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<ol>
	<li>Massier L, et al. An integrated single cell and spatial transcriptomic map of human white adipose tissue. Nat Commun. 2023;14(1):1438. doi:10.1038/s41467-023-36983-2.</li>
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</ol>

```html
<table><tbody><tr><td>BD OptEIA Mouse TNF ELISA Kit</td><td></td><td>BD Biosciences</td><td>560478</td></tr><tr><td>Bodipy 558/568 C12</td><td>Flow cytometry: 1:10000; Staining: 1:2000</td><td>Invitrogen</td><td>D3835</td></tr><tr><td>Bovine Serum Albumin</td><td>3%</td><td>Sigma</td><td>A9647</td></tr><tr><td>CD107a (LAMP1) – AF647</td><td>Staining: 1:100; Flow cytometry: 1:200</td><td>BioLegend</td><td>121610</td></tr><tr><td>CD11c – BV605</td><td>Flow cytometry: 1:100</td><td>BioLegend</td><td>117334</td></tr><tr><td>CD16/32</td><td>Flow cytometry: 1:100</td><td>Invitrogen</td><td>14-0161-82</td></tr><tr><td>CD301 – AF647</td><td>Flow cytometry: 1:50</td><td>Bio-Rad</td><td>MCA2392A647</td></tr><tr><td>CD36 – PE</td><td>Flow cytometry: 1:400</td><td>BioLegend</td><td>102606</td></tr><tr><td>CD45 – PE</td><td>Flow cytometry: 1:100</td><td>BD Pharmingen</td><td>555483</td></tr><tr><td>Click-iT Plus EdU Alexa Fluor 350 Flow Cytometry Assay Kit</td><td>EdU: 5 µM</td><td>Invitrogen</td><td>C10632</td></tr><tr><td>Clodronat-Liposomen</td><td>500 µg/ml Clodronat</td><td>Liposoma</td><td></td></tr><tr><td>Collagenase Typ 2</td><td>1 mg/ml, 315 U/mg</td><td>Worthington</td><td>LS004176</td></tr><tr><td>CyQUANT LDH Cytotoxicity Assay Kit</td><td></td><td>Invitrogen</td><td>C20301</td></tr><tr><td>DAPI</td><td>Flow cytometry: 0,2 µg/ml</td><td>Thermo Fisher</td><td>62248</td></tr><tr><td>Ethanol</td><td>70%</td><td>Carl Roth</td><td>T913.1</td></tr><tr><td>F4/80 – AF647</td><td>Flow cytometry: 1:100</td><td>Invitrogen</td><td>MF48021</td></tr><tr><td>F4/80 – PE-Cy7</td><td>Flow cytometry: 1:200</td><td>Invitrogen</td><td>25-4801-82</td></tr><tr><td>Fetal Calf Serum</td><td>1,10</td><td>Gibco</td><td>10270106</td></tr><tr><td>Fetal Calf Serum</td><td>1,20</td><td>Gibco</td><td>10270106</td></tr><tr><td>HBSS (-Mg, -Ca)</td><td></td><td>Gibco</td><td>14170138</td></tr><tr><td>HEPES</td><td>13 mM</td><td>Roth</td><td>HN77.2</td></tr><tr><td>Hoechst 33342</td><td>1:10.000</td><td>Life Technologies</td><td>H3570</td></tr><tr><td>LysoTracker – AF647</td><td>Flow cytometry: 1:20000; Staining: 1:10000</td><td>Invitrogen</td><td>H34477</td></tr><tr><td>MAC-2</td><td>Staining: 1:1000</td><td>Cedarlane</td><td>CL8942AP</td></tr><tr><td>Millicell Zellkultur-Insert, 30 mm, hydrophil, PTFE, 0,4 µm</td><td></td><td>Merck Millipore</td><td>PICM0RG50</td></tr><tr><td>PBS (-Mg, -Ca)</td><td></td><td>Gibco</td><td>14190169</td></tr><tr><td>PBS (-Mg, -Ca)</td><td></td><td>Gibco</td><td>14190169</td></tr><tr><td>Penicillin/Streptomycin (10.000 U/ml)</td><td>0,111111111</td><td>Gibco</td><td>11548876</td></tr><tr><td>Penicillin/Streptomycin (10.000 U/ml)</td><td>0,111111111</td><td>Gibco</td><td>11548876</td></tr><tr><td>Perilipin</td><td>2 µg/ml</td><td>Abcam</td><td>ab3526</td></tr><tr><td>Plexxikon 5622</td><td>40 µM</td><td>Plexxikon Inc.</td><td>HY-114153</td></tr><tr><td>RPMI-Medium 1640</td><td>mit 11 mM Glucose</td><td>Sigma Aldrich</td><td>R8758</td></tr><tr><td>RPMI-Medium 1640</td><td></td><td>Sigma</td><td>R8758</td></tr><tr><td>TC-Insert für 6-Well-Platten</td><td></td><td>Sarstedt</td><td>83.3930.040</td></tr><tr><td>TPP Tissuekultur-Testplatte 6</td><td></td><td>TPP</td><td>92006</td></tr><tr><td>Triton X-100</td><td>1%</td><td>Carl Roth</td><td>3051.2</td></tr><tr><td>Zinkchlorid</td><td>0,8 mM</td><td>Sigma</td><td>Z0152</td></tr><tr><td>Zinkformalin</td><td></td><td>Polyscience</td><td>21516-3.75</td></tr></tbody></table>
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ein ex vivo mausmodell für fettreiche, diätähnliche fettgewebeentzündung

An ex vivo Mouse Model for High-Fat Diet-Like Adipose Tissue Inflammation

Ein ex vivo Mausmodell für fettreiche, diätähnliche Fettgewebeentzündung

This protocol describes an ex vivo mouse model that recapitulates selected cellular and inflammatory features observed in visceral adipose tissue (VAT) ...

We are investigating inflammation in adipose tissue, focusing on the role of adipose tissue macrophages in this process. This model can be applied in a great variety of adipose tissue inflammation research where the focus is on the adipose tissue itself. To begin, prepare the culture medium under sterile conditions.Warm the culture medium and sterile PBS to 37 degrees Celsius. Clean all equipment and the work area inside the tissue culture hood with 70%ethanol. After placing the sacrificed animal in a glass beaker containing 70%ethanol, wipe the exterior of the glass beaker with ethanol and transfer it into the tissue culture hood.Using blunt forceps, place the mouse in a supine position, and pin it to a dissection board. Then, add a thin layer of pre-warmed PBS to a Petri dish. Change to a fresh pair of gloves.Using forceps, lift the lower abdominal skin, and make a small horizontal incision using scissors to open the abdominal cavity. Make a vertical incision extending from the initial cut to expose the internal organs. For male mice, carefully lift the gonadal fat pad, which is attached to the epididymis and testis.Make a cut above the epididymis. Alternatively, excise the epidi

an-ex-vivo-mouse-model-for-high-fat-diet-like-adipose-tissue

Research

Forschung

JoVE Journal

Immunology and Infection

Immunologie und Infektion

Fettgewebe (AT) ist ein Ort der intensiven Immunzellaktivierung und Interaktion. Fast alle Zellen des Immunsystems sind in AT und ihre Verhältnisse werden durch Fettleibigkeit verändert. Proper Isolierung, Quantifizierung und Charakterisierung von AT Immunzellpopulationen sind entscheidend für das Verständnis ihrer Rolle in immunometabolic Krankheit.

Isolation von Fettgewebe Immune Cells

Fettgewebe (AT) kann die Homöostase des ganzen Körpers beeinflussen, daher ist es wichtig, die molekularen Mechanismen der Adipozytendifferenzierung und -funktion zu verstehen. Wir stellen ein Protokoll zur Verfügung, um neue Einblicke in diese Prozesse zu gewinnen, indem wir die Homöostase, die Differenzierung und die Hypoxie-Exposition der Adipozyten als Modell für die induzierte Apoptose der Adipozyten analysieren.

Mechanismus der Regulierung der Adipocyte Zahlen in adulten Organismen durch Differenzierung und Apoptosis Homöostase

Es wird ein einfaches und zuverlässiges, diächterinduziertes Zäuntiermodell für alkoholfreie Steatohepatitis (NASH) beschrieben, das durch das nicht-SPF-Gehäuse der Tiere und die Verabreichung einer bestimmten fettreichen Ernährung erreicht wird. Wir beschreiben die Identifizierung von Leber-und Fettzell-Subsets, um die menschlichen Immunbedingungen zu rekapitulieren, indem Mäuse Umweltkeimen aussetzen.

Ein fortgeschrittenes Murine-Modell für alkoholfreie Steatohepatitis in Verbindung mit Typ-2-Diabetes

Wir beschreiben ein 3D-Human-Human-Extrazellmatrix-Adipozyten-In-vitro-Kultursystem, das die Zerlegung der Rollen der Matrix und der Adipozyten bei der Kodipierung des metabolischen Phänotyps des Fettgewebes ermöglicht.

Ein menschliches 3D extrazelluläres Matrix-Adipozyten-Kulturmodell zum Studium der Matrix-Zell Metabolischen Crosstalk

Dieses Protokoll beschreibt den technischen Ansatz zur Isolierung von adipogenen und fibro-inflammatorischen Stromazell-Subpopulationen aus murinen intraabdominalen Depots aus weißem Fettgewebe (WAT) durch fluoreszenzaktivierte Zellsortierung oder immunomagnetische Kügelchentrennung.

Isolierung von adipogenen und fibro-inflammatorischen Stromazell-Subpopulationen aus murinen intraabdominalen Fettdepots

Dieses Protokoll beschreibt die Isolierung von Präadipozyten der Maus aus subkutanem Fett, ihre Differenzierung in reife Adipozyten und die Induktion einer Insulinresistenz. Die Insulinwirkung wird durch die Phosphorylierung/Aktivierung von Mitgliedern des Insulin-Signalwegs durch Western Blot bewertet. Diese Methode ermöglicht die direkte Bestimmung der Insulinresistenz/-sensitivität in primären Adipozyten.

Differenzierte Mausadipozyten in Primärkultur: ein Modell der Insulinresistenz

Die Triglycerid-Lipolyse in Adipozyten ist ein wichtiger Stoffwechselprozess, der zur Freisetzung von freien Fettsäuren und Glycerin führt. Hier stellen wir ein detailliertes Protokoll zur Messung der basalen und stimulierten Lipolyse in Adipozyten und ex vivo Fettgewebe von Mäusen zur Verfügung.

Messung der Lipolyserate in ex vivo murinem Fettgewebe und primären Präadipozyten, die in vitro differenziert wurden

Dieses Protokoll beschreibt die halbautomatische Isolierung der stromalen vaskulären Fraktion (SVF) aus murinem Fettgewebe, um Präadipozyten zu erhalten und eine Adipozytendifferenzierung in vitro zu erreichen. Die Verwendung eines Gewebedissoziators für den Kollagenaseverdau reduziert die experimentelle Variation und erhöht die Reproduzierbarkeit.

Halbautomatische Isolierung der stromalen vaskulären Fraktion aus murinem weißem Fettgewebe mit Hilfe eines Gewebedissoziators

Dieses Protokoll stellt einen detaillierten Ansatz zur Replikation eines Mausmodells der Hyperlipidämie-induzierten Herzinsuffizienz mit erhaltener Ejektionsfraktion (HFpEF) vor. Das Design kombiniert die Verabreichung des Adeno-assoziierten Virus 9-kardialen Troponin-T-Low-Density-Lipoprotein-Rezeptors (AAV9-cTnT-LDLR) und Poloxamer-407 (P-407).

Ein Mausmodell der Hyperlipidämie-induzierten Herzinsuffizienz mit erhaltener Ejektionsfraktion

Schistosoma mansoni Eier sind potente Stimulatoren der T-Helferzellen vom Typ 2 (Th2) Immunantwort, die charakteristisch für Parasitenbefall, Asthma und allergische Entzündung. Dieses Protokoll nutzt S. mansoni Ei Injektion an einen CD4 Th2-Zytokin-induzierte Entzündungsreaktion in der Lunge, Lunge durch Granulombildung um das Ei gekennzeichnet, Eosinophilie und Makrophagen-Aktivierung Alternative zu generieren.

Mit den Eizellen<em&gt; Schistosoma mansoni</em&gt; Als ein<em&gt; In vivo</em&gt; Modell von Helminthen-induzierten Lungenentzündung

Leipzig University.  Mit einem ex-vivo-Explant-Modell werden kleine Stücke des rostralen Anteils des viszeralen weißen Fettgewebes von mageren Mäusen 7–10 Tage lang kultiviert, was die Induktion und Untersuchung der Entzündung von Fettgewebe während der fettreichen Ernährung ermöglicht.

Ein ex vivo Mausmodell für fettreiche, diätähnliche Fettgewebeentzündung

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