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<table><tbody><tr><td>10% Tween-20</td><td>Bio-Rad Laboratories</td><td>1662404</td><td>NA</td></tr><tr><td>20x PBS, pH7.4</td><td>Growcells.com</td><td>MRGF-6396</td><td>2,74 M NaCl, 53,7 mM KCl, 20,3 mM Na2HPO4, 29,4 mM KH2PO4&nbsp;</td></tr><tr><td>20x SSC</td><td>Quality Biological</td><td>351-003-131</td><td>3 M NaCl, 0,3 M Natriumcitrat</td></tr><tr><td>37 &deg;C Inkubator</td><td>Fisher Scientific (Isotemp)</td><td>15-015-2633</td><td>NA</td></tr><tr><td>37 &deg;C Wasserbad</td><td>Fisher Scientific</td><td>FSGPD15D</td><td>NA</td></tr><tr><td>Aluminiumfolie</td><td>Reynolds Wrap/Fisher Brand</td><td>15-078-291</td><td>NA</td></tr><tr><td>Antikörper: Maus-anti-Abrupt</td><td>DSHB</td><td>Abrupt; RRID: AB_528344&nbsp;</td><td>Verdünnung: 1:20</td></tr><tr><td>Antikörper: Hühner-anti-GFP</td><td>Millipore Sigma</td><td>Catalog# 06-896; RRID: AB-619712</td><td>Verdünnung: 1:500</td></tr><tr><td>Antikörper: Kaninchen-anti-GFP</td><td>Life Technologies</td><td>#11122; RRID: AB_221569</td><td>Verdünnung: 1:500</td></tr><tr><td>Antikörper: Kaninchen-anti-Dll</td><td>Genscript/Desplan lab</td><td>-</td><td>Verdünnung: 1:200</td></tr><tr><td>Antikörper: Ratten-anti-NCadherin</td><td>DSHB</td><td>DN-Ex #8, RRID: AB_528121</td><td>Verdünnung: 1:50</td></tr><tr><td>Antikörper: Kaninchen-anti-SoxN</td><td>Genscript/Desplan lab</td><td>-</td><td>Verdünnung: 1:200</td></tr><tr><td>Antikörper: Meerschweinchen-anti-Traffic jam</td><td>Geschenk von D. Godt</td><td>-</td><td>Verdünnung: 1:2.000</td></tr><tr><td>Antikörper: Esel-anti-Ratte 405</td><td>Jackson ImmunoResearch</td><td>Code # 712-475-150; RRID: AB_2340680</td><td>Verdünnung: 1:100</td></tr><tr><td>Antikörper: Esel-anti-Hühner 488</td><td>Jackson ImmunoResearch</td><td>Code #703-545-155; RRID: AB_2340375</td><td>Verdünnung: 1:200</td></tr><tr><td>Antikörper: Esel-anti-Maus 488</td><td>Jackson ImmunoResearch</td><td>Code #715-545-151; RRID: AB_2341099</td><td>Verdünnung: 1:200</td></tr><tr><td>Antikörper: Esel-anti-Kaninchen 488</td><td>Jackson ImmunoResearch</td><td>Code #711-545-152; RRID: AB_2313584</td><td>Verdünnung: 1:200</td></tr><tr><td>Antikörper: Esel-anti-Kaninchen A555</td><td>Thermo Scientific</td><td>Catalog #A-31572; RRID: AB_162543</td><td>Verdünnung: 1:200</td></tr><tr><td>Antikörper: Esel-anti-Ratte Cy3</td><td>Jackson ImmunoResearch</td><td>Code #712-165-153; RRID: AB_2340667</td><td>Verdünnung: 1:200</td></tr><tr><td>Antikörper: Esel-anti-Meerschweinchen 647</td><td>Jackson ImmunoResearch</td><td>Code #706-605-148; RRID: AB_2340476</td><td>Verdünnung: 1:200</td></tr><tr><td>Antikörper: Esel-anti-Ratte 647</td><td>Jackson ImmunoResearch</td><td>Code #712-605-153; RRID: AB_2340694</td><td>Verdünnung: 1:200</td></tr><tr><td>Antifade-Montagemittel</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>S36940 (SlowFade Gold Antifade Montagemittel)</td><td>Andere Slowfades funktionieren ebenfalls, einschließlich solche mit DAPI (S36936)</td></tr><tr><td>Konfokalmikroskop</td><td>Zeiss</td><td>LSM-880</td><td>NA</td></tr><tr><td>Deckgläser (22 x 30)</td><td>VWR</td><td>16004-332</td><td>NA</td></tr><tr><td>Fliege: D. melanogaster: ab-GFP-FLAG</td><td>BDSC</td><td>38626; RRID: BDSC_38626</td><td>NA</td></tr><tr><td>Fliege: D. melanogaster: Canton S</td><td>BDSC</td><td>64349; RRID: BDSC_64349</td><td>NA</td></tr><tr><td>Fliege: D. melanogaster: dpp-Gal4</td><td>BDSC</td><td>1553; RRID: BDSC_1553</td><td>NA</td></tr><tr><td>Fliege: D. melanogaster: ham-GFP.FPTB</td><td>BDSC</td><td>83660; RRID: BDSC_83660</td><td>NA</td></tr><tr><td>Fliege: D. melanogaster: yw; 10xUAS-myr-GFP;</td><td>BDSC</td><td>32198; RRID: BDSC_32198</td><td>NA</td></tr><tr><td>Fliege: D. melanogaster: UAS-Stinger</td><td>BDSC</td><td>84277; RRID: BDSC_84277</td><td>NA</td></tr><tr><td>Fliege: D. melanogaster: wit-KO-Gal4</td><td>BDSC</td><td>600136; RRID: BDSC_600136</td><td>NA</td></tr><tr><td>Pinzette</td><td>Dumont</td><td>#5 oder #55s</td><td>NA</td></tr><tr><td>Glasplatten</td><td>VWR</td><td>16005-106</td><td>NA</td></tr><tr><td>Glycin</td><td>Millipore Sigma</td><td>G7126-10MG</td><td>NA</td></tr><tr><td>HCR-Amplifikationspuffer</td><td>Molecular Instruments</td><td>HCR Gold RNA-FISH Kit</td><td>NA</td></tr><tr><td>HCR-Gold-Amplifer</td><td>Molecular Instruments</td><td>HCR Gold RNA-FISH Kit</td><td>NA</td></tr><tr><td>HCR HiFi-Sonden</td><td>Molecular Instruments</td><td>HCR Gold RNA-FISH Kit</td><td>NA</td></tr><tr><td>HCR-Sonden-Hybridisierungspuffer</td><td>Molecular Instruments</td><td>HCR Gold RNA-FISH Kit</td><td>Enthält Formamid</td></tr><tr><td>HCR-Sonden-Waschpuffer</td><td>Molecular Instruments</td><td>HCR Gold RNA-FISH Kit</td><td>Enthält Formamid</td></tr><tr><td>Nagellack (klar)</td><td>Electron Microscopy Sciences</td><td>72180</td><td>NA</td></tr><tr><td>Nukleasenfreies Wasser (nicht mit DEPC behandelt)</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>AM9937</td><td>NA</td></tr><tr><td>Nutating-Mischer</td><td>Corning/Fisher Scientific</td><td>10-320-100</td><td>NA</td></tr><tr><td>Paraformaldehyd, 16% (w/v)</td><td>Electron Microscopy Sciences</td><td>15710</td><td>Giftig</td></tr><tr><td>PCR-Maschine/Thermocycler</td><td>Bio-Rad</td><td>1851148 (C1000 Touch Thermal Cycler)</td><td>NA</td></tr><tr><td>PCR-Pull-Apart-Röhrchenstreifen mit Kuppelkappenstreifen (0,2 ml)&nbsp;</td><td>USA Scientific</td><td>#1402-2400</td><td>NA</td></tr><tr><td>Petrischalen (150 x 15 mm; zur Herstellung von Präparierschalen)</td><td>Fisher Scientific</td><td>FB0875714</td><td>NA</td></tr><tr><td>RNase ZAP</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>AM9780</td>

hybridisierungskettenreaktion fish im sich entwickelnden drosophila-optikuslappen

Hybridization Chain Reaction FISH in the Developing Drosophila Optic Lobe

Hybridisierungskettenreaktion FISH im sich entwickelnden Drosophila-Optikuslappen

Understanding neural development requires precise characterization of when and where genes are expressed. Techniques such as in situ hybridization have ...

hybridization-chain-reaction-fish-developing-drosophila-optic

Research

Forschung

JoVE Journal

Neuroscience

Neurowissenschaften

Mit Whole Berg In situ Hybridisierung zu Molecular Biology und Organismal Link-

Die dendritischen Verzweigung sensorischen Neuronen...

Morphologische Analyse Drosophila Larven peripheren sensorischen Neuron Dendriten und Axone mit Genetic Mosaike

Whole Berg RNA Fluorescent<em&gt; In situ</em&gt; Hybridisierung<em&gt; Drosophila</em&gt; Embryonen

Der Zebrafisch, einem kleinen tropischen Fischen, hat sich zu einem beliebten Modell zum Studium der Genfunktion während Wirbeltiere Entwicklung und Krankheit. Die zeitliche und räumliche Expression von Zielgenen kann bestimmt werden...

Hohe Auflösung Ganze Berge<em&gt; In Situ</em&gt; Hybridisierung innerhalb Zebrafischembryonen Gene Expression und Funktion zu untersuchen

Immunfärbung ist eine effektive Technik zur Visualisierung spezifischer Zelltypen und Proteine innerhalb von Geweben. Durch die Verwendung von Ultraschall verringert das hier beschriebene Protokoll die Notwendigkeit, Drosophila melanogaster-Gewebe von Embryonen und Larven im Spätstadium vor der Immunfärbung zu präparieren. Wir bieten eine effiziente Methodik für die Immunfärbung von Formaldehyd-fixierten Whole-Mount-Larven.

Beschallung-erleichtert Immunfluoreszenzfärbungen der Late-Stage embryonalen und Larven<em&gt; Drosophila</em&gt; Gewebe<em&gt; In-situ</em

Wir beschreiben eine Multi-Target-chromogenen ganze-mount in situ Hybridisierung (MC-WISH) Verfahren in intakten Drosophila-Embryos eine gleichzeitige und spezifischen Nachweis von drei verschiedenen mRNA-Verteilungsmuster durch Kontrastfarbe Niederschläge.

Multi-Target-Chromogenic Whole-mount<em&gt; In-situ-</em&gt; Hybridisierung zum Vergleich Genexpression Domains in<em&gt; Drosophila</em&gt; Embryos

Die beschriebenen RNA in Situ Hybridisierung Protokoll ermöglicht die Erkennung von RNA in ganze Drosophila Embryos oder seziert Gewebe. Mit 96-Well-Mikrotiterplatten und Tyramide Signalverstärkung, können Protokolle mit hoher Auflösung, Empfindlichkeit und Durchsatz und bei relativ geringen Kosten erkannt werden.

Hochauflösender Fluoreszenz In Situ Hybridisierung in Drosophila Embryos und Gewebe mit Tyramide Signalverstärkung

Dieses Manuskript stellt eine detaillierte Methode zur Erzeugung von X-Chromosom Arm Sonden und darstellende Fluoreszenz in Situ Hybridisierung (FISH) zu prüfen, den Zustand der Schwester Chromatids Zusammenhalt im prometaphase und Metaphase ich verhaftet  Drosophila Eizellen. Dieses Protokoll eignet sich zur Feststellung, ob meiotische Arm Zusammenhalt intakt oder in verschiedenen Genotypen gestört ist.

Fluoreszenz In Situ Hybridisierung (FISH) verwenden, um den Zustand der Arm Zusammenhalt im Prometaphase und Metaphase überwachen ich Drosophila Eizellen

Der Artikel beschreibt die Methoden und Reagenzien, die notwendig sind, um eine Hybridisierungskettenreaktion, RNA-Whole-Mount-Fluoreszenz-in-situ-Hybridisierung (HCR, RNA, WM-FISH) durchzuführen, um Einblicke in die räumliche und zelluläre Auflösung von chemosensorischen Rezeptorgenen in der Moskitoantenne und im Oberkieferpalp zu erhalten.

Hybridisierung Kettenreaktion RNA Whole-Mount Fluoreszenz in situ Hybridisierung von chemosensorischen Genen in Riechanhängen von Mücken

Expansion-Assisted Itercence In Situ Hybridization (EASI-FISH) ist eine robuste Technik, die Expansionsmikroskopie mit Fluoreszenz-in-situ-Hybridisierung (FISH) kombiniert, um die Expression mehrerer Gene in dickem Gewebe nachzuweisen. Dieses Protokoll beschreibt die jüngsten Fortschritte in der Methode und ihre Anpassung an die Markierung des intakten Drosophila-Zentralnervensystems.

Multiplex-Detektion der Genexpression im intakten Drosophila-Gehirn mittels expansionsunterstützter iterativer Fluoreszenz-In-situ-Hybridisierung

New York University.  Dieses Protokoll beschreibt die Schritte, die erforderlich sind, um die Hybridisierungskettenreaktion mit fluoreszierender In-situ-Hybridisierung (HCR-FISH) in den optischen Lappen der Drosophila melanogaster-Larve durchzuführen. Verfahren für Sondendesign, Hybridisierung, Amplifikation und Gewebemontage werden detailliert beschrieben, um die Visualisierung des sich entwickelnden Optikuslappens zu erleichtern.

Hybridisierungskettenreaktion FISH im sich entwickelnden Drosophila-Optikuslappen

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