Name: Die DNA-FISH-Metaphase breitet sich aus, um extrachromosomale DNA von homogen färbenden Regionen in menschlichen Krebszelllinien zu unterscheiden (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-08-04T13:35:00.000+00:00
Duration: 8 min 21 s
Description: Lernen Sie die DNA-FISH-Metaphasen-Ausbreitung zur Unterscheidung von extrachromosomaler DNA und homogen färbenden Regionen in menschlichen Krebszelllinien. Diese Methode ermöglicht die Analyse von Onkogenamplifikationen in einzelnen Zellen.

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die dna-fish-metaphase breitet sich aus, um extrachromosomale dna von homogen färbenden regionen in menschlichen krebszelllinien zu unterscheiden

DNA-FISH Metaphase Spreads to Distinguish Extrachromosomal DNA from Homogeneously Staining Regions in Human Cancer Cell Lines

Die DNA-FISH-Metaphase breitet sich aus, um extrachromosomale DNA von homogen färbenden Regionen in menschlichen Krebszelllinien zu unterscheiden

Whole-genome sequencing identifies focal DNA amplifications with base-pair resolution but cannot determine whether amplified sequences reside on ...

Unsere Forschung konzentriert sich darauf, zu bestimmen, ob amplifizierte Onkogene auf extrachromosomaler DNA oder innerhalb separater, chromosomal integrierter, homogen erscheinender Bereiche lokalisiert sind. Die Sequenzierung kann keine Unterscheidung zwischen ecDNA und HSR-Amplifikation treffen, weshalb unser Protokoll dies auf Einzelzell-Ebene klärt.Verdünnen Sie zunächst die Colcemid-Grundlösung im Verhältnis 1:1 mit steriler, ultrareiner Wasser. Für die Metaphase-Arretierung geben Sie 100 Mikroliter der verdünnten Colcemid-Lösung zu den in 10 Milliliter Medium bei logarithmischem Wachstum und 70 % bis 90 % Konfluenz kultivierten COLO320DM-Zellen hinzu und inkubieren diese 45 Minuten bis über Nacht im Zellkulturinkubator. Bereiten Sie eine frische Carnoy’sche Fixierungslösung im Verhältnis 3:1 aus Methanol und Essigsäure vor. Stellen Sie sicher, dass die Carnoy’sche Fixierungslösung während des gesamten Fixierungsverfahrens auf Eis gehalten wird. Bereiten Sie eine frische 0,075-molare Kaliumchloridlösung vor und erwärmen Sie diese in einem 37 Grad Celsius warmen Wasserbad. Nach der Zentrifugation und der Bestimmung der Zellzahl waschen Sie die Zellen mit PBS. Resuspendieren S

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Forschung

JoVE Journal

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Biologie

Dieser Artikel beschreibt die Auswahl von geeigneten Sonden für Single-Cell-FISH, Verbreitung Techniken für Blastomere Kerne und in-situ-Hybridisierung und Signal-Scoring, angewandt auf Präimplantations-Diagnostik (PGD) in einer klinischen Umgebung.

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Chromosomics: Erkennung von numerischen und strukturellen Veränderungen in alle 24 menschlichen Chromosomen gleichzeitig unter Verwendung eines neuartigen OctoChrome FISH-Test

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