Name: Isolierung von Skelettmuskel-Satellitenzellen für In-vitro-Myogenese-Studien (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-02-24T14:20:00.000+00:00
Duration: 7 min 56 s
Description: Lernen Sie die optimierte Isolierung von Skelettmuskel-Satellitenzellen aus adultem und neonatalem Mausgewebe mittels enzymatischer Verdauung, sequenzieller Filtration und magnetischer Zellsortierung. Diese Methode liefert hochreine myogene Vorläuferzellen für In-vitro-Studien zur Myogenese.

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<ol><li>Yeh, C. -J., Sattler, K. M., Lepper, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+regulation+of+satellite+cells+via+intercellular+signaling%5BTitle%5D)+AND+%22Gene%22%5BJournal%5D)">Molecular regulation of satellite cells via intercellular signaling.</a> Gene. 858, 147172(2023).</li>
<li>Gonzalez, M. L., Busse, N. I., Waits, C. M., Johnson, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Satellite+cells+and+their+regulation+in+livestock%5BTitle%5D)+AND+%22J+Anim+Sci%22%5BJournal%5D)">Satellite cells and their regulation in livestock.</a> J Anim Sci. 98 (5), skaa081(2020).</li>
<li>Mauro, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Satellite+cell+of+skeletal+muscle+fibers%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biophys+Biochem+Cytol%22%5BJournal%5D)">Satellite cell of skeletal muscle fibers.</a> J Biophys Biochem Cytol. 9 (2), 493-495 (1961).</li>
<li>Yin, H., Price, F., Rudnicki, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Satellite+cells+and+the+muscle+stem+cell+niche%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Rev%22%5BJournal%5D)">Satellite cells and the muscle stem cell niche.</a> Physiol Rev. 93, 23-67 (2013).</li>
<li>Kahn, R. E., Dayanidhi, S., Lacham-Kaplan, O., Hawley, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+clocks%2C+satellite+cells%2C+and+skeletal+muscle+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Cell+Physiol%22%5BJournal%5D)">Molecular clocks, satellite cells, and skeletal muscle regeneration.</a> Am J Physiol Cell Physiol. 324 (1), C1332-C1340 (2023).</li>
<li>Abreu, P., Mendes, S. V. D., Ceccatto, V. M., Hirabara, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Satellite+cell+activation+induced+by+aerobic+muscle+adaptation+in+response+to+endurance+exercise%5BTitle%5D)+AND+%22Life+Sci%22%5BJournal%5D)">Satellite cell activation induced by aerobic muscle adaptation in response to endurance exercise.</a> Life Sci. 170, 33-40 (2017).</li>
<li>Dueweke, J. J., Awan, T. M., Mendias, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regeneration+of+skeletal+muscle+after+eccentric+injury%5BTitle%5D)+AND+%22J+Sport+Rehabil%22%5BJournal%5D)">Regeneration of skeletal muscle after eccentric injury.</a> J Sport Rehabil. 26 (2), 171-179 (2017).</li>
<li>Michele, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanisms+of+skeletal+muscle+repair+and+regeneration+in+health+and+disease%5BTitle%5D)+AND+%22FEBS+J%22%5BJournal%5D)">Mechanisms of skeletal muscle repair and regeneration in health and disease.</a> FEBS J. 289 (21), 6460-6462 (2022).</li>
<li>Domingues-Faria, C., Vasson, M. -P., Goncalves-Mendes, N., Boirie, Y., Walrand, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Skeletal+muscle+regeneration+and+impact+of+aging+and+nutrition%5BTitle%5D)+AND+%22Ageing+Res+Rev%22%5BJournal%5D)">Skeletal muscle regeneration and impact of aging and nutrition.</a> Ageing Res Rev. 26, 22-36 (2016).</li>
<li>Tierney, M. T., Sacco, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Satellite+cell+heterogeneity+in+skeletal+muscle+homeostasis%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Satellite cell heterogeneity in skeletal muscle homeostasis.</a> Trends Cell Biol. 26 (6), 434-444 (2016).</li>
<li>Troy, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coordination+of+satellite+cell+activation+and+self-renewal+by+Par-complex-dependent+asymmetric+activation+of+p38%CE%B1%2F%CE%B2+MAPK%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Stem+Cell%22%5BJournal%5D)">Coordination of satellite cell activation and self-renewal by Par-complex-dependent asymmetric activation of p38α/β MAPK.</a> Cell Stem Cell. 11 (4), 541-553 (2012).</li>
<li>Dumont, N. A., Wang, Y. X., Rudnicki, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intrinsic+and+extrinsic+mechanisms+regulating+satellite+cell+function%5BTitle%5D)+AND+%22Development%22%5BJournal%5D)">Intrinsic and extrinsic mechanisms regulating satellite cell function.</a> Development. 142 (9), 1572-1581 (2015).</li>
<li>Danoviz, M. E., Yablonka-Reuveni, Z. Skeletal muscle satellite cells: background and methods for isolation and analysis. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aDanoviz%2C+ME+%22Myogenesis%22">Myogenesis</a>. DiMario, J. X. 798, Humana Press. 21-52 (2012).</li>
<li>Gharaibeh, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+of+a+slowly+adhering+cell+fraction+containing+stem+cells+from+murine+skeletal+muscle+by+the+preplate+technique%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">Isolation of a slowly adhering cell fraction containing stem cells from murine skeletal muscle by the preplate technique.</a> Nat Protoc. 3 (9), 1501-1509 (2008).</li>
<li>Benedetti, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+approach+for+the+isolation+and+long-term+expansion+of+pure+satellite+cells+based+on+ice-cold+treatment%5BTitle%5D)+AND+%22Skelet+Muscle%22%5BJournal%5D)">A novel approach for the isolation and long-term expansion of pure satellite cells based on ice-cold treatment.</a> Skelet Muscle. 11 (1), 7(2021).</li>
<li>Yoshioka, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+modified+preplating+method+for+high-yield+and+high-purity+muscle+stem+cell+isolation%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Cell+Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">A modified preplating method for high-yield and high-purity muscle stem cell isolation.</a> Front Cell Dev Biol. 8, 793(2020).</li>
<li>Uezumi, A., Fukada, S., Yamamoto, N., Takeda, S., Tsuchida, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mesenchymal+progenitors+distinct+from+satellite+cells+contribute+to+ectopic+fat+formation%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Mesenchymal progenitors distinct from satellite cells contribute to ectopic fat formation.</a> Nat Cell Biol. 12 (2), 143-152 (2010).</li>
<li>Christov, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Muscle+satellite+cells+and+endothelial+cells%3A+close+neighbors+and+privileged+partners%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Biol+Cell%22%5BJournal%5D)">Muscle satellite cells and endothelial cells: close neighbors and privileged partners.</a> Mol Biol Cell. 18 (4), 1397-1409 (2007).</li>
<li>Elizalde, G., Munoz, A. Z., Almada, A. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protocol+for+the+isolation+of+mouse+muscle+stem+cells+using+fluorescence-activated+cell+sorting%5BTitle%5D)+AND+%22STAR+Protoc%22%5BJournal%5D)">Protocol for the isolation of mouse muscle stem cells using fluorescence-activated cell sorting.</a> STAR Protoc. 4 (4), 102656(2023).</li>
<li>Pasut, A., Oleynik, P., Rudnicki, M. A. Isolation of muscle stem cells by fluorescence-activated cell sorting. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aPasut%2C+A+%22Myogenesis%22">Myogenesis</a>. DiMario, X. 798, Humana Press. 53-64 (2012).</li>
<li>Lee, J. D., Sinha, B. C., Larkin, L. M., Vandenburgh, H. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+and+purification+of+satellite+cells+for+skeletal+muscle+tissue+engineering%5BTitle%5D)+AND+%22J+Regen+Med%22%5BJournal%5D)">Isolation and purification of satellite cells for skeletal muscle tissue engineering.</a> J Regen Med. 3 (2), (2015).</li>
<li>Llufrio, E. M., Wang, L., Naser, F. J., Patti, G. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sorting+cells+alters+their+redox+state+and+cellular+metabolome%5BTitle%5D)+AND+%22Redox+Biol%22%5BJournal%5D)">Sorting cells alters their redox state and cellular metabolome.</a> Redox Biol. 16, 381-387 (2018).</li>
<li>Cusmano, A. A., et al. Efficient isolation and ex vivo differentiation of murine satellite cells. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aCusmano%2C+AA+%22Stem+Cell%22">Stem Cell</a>. Turksen, K. 2939, Springer. 37-54 (2025).</li>
<li>Park, Y. G., Moon, J. H., Kim, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparative+study+of+magnetic-activated+cell+sorting+and+preplating+for+myoblast+purification%5BTitle%5D)+AND+%22Yonsei+Med+J%22%5BJournal%5D)">Comparative study of magnetic-activated cell sorting and preplating for myoblast purification.</a> Yonsei Med J. 47 (2), 179-186 (2006).</li>
<li>Park, Y. G., Baek, A., Kim, S. Myoblast purifying by magnetic-activated cell sorting. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aPark%2C+YG+%22Methods+Cell+Biol%22">Methods Cell Biol</a>. 112, Elsevier. 439-447 (2012).</li>
<li>Lee, H., Han, N. R., Kim, S. J., Yun, J. I., Lee, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+a+high-yield+isolation+protocol+for+active+muscle+satellite+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Stem+Cells%22%5BJournal%5D)">Development of a high-yield isolation protocol for active muscle satellite cells.</a> Int J Stem Cells. 15 (3), 283-290 (2022).</li>
<li>Cui, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+easy+and+practical+method+for+isolation%2C+culture+and+identification+of+mouse+skeletal+muscle+satellite+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Clin+Exp+Med%22%5BJournal%5D)">An easy and practical method for isolation, culture and identification of mouse skeletal muscle satellite cells.</a> Int J Clin Exp Med. 9, 19424-19431 (2016).</li>
<li>Ding, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+and+isolation+of+highly+purified+porcine+satellite+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Death+Discov%22%5BJournal%5D)">Characterization and isolation of highly purified porcine satellite cells.</a> Cell Death Discov. 3, 17003(2017).</li>
<li>Pawlikowski, B., Vogler, T. O., Gadek, K., Olwin, B. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regulation+of+skeletal+muscle+stem+cells+by+fibroblast+growth+factors%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Dyn%22%5BJournal%5D)">Regulation of skeletal muscle stem cells by fibroblast growth factors.</a> Dev Dyn. 246 (5), 359-367 (2017).</li>
<li>Shahini, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efficient+and+high-yield+isolation+of+myoblasts+from+skeletal+muscle%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cell+Res%22%5BJournal%5D)">Efficient and high-yield isolation of myoblasts from skeletal muscle.</a> Stem Cell Res. 30, 122-129 (2018).</li>
<li>Lee, D. H., Kwak, K. B., Park, Y. C., Chung, C. H., Ha, D. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Purification+and+characterization+of+myoblast+fusion+inhibitor%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Cells%22%5BJournal%5D)">Purification and characterization of myoblast fusion inhibitor.</a> Mol Cells. 1, 177-182 (1991).</li>
<li>Moulin, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fetal+and+adult+human+skin+fibroblasts+display+intrinsic+differences+in+contractile+capacity%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Physiol%22%5BJournal%5D)">Fetal and adult human skin fibroblasts display intrinsic differences in contractile capacity.</a> J Cell Physiol. 188 (2), 211-222 (2001).</li>
<li>Wilson, C. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Age-dependent+expression+of+collagen+receptors+in+rat+cardiac+fibroblasts%5BTitle%5D)+AND+%22Microsc+Microanal%22%5BJournal%5D)">Age-dependent expression of collagen receptors in rat cardiac fibroblasts.</a> Microsc Microanal. 17 (4), 555-562 (2011).</li>
<li>Kohen, N. T., Little, L. E., Healy, K. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+Matrigel+interfaces+during+defined+hESC+culture%5BTitle%5D)+AND+%22Biointerphases%22%5BJournal%5D)">Characterization of Matrigel interfaces during defined hESC culture.</a> Biointerphases. 4 (4), 69-79 (2009).</li>
<li>Wang, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vitro+culture+system+supporting+robust+expansion+of+myogenic+progenitors%5BTitle%5D)+AND+%22BioRes+Open+Access%22%5BJournal%5D)">In vitro culture system supporting robust expansion of myogenic progenitors.</a> BioRes Open Access. 3 (3), 79-87 (2014).</li>
<li>Péault, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stem+and+progenitor+cells+in+skeletal+muscle+development+and+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Ther%22%5BJournal%5D)">Stem and progenitor cells in skeletal muscle development and therapy.</a> Mol Ther. 15 (5), 867-877 (2007).</li>
<li>Le Grand, F., Rudnicki, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Skeletal+muscle+satellite+cells+and+adult+myogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Skeletal muscle satellite cells and adult myogenesis.</a> Curr Opin Cell Biol. 19 (6), 628-633 (2007).</li>
<li>Rando, T. A., Blau, H. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Primary+mouse+myoblast+purification+and+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Primary mouse myoblast purification and transplantation.</a> J Cell Biol. 125 (6), 1275-1287 (1994).</li>
<li>Hindi, L., McMillan, J., Afroze, D., Hindi, S., Kumar, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation%2C+culturing%2C+and+differentiation+of+primary+myoblasts%5BTitle%5D)+AND+%22Bio+Protoc%22%5BJournal%5D)">Isolation, culturing, and differentiation of primary myoblasts.</a> Bio Protoc. 7 (9), (2017).</li>
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<table><tbody><tr><td>0,25 % Trypsin-EDTA&nbsp;</td><td>Gibco</td><td>25200-056</td><td></td></tr><tr><td>100 & Mikro; M-Zell-Siebe&NBSP;</td><td>VWR</td><td>732-2759</td><td></td></tr><tr><td>30 & Mikro; M Strainer&NBSP;</td><td>Miltenyi Biotec</td><td>130-041-407</td><td></td></tr><tr><td>40 & Mikro; M-Zell-Siebe&NBSP;</td><td>VWR</td><td>732-2757</td><td></td></tr><tr><td>70 & Mikro; M-Zell-Siebe&NBSP;</td><td>VWR</td><td>130-095-823</td><td></td></tr><tr><td>Essigsäure &nbsp;</td><td>POCH</td><td>568760114</td><td>Gelöst in dH2O bis zu einer Endkonzentration von 20 mM und sterilisiert durch 0,2 & Mikro; M-Filter</td></tr><tr><td>Alexa Fluor 488, Esel-Anti-Kaninchen</td><td>Invitrogen&nbsp;</td><td>A21206</td><td>In Blocklösung gelöst (siehe Abschnitt 8.7) bei einer Verdünnung von 1:250</td></tr><tr><td>Alexa Fluor 488, Ziegen-Anti-Maus&nbsp;</td><td>Abcam</td><td>ab150113</td><td>In Blocklösung gelöst (siehe Abschnitt 8.7) bei einer Verdünnung von 1:250</td></tr><tr><td>Ammoniumchlorid (NH4Cl)&nbsp;</td><td>BioShop</td><td>AMC303.500</td><td>In Wasser auf eine Endkonzentration von 50 mM lösen</td></tr><tr><td>Antifade-Montagemedien</td><td>Vectashield</td><td>H-2000-10</td><td></td></tr><tr><td>Anti-PAX7-Antikörper</td><td>Abcam</td><td>ab187339</td><td>Gelöst in Blocklösung (siehe Abschnitt 8.7) bei einer Verdünnung von 1:100</td></tr><tr><td>Basischer Fibroblastenwachstumsfaktor&nbsp;</td><td>Corning</td><td>354060</td><td>Gelöst in sterilem dH2O bis zu einer Lagerkonzentration von 10 & Mikro; g/mL&nbsp;</td></tr><tr><td>Betadine, 100 mg/mL</td><td>EGIS Pharmaceuticals</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Zellkulturplatte, 6-Brunnen, Zelle+</td><td>SARSTEDT</td><td>83.3902.300</td><td></td></tr><tr><td>Hühnerembryo-Extrakt &nbsp;</td><td>MP Biomedizin</td><td>2850145</td><td></td></tr><tr><td>Kollagen I, Rattenschwanz</td><td>Gibco</td><td>A10483-01</td><td>Gelöst in 20 mM Essigsäure &nbsp;</td></tr><tr><td>Kollagenase, Typ I</td><td>Sigma</td><td>C0130-500MG</td><td>In DMEM gelöst und durch eine 0,2 & Mikro-Methode sterilisiert; M-Filter</td></tr><tr><td>Dissoziationsröhre (GentleMACS C-Röhren)</td><td>Miltenyi Biotec</td><td>130-093-237</td><td></td></tr><tr><td>Dulbeccos modifizierter Eagle Medium, hoher Blutzucker</td><td>Gibco</td><td>31966-021</td><td></td></tr><tr><td>EDTA</td><td>Invitrogen</td><td>AM9260G</td><td></td></tr><tr><td>Falcon Conical Zentrifuge Röhren, 15 mL</td><td>Corning</td><td>352096</td><td></td></tr><tr><td>Falcon Conical Zentrifugenröhren, 50 mL</td><td>Corning</td><td>352070</td><td></td></tr><tr><td>Fetales Rinderserum</td><td>Gibco</td><td>10082147</td><td></td></tr><tr><td>Pferdeserum&nbsp;</td><td>Gibco</td><td>26050088</td><td></td></tr><tr><td>Magnetisches Markierungsreagenz (Satellite Cell Isolation Kit)</td><td>Miltenyi Biotec</td><td>130-104-268</td><td></td></tr><tr><td>Magnetischer Separator (MidiMACS-Separator)</td><td>Miltenyi Biotec</td><td>130-042-302</td><td></td></tr><tr><td>Matrigel&nbsp;</td><td>Corning</td><td>CLS356234</td><td>In DMEM auf 10 % Konzentration gelöst & nbsp;</td></tr><tr><td>Paraformaldehyd, 4 % in PBS</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>J61899. AK</td><td></td></tr><tr><td>Penicillin-Streptomycin&nbsp;</td><td>Gibco</td><td>15140122</td><td></td></tr><tr><td>Phosphatgepufferte Kochsalzlösung &nbsp;</td><td>VWR</td><td>392-0334</td><td></td></tr><tr><td>Trennspalte (LS-Spalten)</td><td>Miltenyi Biotec</td><td>130-042-401</td><td></td></tr><tr><td>Skelettmuskel-Myosin-Antikörper, MHC</td><td>Santa Cruz</td><td>SC-32732</td><td>Gelöst in Blocklösung (siehe Abschnitt 8.7) bei einer Verdünnung von 1:50</td></tr><tr><td>TC-Schüssel, 100 x 20 mm</td><td>SARSTEDT</td><td>83.3902</td><td></td></tr><tr><td>Gewebedissoziator (GentleMACS-Dissoziator)</td><td>Miltenyi Biotec</td><td>130-093-235</td><td></td></tr><tr><td>Triton X-100&nbsp;</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>X100-1L</td><td></td></tr></tbody></table>

isolierung von skelettmuskel-satellitenzellen für in-vitro-myogenese-studien

Isolation of Skeletal Muscle Satellite Cells for In Vitro Myogenesis Studies

Isolierung von Skelettmuskel-Satellitenzellen für In-vitro-Myogenese-Studien

Skeletal muscle regeneration and growth depend on satellite cells, the muscle tissue&#39;s resident stem cells. Currently, these cells serve as ...

isolation-skeletal-muscle-satellite-cells-for-vitro-myogenesis

Research

Forschung

JoVE Journal

Biology

Biologie

Die Mikro-seziert Explantate Technik ist eine robuste und zuverlässige Methode zur Isolierung proliferative Skelettmuskelzellen von Jugendkriminalität, adulte oder embryonale Muskeln als eine Quelle der Skelettmuskulatur Stammzellen. Einzigartig sind diese Zellen klonal abgeleitet, um Skelettmuskulatur Stammzelllinien für in vivo-Transplantation verwendet produzieren.

Adulten und embryonalen Skelettmuskel Microexplant Kultur und Isolation der Skelettmuskulatur Stem Cells

Dieses Video zeigt die Isolierung von Satellitenzellen aus branchiomerem Muskelgewebe des Rattenkopfes durch Gewebedissektion, enzymatische Verdauung und anschließende mechanische und zentrifugale Reinigung. Die Zellen werden dann auf extrazelluläre, mit Matrix beschichtete Vertiefungen ausgesät, um sie in Myoblasten und schließlich in Myotuben und reife Muskelfasern zu differenzieren.

Eine Technik zur Isolierung von Satellitenzellen aus Muskelgewebe von Rattenköpfen

Isolierung und Kultivierung von Muskelfasern ist der...

Isolation und Kultur der einzelnen Muskelfasern und ihre Satelliten aus adulten Skelettmuskel

Die Isolierung und Kultur einer reinen Population von ruhenden Satellitenzellen, eine Muskelstammzellpopulation, ist wesentlich für das Verständnis der Muskelstammzelle Biologie und Regeneration sowie Stammzelltransplantation bei Therapien Muskeldystrophie und anderen degenerativen Erkrankungen.

Isolierung, Kultur und Transplantation von Muskel-Satelliten-Zellen

In-vitro-Kultur haben Systeme unerlässlich, um unser Verständnis von Wirbel myogenesis bewährt. Allerdings bleibt noch viel zu über Nicht-Säuger-Skelettmuskel-Entwicklung und das Wachstum gelernt werden, vor allem in den basalen Taxa. Eine effiziente und robuste Protokoll für die Isolierung der adulten Stammzellen aus diesem Gewebe, die myogene Vorläuferzellen (MPCs) und Erhaltung ihrer Selbsterneuerung, Proliferation und Differenzierung in einer Primärkultur Einstellung ermöglicht die...

Herstellung von primären Myogenic Vorläuferzelle / Myoblastenkulturen von Basal Wirbelstammbaum

Die wichtigsten adhärenten Zelltypen, die aus dem menschlichen Muskel stammen, sind myogene Zellen und Fibroblasten. Hierbei werden Zellpopulationen mittels magnetisch aktivierter Zellsortierung auf Basis des CD56-Antigens angereichert. Die anschließende Immunmarkierung mit spezifischen Antikörpern und der Einsatz von Bildanalysetechniken ermöglicht die Quantifizierung der zytoplasmatischen und nukleären Eigenschaften in einzelnen Zellen.

Isolierung und Charakterisierung von Quantitative Immunzytochemische Primäre myogenen Zellen und Fibroblasten aus menschlichen Skelettmuskel

Dieses Protokoll beschreibt die Isolierung von Satellitenzellen aus branchiomeric Kopf Muskeln über ein 9 Wochen alten Ratte. Die Muskeln aus unterschiedlichen Kiemenbögen. Anschließend werden die Satellitenzellen auf einem Spotlackierung von Millimetergröße, um ihre Differenzierung zu untersuchen kultiviert. Dieser Ansatz vermeidet die Expansion und Passagieren von Satellitenzellen.

Isolierung und Charakterisierung von Satellitenzellen aus Ratte Kopf Branchiomeric Muscles

Die genaue Identifizierung der satellitenzellen ist wichtig für das Studium ihrer Aufgaben unter verschiedenen physiologischen und pathologischen Bedingungen. Dieser Artikel stellt ein Protokoll zur satellitenzellen auf Erwachsene Skelettmuskulatur Abschnitte durch Immunfluoreszenz-basierte Färbung zu erkennen.

Kennung des skelettartigen Muskels Satellitenzellen durch Immunfluoreszenz mit Pax7 und Laminin-Antikörper

Dieses Protokoll veranschaulicht 1) die Isolierung und Kultivierung von primären Fibroblasten aus dem adulten Musculus gastrocnemius der Maus sowie 2) die Aufreinigung und Charakterisierung von Exosomen unter Verwendung einer differentiellen Ultrazentrifugationsmethode in Kombination mit Saccharosedichtegradienten gefolgt von Western-Blot-Analysen.

Isolierung und Charakterisierung von Exosomen aus Skelettmuskelfibroblasten

Hier schlagen wir eine Methode vor, um einzelne Muskelfasern in frühen postnatalen Entwicklungsstadien aus dem homozygoten Mutanten Lamin-Mausmodell, einem sehr schweren Modell für Emery-Dreifuss-Muskeldystrophie (EDMD), effizient zu erhalten.

Single Myofiber Isolation and Culture from a Murine Model of Emery-Dreifuss Muscular Dystrophy in Early Post-Natal Development

Die Skelettmuskulatur besteht aus mehreren Zelltypen, einschließlich residenter Stammzellen, von denen jede einen besonderen Beitrag zur Muskelhomöostase und -regeneration leistet. Hier werden die 2D-Kultur von Muskelstammzellen und die Muskelzellnische in einer ex vivo Umgebung beschrieben, die viele der physiologischen, in vivo und Umwelteigenschaften bewahrt.

Unfraktionierte Massenkultur des Mausskelettmuskels zur Rekapitulation der Nischen- und Stammzellruhe

Lernen Sie die optimierte Isolierung von Skelettmuskel-Satellitenzellen aus adultem und neonatalem Mausgewebe mittels enzymatischer Verdauung, sequenzieller Filtration und magnetischer Zellsortierung. Diese Methode liefert hochreine myogene Vorläuferzellen für In-vitro-Studien zur Myogenese.

Isolierung von Skelettmuskel-Satellitenzellen für In-vitro-Myogenese-Studien

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