Name: Standortspezifische Lysinlaktylierung durch genetische Code-Erweiterung in E. coli und Säugetierzellen (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-02-24T13:25:00.000+00:00
Duration: 5 min 58 s
Description: Lernen Sie die standortspezifische Lysinlaktylierung durch genetische Code-Erweiterung in E. coli und Säugetierzellen. Diese Methode ermöglicht präzise Untersuchungen von Proteinfunktionen und Tumorstoffwechsel.

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<ol><li>Zhang, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metabolic+regulation+of+gene+expression+by+histone+lactylation%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Metabolic regulation of gene expression by histone lactylation.</a> Nature. 574 (7779), 575-580 (2019).</li>
<li>Yu, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Histone+lactylation+drives+oncogenesis+by+facilitating+m6A+reader+protein+YTHDF2+expression+in+ocular+melanoma%5BTitle%5D)+AND+%22Genome+Biol%22%5BJournal%5D)">Histone lactylation drives oncogenesis by facilitating m6A reader protein YTHDF2 expression in ocular melanoma.</a> Genome Biol. 22 (1), 85(2021).</li>
<li>Pan, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Demethylzeylasteral+targets+lactate+by+inhibiting+histone+lactylation+to+suppress+the+tumorigenicity+of+liver+cancer+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacol+Res%22%5BJournal%5D)">Demethylzeylasteral targets lactate by inhibiting histone lactylation to suppress the tumorigenicity of liver cancer stem cells.</a> Pharmacol Res. 181, 106270(2022).</li>
<li>Xu, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Royal+jelly+acid+suppresses+hepatocellular+carcinoma+tumorigenicity+by+inhibiting+H3+histone+lactylation+at+H3K9la+and+H3K14la+sites%5BTitle%5D)+AND+%22Phytomedicine%22%5BJournal%5D)">Royal jelly acid suppresses hepatocellular carcinoma tumorigenicity by inhibiting H3 histone lactylation at H3K9la and H3K14la sites.</a> Phytomedicine. 118, 154940(2023).</li>
<li>Chai, P., Zhao, F., Jia, R., Zhou, X., Fan, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lactate%2Flactylation+in+ocular+development+and+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+Mol+Med%22%5BJournal%5D)">Lactate/lactylation in ocular development and diseases.</a> Trends Mol Med. 31 (12), 1073-1076 (2025).</li>
<li>Wang, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+relationship+and+clinical+significance+of+lactylation+modification+in+digestive+system+tumors%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Cell+Int%22%5BJournal%5D)">The relationship and clinical significance of lactylation modification in digestive system tumors.</a> Cancer Cell Int. 24 (1), 246(2024).</li>
<li>Yang, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lactylome+analysis+suggests+lactylation-dependent+mechanisms+of+metabolic+adaptation+in+hepatocellular+carcinoma%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Metab%22%5BJournal%5D)">Lactylome analysis suggests lactylation-dependent mechanisms of metabolic adaptation in hepatocellular carcinoma.</a> Nat Metab. 5 (1), 61-79 (2023).</li>
<li>Chen, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lactate-lactylation+hands+between+metabolic+reprogramming+and+immunosuppression%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Lactate-lactylation hands between metabolic reprogramming and immunosuppression.</a> Int J Mol Sci. 23 (19), 11943(2022).</li>
<li>Sun, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+diapause-like+colorectal+cancer+cells+induced+by+smc4+attenuation+are+characterized+by+low+proliferation+and+chemotherapy+insensitivity%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Metab%22%5BJournal%5D)">The diapause-like colorectal cancer cells induced by smc4 attenuation are characterized by low proliferation and chemotherapy insensitivity.</a> Cell Metab. 35 (9), 1563-1579 (2023).</li>
<li>Yang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+positive+feedback+loop+between+inactive+VHL-triggered+histone+lactylation+and+PDGFR%CE%B2+signaling+drives+clear+cell+renal+cell+carcinoma+progression%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Biol+Sci%22%5BJournal%5D)">A positive feedback loop between inactive VHL-triggered histone lactylation and PDGFRβ signaling drives clear cell renal cell carcinoma progression.</a> Int J Biol Sci. 18 (8), 3470-3483 (2022).</li>
<li>Li, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tumor-derived+lactate+promotes+resistance+to+bevacizumab+treatment+by+facilitating+autophagy+enhancer+protein+Rubcnl+expression+through+histone+H3+lysine+18+lactylation+%28H3K18la%29+in+colorectal+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Autophagy%22%5BJournal%5D)">Tumor-derived lactate promotes resistance to bevacizumab treatment by facilitating autophagy enhancer protein Rubcnl expression through histone H3 lysine 18 lactylation (H3K18la) in colorectal cancer.</a> Autophagy. 20 (1), 114-130 (2024).</li>
<li>Jiang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lactate+modulates+cellular+metabolism+through+histone+lactylation-mediated+gene+expression+in+non-small+cell+lung+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Oncol%22%5BJournal%5D)">Lactate modulates cellular metabolism through histone lactylation-mediated gene expression in non-small cell lung cancer.</a> Front Oncol. 11, 647559(2021).</li>
<li>Chen, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metabolic+regulation+of+homologous+recombination+repair+by+MRE11+lactylation%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Metabolic regulation of homologous recombination repair by MRE11 lactylation.</a> Cell. 187 (2), 294-311 (2024).</li>
<li>Li, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glycometabolic+reprogramming-induced+XRCC1+lactylation+confers+therapeutic+resistance+in+ALDH1A3-overexpressing+glioblastoma%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Metab%22%5BJournal%5D)">Glycometabolic reprogramming-induced XRCC1 lactylation confers therapeutic resistance in ALDH1A3-overexpressing glioblastoma.</a> Cell Metab. 36 (8), 1696-1710.e10 (2024).</li>
<li>Liberti, M. V., Locasale, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+warburg+effect%3A+How+does+it+benefit+cancer+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+Biochem+Sci%22%5BJournal%5D)">The warburg effect: How does it benefit cancer cells.</a> Trends Biochem Sci. 41 (3), 211-218 (2016).</li>
<li>Varner, E. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantification+of+lactoyl-CoA+%28lactyl-CoA%29+by+liquid+chromatography+mass+spectrometry+in+mammalian+cells+and+tissues%5BTitle%5D)+AND+%22Open+Biol%22%5BJournal%5D)">Quantification of lactoyl-CoA (lactyl-CoA) by liquid chromatography mass spectrometry in mammalian cells and tissues.</a> Open Biol. 10 (9), 200187(2020).</li>
<li>Chen, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metabolic+regulation+of+homologous+recombination+repair+by+MRE11+lactylation%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Metabolic regulation of homologous recombination repair by MRE11 lactylation.</a> Cell. 187 (2), 294-311.e21 (2024).</li>
<li>Chen, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((NBS1+lactylation+is+required+for+efficient+DNA+repair+and+chemotherapy+resistance%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">NBS1 lactylation is required for efficient DNA repair and chemotherapy resistance.</a> Nature. 631 (8021), 663-669 (2024).</li>
<li>Zong, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Alanyl-trna+synthetase%2C+AARS1%2C+is+a+lactate+sensor+and+lactyltransferase+that+lactylates+p53+and+contributes+to+tumorigenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Alanyl-trna synthetase, AARS1, is a lactate sensor and lactyltransferase that lactylates p53 and contributes to tumorigenesis.</a> Cell. 187 (10), 2375-2392.e33 (2024).</li>
<li>Ju, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+alanyl-tRNA+synthetase+AARS1+moonlights+as+a+lactyltransferase+to+promote+YAP+signaling+in+gastric+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Invest%22%5BJournal%5D)">The alanyl-tRNA synthetase AARS1 moonlights as a lactyltransferase to promote YAP signaling in gastric cancer.</a> J Clin Invest. 134 (10), e174587(2024).</li>
<li>Sun, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lactylation+of+METTl16+promotes+cuproptosis+via+m6A-modification+on+FDX1+mRNA+in+gastric+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Lactylation of METTl16 promotes cuproptosis via m6A-modification on FDX1 mRNA in gastric cancer.</a> Nat Commun. 14 (1), 6523(2023).</li>
<li>Mao, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypoxia+induces+mitochondrial+protein+lactylation+to+limit+oxidative+phosphorylation%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Res%22%5BJournal%5D)">Hypoxia induces mitochondrial protein lactylation to limit oxidative phosphorylation.</a> Cell Res. 34 (1), 13-30 (2024).</li>
<li>Lv, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mitogenic+and+oncogenic+stimulation+of+K433+acetylation+promotes+PKM2+protein+kinase+activity+and+nuclear+localization%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Cell%22%5BJournal%5D)">Mitogenic and oncogenic stimulation of K433 acetylation promotes PKM2 protein kinase activity and nuclear localization.</a> Mol Cell. 52 (3), 340-352 (2013).</li>
<li>Okada, A. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lysine+acetylation+regulates+the+interaction+between+proteins+and+membranes%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Lysine acetylation regulates the interaction between proteins and membranes.</a> Nat Commun. 12 (1), 6466(2021).</li>
<li>Wan, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cyclic+immonium+ion+of+lactyllysine+reveals+widespread+lactylation+in+the+human+proteome%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">Cyclic immonium ion of lactyllysine reveals widespread lactylation in the human proteome.</a> Nat Methods. 19 (7), 854-864 (2022).</li>
<li>Shao, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+code+expansion+reveals+site-specific+lactylation+in+living+cells+reshapes+protein+functions%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Genetic code expansion reveals site-specific lactylation in living cells reshapes protein functions.</a> Nat Commun. 16 (1), 227(2025).</li>
<li>Sun, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+encoding+of+%CE%B5-N-L-lactyllysine+for+detecting+delactylase+activity+in+living+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Chem+Commun+%28Camb%29%22%5BJournal%5D)">Genetic encoding of ε-N-L-lactyllysine for detecting delactylase activity in living cells.</a> Chem Commun (Camb). 58 (61), 8544-8547 (2022).</li>
<li>Ren, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expanding+the+scope+of+genetically+encoded+lysine+post-translational+modifications+with+lactylation%2C+%CE%B2-hydroxybutyrylation+and+lipoylation%5BTitle%5D)+AND+%22Chembiochem%22%5BJournal%5D)">Expanding the scope of genetically encoded lysine post-translational modifications with lactylation, β-hydroxybutyrylation and lipoylation.</a> Chembiochem. 23 (18), e202200302(2022).</li>
<li>Hu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Engineering+unnatural+cells+with+a+21st+amino+acid+as+a+living+epigenetic+sensor%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Engineering unnatural cells with a 21st amino acid as a living epigenetic sensor.</a> Nat Commun. 16 (1), 9388(2025).</li>
<li>Elsasser, S. J., Ernst, R. J., Walker, O. S., Chin, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+code+expansion+in+stable+cell+lines+enables+encoded+chromatin+modification%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">Genetic code expansion in stable cell lines enables encoded chromatin modification.</a> Nat Methods. 13 (2), 158-164 (2016).</li>
<li>Zhu, W., Fan, C., Hou, Y., Zhang, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lactylation+in+tumor+microenvironment+and+immunotherapy+resistance%3A+New+mechanisms+and+challenges%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Lett%22%5BJournal%5D)">Lactylation in tumor microenvironment and immunotherapy resistance: New mechanisms and challenges.</a> Cancer Lett. 627, 217835(2025).</li>
<li>Mills, E. M., Barlow, V. L., Jones, A. T., Tsai, Y. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+mammalian+cell+logic+gates+controlled+by+unnatural+amino+acids%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Rep+Methods%22%5BJournal%5D)">Development of mammalian cell logic gates controlled by unnatural amino acids.</a> Cell Rep Methods. 1 (6), 100073(2021).</li>
<li>Italia, J. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetically+encoded+protein+sulfation+in+mammalian+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Chem+Biol%22%5BJournal%5D)">Genetically encoded protein sulfation in mammalian cells.</a> Nat Chem Biol. 16 (4), 379-382 (2020).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>6*sein, sein Tag Rekombinanter monoklonaler Antikörper</td><td>Proteintech</td><td>84814-1-RR</td><td>Eine Klasse spezifischer Immunglobuline, die auf die 6&-Zeiten abzielt; Sein Tag (ein kurzes Peptid, bestehend aus sechs aufeinanderfolgenden Hisidinresten, HHHHHH) in rekombinanten Proteinen.</td></tr><tr><td>ACQUITY UPLC-System</td><td>Gewässer</td><td></td><td>UltraPerformance-Flüssigkeitschromatographie</td></tr><tr><td>Anti-L-Lactyllysin-Kaninchen-MAb</td><td>PTM Biolabs</td><td>PTM-1401RM</td><td>Eine Klasse spezifischer Immunglobuline, die auf L-Lactyl Lysin (Klac) abzielen, eine posttranslationale Modifikation (PTM) von Proteinen.</td></tr><tr><td>ClonExpress II One Step Klon-Kit</td><td>Vazyme&nbsp;</td><td>C112</td><td>Basierend auf einfacher, schneller und effizienter DNA-nahtloser Klontechnologie können Einfügungsfragmente richtungsweise in jede Stelle jedes beliebigen Vektors geklont werden.</td></tr><tr><td>CytoFlex-Durchflusszytometer</td><td>Beckmann Coulter</td><td></td><td>Durchflusszytometer mit hochempfindlicher Detektion und Mehrfarbanalysefunktion</td></tr><tr><td>DH10B</td><td>Biorabbit</td><td>EC005H-S</td><td>Eine Art kompetenter Zellen für Plasmidtransformation, Genklonierung und Blue-White-Screening.</td></tr><tr><td>DH5&alpha;</td><td>Vazyme&nbsp;</td><td>C502</td><td>Eine Art kompetenter Zellen für Plasmidtransformation, Genklonierung und Blue-White-Screening.</td></tr><tr><td>EASY-nano LC 1200 System</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td></td><td>Nanoflüssigchromatographie zur Trennung hochempfindlicher, hochauflösender komplexer Proben</td></tr><tr><td>Orbitrap-Finsternis-Tribrid-Massenspektrometer</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td></td><td>ein Flaggschiff-High-End-Tribrid-Flüssigkeitschromatographie-Massenspektrometrie-(LC-MS)-System</td></tr><tr><td>Phanta Max Super-Fidelity DNA-Polymerase</td><td>Vazyme&nbsp;</td><td>P505</td><td>Ein hochpräzises Einzelenzym, das schnelle Amplifikation und Genauigkeit kombiniert</td></tr><tr><td>PolyJet</td><td>SignaGen</td><td>SL100688</td><td>PolyJet DNA In Vitro Tranfektionsreagenz ist als leistungsstarkes Transfektionsreagenz formuliert, das eine effektive und reproduzierbare Transfektion mit geringerer Zytotoxizität gewährleistet.</td></tr></tbody></table>

standortspezifische lysinlaktylierung durch genetische code-erweiterung in e. coli und säugetierzellen

Site-Specific Lysine Lactylation via Genetic Code Expansion in E. coli and Mammalian Cells

Zunächst untersuchten wir die Inkorporationsspezifität von Klac in Proteine in E. coli. Das Gen für humane Enolase 1 (hENO1) wurde so konstruiert, dass es am Rest K89 (hENO1-89TAG) ein bernsteinfarbenes Stoppcodon enthält, und dieses Konstrukt wurde mit dem orthogonalen KlacRS und seinem verwandten tRNA-Paar in E. coli koexprimiert. Ohne 1 mM Klac-Supplementierung wurde kein hENO1 in voller Länge nachgewiesen; im Gegensatz dazu wurde bei der Zugabe von 1 mM Klac zum Wachstumsmedium ein vollwert...

Standortspezifische Lysinlaktylierung durch genetische Code-Erweiterung in E. coli und Säugetierzellen

Lactylation is a recently discovered post-translational modification (PTM) with diverse biological functions. Since its initial identification in 2019 as ...

site-specific-lysine-lactylation-via-genetic-code-expansion-e-coli

Research

Forschung

JoVE Journal

Biochemistry

Biochemie

Die Aktivität der induzierbaren Lysin-Decarboxylase wird durch Umsetzung des Substrates L-Lysin und das Produkt Cadaverin mit 2,4,6-trinitrobenzensulfonic Säure-Addukte, die unterschiedliche Löslichkeit in Toluol Form überwacht.

Ein Assay zur Messung der Aktivität von Escherichia coli Inducible Lysin Decarboxyase

Die Validierung der enzymatischen Aktivitäten in biochemischen Wege beteiligt sind, können mit Hilfe der funktionellen Komplementierung Analyse (FCA) erläutert. Beschrieben in diesem Manuskript ist das FCA-Assay der enzymatischen Aktivität von Enzymen involviert in den Metabolismus von Aminosäuren, bakterielle stringenten Antwort und bakterielle Peptidoglycan-Biosynthese zeigen.

Funktionelle Komplementierung Analyse (FCA): A Laboratory Übung konzipiert und umgesetzt, die Lehre von Biochemical Pathways zur Ergänzung

Ein einfach zu bedienendes, zellfreies Expressionsprotokoll für den rückstandsspezifischen Einbau von nicht-kanonischen Aminosäureanaloga in Proteine, einschließlich Downstream-Analysen, wird für medizinische, pharmazeutische, strukturelle und funktionelle Studien vorgestellt.

Rückstands spezifische Einbau nichtkanonischer Aminosäuren in Modellproteine ​​eine Verwendung<em&gt; Escherichia coli</em&gt; Zellfreie Transkription-Translation-System

Biochemische und strukturelle Analysen des glykosylierten Proteinen erfordern relativ große Mengen an homogenen Proben. Hier präsentieren wir Ihnen eine effiziente chemische Methode für standortspezifische Glykosylierung von rekombinanten Proteinen durch gezielte reaktive Cys Thiole von Bakterien gereinigt.

Targeting Cystein Thiole für in-vitro- standortspezifische Glykosylierung von rekombinanten Proteinen

Synthetischer Biologie ermöglicht das Engineering von Proteinen mit noch nie dagewesenen Eigenschaften mit Hilfe der co-translational Einfügen von nicht-kanonischen Aminosäuren. Hier präsentierten wir, wie eine Spektral rot verschoben-Variante des ein GLP-Typ Fluorophor mit neuartigen Fluoreszenz spektroskopischen Eigenschaften, genannt "Gold" fluoreszierende Protein (GdFP), über Selektionsdruck Aufnahme (SPI) in E. Coli hergestellt wird.

Engineering-"Golden" Fluoreszenz durch Selektionsdruck Einbeziehung der nicht-kanonischen Aminosäuren und Protein-Analyse durch Massenspektrometrie und Fluoreszenz

Erweiterung des genetischen Codes dient als ein mächtiges Werkzeug für eine Vielzahl von biologischen Prozessen, einschließlich Protein Acetylierung zu studieren. Hier zeigen wir, dass eine einfache Protokoll nutzen diese Technik zur Erzeugung von homogen Proteine an bestimmten Standorten in Escherichia coli Zellen acetyliert.

Eine einfache Protokoll ortspezifisch generieren acetyliert Proteine in Escherichia Coli

Diese Studie präsentiert eine alternative Strategie zur herkömmlichen toxischen analogen Methode zur Identifizierung von Aminosäureüberproduzenten durch verwendung seltener Kodon-reicher Marker, um Genauigkeit, Empfindlichkeit und hohen Durchsatz gleichzeitig zu erreichen.

Identifizieren von Aminosäure-Overproduzenten mit selten-Codon-reichen Markern

Hier präsentieren wir eine Methode, um acetylierte Histonproteine mittels genetischer Codeerweiterung auszudrücken und rekonstituierte Nukleosomen in vitro zusammenzusetzen.

Ortsspezifische Lysin-Acetylierung von Histonen zur Nukleosomen-Rekonstitution mit genetischer Codeerweiterung bei Escherichia coli

Dieses Protokoll beschreibt eine schnelle und einfache Methode zur Herstellung von bakteriellem Lysat für die zellfreie Genexpression unter Verwendung eines technisch hergestellten Stammes von Escherichia coli und erfordert nur Standardlaborgeräte.

Schnelle, kostengünstige und unkomplizierte Herstellung von bakteriellem zellfreiem Lysat

Dieser Artikel bietet ein einfaches und klares Protokoll zur ortsspezifischen Markierung von Salmonella-sezernierten Effektoren mittels genetischer Code-Expansion (GCE) und zur Abbildung der subzellulären Lokalisation von sezernierten Proteinen in HeLa-Zellen mit Hilfe der direkten stochastischen optischen Rekonstruktionsmikroskopie...

Super-Resolution-Bildgebung von bakteriell sezernierten Proteinen mittels genetischer Code-Expansion

Leishmania Translational Extract (LTE) ist ein eukaryotisches zellfreies Proteinexpressionssystem, das aus dem einzelligen Parasiten Leishmania tarentolae gewonnen wird. Dieses optimierte Protokoll macht LTE einfach und kostengünstig in der Herstellung. Es eignet sich für verschiedene Anwendungen, die sich auf die multiparallele Expression und Untersuchung komplexer eukaryotischer Proteine und ihrer Wechselwirkungen konzentrieren.

Produktion und Optimierung von LTE, einem von Leishmania tarentolae abgeleiteten zellfreien Proteinexpressionssystem für die rekombinante Proteinproduktion

Lernen Sie die standortspezifische Lysinlaktylierung durch genetische Code-Erweiterung in E. coli und Säugetierzellen. Diese Methode ermöglicht präzise Untersuchungen von Proteinfunktionen und Tumorstoffwechsel.

Standortspezifische Lysinlaktylierung durch genetische Code-Erweiterung in E. coli und Säugetierzellen

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