Selektive und permanente Verschluss der mittleren Hirnarterie bei Ratten: Ein experimenteller Ansatz zur Untersuchung motorischer und räumlicher Gedächtnisdefizite

Ein Rattenmodell einer selektiven permanenten MCA-Verschluss wurde entwickelt, um motorische und räumliche Gedächtnisdefizite zu untersuchen. Viele Schlaganfallmodelle sind weniger selektiv, sodass dieses Protokoll eine direkte Sicht auf das Gefäß und eine präzise distale MCA-Okklusion ermöglicht. Zunächst sammeln Sie die sauberen, sterilen chirurgischen Instrumente um den mit einem sterilen Tuch bedeckten Mikroskoptisch herum.

Legen Sie die linke Seitenfläche der anästhesierten Worcester-Ratte, die in 180-Grad-Seitenlage auf der gepolsterten Mikroskopplatte mit dem Kopf, der von einer weichen Rolle gestützt wird, freizulegen. Sichern Sie den Kopf mit Klebeband. Geben Sie schützende Augentropfen.

Die Augenlider mit Klebeband verschließen. Die rektale Temperatur erneut überprüfen, um sicherzustellen, dass sie im idealen Bereich von etwa 37 Grad Celsius bleibt. Die Heizquelle bei Bedarf anpassen.

Führen Sie die Haarentfernung in einem Bereich von 1,6 mal 0,5 Zentimetern zwischen dem lateralen Augenwinkel und dem Tragus mit einem Mini-Haarschneider oder einer Rasierklinge durch. Desinfizieren Sie die rasierte Fläche mit 2 % Chlorhexidin-Lösung, gefolgt von 0,2 % wässriger Chlorhexidin-Lösung. Verwenden Sie eine sterile Skalpellklinge, um einen ein Zentimeter langen Schnitt durch Haut und Subkutis zu setzen, wobei ein Sicherheitsabstand von 0,3 Zentimetern hinter dem lateralen Augenwinkel und vor dem Tragus eingehalten werden muss.

Verwenden Sie hämostatische Pinzetten, um die Haut und die subkutane Schicht zurückzuziehen. Nachdem der mittlere temporale Zweig der oberflächlichen temporalen Gefäße identifiziert wurde, koagulieren Sie das Gefäß mit Elektrokauter. Tasten Sie mithilfe eines Freer-Elevators den Processus zygomaticus ab.

Schneiden Sie die Faszie des Musculus temporalis längs ein. Präparieren Sie den Musculus temporalis kranial und kaudal, um das Processus temporalis und das Frontalbein sowie einen Teil des Musculus masseter freizulegen. Isolieren Sie den Arcus zygomaticus längs.

Entfernen Sie ein etwa 0,5 cm langes Segment des Jochbogens. Gehen Sie bei Durchführung des Eingriffs mit angemessenen Vorsichtsmaßnahmen vor. Bohren Sie mit einem runden, diamantbeschichteten Fräser den lateralen Schläfenknochen unmittelbar posterior zur Entfernungstelle des Jochbogens unter Verwendung einer intermittierenden 0,9%igen Salzlösungs-Spülung.

Während des Bohrens eine dünne, an der Dura mater anliegende Knochenlage stehen lassen. Die verbleibenden anhaftenden Fragmente vorsichtig mit Halsted-Debakelpinzette entfernen. Die Dura mater mit einer ultrafeinen Nadel öffnen.

Identifizieren Sie die untere zerebrale Vene, die Arteria cerebri media (ACM) oder ACM und der basalen, dicksten ACM-Zweig in der Mitte. Führen Sie mit einer feinen Nadelhalter eine nicht resorbierbare 8,0-Polypropylennäht um die ACM und verschließen Sie das Gefäß durch Anlegen von drei Knoten. Nach Bestätigung des Fehlens eines abströmenden Blutflusses überprüfen Sie mit der ultrafeinen Nadel, ob zusätzliche ACM-Zweige vorhanden sind, die ligiert werden müssen.

Spülen Sie die Kavität mit Kochsalzlösung aus. Führen Sie die Blutstillung mittels Elektrokauterisierung oder sanfter Kompression durch. Nach Okklusion der A. cerebri media und duraler Naht bringen Sie die tiefe Muskelschicht wieder in Annäherung und nähen die Faszie des Musculus temporalis mit resorbierbarem 4-0-Faden.

Verwenden Sie resorbierbare Polyglactin-910-Nähte der Stärke 4-0, um die subkutane Schicht und die Hautschicht in kontinuierlicher Nahttechnik zu vernähen. Führen Sie die postoperative Beurteilung an bestimmten Tagen durch. Die motorischen Funktionsscores im Haltungstest am siebten postoperativen Tag waren bei Tieren mit MCA-Verschluss signifikant höher als bei Scheintieren.

Tiere mit MCA-Verschluss zeigten am achten Tag nach der Operation eine verminderte Erkundung des umpositionierten Objekts im Vergleich zu Scheintieren. Dieses Protokoll hilft Forschern, die selektive kortikale Ischämie und ihre Auswirkungen auf motorische Funktionen und räumliches Gedächtnis zu untersuchen. Die Hauptschwierigkeit besteht darin, die Kraniotomie sicher durchzuführen und die Arteria cerebri media korrekt zu identifizieren.

Zukünftige Studien können dieses Modell verwenden, um Behandlungen zu testen und langfristige funktionelle sowie histologische Ergebnisse zu untersuchen.