Name: Physische Manipulation zur Erzeugung von Xenopus-Mini-Embryonen (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-04-10T13:20:00.000+00:00
Duration: 4 min 9 s
Description: Lernen Sie die physische Manipulation von Xenopus laevis-Eizellen mit Haarknoten zur Erzeugung von Mini-Embryonen. Diese Methode ermöglicht die Untersuchung zellgrößenabhängiger Entwicklungsmechanismen und deren Einfluss auf die zygotische Genomaktivierung.

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<ol><li>Newport, J., Kirschner, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+major+developmental+transition+in+early+Xenopus+embryos%3A+I.+Characterization+and+timing+of+cellular+changes+at+the+midblastula+stage%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">A major developmental transition in early Xenopus embryos: I. Characterization and timing of cellular changes at the midblastula stage.</a> Cell. 30 (3), 675-686 (1982).</li>
<li>Newport, J., Kirschner, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+major+developmental+transition+in+early+Xenopus+embryos%3A+II.+Control+of+the+onset+of+transcription%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">A major developmental transition in early Xenopus embryos: II. Control of the onset of transcription.</a> Cell. 30 (3), 687-696 (1982).</li>
<li>Kane, D. A., Kimmel, C. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+zebrafish+midblastula+transition%5BTitle%5D)+AND+%22Development%22%5BJournal%5D)">The zebrafish midblastula transition.</a> Development. 119 (2), 447-456 (1993).</li>
<li>Lu, X., Li, J. M., Elemento, O., Tavazoie, S., Wieschaus, E. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coupling+of+zygotic+transcription+to+mitotic+control+at+the+Drosophila+mid-blastula+transition%5BTitle%5D)+AND+%22Development%22%5BJournal%5D)">Coupling of zygotic transcription to mitotic control at the Drosophila mid-blastula transition.</a> Development. 136 (12), 2101-2110 (2009).</li>
<li>Jevtic, P., Levy, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Both+nuclear+size+and+DNA+amount+contribute+to+midblastula+transition+timing+in+Xenopus+laevis%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Both nuclear size and DNA amount contribute to midblastula transition timing in Xenopus laevis.</a> Sci Rep. 7 (1), 7908(2017).</li>
<li>Edgar, B. A., Kiehle, C. P., Schubiger, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cell+cycle+control+by+the+nucleo-cytoplasmic+ratio+in+early+Drosophila+development%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Cell cycle control by the nucleo-cytoplasmic ratio in early Drosophila development.</a> Cell. 44 (2), 365-372 (1986).</li>
<li>Chen, H., Qian, W., Good, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Integrating+cellular+dimensions+with+cell+differentiation+during+early+development%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Integrating cellular dimensions with cell differentiation during early development.</a> Curr Opin Cell Biol. 67, 109-117 (2020).</li>
<li>Lee, D. R., Lee, J. E., Yoon, H. S., Roh, S. I., Kim, M. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Compaction+in+preimplantation+mouse+embryos+is+regulated+by+a+cytoplasmic+regulatory+factor+that+alters+between+1-+and+2-cell+stages+in+a+concentration-dependent+manner%5BTitle%5D)+AND+%22J+Exp+Zool%22%5BJournal%5D)">Compaction in preimplantation mouse embryos is regulated by a cytoplasmic regulatory factor that alters between 1- and 2-cell stages in a concentration-dependent manner.</a> J Exp Zool. 290 (1), 61-71 (2001).</li>
<li>Ishimatsu, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Size-reduced+embryos+reveal+a+gradient+scaling-based+mechanism+for+zebrafish+somite+formation%5BTitle%5D)+AND+%22Development%22%5BJournal%5D)">Size-reduced embryos reveal a gradient scaling-based mechanism for zebrafish somite formation.</a> Development. 145 (11), dev161257(2018).</li>
<li>Clute, P., Masui, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regulation+of+the+appearance+of+division+asynchrony+and+microtubule-dependent+chromosome+cycles+in+Xenopus+laevis+embryos%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">Regulation of the appearance of division asynchrony and microtubule-dependent chromosome cycles in Xenopus laevis embryos.</a> Dev Biol. 171 (2), 273-285 (1995).</li>
<li>Chen, H., Einstein, L. C., Little, S. C., Good, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spatiotemporal+patterning+of+zygotic+genome+activation+in+a+model+vertebrate+embryo%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Cell%22%5BJournal%5D)">Spatiotemporal patterning of zygotic genome activation in a model vertebrate embryo.</a> Dev Cell. 49 (6), 852-866.e7 (2019).</li>
<li>Sive, H. L., Grainger, R. M., Harland, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Xenopus+laevis+in+vitro+fertilization+and+natural+mating+methods%5BTitle%5D)+AND+%22CSH+Protoc%22%5BJournal%5D)">Xenopus laevis in vitro fertilization and natural mating methods.</a> CSH Protoc. 2007, pdb prot4737(2007).</li>
<li>Chen, H., Good, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Imaging+nascent+transcription+in+wholemount+vertebrate+embryos+to+characterize+zygotic+genome+activation%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Enzymol%22%5BJournal%5D)">Imaging nascent transcription in wholemount vertebrate embryos to characterize zygotic genome activation.</a> Methods Enzymol. 638, 139-165 (2020).</li>
<li>Meaders, J. L., Burgess, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microtubule-based+mechanisms+of+pronuclear+positioning%5BTitle%5D)+AND+%22Cells%22%5BJournal%5D)">Microtubule-based mechanisms of pronuclear positioning.</a> Cells. 9 (2), 505(2020).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>30-G-Nadel</td><td>BD Medical</td><td>305128</td><td>Für das Eindringen von Embryonen</td></tr><tr><td>60 mm Einweg-Petrischalen</td><td>VWR</td><td>25384-092</td><td>Für die Inkubation von Embryonen</td></tr><tr><td>ACCU-SCOPE 3075 Zoom-Stereomikroskope</td><td>VWR</td><td>470351-130</td><td>Zur Visualisierung von Embryonen</td></tr><tr><td>Agarose</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A-9414</td><td>Zum Überziehen von Petrischalen</td></tr><tr><td>Dumont-Pinzette, Stil 5</td><td>Elektronenmikroskopiewissenschaften</td><td>72701-D</td><td>Zum Anpassen und Halten von Embryonen</td></tr><tr><td>Ficoll 400</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>GE17-0300-10</td><td>Für die Inkubation von Embryonen</td></tr><tr><td>TipOne Pipettenspitze, 10 & Micro; L</td><td>USA Scientific</td><td>1111-3700</td><td>Zum Anbringen der Haarknoten</td></tr><tr><td>Wachsblock, Schwarz</td><td>Carolina Biological Supply Co.</td><td>974228</td><td>Zum Anbringen der Haarknoten</td></tr></tbody></table>

physische manipulation zur erzeugung von xenopus-mini-embryonen

Physical Manipulation to Generate Xenopus Mini Embryos

Physische Manipulation zur Erzeugung von Xenopus-Mini-Embryonen

A defining characteristic of early embryogenesis is the rapid, exponential decrease in individual cell size while the overall embryo volume remains ...

physical-manipulation-to-generate-xenopus-mini-embryos

Research

Forschung

JoVE Journal

Developmental Biology

Entwicklungsbiologie

Xenopus embryonalen Ektoderm hat sich ein attraktives Modell für Studien der Zellpolarität. Ein Assay ist beschrieben, in denen subzellulären Verteilung von fluoreszierenden Proteinen in Ectodermzellen beurteilt wird. Dieses Protokoll wird dazu beitragen, Fragen im Zusammenhang mit räumlichen Steuerung der Signalisierung.

Polarized Translokation von fluoreszierenden Proteinen in Xenopus Ektoderm in Response to Wnt Signaling

Dieses Video zeigt die Maßnahmen zur primären Kulturen von embryonalen...

Gleichzeitige Pre-und Post-synaptischen Elektrophysiologische Aufnahme von<em&gt; Xenopus</em&gt; Nerv-Muskel-Co-Kulturen

Eine Technik zum Trans "Extreme Anterior Domain" Gesichtsgewebe zwischen Xenopus laevis-Embryonen entwickelt. Tissue kann von einem Gen-Expression Hintergrund in eine andere verschoben werden, so dass die Untersuchung der lokalen Anforderungen für kraniofaziale Entwicklung und zur Signalisierung von Wechselwirkungen zwischen Gesichtsregionen.

Gesichtstransplantation in<em&gt; Xenopus laevis</em&gt; Embryonen

Ein Verfahren, um die orofacial Größe und Form des Xenopus laevis Embryonen Quantifizierung entwickelt worden. In diesem Protokoll werden traditionelle Größenmessungen mit geometrischen Morphometrie kombiniert, um für komplexere Analysen der orofazialen Entwicklung und Mängel zu ermöglichen.

Quantifizierung der Orofacial Phänotypen in Xenopus

Wir beschreiben Methoden zur Manipulation unreifer Eizellen von Xenopus laevis, zur In-vitro-Reifung von Eizellen zu Eizellen und zur intrazytoplasmatischen Spermieninjektion. Dieses Protokoll ermöglicht den Abbau einiger mütterlicher Proteine und die Überexpression von Genen von Interesse während der Befruchtung und ist daher wertvoll, um die Rolle spezifischer Faktoren in der frühen Embryonalentwicklung zu untersuchen.

Manipulation und<em&gt; In-vitro-</em&gt; Ausbau der<em&gt; Xenopus laevis</em&gt; Eizellen, von Intrazytoplasmatische Spermieninjektion gefolgt, um embryonale Entwicklungsstudie

Das Manuskript hier bietet eine einfache Reihe von Methoden für die Sekretion und Verbreitung von fluoreszierend markierten Liganden in Xenopus-Analyse. Dies bietet einen Rahmen für die Prüfung der Fähigkeit von anderen Proteinen zu Ligand Verteilung ändern und erlaubt Experimente, die Einblick in die Mechanismen, die Morphogen Gradienten geben kann.

Mittels konfokaler Analyse<em&gt; Xenopus laevis</em&gt; Um Modulatoren der Wnt und Shh Morphogen Gradienten Untersuchen

Wir beschreiben ein Xenopus-Eizell- und Tierkappensystem für die Expressionsklonierung von Genen, die in der Lage sind, eine Reaktion in kompetentem Ektoderm zu induzieren, und diskutieren Techniken für die anschließende Analyse solcher Gene. Dieses System ist nützlich bei der funktionellen Identifizierung einer Vielzahl von Genprodukten.

Functional Cloning Mit ein<em&gt; Xenopus</em&gt; Eizellen Expression System

Hier präsentieren wir ein Protokoll zur Verwendung von Schicksalskarten und Abstammungsverfolgungen, um gezielte Injektionen in einzelne Blastomere durchzuführen, aus denen die Niere von Xenopus laevis-Embryonen entsteht.

Technik auf Zielmikroinjektions an die Entwicklungs<em&gt; Xenopus</em&gt; Kidney

Dieses Protokoll zeigt eine fluoreszenzbasierte Methode zur Visualisierung der Vaskulatur und zur Quantifizierung ihrer Komplexität in Xenopus tropicalis . Blutgefäße können nach der Injektion eines fluoreszierenden Farbstoffs in das schlagende Herz eines Embryos nach genetischen und / oder pharmakologischen Manipulationen abgebildet werden, um die kardiovaskuläre Entwicklung in vivo zu untersuchen.

Visualisierung und quantitative Analyse der embryonalen Angiogenese in<em&gt; Xenopus tropicalis</em

Dieses Protokoll beschreibt eine optogenetische Strategie zur Modulation der mitogenaktivierten Proteinkinase (MAPK) Aktivität während der Zelldifferenzierung und der Xenopus embryonalen Entwicklung. Diese Methode ermöglicht die reversible Aktivierung des MAPK-Signalwegs in der Säugerzellkultur und in multizellulären Lebendorganismen wie Xenopus- Embryonen mit hoher räumlicher und zeitlicher Auflösung.

Lichtvermittelte reversible Modulation des mitogenaktivierten Proteinkinase-Pathways während der Zelldifferenzierung und<em&gt; Xenopus</em&gt; Embryonale Entwicklung

Dieses Protokoll soll zeigen, wie man ein DNA/DOTAP-Gemisch in Augenknospen von eintägigen Xenopus laevis Embryonen mikroinjiziert und wie man einzelne grüne fluoreszierende Proteine (GFP) abbilden und rekonstruieren kann, die optische axonale Lauben in tektalen Midhirnen von intakte, lebende Xenopus Kaulquappen.

Mikroinjektion von DNA in Augenknospen in Xenopus laevis Embryonen und Bildgebung von GFP Expressing Optic Axonal Arbors in Intact, Living Xenopus Tadpoles

Lernen Sie die physische Manipulation von Xenopus laevis-Eizellen mit Haarknoten zur Erzeugung von Mini-Embryonen. Diese Methode ermöglicht die Untersuchung zellgrößenabhängiger Entwicklungsmechanismen und deren Einfluss auf die zygotische Genomaktivierung.

Physische Manipulation zur Erzeugung von Xenopus-Mini-Embryonen

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