Name: Elektrophoretische Trennung von Proteinen (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2008-06-12T13:29:00.000+00:00
Duration: 8 min 17 s
Description: Lernen Sie die elektrophoretische Trennung von Proteinen mittels Polyacrylamid-Gelelektrophorese (PAGE). Diese Methode ermöglicht Forschern die Auftrennung komplexer Proteinmischungen nach Ladung und Größe.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Der vollständige Text Protokoll für diesen experimentellen Ansatz ist in <a href="http://www.mrw.interscience.wiley.com/emrw/9780471142720/cp/cpmb/article/mb1002a/current/abstract" target="_blank">Current Protocols in Molecular Biology</a> .

Die Autoren haben nichts offenzulegen.

elektrophoretische trennung von proteinen

Electrophoretic Separation of Proteins

Elektrophorese wird verwendet, um komplexe Gemische von Proteinen (z. B. von Zellen, subzellulären Fraktionen, Säulenfraktionen oder Immunpräzipitaten) zu trennen, die Untereinheit Kompositionen zu untersuchen und um die Homogenität der Protein-Proben zu überprüfen. Es kann auch dazu dienen, um Proteine ​​für den Einsatz in weiteren Anwendungen zu reinigen. In Polyacrylamidgelelektrophorese, Proteine ​​in Reaktion auf ein elektrisches Feld durch die Poren in einem Polyacrylamid-Gel-Matrix zu migrieren, Porengröße nimmt mit steigender Acrylamid-Konzentration. Die Kombination von Porengröße und Protein Ladung, Größe und Form bestimmt die Wanderungsgeschwindigkeit des Proteins. In dieser Einheit ist die Standard-Laemmli-Methode für die diskontinuierliche Gelelektrophorese unter denaturierenden Bedingungen beschrieben, dh in Gegenwart von Natriumdodecylsulfat (SDS).

In diesem Video zeigen wir eine Methode zur elektrophoretischen Trennung von Proteinen unter Verwendung von Poly-acrylimid Gelelektrophorese (PAGE).

Elektrophoretische Trennung von Proteinen

Die Elektrophorese wird verwendet, um komplexe Proteinmischungen (z. B. aus Zellen, subzellulären Fraktionen, Säulenfraktionen oder Immunpräzipitaten) zu trennen, um ...

Die Trennung einzelner Proteine aus komplexen Proteinmischungen kann mittels Gelelektrophorese in Polyacrylamid-Gelelektrophorese, auch bekannt als PAGE, erreicht werden. Dabei wandern Proteine in einem elektrischen Feld durch Poren in der Gelmatrix. Die Kombination aus Porengröße des Gels sowie Ladung, Größe und Form des Proteins bestimmt die Migrationsgeschwindigkeit des Proteins. In diesem Video demonstrieren wir eine Methode zur elektrophoretischen Trennung von Proteinen.Hallo, ich bin Dr. Bobul Chakravarti vom Proteomik-Zentrum des Keck Graduate Institute of Applied Life Sciences. Heute werde ich Ihnen ein Verfahren zur Durchführung der eindimensionalen Gelelektrophorese zeigen. Beginnen wir also.Beginnen Sie damit, das Glasplatten-Sandwich der Elektrophoreseapparatur gemäß den Herstelleranweisungen unter Verwendung von zwei sauberen Glasplatten und zwei 1,5 Millimeter Abstandshaltern zusammenzubauen. Befestigen Sie nun das Glasplatten-Sandwich an dem Gießständer. Bereiten Sie danach die Trenngellösung vor, die in aktuellen Protokollen beschrieben wurde.Geben Sie die angegebene Menge 10 % Ammoniumpersulfat und TEMED zur Lösung hinzu und mischen Sie vorsichtig durch Schwenken.

Research

Forschung

JoVE Journal

Biology

Biologie

Dieses Video zeigt eine denaturierende Polyacrylamid-basierte Trenntechnik für Proteine. Diese Technik hilft bei der vorläufigen Identifizierung von Proteinen anhand ihres Molekulargewichts.

Natriumdodecylsulfat-Polyacrylamid-Gelelektrophorese für die Proteinanalyse: Eine Technik zur Trennung und Visualisierung von Proteinen auf der Grundlage des Molekulargewichts

Dieses Video beschreibt multimere PAGE zur Trennung von nativen Proteinkomplexen aus Gewebehomogenaten. Die Technik ist eine Mischung aus Blue Native-PAGE- und SDS-PAGE-Techniken. Die getrennten Komplexe können charakterisiert und auf ihre Rolle bei der Zellfunktion untersucht werden.

Multimer-PAGE zur Trennung nativer Proteinkomplexe: eine hybride Trenntechnik bestehend aus blauem native-PAGE und SDS-PAGE zur Trennung intakter multimerer Proteine aus Gewebelysat

In diesem Video demonstrieren wir eine zweidimensionale Gelelektrophorese-Methode, die einzelne Proteine aus einer komplexen Proteinmischung trennt, die aus Tumorgeweben des humanen nichtfunktionellen Hypophysenadenoms (NFPA) gewonnen wurde. Die Proteine werden in der ersten Dimension anhand ihrer elektrischen Ladung und in der zweiten Dimension anhand von Molekulargewichten weiter getrennt.

Zweidimensionale Polyacrylamid-Gelelektrophorese: eine Trenntechnik zur Analyse von Proteinen in komplexen Proteingemischen basierend auf Ladung und Molekulargewicht

Dieses Protokoll beschreibt, wie eine klare native gel-eluierte Flüssigfraktions-Einschlusselektrophorese (CN-GELFrEE) hergestellt und durchgeführt wird, eine native Trenntechnik für nicht-kovalente biomolekulare Anordnungen und Proteine aus heterogenen Proben, die mit verschiedenen nachgeschalteten Proteinanalysetechniken kompatibel ist.

CN-GELFrEE - Clear india geleluiert flüssige Fraktion Verleitung Elektrophorese

Nach der Trennung durch elektrophoretische Methoden können Proteine ​​in einem Gel durch mehrere Färbemethoden nachgewiesen werden. Die Färbung von Proteinen mit Coomassie Blue, Silver Färbung, SYPRO Orange, SYPRO Ruby sind in diesem Video demonstriert.

Die Färbung Proteine ​​in Gelen

Mikrokontaktdruck ausgiebig in die Muster von Proteinen und anderen Molekülen auf Materialoberflächen eingesetzt. Wir zeigen die wichtigsten Schritte dieses Prozesses, Stanz-Muster von Fibronektin auf Glas.

Mikrokontaktdrucken von Proteinen für Zellbiologie

Paarung und Tetrade Trennung sind für die genetische Analyse...

Paarung und Tetrad Trennung von Chlamydomonas reinhardtii Für genetische Analysen

Rat MSCs wurden aus Oberschenkel-und Unterschenkelknochen isoliert und dann durch magnetische Zellsortierung angereichert. Sortiert Zellen wurden für die Expression der Oberflächenmarker durchflusszytometrisch bestätigt. Diese Zellen wurden auch bei klonaler Dichte kultiviert werden, um einzelne Kolonien bilden, und dann dieser Kolonien wurden durch Klonen Zylinder getrennt.

Isolierung und Anreicherung von Rat mesenchymalen Stammzellen (MSCs) und Separation von Single-Kolonie Derived MSCs

Die Protokolle beschreiben die wesentlichen Schritte für den Erhalt Beugung Qualität Kristalle von Membranproteinen ab Rekonstitution des Proteins in einer Lipid-kubische Phase (LCP), finden Anfangsbedingungen mit LCP-FRAP Vorkristallisation Assays, die Einrichtung von LCP Kristallisation Studien und Ernte-Kristallen .

Die Kristallisation von Membranproteinen in Lipidische Mesophasen

Calmodulin (CaM) Pull-Down-Assay ist ein effektiver Weg, um die Interaktion von CaM mit verschiedenen Proteinen zu untersuchen. Diese Methode verwendet CaM-Sepharose-Kügelchen für eine effiziente und spezifische Analyse von CaM-bindenden Proteinen. Dies stellt ein wichtiges Instrument zur CaM-Signalisierung in zelluläre Funktion zu erforschen.

Pull-down von Calmodulin-bindende Proteine

Lernen Sie die elektrophoretische Trennung von Proteinen mittels Polyacrylamid-Gelelektrophorese (PAGE). Diese Methode ermöglicht Forschern die Auftrennung komplexer Proteinmischungen nach Ladung und Größe.

Elektrophoretische Trennung von Proteinen

Weitere Videos entdecken