ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol>
	<li>Vogel, J. W. et al. Spread of pathological tau proteins through communicating neurons in human Alzheimer&#8217;s disease. Nat Commun 11, 2612 (2020).</li>
	<li>Weber, A. J. et al. Tau seeds induce neurofibrillary tangle formation across brain regions via individual-specific connectivity. Neuron S0896627326001649 doi:10.1016/j.neuron.2026.03.001&#160;(2026).</li>
	<li>Luo, W. et al. Microglial internalization and degradation of pathological tau is enhanced by an anti-tau monoclonal antibody. Sci Rep 5, 11161 (2015).</li>
	<li>Bol&#243;s, M. et al. Direct Evidence of Internalization of Tau by Microglia In Vitro and In Vivo. JAD 50, 77-87 (2016).</li>
	<li>Bol&#243;s, M. et al. Absence of CX3CR1 impairs the internalization of Tau by microglia. Mol Neurodegeneration 12, 59 (2017).</li>
	<li>Perea, J. R. et al. Extracellular Monomeric Tau Is Internalized by Astrocytes. Front. Neurosci. 13, 442 (2019).</li>
	<li>Fleeman, R. M., &#38; Proctor, E. A.&#160;Astrocytic Propagation of Tau in the Context of Alzheimer&#8217;s Disease. Front. Cell. Neurosci. 15, 645233 (2021).</li>
	<li>Mothes, T. et al. Astrocytic uptake of neuronal corpses promotes cell-to-cell spreading of tau pathology. acta neuropathol commun 11, 97 (2023).</li>
	<li>Eltom, K., Mothes, T., Libard, S., Ingelsson, M., &#38; Erlandsson, A. Astrocytic accumulation of tau fibrils isolated from Alzheimer&#8217;s disease brains induces inflammation, cell-to-cell propagation and neuronal impairment. acta neuropathol commun. 12, 34 (2024).</li>
	<li>Ferrer, I. et al. Involvement of Oligodendrocytes in Tau Seeding and Spreading in Tauopathies. Front. Aging Neurosci. 11, 112 (2019).</li>
	<li>Hopp, S. C. et al. The role of microglia in processing and spreading of bioactive tau seeds in Alzheimer&#8217;s disease. J Neuroinflammation 15, 269 (2018).</li>
	<li>Asai, H. et al. Depletion of microglia and inhibition of exosome synthesis halt tau propagation. Nat Neurosci 18, 1584-1593 (2015).</li>
	<li>Dickson, J. R. et al. Alzheimer disease-associated tau post-translational modification mimics impact tau propagation and uptake. Journal of Neuropathology &#38; Experimental Neurology 84, 459-470 (2025).</li>
	<li>Weisov&#225;, P. et al. Therapeutic antibody targeting microtubule-binding domain prevents neuronal internalization of extracellular tau via masking neuron surface proteoglycans. acta neuropathol commun 7, 129 (2019).</li>
	<li>Shamir, D. B., Rosenqvist, N., Rasool, S., Pedersen, J. T., &#38; Sigurdsson, E. M. Internalization of tau antibody and pathological tau protein detected with a flow cytometry multiplexing approach. Alzheimer&#8217;s &#38; Dementia. 12, 1098-1107 (2016).</li>
	<li>Evans, L. D. et al. Extracellular Monomeric and Aggregated Tau Efficiently Enter Human Neurons through Overlapping but Distinct Pathways. Cell Reports 22, 3612-3624 (2018).</li>
	<li>Holmes, B. B. et al. Heparan sulfate proteoglycans mediate internalization and propagation of specific proteopathic seeds. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 110, (2013).</li>
	<li>Boland, B. et al. Autophagy induction and autophagosome clearance in neurons: relationship to autophagic pathology in Alzheimer&#8217;s disease. J Neurosci 28, 6926-6937 (2008).</li>
	<li>Mandrekar, S. et al. Microglia Mediate the Clearance of Soluble A&#946; through Fluid Phase Macropinocytosis. J. Neurosci. 29, 4252-4262 (2009).</li>
	<li>Oh-hashi, K., Furuta, E., Fujimura, K., &#38; Hirata, Y. Application of a novel HiBiT peptide tag for monitoring ATF4 protein expression in Neuro2a cells. Biochemistry and Biophysics Reports. 12, 40-45 (2017).</li>
	<li>Schwinn, M. K. et al. CRISPR-Mediated Tagging of Endogenous Proteins with a Luminescent Peptide. ACS Chem. Biol. 13, 467-474 (2018).</li>
	<li>Boursier, M. E. et al. The luminescent HiBiT peptide enables selective quantitation of G protein&#8211;coupled receptor ligand engagement and internalization in living cells. Journal of Biological Chemistry 295, 5124-5135 (2020).</li>
	<li>Gibson, D. G. et al. Enzymatic assembly of DNA molecules up to several hundred kilobases. Nat Methods 6, 343-345 (2009).</li>
	<li>Shultz, A. et al. Extracellular tau clearance is governed by its aggregation state and independent of microglial activation by LPS and IFN-&#947;. Neurobiology of Disease 215, 107058 (2025).</li>
	<li>Rauch, J. N. et al. LRP1 is a master regulator of tau uptake and spread. Nature 580, 381-385 (2020).</li>
	<li>Rauch, J. N. et al. Tau Internalization is Regulated by 6-O Sulfation on Heparan Sulfate Proteoglycans (HSPGs). Sci Rep 8, 6382 (2018).</li>
	<li>Shultz, A., Mena, D., Roy, J. L., Nulman, J., &#38; Rauch, J. N. Protocol for the removal of bound endotoxin from tau protein produced in Escherichia coli. STAR Protocols. 6, 104177 (2025).</li>
	<li>Smith, P. K. et al. Measurement of protein using bicinchoninic acid. Analytical Biochemistry 150, 76-85 (1985).</li>
	<li>Bradford, M. M. A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding. Analytical Biochemistry. 72, 248&#8211;254 (1976).</li>
	<li>Dr&#228;ger, N. M. et al. A CRISPRi/a platform in human iPSC-derived microglia uncovers regulators of disease states. Nat Neurosci 25, 1149-1162 (2022).</li>
	<li>Elias, R. D. et al. Cathepsin C&#8211;Catalyzed Ligation Generates Intralysosomal Amyloid Fibrils from Dipeptide Esters. Preprint at https://doi.org/10.64898/2025.12.23.696283 (2025).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Accutase</td><td>Thermo Scientific</td><td>A1110501</td><td></td></tr><tr><td>Konische sterile Polypropylen-Zentrifugenrohre</td><td>Fisher Scientific</td><td>12-565-268</td><td></td></tr><tr><td>Corning Matrigel Wachstumsfaktor-reduzierte (GFR) Basalmembran-Matrix, phenolrotfrei, LDEV-frei</td><td>Corning</td><td>356231</td><td></td></tr><tr><td>DMEM/F-12, HEPES</td><td>Thermo Scientific</td><td>11330057</td><td></td></tr><tr><td>Doxycyclin</td><td>Clontech</td><td>631311</td><td></td></tr><tr><td>DPBS</td><td>Thermo Scientific</td><td>14-190-250</td><td></td></tr><tr><td>GlutaMAX</td><td>Thermo Scientific</td><td>35050061</td><td></td></tr><tr><td>Grafik-Software</td><td>GraphPad Prism (oder ähnlich)</td><td>n/a</td><td></td></tr><tr><td>Humanes GM-CSF</td><td>Thermo Scientific</td><td>300-03</td><td></td></tr><tr><td>KnockOut DMEM</td><td>Thermo Scientific</td><td>10829018</td><td></td></tr><tr><td>Lumineszenter Plattenleser</td><td>SpectraMax i3x (oder ähnlich) - Molecular Devices</td><td>n/a</td><td></td></tr><tr><td>Mikrozentrifugenrohre</td><td>Fisher Scientific</td><td>02-682-002</td><td></td></tr><tr><td>Mikrotiterplatte, 96-Well, PS, Halbbereich, Weiß</td><td>Greiner</td><td>675075</td><td></td></tr><tr><td>mTeSR Plus</td><td>STEMCELL Technologies</td><td>100-0276</td><td></td></tr><tr><td>Nano-Glo HiBiT Lytic Detection System</td><td>Promega</td><td>N3030</td><td></td></tr><tr><td>Poly-L-Lysin hydrobromid&nbsp;</td><td>Fisher Scientific</td><td>ICN15017750</td><td></td></tr><tr><td>Rekombinantes Human IL-34</td><td>Thermo Scientific</td><td>200-34</td><td></td></tr><tr><td>Rekombinantes Human M-CSF</td><td>Thermo Scientific</td><td>300-25</td><td></td></tr><tr><td>Rekombinantes Human TGF-&beta;1</td><td>Thermo Scientific</td><td>100-21C</td><td></td></tr><tr><td>Oberflächenbehandelte sterile Zellkulturplatten</td><td>Fisher Scientific</td><td>FB012927</td><td></td></tr><tr><td>Tau-HiBiT-Protein</td><td>In house</td><td>n/a</td><td>Tau-Protein mit einem VSGWRLFKKIS-Peptid-Tag</td></tr><tr><td>Trypsin-Inhibitor</td><td>Sigma Aldrich</td><td>T9128</td><td></td></tr><tr><td>Trypsin-EDTA</td><td>Thermo Scientific</td><td>5-200-072</td><td></td></tr><tr><td>Y-27632 dihydrochlorid</td><td>Bio-techne</td><td>1254</td><td></td></tr></tbody></table>

ein split-luciferase-komplementationsassay zur zeitlich aufgelösten messung der tau-clearance in mikroglia

A Split-Luciferase Complementation Assay for Temporally Resolved Measurement of Tau Clearance in Microglia

Ein Split-Luciferase-Komplementationsassay zur zeitlich aufgelösten Messung der Tau-Clearance in Mikroglia

As the resident immune cells of the central nervous system, microglia are central regulators of brain homeostasis and key mediators of neurodegenerative ...

a-split-luciferase-complementation-assay-for-temporally-resolved

Research

Forschung

JoVE Journal

Neuroscience

Neurowissenschaften

Das Video zeigt einen FRET-Durchflusszytometrie-Assay zum Nachweis der Seeding-Aktivität von Proteinaggregaten, die aus biologischen Proben isoliert wurden. Säugetierzellen, die Tau-Reporterproteine exprimieren, werden mit Liposomentransduktionskomplexen inkubiert, die Tau-Seeds enthalten. Diese Seeds vermitteln die Aggregation der Reporterproteine, was zur Erzeugung eines FRET-positiven Signals im Durchflusszytometer führt.

Eine FRET-Durchflusszytometrie-Technik zum Nachweis der Tau-Seed-induzierten Aggregation von Reporterproteinen

Dieses Video zeigt einen zellbasierten Assay zur Quantifizierung der Tau-Aufnahme durch murine Mikroglia unter Verwendung von pH-sensitiven fluoreszenzmarkierten Tau-Aggregaten, die mittels fluoreszenzaktivierter Zellsortierung für eine quantitative Bewertung analysiert wurden.

Ein zellbasierter Assay zur Beurteilung der Aufnahme des Tau-Proteins durch Mikroglia

Zell-zu-Zell-Transfer von Proteinaggregaten oder proteopathischen Seeds könnte dem Fortschreiten der Pathologie bei neurodegenerativen Erkrankungen zugrunde liegen. In dieser Arbeit wird ein neuartiger FRET-Durchflusszytometrie-Assay beschrieben, der einen spezifischen und sensitiven Nachweis der Seeding-Aktivität aus rekombinanten oder biologischen Proben ermöglicht.

Sensitive Detection von Proteopathic Seeding Aktivität mit FRET Durchflusszytometrie

Hier beschreiben wir die Setup - Software Navigation, und die Datenanalyse für eine räumlich und zeitlich genaue Methode der tonischen und phasische extrazellulären Glutamat Veränderungen in vivo Messung unter Verwendung von enzymgekoppelten Mikroelektrodenarrays (MEA).

Enzym-basierte Biosensoren Mit Tonic und Phasic Glutamate in der Alzheimer-Maus-Modellen zu messen

Wir haben erfolgreich zwei Substrat-spezifische γ-Sekretase Assays generiert. Beiden zellbasierte Assays, die hier vorgestellten sollen γ-Sekretase enzymatischen Aktivitäten über den Ausgang des Firefly Luciferase Reporter zu quantifizieren.

Quantitative Messung der γ-Sekretase-vermittelten Amyloid-Precursor-Protein und Notch Spaltung in zellbasierten Luciferase Reporter Assay Plattformen

Hier beschreiben wir eine zellbasierte Assays um Tau Aufnahme von Mikroglia mit dem Ziel der Schaffung einer investigational Tool besser zu charakterisieren, die Mechanismen der Wirkung von Anti-Tau-Antikörpern quantitativ zu bewerten.

Zellbasierte Assays, Antikörper-vermittelten Tau Clearance von Mikroglia zu studieren

In diesem Protokoll wird ein Verfahren beschrieben, bei dem menschliche neuronale Kulturen mit Linsenkonstrukten übertragen werden, die für mutwillige menschliche Tauben kodieren. Durchgeführte Kulturen zeigen Tau-Aggregate und damit verbundene Pathologien.

Ein In-Vitro-Modell für das Studium der Tau Aggregation mit Lentiviral-vermittelter Transkription menschlicher Neuronen

Tau ist ein neuronales Protein, das sowohl im Zytoplasma, wo es Mikrotubuli bindet, als auch im Kern, wo es unkonventionelle Funktionen wie die Modulation von Alzheimer-Gene ausübt. Hier beschreiben wir eine Methode zur Untersuchung der Funktion von nuklearem Tau unter Ausschluss von Interferenzen, die von zytoplasmatischem Tau kommen.

Modulation der subzellulären Lokalisierung von Tau als Werkzeug zur Untersuchung der Expression krankheitsbedingter Gene

Hier zeigen wir, wie die Transfektion von primären hippokampalen Nagetierneuronen mit konfokaler Bildgebung in lebenden Zellen kombiniert werden kann, um pathologische Protein-induzierte Effekte auf den axonalen Transport zu analysieren und mechanistische Signalwege zu identifizieren, die diese Effekte vermitteln.

Verwendung von Lebendzell-Imaging zur Messung der Auswirkungen pathologischer Proteine auf den axonalen Transport in primären Hippocampus-Neuronen

Diese Arbeit demonstriert eine Methode zur Visualisierung und Quantifizierung der Mikroglia-Motilität und des Kontakts mit postsynaptischen Puncta in der Netzhaut mittels rotierender Scheiben-Konfokalmikroskopie.

Live-Bildgebung und Charakterisierung der Mikroglia-Dynamik und Wechselwirkungen mit Synapsen in erkrankter Maus-Netzhaut

University of Massachusetts Amherst.  Wir beschreiben eine sensible, zeitaufgelöste quantitative Plattform zur Messung der Clearance von extrazellulärem Tau in menschlich induzierten, pluripotenten Stammzellen (iPSC)-abgeleiteten Mikroglia mittels eines mikroplattenbasierten Lumineszenzsystems. Dieser Ansatz ermöglicht eine empfindliche Detektion der Tau-Abbaukinetik im Mikrowell-Format, was eine Hochdurchsatzuntersuchung der Tau-Handhabung unter verschiedenen experimentel...

Ein Split-Luciferase-Komplementationsassay zur zeitlich aufgelösten Messung der Tau-Clearance in Mikroglia

Weitere Videos entdecken