Name: Quantifizierung der embryonalen Letalitätsrate bei Caenorhabditis elegans (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-06-12T15:15:00.000+00:00
Duration: 11 min 35 s
Description: Lernen Sie eine kostengünstige Methode zur Quantifizierung der embryonalen Letalität bei Caenorhabditis elegans. Dieses zugängliche Protokoll erfordert kein Spezialgerät und ermöglicht präzise Messungen entwicklungsbiologischer Defekte.

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	<li>Kamath R. S., Ahringer J. Genome-wide RNAi screening in Caenorhabditis elegans. Methods. 2003;30(4):313&#8211;21.</li>
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	<li>De-Souza E. A. et al. RNA interference may result in unexpected phenotypes in Caenorhabditis elegans. Nucleic Acids Res. 2019;47(8):3957&#8211;69.</li>
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	<li>Bai X. et al. Loss of the seipin gene perturbs eggshell formation in Caenorhabditis elegans. Development. 2020;147(20):dev192997.</li>
	<li>Green R. A. et al. Automated profiling of gene function during embryonic development. Cell. 2024;187(12):3141-3160.e23.</li>
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<table><tbody><tr><td>Ampicillin-Natriumsalz</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A9518</td><td></td></tr><tr><td>Bakteriologisches Pepton</td><td>Fischer Scientific</td><td>DF0118-17-0</td><td></td></tr><tr><td>C. elegans N2</td><td>Caenorhabditis Genetics Center</td><td>N2</td><td>Wildtyp</td></tr><tr><td>C. elegans NL2099</td><td>Caenorhabditis Genetics Center</td><td>NL2099</td><td>rrf-3(pk1426) II. RNAi-empfindlich</td></tr><tr><td>Kalziumchlorid, wasserfrei</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>746495</td><td></td></tr><tr><td>Cholesterol</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>C3045</td><td></td></tr><tr><td>Konische Zentrifugengefäße, 15 mL</td><td>VWR</td><td>60818-725</td><td></td></tr><tr><td>Kulturröhrchen, 14 mL</td><td>VWR</td><td>470150-966</td><td></td></tr><tr><td>Membranpumpe</td><td>Amazon</td><td>TC-100</td><td></td></tr><tr><td>Dissektionsmikroskop</td><td>AmScope</td><td>SM-2</td><td></td></tr><tr><td>Escherichia coli HT115</td><td>Caenorhabditis Genetics Center</td><td></td><td>RNAse III-defizient, für RNAi-Fütterungsexperimente verwendet</td></tr><tr><td>Escherichia coli OP50</td><td>Caenorhabditis Genetics Center</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Granulierter Agar</td><td>Fischer Scientific</td><td>BP97445</td><td></td></tr><tr><td>Handzähler</td><td>LabDepot</td><td>HTCP01</td><td></td></tr><tr><td>IPTG, dioxanfrei (Isopropyl-b-D-thiogalactosid)</td><td>US Biological</td><td>I8500</td><td></td></tr><tr><td>LB-Bouillon (Miller)</td><td>US Biological</td><td>L1520</td><td>Um LB-Medium herzustellen, lösen Sie 25 g LB-Pulver in 1 L destilliertem Wasser. Autoklavieren Sie für 20 min bei 121,1 &deg;C.</td></tr><tr><td>Einwegspritze mit Luer-Lok</td><td>BH Supplies</td><td>BH20LL</td><td></td></tr><tr><td>Magnesiumsulfat</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>M2643</td><td></td></tr><tr><td>Objektträger</td><td>Sail Brand</td><td>7101</td><td></td></tr><tr><td>Petrischalen, 100 mm</td><td>Tritech Research</td><td>T3371</td><td></td></tr><tr><td>Petrischalen, 35 mm</td><td>Tritech Research</td><td>T3501</td><td></td></tr><tr><td>Kaliumphosphatpuffer (PPB)</td><td></td><td></td><td>Um Kaliumphosphatpuffer (1 M) herzustellen, lösen Sie 98 g Kaliumphosphatmonohydrat und 48 g Kaliumphosphatdihydrat in 1 L destilliertem Wasser. Stellen Sie den pH-Wert auf 6 ein. Autoklavieren Sie für 20 min bei 121 &deg;C.</td></tr><tr><td>Kaliumphosphatdihydrat</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>795496</td><td></td></tr><tr><td>Kaliumphosphatmonohydrat</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>529568</td><td></td></tr><tr><td>Schüttelinkubator (nutatierer Mischer)</td><td>Corning LSE</td><td>6720</td><td></td></tr><tr><td>Serologische Pipetten, 25 mL</td><td>Corning</td><td>4489</td><td></td></tr><tr><td>Serologische Pipetten, 5 mL</td><td>Celltreat</td><td>229235</td><td></td></tr><tr><td>Schüttelinkubator Infors Multitron</td><td>INFORS HT</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>Natriumchlorid</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>S9888</td><td></td></tr><tr><td>Natriumhydroxidlösung, 5 N</td><td>Fisher Scientific</td><td>SS256-500</td><td></td></tr><tr><td>Natriumhypochlorit, 5%</td><td>LabDepot</td><td>LC246302</td><td></td></tr><tr><td>Natriumphosphatdihydrat</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>S9763</td><td></td></tr><tr><td>Sorvall ST1 Plus Zentrifuge</td><td>Thermo Scientific</td><td>75016030</td><td></td></tr><tr><td>Rührplatte</td><td>ONilab</td><td>ONi28-S</td><td></td></tr><tr><td>Spritzfilter</td><td>Semmerfeld</td><td>JQP033022QE1</td><td></td></tr><tr><td>Wasserbad</td><td>FOUR E's Scientific</td><td>WB401</td><td></td></tr></tbody></table>

quantifizierung der embryonalen letalitätsrate bei caenorhabditis elegans

Quantifying Embryonic Lethality Rate in Caenorhabditis elegans

Quantifizierung der embryonalen Letalitätsrate bei Caenorhabditis elegans

Embryonic lethality is a cornerstone phenotype used in Caenorhabditis elegans research to characterize developmental defects arising from factors such as ...

Our research focuses on measuring embryonic lethality in Caenorhabditis elegans and determining how strongly a perturbation affects development. This protocol can be applied to assess embryonic lethality caused by genetic mutations, RNAi knockdowns, drug treatment, nutritional supplementation, or environmental perturbations.To begin, gather the required reagents. Prepare 1 liter of nematode growth medium or NGM in a 2-liter bottle. Allow the medium to cool to 55 degrees Celsius in a water bath. After placing the bottle on a stir plate, aseptically add the required reagents. Pour approximately 25 milliliters of medium into each 100-milliliter plate. Inoculate 200 milliliters of LB medium with a single E. coli OP50 colony using a sterile inoculation loop. Place the flask on an orbital shaker at 200 revolutions per minute, and incubate overnight at 37 degrees Celsius. Transfer the E. coli OP50 culture into autoclaved centrifuge bottles. After centrifugation, resuspend the bacterial pellet in 1/20th of the original volume. Seed each 100-millimeter NGM plate with one to 1.5 milliliters of the concentrated culture, and incubate overnight at room temperature to allow the bacteria to grow.

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Research

Forschung

JoVE Journal

Developmental Biology

Entwicklungsbiologie

Dieses Video beschreibt eine traditionelle, plattenbasierte Methode zur Messung der Lebensdauer von C. elegans. Das Beispielprotokoll misst die Lebensdauer von Würmern, die mit RNAi behandelt wurden.

Lebensdaueranalyse: Messung der Langlebigkeit von C. elegans

C. elegans Eiablageverhalten kann wichtige Informationen in Entwicklungs-, Reproduktions- und anatomischen Studien liefern. Dieses Video stellt die wichtigen Schritte eines Eiablageassays vor und zeigt ein Beispielexperiment, in dem ein Medikament auf Reproduktionstoxizität getestet wird.

Egg Laying Assay: Eine Methode zur Quantifizierung des Eiablageverhaltens von C. elegans

Quelle: Anderson, Q. L., et al. Ein Pathosystem von C. elegans mit hohem Durchsatz und hohem Gehalt auf Flüssigkeitsbasis. J. Vis. Exp. (2018)Das Video zeigt einen flüssigkeitsbasierten Assay, bei dem genetisch veränderte C . elegans-Larven in einer Mikroplatte pathogenen Bakterien ausgesetzt werden. Bakterielle Toxine, die in das Medium ausgeschieden werden, führen zu Stress und Tod des Wirts. Ein Fluoreszenzfarbstoff färbt tote Würmer und ermöglicht so eine bildgebende Quantifizierung der...

Bewertung der durch pathogene Bakterien induzierten Mortalität bei Larven von C. elegans

Ein Ei-in-Wurm (EIW)-Assay ist eine nützliche Methode, um Eiablageverhalten quantifizieren. Änderungen in Eiablage kann eine Verhaltensreaktion des Modells...

Messung der Auswirkungen von Bakterien auf<em&gt; C. Elegans</em&gt; Verhalten Mit einem Ei Retention Assay

Wir beschreiben die detaillierten Schritte eines chemischen Hochdurchsatz-Assays im Fadenwurm Caenorhabditis elegans, der zur Beurteilung der Keimbahntoxizität verwendet wird. In diesem Assay wird die Störung der Keimbahnfunktion nach chemischer Exposition mit einem fluoreszierenden Reporter überwacht, der spezifisch für aneuploide Embryonen ist.

Umfassende Beurteilung der Keimbahn Chemical Toxicity Mit der Nematode<em&gt; Caenorhabditis elegans</em

Hier beschreiben wir Protokolle, die speziell zur Überwachung morphogener Defekte entwickelt wurden, die während der frühen und späten Phasen der embryonalen Elongation des Fadenwurms Caenorhabditis elegans auftreten. Letztendlich sind diese Protokolle darauf ausgelegt, Gene zu identifizieren, die diese Phasen regulieren, und ihre unterschiedlichen Anforderungen entlang der antero-posterioren Achse des Embryos zu charakterisieren.

Novel Metrics zur Charakterisierung von Embryonic Dehnung des Nematode<em&gt; Caenorhabditis elegans</em

Hier beschreiben wir die Replikatgruppe Methode, Vorgehensweise quantitativ Messen C. Elegans Lebensdauer/überleben und Healthspan in hohem Durchsatz und robuste Art und Weise, so dass Screening von vielen Bedingungen ohne Einbußen bei der Qualität der Daten. Dieses Protokoll beschreibt die Strategie und bietet ein Software-Tool für die Analyse der Replikatgruppe Daten.

Die Replica-Set-Methode: Eine Hochdurchsatz-Ansatz zu quantitativ Messen Caenorhabditis Elegans Lebensdauer

Diese Arbeit beschreibt ein semi-high-throughput-Protokoll, das eine gleichzeitige 3D-Zeitraffer-Bildgebung der Embryogenese in 80–100 C. elegans Embryonen in einem einzigen Nachtlauf ermöglicht. Darüber hinaus sind Bildverarbeitungs- und Visualisierungstools enthalten, um die Datenanalyse zu optimieren. Die Kombination dieser Methoden mit kundenspezifischen Reporterstämmen ermöglicht eine detaillierte Überwachung der Embryogenese.

Ein Instrument zur Analyse der C. elegans Embryonal development

Um Chaperon-Chaperon- und Chaperon-Substrat-Interaktionen zu untersuchen, führen wir synthetische Interaktionsscreens bei Caenorhabditis elegans mit RNA-Interferenz in Kombination mit leichten Mutationen oder Überexpression von Chaperonen durch und überwachen gewebespezifische Proteindysfunktion auf organismischer Ebene.

Verwendung von Caenorhabditis elegans zum Screening auf gewebespezifische Chaperon-Interaktionen

In dieser Arbeit stellen wir eine allgemeine Methode vor, um die embryonale Lebensfähigkeit und die Gesamtzahl der produzierten Embryonen (Brut) mit dem Modellorganismus C. elegans zu bestimmen.

Messung der Embryonalviabilität und Brutgröße bei Caenorhabditis elegans

Lernen Sie eine kostengünstige Methode zur Quantifizierung der embryonalen Letalität bei Caenorhabditis elegans. Dieses zugängliche Protokoll erfordert kein Spezialgerät und ermöglicht präzise Messungen entwicklungsbiologischer Defekte.

Quantifizierung der embryonalen Letalitätsrate bei Caenorhabditis elegans

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