</td><td>Sigma-Aldrich (oder ähnlich)</td><td>A7906</td><td>Verwendet mit 1 % (w/v) in PBS zum Blockieren und als Bestandteil des Antikörper-Verdünnungspuffers.</td></tr><tr><td>DAPI (4', 6-diamidino-2-Phenylindol)</td><td>Sigma-Aldrich (oder ähnlich)</td><td>D9542</td><td>Nukleare Gegenfärbung. Verwendet in einer Endkonzentration von 1 & Mikro; g/mL.</td></tr><tr><td>Esel-Anti-Kaninchen-IgG, Alexa Fluor 488 konjugiert</td><td>Invitrogen (oder ähnlich)</td><td>A21206</td><td>Sekundärer Antikörper gegen mitochondriale Färbung. Verwendet bei 1:500 Verdünnung</td></tr><tr><td>Fluoreszierende Mikrosphären (Perlen), 100 nm Durchmesser</td><td>Invitrogen (z. B. TetraSpeck&trade) oder ähnliches</td><td>T7279</td><td>Verwendet für empirische Messungen des Systems' s Punktstreuungsfunktion (PSF) und Auflösung.</td></tr><tr><td>Hep3B-Zellen exprimieren stabil EGFP-Mitochondrien</td><td>IMMOCELL</td><td>IM-H367</td><td>Menschliche Hepatomzelllinie, die darauf ausgelegt ist, EGFP stabil auf die mitochondriale Matrix auszudrücken. Verwendet für Live-Zell-Zeitrafferbildgebung.</td></tr><tr><td>HEPES-Pufferlösung, 1 M</td><td>Gibco (oder ähnlich)</td><td>15630080</td><td>Verwendet mit einer Endkonzentration von 25 mM im Bildmedium zur pH-Stabilisierung während der Live-Bildgebung außerhalb eines CO2 Inkubators.</td></tr><tr><td>Hochpräzises Deckglas (#1,5, 0,17 mm Dicke)</td><td>Marienfeld (oder ähnlich)</td><td>107052</td><td>Verwendet zum Anbringen fester Proben.</td></tr><tr><td>Mikroskop-Betriebssystem-Software (z. B. ZEN Blue Edition)</td><td>Carl Zeiss AG</td><td>ZEN 3.5 (blau)</td><td>Verwendet für Systemsteuerung, Bildaufnahme und grundlegende Verarbeitung.</td></tr><tr><td>Objektiv: Plan-Apochromat 63x/1,40 NA Oil DIC</td><td>Carl Zeiss AG</td><td>421462-9900-000</td><td>Primäres Ziel für hochauflösende Bildgebung.</td></tr><tr><td>Kaninchen-Anti-TOMM20 polyklonaler Antikörper</td><td>Abcam (oder ähnlich)</td><td>ab186735</td><td>Primärer Antikörper zur Markierung der Mitochondrien. Verwendet bei 1:1000 Verdünnung&nbsp;</td></tr></tbody></table>

superauflösende bildgebung und gemeinsames management: ein protokoll für konfokale mikroskopie mit multiplex-detektion

Super-Resolution Imaging and Shared Management: A Protocol for Confocal Microscopy with Multiplex Detection

Superauflösende Bildgebung und gemeinsames Management: Ein Protokoll für konfokale Mikroskopie mit Multiplex-Detektion

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