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</ol>

<table><tbody><tr><td>(3-Aminopropyl)triethoxysilan (APTES)</td><td>919-30-2</td><td>-</td><td>Thermo Fisher Scientific</td></tr><tr><td>1,7 mL Mikrozentrifugenrohre</td><td>-</td><td>LMCT1.7B</td><td>FroggaBio</td></tr><tr><td>12-Well-Platten für Gewebekultur, behandelt</td><td>-</td><td>83.3921</td><td>Sarstedt</td></tr><tr><td>15 mL Zentrifugenrohre (für orange Kammer)</td><td>-</td><td>CLS430790</td><td>Corning</td></tr><tr><td>2-Hydroxy-4'-(2-hydroxyethoxy)-2-methylpropiophenon (Irgacure)</td><td>106797-53-9</td><td>-</td><td>Thermo Fisher Scientific</td></tr><tr><td>2% Bisacrylamid-Lösung</td><td>110-26-9</td><td>-</td><td>Bio-Rad</td></tr><tr><td>3-(3-Dimethylaminopropyl)-1-ethylcarbodiimid-hydrochlorid (EDC)</td><td>25952-53-8</td><td>-</td><td>Chem Impex International</td></tr><tr><td>4',6-Diamidino-2-phenylindoldihydrochlorid</td><td>28718-90-3</td><td>-</td><td>Sigma</td></tr><tr><td>4',6-Diamidino-2-phenylindoldihydrochlorid (DAPI)</td><td>-</td><td>D1306</td><td>Invitrogen</td></tr><tr><td>40% Acrylamid-Lösung</td><td>01/06/1979</td><td>-</td><td>Bio-Rad</td></tr><tr><td>50% Glutaraldehyd</td><td>111-30-8</td><td>-</td><td>Thermo Fisher Scientific</td></tr><tr><td>6 cm Gewebekulturschalen, behandelt</td><td>-</td><td>83.3901</td><td>Sarstedt</td></tr><tr><td>A549 Zellen</td><td>-</td><td>CCL-185</td><td>ATCC</td></tr><tr><td>Acrylic acid N-hydroxysuccinimide ester</td><td>38862-24-7</td><td>-</td><td>Thermo Fisher Scientific</td></tr><tr><td>Alexa Fluor 488 Ziege Anti-Kaninchen-Antikörper</td><td>-</td><td>A11008</td><td>Invitrogen</td></tr><tr><td>Alexa Fluor 594 NHS-Ester (tris(triethylammoniumsalz))</td><td>-</td><td>A37572</td><td>Invitrogen</td></tr><tr><td>Ammoniumpersulfat</td><td>7727-54-0</td><td>-</td><td>Bio-Rad</td></tr><tr><td>Klare, schlagfestige Polycarbonatfolie (0,005 Zoll; Distanzhalter)</td><td>-</td><td>85585K72</td><td>McMaster-Carr</td></tr><tr><td>CY 52-276 Silikongel, Komponenten A und B</td><td>2624028</td><td>-</td><td>Dow</td></tr><tr><td>Dulbecco's Modifiziertes Eagle-Medium (DMEM)</td><td>-</td><td>11995-065</td><td>Thermo Fisher Scientific</td></tr><tr><td>Ethanol, wasserfrei</td><td>64-17-5</td><td>-</td><td>Greenfield Canada</td></tr><tr><td>Fast SYBR Green Master Mix</td><td>-</td><td>4385612</td><td>Thermo Fisher Scientific</td></tr><tr><td>Fötales Rinderserum</td><td>-</td><td>A52567-01</td><td>Thermo Fisher Scientific</td></tr><tr><td>Fibronectin</td><td>-</td><td>356008</td><td>Corning</td></tr><tr><td>Formaldehyd (16%)</td><td>-</td><td>28908</td><td>Thermo Fisher Scientific</td></tr><tr><td>HEPES</td><td>7365-45-9</td><td>-</td><td>BioShop</td></tr><tr><td>Hochtemperatur-Silikongummi-Folie (0,020 Zoll; Dichtung)</td><td>-</td><td>86435K452</td><td>McMaster-Carr</td></tr><tr><td>Salzsäure</td><td>7647-01-0</td><td>-</td><td>BioShop</td></tr><tr><td>Großes Lochstanzer-Werkzeugset</td><td>-</td><td>66000</td><td>Mayhew Pro</td></tr><tr><td>Matrigel</td><td>-</td><td>356234</td><td>Corning</td></tr><tr><td>Borosilikatglasflasche für Medienlagerung, 250 ml</td><td>-</td><td>CLS1395250</td><td>Corning</td></tr><tr><td>Borosilikatglasflasche für Medienlagerung, 500 ml</td><td>-</td><td>CLS1395500</td><td>Corning</td></tr><tr><td>MicroAmp Fast Optical 96-Well-Reaktionsplatte</td><td>-</td><td>4346906</td><td>Thermo Fisher Scientific</td></tr><tr><td>Mikroskop-Objektträger-Deckgläser, 18 mm Durchmesser</td><td>-</td><td>72222-01</td><td>Electron Microscopy Sciences</td></tr><tr><td>Mikroskop-Objektträger-Deckgläser, 50 mm Durchmesser</td><td>-</td><td>1.84E+16</td><td>eBay</td></tr><tr><td>PBS (1x)</td><td>-</td><td>14190144</td><td>Thermo Fisher Scientific</td></tr><tr><td>PBS (10x)</td><td>-</td><td>70011044</td><td>Thermo Fisher Scientific</td></tr><tr><td>Phalloidin</td><td>17466-45-4</td><td>-</td><td>Biotium</td></tr><tr><td>Phospho-FAK (Tyr397) Antikörper</td><td>-</td><td>85567</td><td>Cell Signaling Technology</td></tr><tr><td>Phospho-MLC (Ser19) Antikörper</td><td>-</td><td>3671</td><td>Cell Signaling Technology</td></tr><tr><td>Plasmareiniger</td><td>-</td><td>PDC-32G</td><td>Harrick Plasma</td></tr><tr><td>qPCR-Primer (vorwärts und rückwärts)</td><td>-</td><td>N/A</td><td>Integrated DNA Technologies</td></tr><tr><td>qScript cDNA-Synthese-Kit</td><td>-</td><td>95047</td><td>QuantaBio</td></tr><tr><td>Rain-X</td><td>-</td><td>-</td><td>Rain-X</td></tr><tr><td>Schraubverschluss-Röhrchen, konischer Boden, 15 ml</td><td>-</td><td>62.554.101</td><td>Sarstedt</td></tr><tr><td>Schraubverschluss-Röhrchen, konischer Boden, 50 ml</td><td>-</td><td>62.547.205</td><td>Sarstedt</td></tr><tr><td>Serologische Pipette, 10 ml</td><td>-</td><td>170356N</td><td>Thermo Fisher Scientific</td></tr><tr><td>Serologische Pipette, 25 ml</td><td>-</td><td>170357N</td><td>Thermo Fisher Scientific</td></tr><tr><td>Serologische Pipette, 5 ml</td><td>-</td><td>170355N</td><td>Thermo Fisher Scientific</td></tr><tr><td>Serologische Pipette, 50 ml</td><td>-</td><td>170358N</td><td>Thermo Fisher Scientific</td></tr><tr><td>Natriumhydroxid</td><td>1310-73-2</td><td>-</td><td>BioShop</td></tr><tr><td>SYPRO Ruby Protein-Gel-Färbemittel</td><td>-</td><td>S12000</td><td>Invitrogen</td></tr><tr><td>TEMED</td><td>110-18-9</td><td>-</td><td>Bio-Rad</td></tr><tr><td>TRIzol-Reagenz</td><td>-</td><td>15596026</td><td>Thermo Fisher Scientific</td></tr><tr><td>UV-Kammer</td><td>-</td><td>165-5031</td><td>Bio-Rad</td></tr></tbody></table>

erzeugung von polyacrylamid- und silikon-extrazellmatrixsubstraten mit definierter steifigkeit für anwendungen in der zellbiologie

Generation of Polyacrylamide and Silicone Extracellular Matrix Substrates with Defined Stiffness for Cell Biology Applications

Erzeugung von Polyacrylamid- und Silikon-Extrazellmatrixsubstraten mit definierter Steifigkeit für Anwendungen in der Zellbiologie

The extracellular matrix (ECM) is a critical regulator of cell behavior, with ECM stiffness serving as a key mechanical cue that governs cellular ...

generation-polyacrylamide-silicone-extracellular-matrix-substrates

Research

Forschung

JoVE Journal

Biology

Biologie

Die Wirkung von Substraten Steifigkeit auf die zelluläre Funktion modelliert werden...

Untersuchung der Auswirkungen von Matrix Stiffness auf Cellular-Funktion mit Acrylamid-basierte Hydrogele

Wir präsentieren ein neues Polyacrylamid-Hydrogel, genannt Hydroxy-PAAm, die mit minimalen Kosten oder Know-how eine direkte Bindung von ECM-Proteine ​​ermöglicht. Die Kombination von Hydroxy-PAAm Hydrogele mit Mikrokontaktdruck erleichtert eine unabhängige Steuerung der vielen Hinweise des natürlichen Zellmikroumgebung für die Untersuchung zellulärer mechanostransduction.

Herstellung von Hydroxy-PAAm Hydrogele zur Entkopplung der Auswirkungen von Mechanotransduction Cues

Unser Labor hat DNA-vernetzte Polyacrylamid-Hydrogele, ein dynamisches System Hydrogel entwickelt, um die Effekte der Modulation Gewebesteifigkeit auf die Zellfunktion zu verstehen. Hier bieten wir Schaltpläne, Beschreibungen und Protokolle, um diese Hydrogele vorzubereiten.

Herstellung von DNA-vernetztem Polyacrylamid, Hydrogele

Hier wird eine Methode beschrieben, die eine schnelle, effiziente und kostengünstige Herstellung von Polyacrylamid-Gelen in einem Multiwell-Plattenformat ermöglicht. Die Methode erfordert keine spezielle Ausrüstung und kann von jedem Forschungslabor leicht übernommen werden. Es wäre besonders nützlich in der Forschung, die sich auf das Verständnis steifigkeitsabhängiger Zellreaktionen konzentriert.

Einfache Polyacrylamid-basierten Multiwell Steifigkeit Assay für das Studium der Steifigkeit abhängige Zell-Antworten

Ein Protokoll wird präsentiert, um bereiten polyvinyl Alkohol-co-Itaconic Säure Hydrogele mit unterschiedlicher Steifigkeit, die mit und ohne Oligopeptide, aufgepfropft wurden, um zu untersuchen, die Wirkung der Steifigkeit von Biomaterialien auf die Differenzierung und Proliferation von Stammzellen. Die Steifigkeit der Hydrogele wurde dadurch die Vernetzung bestimmt.

Menschlichen pluripotenten Stammzelle-Kultur auf Polyvinyl Alkohol-Co-Itaconic Säure Hydrogele mit unterschiedlicher Steifigkeit Xeno-freien Bedingungen

Wir haben eine Multi-well-Format Polyacrylamid-basierten Test zum Sondieren der Wirkung der extrazellulären Matrix Steifigkeit auf bakterielle Infektion von adhärenten Zellen entwickelt. Dieser Assay ist kompatibel mit Durchflusszytometrie, Immunostaining und Traktion Rasterkraftmikroskopie, zulassend quantitative Messungen der biomechanischen Wechselwirkungen zwischen Zellen, extrazelluläre Matrix und Pathogene Bakterien.

Ein Multi-well-Format Polyacrylamid-basierten Test zur Untersuchung der Wirkung der extrazellulären Matrix Steifigkeit auf die bakterielle Infektion von adhärenten Zellen

Ein Protokoll für die Herstellung von Polymeren Dünnschicht Verbundstrukturen besitzen unterschiedliche Youngs Moduli oder dicken wird vorgestellt. Filme sind für fortgeschrittene Zelle Kulturwissenschaft oder als Haut Klebstoffe hergestellt.

Dünnen Film Composite Silikon Elastomere für Zellkultur und Haut Anwendungen: Herstellung und Charakterisierung

Substrate mit Steifheit im Bereich Kilopascal sind nützlich, um die Reaktion der Zellen auf physiologisch relevanten Mikroumgebung Steifigkeit zu studieren. Verwenden nur ein Weitfeld-Fluoreszenz-Mikroskop, kann des Elastizitätsmoduls weichen Silikon-Gel mit einer Einbuchtung mit einer geeigneten Kugel bestimmt werden.

Messung der Steifigkeit weichem Silikon Substrate für Mechanobiology Studien mit einem Weitfeld-Fluoreszenz-Mikroskop

Diese Methode soll die Mechanismen veranschaulichen, mit denen extrazelluläre Matrix-Cues wie Substratsteifigkeit, Proteinzusammensetzung und Zellmorphologie Schwann-Zell(SC)-Phänotyp regulieren.

Vorbereitung von tunable Extracellular Matrix Microenvironments zur Bewertung der Schwann Cell Phänotyp Specification

BioMEMS and Cellular Biology: Perspektiven und Anwendungen

University of Calgary.  Obwohl die Steifigkeit der extrazellulären Matrix (ECM) ein entscheidender Regulator des zellulären Verhaltens ist, bleiben die zugrunde liegenden Sensor- und Transduktionsmechanismen unklar. Um dem entgegenzuwirken, stellen wir Protokolle zur Herstellung von polyacrylamid- und silikonbasierten Substraten mit abstimmbarer Steifigkeit bereit, um unser Verständnis des Zell-ECM-Übersprechens zu vertiefen.

Erzeugung von Polyacrylamid- und Silikon-Extrazellmatrixsubstraten mit definierter Steifigkeit für Anwendungen in der Zellbiologie

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