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	<li>Hattar S, Liao HW, Takao M, Berson DM, Yau KW. Melanopsin-containing retinal ganglion cells: architecture, projections, and intrinsic photosensitivity. Science. 2002;295(5557):1065&#8211;70.</li>
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</ol>

<table><tbody><tr><td>AAV2-hSyn-DIO-hM3D(Gq)-mCherry</td><td>Addgene</td><td>44361</td><td>Cre-abhängiger viraler Vektor, der den exzitatorischen DREADD (hM3Dq) codiert, der mit mCherry für die selektive ipRGC-Aktivierung verschmolzen ist</td></tr><tr><td>Anti-c-Fos-Antikörper (kaninchenmonoklonal)</td><td>Cell Signaling Technology</td><td>2250S</td><td>Primärantikörper zur Detektion von c-Fos als Marker für neuronale Aktivierung</td></tr><tr><td>Anti-tdTomato-Antikörper (Ziege)</td><td>LSBio</td><td>LS-C340696</td><td>Primärantikörper zur Detektion der mCherry/tdTomato-Reporterexpression</td></tr><tr><td>Blue LED driver</td><td>Thorlabs</td><td>LEDD1B</td><td>Stromversorgung zur Kontrolle der Intensität und Ausgabe des blauen LED</td></tr><tr><td>Blue LED light source</td><td>Thorlabs</td><td>M470L5</td><td>LED-Quelle, die blaues Licht (&lambda;max &asymp; 470 nm) für photische Stimulation emittiert</td></tr><tr><td>ClockLab software</td><td>Actimetrics</td><td>Version 6.0.53</td><td>Software für die Erfassung und Analyse zirkadianer Lokomotoraktivitätsdaten</td></tr><tr><td>Clozapine-N-oxid (CNO)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>C0832-5MG</td><td>Ligand zur Aktivierung von hM3Dq DREADD-Rezeptoren in vivo</td></tr><tr><td>DAPI</td><td>Invitrogen</td><td>62248</td><td>Fluoreszierende nukleäre Färbung zur Markierung von Zellkernen</td></tr><tr><td>Donkey anti-goat Alexa Fluor 555</td><td>Invitrogen</td><td>A21432</td><td>Fluoreszierende Sekundärantikörper zur Detektion von Ziegen-Primärantikörpern</td></tr><tr><td>Donkey anti-rabbit Alexa Fluor 488</td><td>Invitrogen</td><td>A21206</td><td>Fluoreszierende Sekundärantikörper zur Detektion von Kaninchen-Primärantikörpern</td></tr><tr><td>Fluoromount-G</td><td>Invitrogen</td><td>00-4958-02</td><td>Einbettmedium zur Erhaltung der Fluoreszenz in Gewebeschnitten</td></tr><tr><td>ImageJ (Fiji) software</td><td>NIH</td><td>Version 2.16.0/1.54g</td><td>Open-Source-Software zur Bildverarbeitung und quantitativen Analyse</td></tr><tr><td>Opn4cre Mäuse</td><td>The Jackson Laboratry</td><td>RRID:IMSR_JAX:035925</td><td>Mäuse, die für chemogenetische Aktivierung verwendet werden</td></tr><tr><td>Violet LED driver</td><td>Mightex</td><td>SLA-1000-2</td><td>Stromversorgung zur Steuerung der violetten LED-Ausgabe</td></tr><tr><td>Violet LED light source</td><td>Mightex</td><td>BLS-LCS-0385-04-22</td><td>LED-Quelle, die violettes Licht (&lambda;max &asymp; 385 nm) für wellenlängenspezifische Stimulation emittiert</td></tr><tr><td>Wild-Typ-Mäuse</td><td>The Jackson Laboratry</td><td>Jackson strain #101043</td><td>Mäuse, die für das violette Licht-Experiment verwendet werden</td></tr></tbody></table>

induzierung von circadianen phasenverschiebungen am tag mittels chemogenetischer und spektraler ansätze

Inducing Daytime Circadian Phase Shifts Using Chemogenetic and Spectral Approaches

Induzierung von circadianen Phasenverschiebungen am Tag mittels chemogenetischer und spektraler Ansätze

In mammals, circadian phase shifting during the daytime is limited by reduced photic responsiveness of the suprachiasmatic nucleus (SCN), restricting the ...

inducing-daytime-circadian-phase-shifts-using-chemogenetic-spectral

Research

Forschung

JoVE Journal

Neuroscience

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Dieser Artikel prüft Methoden, die verwendet werden, um zirkadiane Funktion und Licht Reaktionsfähigkeit bei Mäusen bestimmt werden kann.

Mess-und Circadian Akute Licht Responses in Mäuse mit Rad Laufen Activity

Circadiane Uhren funktionieren innerhalb einzelner Zellen, dh sie sind zellautonome. Hier beschreiben wir Verfahren zur Erzeugung von Zell-autonome Uhrenmodelle mit nicht-invasiven, Luciferase-basierte Echtzeit-Biolumineszenz-Technologie. Reporter Zellen bereitzustellen gefügig, funktionales Modell für das Studium zirkadianen Biologie.

Überwachung Zell-autonome circadiane Uhr Rhythms der Genexpression mittels Luciferase Biolumineszenz Reporter

Quelle: Kodani, S., et.al. Optogenetische Manipulation neuronaler Schaltkreise bei der Überwachung von Schlaf-/Wachzuständen bei Mäusen. J. Vis. Exp. (2019)Dieses Video zeigt die optogenetische Manipulation neuronaler Schaltkreise, die am Übergang vom Schlaf in den Wachzustand bei Mäusen beteiligt sind. Bei dem Verfahren werden eine optische Faser und Elektroden chirurgisch in das Gehirn und die Muskeln implantiert, um eine Lichtstimulation und elektrophysiologische Aufzeichnung zu ermöglichen.

Optogenetische Manipulation neuronaler Schaltkreise für den Übergang vom Schlaf in den Wachzustand bei Mäusen

Ein in-vitro- Biolumineszenz-Assay zellulären zirkadianen Rhythmus in Mamma Epithelzellen bestimmen wird vorgestellt. Diese Methode nutzt Säugerzelle Reporter Plasmide destabilisierte Luciferase unter der Kontrolle des Veranstalters Periode 2 gen zum Ausdruck zu bringen. Es kann zu anderen Zelltypen auszuwertende Organ-spezifischen Auswirkungen auf die zirkadianen Rhythmus angepasst werden.

In-vitro- Biolumineszenz-Assay zirkadianen Rhythmus in Mamma Epithelzellen zu charakterisieren

Genetisch codierte Luciferase ist eine beliebte nicht-invasive Reporter der Genexpression. Eine automatisierte längs Luciferase imaging-Gas - und Temperatur-optimierte Recorder (ALLIGATOR) können längs Aufnahme von Biolumineszenz Zellen unter den unterschiedlichsten Bedingungen. Hier zeigen wir, wie ALLIGATOR im Rahmen des circadianen Rhythmus Forschung verwendet werden können.

Flexible Messung der Biolumineszenz Reporter mit einer automatisierten längs Luciferase Imaging-Gas - und Temperatur-optimierte Recorder (ALLIGATOR)

Diese neu entwickelte Fluoreszenz basierende Technologie ermöglicht Langzeit-monitoring der Transkription der circadianen uhrengene im Suprachiasmatic Nucleus (SCN) Mäuse in Echtzeit und mit einer hohen zeitlichen Auflösung frei zu bewegen.

In Vivo Überwachung der circadianen Uhr Genexpression in der Maus Suprachiasmatischen Kern mit Fluoreszenz-Reporter

Hier stellen wir eine Methode zur Untersuchung von Tagesrhythmen in der Performance nach genauer Kategorisierung der Teilnehmer in zirkadiane Phänotypgruppen auf Basis des Münchner ChronoType-Fragebogens, Goldstandard-Zirkadianer-Phasen-Biomarker und aktiographischeN Maßnahmen vor.

Human Circadian Phenotyping und Diurnal Performance Testing in der realen Welt

Hier beschreiben wir, wie man Drosophila mit einem zirkadianen Tag synchronisiert. Dies ist der erste und wichtigste Schritt, der für das Studium biologischer Rhythmen und Chronobiologie notwendig ist.

Circadian Entrainment von Drosophila Melanogaster

Wir beschreiben Verfahren zur Erfassung täglichen Bewegungsaktivität...

Assaying Bewegungsaktivität zu zirkadianen Rhythmen Study and Sleep Parameter in Drosophila</em

Die Profilierung der RNA-Expression in diskreten Regionen des Mausgehirns erfordert eine präzise und reproduzierbare Strategie zur Gewinnung von Gewebeproben. Hier wird ein Protokoll beschrieben, das sowohl die koronare Schnittführung des Gehirns als auch die mikrodissektionsbasierte Gewebeentnahme mithilfe eines Gewebecorers nutzt. Die Ausbeute und Qualität der gesamten RNA aus den resultierenden Proben bestätigt die Eignung der dargestellten Methode.

Non-Laser Capture Microscopy Ansatz für die Mikrodissektion von Discrete-Maus Hirnregionen für Gesamt-RNA Isolierung und Downstream Next-Generation Sequencing and Gene Expression Profiling

National Institute of Mental Health (NIMH), National Institutes of Health (NIH).  Diese Studie führt chemogenetische und auf violettes Licht basierende Strategien ein, um eine zuverlässige zirkadiane Phasenverschiebung am Tag zu ermöglichen.

Induzierung von circadianen Phasenverschiebungen am Tag mittels chemogenetischer und spektraler Ansätze

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