Name: Live-Zell-Bildgebung und Einzelzell-Tracking zur Überwachung der klonalen Dynamik und Schicksalsübergänge in menschlichen und murinen Darmorganoiden (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-07-10T14:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 39 s
Description: Erfahren Sie Live-Zell-Bildgebung und Einzelzell-Tracking zur Überwachung klonaler Dynamik und Schicksalsübergänge in menschlichen und murinen Darmorganoiden. Diese Methode ermöglicht Echtzeit-Beobachtung von Zellschicksalsentscheidungen.

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	<li>Barker N, et al. Identification of stem cells in small intestine and colon by marker gene Lgr5. Nature. 2007;449(7165):1003-7.</li>
	<li>Clevers H. Shifting paradigms in tissue stem cell biology: insights from the intestine. Cell. 2026;189(3):706-24.</li>
	<li>Betjes MA, Kok RNU, Tans SJ, van Zon JS. Cell tracking with accurate error prediction. Nat Methods. 2025;22(11):2400-10.</li>
	<li>Sato T, et al. Single Lgr5 stem cells build crypt-villus structures in vitro without a mesenchymal niche. Nature. 2009;459(7244):262-5.</li>
	<li>Sato T, et al. Long-term expansion of epithelial organoids from human colon, adenoma, adenocarcinoma, and Barrett&#39;s epithelium. Gastroenterology. 2011;141(5):1762-72.</li>
	<li>He GW, et al. Optimized human intestinal organoid model reveals interleukin-22-dependency of Paneth cell formation. Cell Stem Cell. 2022;29(9):1333-45.e6.</li>
	<li>Artegiani B, et al. Fast and efficient generation of knock-in human organoids using homology-independent CRISPR-Cas9 precision genome editing. Nat Cell Biol. 2020;22(3):321-31.</li>
	<li>Celotti M, et al. Protocol to create isogenic disease models from adult stem cell-derived organoids using next-generation CRISPR tools. STAR Protoc. 2024;5(3):103189.</li>
	<li>Krueger D, et al. Epithelial tension controls intestinal cell extrusion. Science. 2025;389(6764).</li>
	<li>Buissant des Amorie JR, et al. Intestinal tuft cell subtypes represent successive stages of maturation driven by crypt-villus signaling gradients. Nat Commun. 2025;16(1):6765.</li>
	<li>Huang L, et al. Tuft cells act as regenerative stem cells in the human intestine. Nature. 2024;634(8035):929-35.</li>
	<li>Wang D, et al. Interferon-responsive intestinal BEST4/CA7+ cells are targets of bacterial diarrheal toxins. Cell Stem Cell. 2025;32(4):598-612.e5.</li>
	<li>Jain A, et al. Morphodynamics of human early brain organoid development. Nature. 2025;644(8078):1010-9.</li>
	<li>Krotenberg Garcia A, van Rheenen J, Suijkerbuijk SJE. Generation of mixed murine organoids to model cellular interactions. STAR Protoc. 2021;2(4):100997.</li>
	<li>Krotenberg Garcia A, et al. Active elimination of intestinal cells drives oncogenic growth in organoids. Cell Rep. 2021;36(1):109307.</li>
	<li>Serra D, et al. Self-organization and symmetry breaking in intestinal organoid development. Nature. 2019;569(7754):66-72.</li>
	<li>de Medeiros G, et al. Multiscale light-sheet organoid imaging framework. Nat Commun. 2022;13(1):4864.</li>
	<li>Huelsz-Prince G, et al. Mother cells control daughter cell proliferation in intestinal organoids to minimize proliferation fluctuations. eLife. 2022;11.</li>
	<li>Zheng X, et al. Organoid cell fate dynamics in space and time. Sci Adv. 2023;9(33).</li>
	<li>Okkelman IA, Foley T, Papkovsky DB, Dmitriev RI. Live cell imaging of mouse intestinal organoids reveals heterogeneity in their oxygenation. Biomaterials. 2017;146:86-96.</li>
	<li>Gros A, et al. A quantitative pipeline for whole-mount deep imaging and analysis of multi-layered organoids across scales. eLife. 2026;14.</li>
	<li>Nagarajan S, Naganathan SR. Pushing the limits of automated cell tracking. Nat Methods. 2025;22(11):2236-8.</li>
	<li>Kok RNU, et al. OrganoidTracker: efficient cell tracking using machine learning and manual error correction. PLoS One. 2020;15(10).</li>
	<li>Martinez-Silgado A, et al. Differentiation and CRISPR-Cas9-mediated genetic engineering of human intestinal organoids. STAR Protoc. 2022;3(3):101639.</li>
	<li>van der Linden FH, Okkelman IA, Ioannou M, Dmitriev RI. A turquoise fluorescence lifetime-based biosensor for quantitative imaging of intracellular calcium. Nat Commun. 2021;12(1):7159.</li>
	<li>Okkelman IA, Foley T, Papkovsky DB, Dmitriev RI. Extracellular Ca2+-sensing fluorescent protein biosensor based on a collagen-binding domain. ACS Appl Bio Mater. 2020;3(8):5310-21.</li>
	<li>Nguyen NTB, et al. Lactate controls cancer stemness and plasticity through epigenetic regulation. Cell Metab. 2025;37(4):903-19.e10.</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>A83-01</td><td>Tocris&nbsp;</td><td>2939</td><td></td></tr><tr><td>Accutase Cell Detachment Solution</td><td>Innovative Cell Technologies</td><td>AT104-500</td><td></td></tr><tr><td>Advanced Dulbecco's Modified Eagle Medium/F12 (Advanced DMEM/F12)</td><td>Invitrogen</td><td>&nbsp;12634-010</td><td></td></tr><tr><td>B27 supplement&nbsp;</td><td>Thermo Fisher</td><td>17504044</td><td></td></tr><tr><td>Blasticidin</td><td>InvivoGen</td><td>ant-bl-05</td><td></td></tr><tr><td>Cell strainer (40um)&nbsp;</td><td>Greiner Bio-one</td><td>542140</td><td></td></tr><tr><td>CHIR99021</td><td>Stemgent</td><td>04-0004-base</td><td></td></tr><tr><td>Konfokales Mikroskop</td><td>Leica</td><td>SP8</td><td>mit Klimaregelung für Temperatur und CO2</td></tr><tr><td>Cultrex Basement Membrane Extract (BME)</td><td>R&amp;D Systems, Bio-Techne</td><td>3533-001-02</td><td></td></tr><tr><td>Fiji</td><td>Open Source</td><td></td><td>Open Source https://imagej.net/software/fiji/</td></tr><tr><td>Glaskegelplatten</td><td>CellVis</td><td>P24-1.5H-N</td><td></td></tr><tr><td>Glutamax&nbsp;</td><td>Gibco&nbsp;</td><td>35050-061</td><td></td></tr><tr><td>HEPES</td><td>Gibco&nbsp;</td><td>15630-080</td><td></td></tr><tr><td>N2 supplement&nbsp;</td><td>Thermo Fisher</td><td>17502048</td><td></td></tr><tr><td>N-Acetylcystein</td><td>Sigma-Aldrich&nbsp;</td><td>A9165</td><td></td></tr><tr><td>NEPA Elektroporationssystem</td><td>NEPAGENE</td><td>NEPA21</td><td></td></tr><tr><td>Nikotinamid</td><td>Sigma-Aldrich&nbsp;</td><td>N0636</td><td></td></tr><tr><td>NucSpot Live</td><td></td><td></td><td>Far-Red-Live-Zell-Kernfarbstoff</td></tr><tr><td>Noggin konditioniertes Medium (U-Protein Express)</td><td>IPA Therapeutics</td><td>N002</td><td></td></tr><tr><td>OrganoidTracker</td><td>Open Source</td><td></td><td>Open Source https://organoidtracker.org/</td></tr><tr><td>p2T-CAG-mT2TP</td><td>selbstgemacht</td><td></td><td>Protokoll zur Generierung des Plasmids DOI: 10.1126/science.adr8753</td></tr><tr><td>p2T-H2B-iRFP-IRES-PuroR</td><td>selbstgemacht</td><td></td><td>Protokoll zur Generierung des Plasmids DOI: 10.1126/science.adr8753</td></tr><tr><td>p2T-H2B-mCherry-IRES-BlastR&nbsp;</td><td>selbstgemacht</td><td></td><td>Protokoll zur Generierung des Plasmids DOI: 10.1126/science.adr8753</td></tr><tr><td>Penicillin/Streptomycin</td><td>Gibco&nbsp;</td><td>11548876</td><td></td></tr><tr><td>Primocin</td><td>InvivoGen</td><td>ant-pm-05</td><td></td></tr><tr><td>Prostaglandin E2</td><td>Tocris&nbsp;</td><td>2296</td><td></td></tr><tr><td>Puromycin</td><td>InvivoGen</td><td>ant-pr</td><td></td></tr><tr><td>Rekombinantes humanes EGF</td><td>Peprotech</td><td>AF-100-15</td><td></td></tr><tr><td>Rekombinantes humanes IL-22</td><td>Peprotech</td><td>200-22</td><td></td></tr><tr><td>Rekombinantes humanes R-spondin 1</td><td>Thermo Fisher</td><td>120-38-5UG</td><td></td></tr><tr><td>Rekombinantes murines EGF</td><td>Thermo Fisher&nbsp;</td><td>315-09-500UG</td><td></td></tr><tr><td>Rekombinantes murines Noggin</td><td>Thermo Fisher</td><td>250-38-100UG</td><td></td></tr><tr><td>R-spondin konditioniertes Medium (U-Protein Express)</td><td>IPA Therapeutics</td><td>R001</td><td></td></tr><tr><td>SiR-DNA</td><td></td><td></td><td>Far-Red-Live-Zell-DNA-Farbstoff</td></tr><tr><td>SB202190 (p38-Inhibitor)</td><td>Sigma-Aldrich&nbsp;</td><td>S7076</td><td></td></tr><tr><td>Suspensionsplatte für Organoid-Kultur</td><td>Greiner</td><td>665102</td><td></td></tr><tr><td>Trypanblau&nbsp;</td><td>Gibco&nbsp;</td><td>15250061</td><td></td></tr><tr><td>TrypLE</td><td>Gibco&nbsp;</td><td>12605-010</td><td></td></tr><tr><td>Wnt-Surrogat</td><td>U-Protein Express</td><td>&nbsp;kundenspezifisch</td><td></td></tr><tr><td>Wnt3A konditioniertes Medium</td><td>selbstgemacht</td><td></td><td>Die Herstellung des Wnt3A konditionierten Mediums finden Sie hier:&nbsp; https://doi.org/10.1002/cpim.106</td></tr><tr><td>Y-27632 Dihydrochlorid</td><td>Abmole Bioscience</td><td>M1817</td><td></td></tr></tbody></table>

live-zell-bildgebung und einzelzell-tracking zur Überwachung der klonalen dynamik und schicksalsübergänge in menschlichen und murinen darmorganoiden

Live-Cell Imaging and Single-Cell Tracking to Monitor Clonal Dynamics and Fate Transitions in Human and Murine Intestinal Organoids

Live-Zell-Bildgebung und Einzelzell-Tracking zur Überwachung der klonalen Dynamik und Schicksalsübergänge in menschlichen und murinen Darmorganoiden

The intestinal epithelium undergoes rapid self-renewal through stem cell division, cell differentiation, and migration. Understanding how individual cells ...

Unsere Forschung konzentriert sich darauf, zu untersuchen, wie einzelne Zellen ihre Schicksalsentscheidungen treffen und ihr Verhalten im sich selbst erneuernden Darmepithel koordinieren. Die Lichtmikroskopie kann einen allgegenwärtigen Marker, beispielsweise den Membranbereich einer Zelle oder das Cytoskelett, nicht so auflösen, dass er eindeutig einer bestimmten Zelle oder ihren Nachbarzellen zugeordnet werden kann. Mosaik-Organoide können jedoch tatsächlich helfen, diese Einschränkung zu überwinden.Zunächst beschaffen Sie die erforderlichen Reagenzien sowie validierte murine und humane fluoreszierende Reporter-Darmorganoidlinien. Passagieren Sie beide Organoidlinien drei Tage vor der Erzeugung der Mosaikorganoiden in Wnt-konditioniertes Medium, um die Expansion der Stammzellen zu fördern und die Zellviabilität während der Dissoziation zu maximieren. Bereiten Sie 5 % BME in DMEM vor. Beschichten Sie jede Vertiefung einer 48-Well-Platte mit 20 Mikrolitern des vorbereiteten BME, um eine dünne haftende Schicht für die Zellanheftung bereitzustellen, und inkubieren Sie eine Stunde bei 37 °C. Lösen Sie anschließend das BME durch Zugabe von eiskaltem Basalmedium auf. Sammeln Sie die Organoiden jeder Linie getrennt durch Zentrifugation bei 300 × g für fünf Minuten bei 4 °C. Dissoziieren Sie die Organoiden durch Inkubation in einer enzymatischen Zellablösungslösung für 5 bis 7 Minuten in einem Wasserbad bei 37 °C in Einzelzellen. Unterstützen Sie die mechanische Dissoziation durch wiederholtes Pipettieren der Suspension mit einer P1000-Pipette. Überwachen Sie die Dissoziation unter einem Hellfeldmikroskop. Beenden Sie die Reaktion durch Zugabe von überschüssigem eiskaltem Basalmedium, sobald überwiegend Einzelzellen oder kleine Organoidfragmente aus 2 bis 10 Zellen sichtbar sind. Zentrifugieren Sie die Zellen anschließend bei 300 × g für fünf Minuten bei 4 °C, um sie zu pelletieren. Bestimmen Sie die Zellviabilität und zählen Sie die lebensfähigen Zellen mithilfe der Trypanblau-Ausschlussmethode. Kombinieren Sie die beiden Zellpopulationen im gewünschten Verhältnis, um insgesamt 300.000 Zellen in 500 Mikrolitern Wnt-konditioniertem Medium zu erhalten, ergänzt mit 10 Mikromolar Y-27632-Dihydrochlorid für murine Mosaikorganoiden oder humanem Expansionsmedium für humane Mosaikorganoidkulturen. Mischen Sie gründlich durch vorsichtiges Pipettieren. Entfernen Sie danach das Beschichtungsmedium von den 48-Well-Platten und säen Sie die Zellsuspension in die beschichteten Vertiefungen aus. Zentrifugieren Sie die Platte bei 200 × g für fünf Minuten bei Raumtemperatur und inkubieren Sie bei 37 °C. Bereiten Sie eine P200-Pipettenspitze vor, indem Sie sie verbiegen. Nach 24 Stunden lösen Sie die Zellschicht mechanisch durch Abkratzen mit der verbogenen Pipettenspitze und spülen Sie gründlich mit eiskaltem Basalmedium aus. Sammeln Sie die abgelösten Aggregate durch Zentrifugation bei 300 × g für drei Minuten bei 4 °C, ohne zusätzliche mechanische Scherkräfte anzuwenden. Resuspendieren Sie die Aggregate in BME und plattieren Sie sie in bildgebungsgeeignete Probenträger. Kultivieren Sie die platzierten Aggregate in ENR-Medium für murine Organoiden bzw. in humanem Expansionsmedium für humane Mosaikorganoiden.Verwenden Sie Glasboden-Kammerobjekte, um die optische Kompatibilität mit Objektiven für die konfokale Mikroskopie mit hoher numerischer Apertur sicherzustellen. Pipettieren Sie die Organoid-BME-Suspension als dünne Kuppel nahe dem Zentrum des Glasbodens. Inkubieren Sie die Platte bei 4 Grad Celsius für 5 bis 10 Minuten, damit die Organoiden durch die Schwerkraft zum Glasboden absinken können. Überführen Sie die Platte auf 37 Grad Celsius und lassen Sie das BME für 20 bis 30 Minuten erstarren. Geben Sie 500 Mikroliter vorgewärmtes Wachstumsmedium in jedes Loch. Lassen Sie die Organoiden mindestens 24 Stunden lang regenerieren und ihre Morphologie ausbilden, bevor Sie mit der Live-Bildgebung beginnen. Erstellen Sie Langzeit-Zeitrafferbilder und führen Sie Einzelzell-Tracking sowie Linienrekonstruktion für die nachgeschaltete Analyse durch.Eine erfolgreiche Mosaikbildung zeichnete sich entweder durch eine Salz-und-Pfeffer-Verteilung oder durch definierte Grenzen zwischen den beiden Populationen aus, abhängig vom verwendeten Dissoziierungsgrad. Eine gründliche Einzelzell-Dissoziation führte zu Salz-und-Pfeffer-Mosaiken, während eine schonende Fragmentierung kleine klonale Zellverbände erhielt. Wenn eine einzelne Zelle, die einen Reporter von Interesse koexprimiert, von nicht markierten Nachbarzellen umgeben ist, können ihre zytoskelettalen Dynamiken während Migration, Teilung oder Extrusion eindeutig dieser Zelle zugeordnet werden. Nukleäre H2B-Reporter ermöglichten die Identifizierung aussagekräftiger Zellkonstellationen innerhalb des Mosaiks, und prozelluläre Messungen wie die durchschnittliche Teilungsrate über die Lebensdauer sowie die Dynamik der Reporterintensität wurden aus den Tracking-Daten extrahiert. Becherzellen aktivierten und hielten einen hohen MUC2-mNeonGreen-Spiegel während des gesamten Bildgebungszeitraums aufrecht, während Paneth-Zellen zunächst eine Aktivierung von MUC2-mNeonGreen zeigten, gefolgt von einer fortschreitenden Signalabnahme und anschließender Aktivierung von DEFA5-dsRed. Die quantitativen Einzelzellanalysen bestätigten diesen sequenziellen Übergang auf Ebene einzelner Zellen. Gemittelte Intensitätskurven über mehrere verfolgte Zellen bestätigten, dass dieses Muster auf Populationsebene konsistent war, wobei Paneth-Zellvorläufer eine charakteristische inverse Beziehung zwischen den Signalen von MUC2-mNeonGreen und DEFA5-dsRed aufwiesen.Mit diesem Protokoll können Forscher untersuchen, wie eine einzelne Zelle ihren Zytoskeletts umgestaltet, beispielsweise während der Teilung, während der Migration oder zum Beispiel während der Extrusion in einem intakten Gewebe. Entscheidend ist die Wahl des Markierungsverhältnisses, da spärlich markierte Reportorzellen einzelne Zellsignale isolieren, während spärliche, nicht markierte Zellen die Reaktionen der Umgebung offenbaren. Künftige Studien können Fate-Reporter mit mosaikartiger Markierung in einem Organoid kombinieren, um Zellschicksalsentscheidungen mit den Zytoskelettdynamiken einzelner Zellen zu verknüpfen.

live-cell-imaging-single-cell-tracking-to-monitor-clonal-dynamics

Research

Forschung

JoVE Journal

Biology

Biologie

Tracking-Dynamics of Muscle Engraftment bei Kleintieren durch In Vivo Fluorescent Imaging

Eine Methode ist beschrieben, um einzelne Zellen mit einem Käfig fluoreszierenden Proteins mit Zwei-Photonen-Absorption aus einer Ti photoaktivieren: Sapphire Femtosekunden-Laser-Oszillator. Um das Schicksal der Karte photoaktivierte Zelle, ist die Immunhistochemie verwendet. Diese Technik kann auf jeden Zelltyp angewendet werden.

Single Cell Fate Mapping im Zebrafisch

In diesem Videoprotokoll erklären wir Schritt für Schritt die lentivirale Transduktion in Organoiden des primären Darmepithels und die Verarbeitung und nachgelagerte Analyse dieser Kulturen mittels quantitativer RT-PCR, RNA-Microarray und Immunhistochemie.

Ein Protokoll für Lentivirale Transduktion und Downstream-Analyse der Darm Organoide

Protokolle für die Kultur humaner Nabelvenen-Endothelzellen (HUVEC), die transiente Transfektion von fluoreszenzmarkierten Markern des Mikrotubuli-Wachstums, die Bildgebung lebender Zellen und die automatisierte Analyse der Wachstumsdynamik von Mikrotubuli zwischen den Phasen werden detailliert beschrieben.

Hochauflösende Zeitraffer-Imaging und automatische Analyse von Dynamik der Mikrotubuli in lebenden menschlichen Endothelzellen aus der Nabelvene

Hier präsentieren wir Live-Zell-Bildgebung, eine ungiftige Mikroskopiemethode, die es Forschern ermöglicht, das Proteinverhalten und die Kerndynamik in lebenden Spalthefezellen während Derose und Meiose zu untersuchen.

Untersuchung der Mitotic and Meiotic Fission Yeast Nuclear Dynamics durch Fluoreszenz-Livezellmikroskopie

Hier stellen wir ein Protokoll zur Beurteilung der Dynamik der Spindelbildung und der mitotischen Progression vor. Unsere Anwendung der Zeitraffer-Bildgebung ermöglicht es dem Anwender, Zellen in verschiedenen Stadien der Mitose zu identifizieren, mitotische Defekte zu verfolgen und zu identifizieren und die Spindeldynamik und das mitotische Zellschicksal bei Exposition gegenüber Anti-Mitotik-Medikamenten zu analysieren.

Live Cell Imaging zur Bewertung der Dynamik von Metaphasen-Timing und Zellschicksal nach mitotischen Spindelstörungen

Die gesamte 3D-Struktur und der zelluläre Gehalt von Organoiden sowie ihre phänotypische Ähnlichkeit mit dem ursprünglichen Gewebe können mit dem hier beschriebenen einzelligen 3D-Bildgebungsprotokoll erfasst werden. Dieses Protokoll kann auf eine breite Palette von Organoiden mit unterschiedlichem Ursprung, Größe und Form angewendet werden.

Single-Cell Resolution Dreidimensionale Bildgebung intakter Organoide

Hier wird ein Protokoll für einen Fluoreszenzbildgebungsansatz vorgestellt, multiplex immunofluorescent cell-based detection of DNA, RNA, and protein (MICDDRP), eine Methode, die in der Lage ist, gleichzeitig Fluoreszenz-Einzelzellvisualisierung von viralen Proteinen und Nukleinsäuren unterschiedlicher Art und Strandung zu visualisieren. Dieser Ansatz kann auf eine Vielzahl von Systemen angewendet werden.

Einzelzell-Multiplex-Fluoreszenzbildgebung zur Visualisierung viraler Nukleinsäuren und Proteine und zur Überwachung von HIV-, HTLV-, HBV-, HCV-, Zika-Virus- und Influenza-Infektionen

Wir stellen eine Methode zur Erfassung von Fluoreszenz-Reporter-Zeitkursen aus einzelnen Zellen mit mikrostrukturierten Arrays vor. Das Protokoll beschreibt die Vorbereitung von Einzelzellarrays, den Aufbau und Betrieb der Live-Cell-Scanning-Zeitraffermikroskopie und ein Open-Source-Bildanalyse-Tool zur automatisierten Vorauswahl, visuellen Kontrolle und Verfolgung von zellintegrierten Fluoreszenzzeitverläufen pro Adhäsionsstelle.

Live-Cell Imaging of Single-Cell Arrays (LISCA) - eine vielseitige Technik zur Quantifizierung der zellulären Kinetik

Das vorliegende Protokoll beschreibt eine Methode zum Nachweis reaktiver Sauerstoffspezies (ROS) in den intestinalen murinen Organoiden unter Verwendung qualitativer Bildgebung und quantitativer Zytometrie-Assays. Diese Arbeit kann möglicherweise auf andere fluoreszierende Sonden ausgedehnt werden, um die Wirkung ausgewählter Verbindungen auf ROS zu testen.

Analyse von oxidativem Stress in murinen Darmorganoiden mit reaktiver Sauerstoffspezies-sensitiver fluorogener Sonde

Erfahren Sie Live-Zell-Bildgebung und Einzelzell-Tracking zur Überwachung klonaler Dynamik und Schicksalsübergänge in menschlichen und murinen Darmorganoiden. Diese Methode ermöglicht Echtzeit-Beobachtung von Zellschicksalsentscheidungen.

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Live-Zell-Bildgebung und Einzelzell-Tracking zur Überwachung der klonalen Dynamik und Schicksalsübergänge in menschlichen und murinen Darmorganoiden

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