Name: Beziehen Eier von Xenopus laevis Weibchen (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2008-08-20T20:12:00.000+00:00
Duration: 4 min 47 s
Description: Lernen Sie die Gewinnung und Aufbereitung von Eiern von Xenopus laevis für zellbiologische Experimente. Dieses Protokoll zeigt Hormoninduktion, Dejellyfizierung und Qualitätskontrolle für reproduzierbare Ergebnisse.

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Der vollständige Text Protokoll für diesen experimentellen Ansatz ist in <a href="http://mrw.interscience.wiley.com/emrw/9780471143031/cp/cpcb/article/cb1110/current/abstract?hd=author,Powers]">Current Protocols in Cell Biology</a> .

Die Autoren haben nichts offenzulegen.

beziehen eier von xenopus laevis weibchen

Obtaining Eggs from Xenopus laevis Females

Die Eier von Xenopus laevis intakt, lysiert und / oder fraktionierte sind nützlich für eine Vielzahl von Experimenten. Dieses Protokoll zeigt, wie die Eiablage zu veranlassen, zu sammeln und dejelly die Eier, und sortieren Sie die Eier, um beschädigte Eier zu entfernen.

Beziehen Eier von Xenopus laevis Weibchen

Die Eier von Xenopus laevis – ob intakt, lysiert und/oder fraktioniert – sind für eine Vielzahl von Experimenten nützlich. Dieses Protokoll zeigt, wie die Eiablage induziert wird, ...

Xip-Labis-Ei-Extrakte eignen sich gut als Quelle für zytoplasmatisches Material und Organellen für die in-vitro-Rekonstitution zellulärer Vorgänge wie der Kernassemblierung und des nukleären Proteinimports. Natürlich muss man, bevor man Ei-Extrakte verwenden kann, zunächst die Eier von weiblichen Fröschen gewinnen. Hallo, ich heiße Marie Cross und bin Doktorandin in Dr. Maureen Powers Labor in der Abteilung für Zellbiologie an der Emory University in Atlanta, Georgia.Heute zeigen wir Ihnen, wie man Ei- und D-Jelly-Eier von ausgewachsenen Weibchen von Opus lavis erhält. Dieses Verfahren umfasst die folgenden Schritte: Vorbereitung der Frösche für die Eiablage mittels pregnant mare serum gonadotropin, Induktion der Eiablage mittels humanem Choriongonadotropin sowie die Sortierung von defekten Eiern oder Zellen. Beginnen wir also.Um Eier zu erzeugen, werden ausgewachsene weibliche Frösche zunächst mit schwangerem Stuten-Serum-Gonadotropin stimuliert. Für den Beginn des Stimulationsverfahrens bereiten Sie einen Behälter mit einer hundert Millimolar Natriumchloridlösung zur Unterbringung der Frösche vor. Nach der Injektion sollten stimulierte Frösche mit einer Dichte von etwa einem Fros

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Research

Forschung

JoVE Journal

Biology

Biologie

Die Befruchtung der Xenopus Oozyten Über den Host-Transfer-Methode

Xenopus embryonalen Epithelien sind ein ideales Modellsystem, um die Zelle Verhaltensweisen wie Polarität Entwicklung und Formänderung beim epithelialen Morphogenese zu studieren. Traditionelle Histologie des festen Proben wird zunehmend durch Live-Cell-konfokale Bildgebung ergänzt. Hier zeigen wir Methoden, um Frosch Gewebe zu isolieren und zu visualisieren leben Epithelzellen und deren Zytoskelett mit Live-cell konfokalen Mikroskopie.

Live-Cell-Imaging und Quantitative Analyse der embryonalen Epithelzellen in Xenopus laevis</em

Xenopus Eiextrakt ist ein nützliches Modellsystem, um die DNA-Schäden Prüfpunkt untersuchen. Dieses Protokoll ist für die Herstellung von Xenopus Ei-Extrakten und DNA-Schaden induzierenden Prüfpunkt Reagenzien. Diese Techniken sind an eine Vielzahl von DNA-schädigenden Ansätze in der Untersuchung der DNA-Schädigung Prüfpunkt Signalisierung.

Untersuchung der DNA Damage Checkpoint mit<em&gt; Xenopus</em&gt; Egg Auszüge

Produktion von<em&gt; Xenopus tropicalis</em&gt; Egg Extrakte Mikrotubuli-assoziierten RNAs identifizieren

Es wird ein Verfahren zur Analyse von Protein-Abbau unter Verwendung radioaktiv markiert und die Luciferase-Fusionsproteine ​​in Xenopus-Ei-Extrakt und deren Anpassung für Hochdurchsatz-Screening für Kleinmolekül-Modulatoren der Proteinabbaus beschrieben.

Rekonstitution von β-Catenin-Abbau in<em&gt; Xenopus</em&gt; Egg Extract

Wir beschreiben Methoden zur Manipulation unreifer Eizellen von Xenopus laevis, zur In-vitro-Reifung von Eizellen zu Eizellen und zur intrazytoplasmatischen Spermieninjektion. Dieses Protokoll ermöglicht den Abbau einiger mütterlicher Proteine und die Überexpression von Genen von Interesse während der Befruchtung und ist daher wertvoll, um die Rolle spezifischer Faktoren in der frühen Embryonalentwicklung zu untersuchen.

Manipulation und<em&gt; In-vitro-</em&gt; Ausbau der<em&gt; Xenopus laevis</em&gt; Eizellen, von Intrazytoplasmatische Spermieninjektion gefolgt, um embryonale Entwicklungsstudie

Die Kontrolle der Proteinsynthese erfolgt hauptsächlich im Initiationsschritt der Translation, dessen Mängel mit verschiedenen Störungen verbunden sind. Um ihre Ätiologie besser zu verstehen, haben wir hier ein Protokoll mit Xenopus laevis Eizellen beschrieben, das die Translation des mos-Transkripts in Gegenwart einer Mutante des Translationsinitiationsfaktors eIF4G1 bewertet.

Xenopus laevis als Modell zur Übersetzung Impairment Identifizieren

Mechanismen der zellulären und intrazellulären Skalierung bleiben schwer fassbar. Die Verwendung von Xenopus-Embryoextrakten wird immer häufiger, um die Mechanismen der Organellengrößenregulation aufzuklären. Diese Methode beschreibt die Herstellung von Embryonenextrakten und einen neuartigen Kernskalierungsassay, durch den Mechanismen der Kerngrößenregulation identifiziert werden können.

Ein zellfreien Assay unter Verwendung von<em&gt; Xenopus laevis</em&gt; Embryo Extrahiert Mechanismen der Kerngröße Verordnung zum Studium

Dieses Protokoll zeigt eine fluoreszenzbasierte Methode zur Visualisierung der Vaskulatur und zur Quantifizierung ihrer Komplexität in Xenopus tropicalis . Blutgefäße können nach der Injektion eines fluoreszierenden Farbstoffs in das schlagende Herz eines Embryos nach genetischen und / oder pharmakologischen Manipulationen abgebildet werden, um die kardiovaskuläre Entwicklung in vivo zu untersuchen.

Visualisierung und quantitative Analyse der embryonalen Angiogenese in<em&gt; Xenopus tropicalis</em

Wir beschreiben ein Verfahren zur Herstellung und Live-Bildgebung von unverdünnten zytoplasmatischen Extrakten aus Xenopus laevis-Eiern .

Xenopus laevis Ei-Extrakt-Zubereitung und Live-Bildgebungsverfahren zur Visualisierung der dynamischen zytoplasmatischen Organisation

Wenn Transforming Growth Factor ß-Familie Vorläuferproteine in Xenopus laevis-Embryonen ektopisch exprimiert werden, dimerisieren, gespalten werden und in die Blastokoele sezerniert werden, die von der späten Blastula bis zur frühen Gastrula beginnt. Wir beschreiben eine Methode zum Absaugen von Spaltprodukten aus der Blastokoele-Höhle für die Immunoblot-Analyse.

Analyse der Umwandlung von Wachstumsfaktor ß Familie Spaltungsprodukte, die in die Blastokoele von Xenopus laevis Embryonen sezerniert werden

Lernen Sie die Gewinnung und Aufbereitung von Eiern von Xenopus laevis für zellbiologische Experimente. Dieses Protokoll zeigt Hormoninduktion, Dejellyfizierung und Qualitätskontrolle für reproduzierbare Ergebnisse.

Beziehen Eier von Xenopus laevis Weibchen

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