Name: Isolierung und Kultur mikrovaskulärer Endothelzellen im Maushirn (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-07-17T12:40:00.000+00:00
Duration: 10 min 11 s
Description: Erfahren Sie die Isolierung und Kultur mikrovaskulärer Endothelzellen aus dem Maushirn. Diese Methode ermöglicht zuverlässige in-vitro-Modelle der Blut-Hirn-Schranke für neurologische Forschung.

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</ol>

```html
<table><tbody><tr><td>60 mm Kulturplatten</td><td>Corning</td><td>430166</td><td></td></tr><tr><td>96-Well-Kulturplatten</td><td>Corning</td><td>41122107</td><td></td></tr><tr><td>Essigsäure</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A6283</td><td></td></tr><tr><td>Antibiotika-Antimykotikum (optional)</td><td>Gibco</td><td>15240062</td><td></td></tr><tr><td>Anti-CD31</td><td>Santa Cruz&nbsp;</td><td>sc-46694</td><td>1:100</td></tr><tr><td>Anti-GFAP</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>13-0300</td><td>1:500</td></tr><tr><td>Anti-GLUT1</td><td>Abcam</td><td>ab115730</td><td>1:200</td></tr><tr><td>Anti-Iba1</td><td>Santa Cruz</td><td>sc-32725</td><td>1:500</td></tr><tr><td>Anti-Maus-IgG Alexa Fluor (594-Farbstoff)</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>A-11005</td><td>1:500</td></tr><tr><td>Anti-Rinder-IgG Alexa Fluor&nbsp; (488-Farbstoff)</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>A-11008</td><td>1:500</td></tr><tr><td>Automatische und serologische Pipetten</td><td>&nbsp;Oxford LP&nbsp;</td><td>&nbsp;OXL.OXL.OSP-5C</td><td></td></tr><tr><td>Basismedium (für Kollagenlösung)</td><td>Gibco (DMEM)</td><td>11965092</td><td></td></tr><tr><td>Bovines Serumalbumin (BSA)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A9647</td><td></td></tr><tr><td>Collagenase Typ II</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>C6885</td><td></td></tr><tr><td>DAPI</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>62248</td><td>1 &micro;g/mL</td></tr><tr><td>DMEM (hoch Glucose)</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>11965092</td><td></td></tr><tr><td>EndoGRO-MV Komplettmedium</td><td>Merck Millipore</td><td>SCME004</td><td>Endothelzell-Wachstumsmedium</td></tr><tr><td>Falcon-Röhrchen (15 &amp; 50 mL)</td><td>Corning&reg;</td><td>352096 / 352070</td><td></td></tr><tr><td>Fötales Rinderserum (FBS)</td><td>Gibco (Thermo Fisher)</td><td>16000044</td><td></td></tr><tr><td>Fluoreszenzmikroskop</td><td>Motic</td><td>BA410</td><td></td></tr><tr><td>Handschuhe, Masken, Laborverbrauchsmaterialien</td><td>Verschiedene Lieferanten</td><td>&mdash;</td><td></td></tr><tr><td>Heparin (100 U/mL)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>H3393</td><td></td></tr><tr><td>Invertiertes Mikroskop</td><td>Olympus&nbsp;</td><td>CKX41</td><td></td></tr><tr><td>Magnetischer Trennmagnet</td><td>EasySep&nbsp;</td><td>&nbsp;NC9284020</td><td></td></tr><tr><td>Orbital-Shaker (37 &deg;C)</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>SK-0180-S</td><td></td></tr><tr><td>Parafilm</td><td>Bemis</td><td>PM996</td><td></td></tr><tr><td>PBS (1&times;)</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>10010023</td><td></td></tr><tr><td>Kühlzentrifuge</td><td>HITACHI</td><td>CT5RE</td><td></td></tr><tr><td>Skalpell</td><td>Fine Science Tools</td><td>Verschiedene</td><td></td></tr><tr><td>Schere und feine Pinzette</td><td>Fine Science Tools</td><td>Verschiedene</td><td></td></tr><tr><td>Sterile Nitrozellulose-Membran</td><td>BIO-RAD</td><td>1620094</td><td></td></tr><tr><td>Typ I Kollagen</td><td>Corning&nbsp;</td><td>30394</td><td></td></tr></tbody></table>
```

isolierung und kultur mikrovaskulärer endothelzellen im maushirn

Isolation and Culture of Mouse Brain Microvascular Endothelial Cells

Isolierung und Kultur mikrovaskulärer Endothelzellen im Maushirn

Brain microvascular endothelial cells (BMECs) are the main cellular component of the blood-brain barrier (BBB) and play a key role in regulating molecular ...

Unsere Studie untersucht, wie Gehirnendothelzellen isoliert und kultiviert werden können, um die neurovaskuläre Funktion in Gesundheit und Krankheit zu erforschen. Das Protokoll kann verwendet werden, um das fetale Gehirnendothel bei neurodevelopmentellen Erkrankungen und schwangerschaftsbedingten Störungen zu untersuchen.Als Erstes beschaffen Sie fünf fünftägige Nachkommen nach der Geburt. Nach der Tötung der Nachkommen sammeln Sie deren Gehirne unter einem laminarer Luftströmung nutzenden biologischen Sicherheitswerkbank und legen sie in ein 50-Milliliter-Konischgefäß, das sterile, kalte PBS enthält. Rollen Sie jedes Gehirn vorsichtig auf einer sterilisierten Nitrocellulose-Membran, um die Hirnhäute zu trennen. Überführen Sie die Gehirne in eine 100-Millimeter-Platte, die kaltes PBS enthält. Entfernen Sie mit einem sterilen Skalpell den Hirnstamm, das Kleinhirn, den Thalamus und die Riechbülbe. Nach dem Sammeln der meningenfreien Großhirnrinde überführen Sie diese unverzüglich in ein 50-Milliliter-Konischgefäß mit 5 Milliliter PBS auf Eis. Zerkleinern Sie das Gewebe mit sterilen Scheren mechanisch. Pipettieren Sie das Gewebe mithilfe einer 1-Milliliter-Pipette, bis eine homogene

isolation-and-culture-of-mouse-brain-microvascular-endothelial-cells

Research

Forschung

JoVE Journal

Neuroscience

Neurowissenschaften

Hier beschreiben wir ein Protokoll für die Isolierung und Kultivierung von murinen pulmonalen Endothelzellen. Dieses Verfahren umfasst mechanische und enzymatische Lungengewebe Dissoziation sowie eine 2-Schritt-Reinigungsverfahren mit anti-PECAM-1 und anti-ICAM-2-Antikörper, konjugiert an magnetische Kügelchen, die eine reine Endothelzellen Bevölkerung meist mikrovaskuläre Herkunft produziert.

Isolierung und Kultivierung von pulmonaler Endothelzellen aus neugeborenen Mäusen

Diese Methode beschreibt, wie zu isolieren und zu verewigen mikrovaskulären Endothelzellen von der Maus Gehirn. Wir beschreiben ein Schritt-für-Schritt-Protokoll ausgehend von der Homogenisierung von Hirngewebe, Verdauungsschritten, Aussaat und Immortalisierung der Zellen. Normalerweise dauert es etwa fünf Wochen, um eine homogene, verewigt mikrovaskuläre Endothelzellen Zelllinie zu erhalten.

Erzeugung eines Immortalisierte Murine Gehirn mikrovaskulären Endothelzellen Zelllinie als<em&gt; In Vitro</em&gt; Blut-Hirn-Barriere Modell

Dieses Video zeigt die Isolierung von Mikrogefäßen aus einem Rattengehirn mit einer Kombination aus Dichtegradientenzentrifugation und enzymatischen Verdauungsmethoden. Die isolierten Mikrogefäße können in einem Kulturkolben kultiviert werden, der mit Kollagen- und Fibronektinmatrix vorbeschichtet ist, um Endothelzellkolonien zu erhalten.

Endothelzellkultur aus Mikrogefäßen des Rattengehirns: Ein Verfahren zur Isolierung und Kultivierung von Endothelzellen aus Mikrogefäßen des Rattengehirns

Dieses Video zeigt eine Methode zur Isolierung von zerebralen Perizyten aus einem Mäusegehirn. Die isolierten Zellen werden in perizytenspezifischen Medien kultiviert, um die Perizytenproliferation zu fördern.

Isolierung und Kultivierung von zerebralen Perizyten der Maus

Dieses Video zeigt eine Methode zur Isolierung der Endothelröhren aus dem Hirnparenchym der Maus. Durch eine Kombination aus enzymatischem Verdau und mechanischer Dissoziation entsteht eine intakte Röhre mit Endothelzellen.

Präparation von zerebralen Endotheltuben aus parenchymalen Arteriolen der Maus

Mikrovaskuläre Endothelzellen (BMEC) des Gehirns sind durch spezifische Verbindungsproteine miteinander verbunden, die eine hochregulierte Barriere zwischen Blut und dem Zentralnervensystem (ZNS) bilden, die sogenannte Blut-Hirn-Schranke (BHS). Die Isolierung primärer mikrovaskulärer Endothelzellen des murinen Gehirns, wie in diesem Protokoll beschrieben, ermöglicht detaillierte in vitro-Studien der BHS.

Isolierung von primären murinen Gehirn mikrovaskulären Endothelzellen

Die vaskulären Endothelzellen spielen eine bedeutende Rolle bei vielen wichtigen Herz-Kreislauf-Erkrankungen. Dieser Artikel beschreibt eine einfache Methode, um Endothelzellen aus der Aorta der Maus zu isolieren und zu erweitern, ohne spezielle Geräte zu verwenden. Unser Protokoll bietet ein wirksames Mittel zur Identifizierung von Mechanismen in der Physiopathologie von Endothelzellen.

Isolation und Primärkultur von Maus Aortic Endothelial Cells

Wir beschreiben ein Protokoll, das die Reinigung des Gefäßkompartiments des Mäusegehirns ermöglicht. Zu den isolierten Hirngefäßen gehören Endothelzellen, die durch Tight Junctions verbunden und von einer durchgehenden Basallamina umgeben sind, Perizyten, vaskuläre glatte Muskelzellen sowie perivaskuläre Astrogliamembranen.

Reinigung von Maus-Hirngefäße

Die Erhaltung der Blut-Hirn-Schranke Abdeckung ist der Schlüssel für die Homöostase des zentralen Nervensystems. Dieses Protokoll beschreibt in vitro- Techniken, um die fundamentalen und pathologischen Prozesse abzugrenzen, die die Blut-Hirn-Schrankenabdeckung modulieren.

In-Vitro- Assays zur Beurteilung der Blut-Hirn-Schranke Mesh-artigen Gefäßbildung und -störung

Mikrovaskuläre Endothelzellen der Skelettmuskulatur (MMEC) prägen die Innenwand des Muskels Kapillaren und regulieren, Austausch von Flüssigkeiten/Moleküle und Migration (Immunzellen) zwischen Blut und Muskelgewebe. Isolierung der primären murinen MMEC, ermöglicht wie hier beschrieben umfassende in-vitro-Untersuchungen des Referats"Myovascular".

Isolierung der primären murinen Skelettmuskulatur mikrovaskuläre Endothelzellen

Die intensive Vorbereitung intakter zerebraler endothelialer "Röhrchen" der Maus aus den zerebralen parenchymalen Arteriolen wird für die Untersuchung der zerebralen Blutflussregulation veranschaulicht. Darüber hinaus demonstrieren wir die experimentellen Stärken dieses endothelialen Studienmodells für die Fluoreszenzbildgebung und die elektrophysiologische Messung wichtiger zellulärer Signalwege, einschließlich Änderungen des intrazellulären [Ca2+] und des Membranpotentials.

Isolierung und funktionelle Analyse des arteriolären Endothels des Hirnparenchyms der Maus

Erfahren Sie die Isolierung und Kultur mikrovaskulärer Endothelzellen aus dem Maushirn. Diese Methode ermöglicht zuverlässige in-vitro-Modelle der Blut-Hirn-Schranke für neurologische Forschung.

Isolierung und Kultur mikrovaskulärer Endothelzellen im Maushirn

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