Name: Vorbereitung und Fraktionierung von Xenopus laevis Egg Auszüge (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2008-08-27T12:38:00.000+00:00
Duration: 7 min 45 s
Description: Lernen Sie die Präparation und Fraktionierung von Xenopus laevis-Ei-Extrakten für die Rekonstitution zellulärer Prozesse. Diese Methode ermöglicht die Isolierung zytoplasmatischer und leichter Membranfraktionen für biochemische Analysen.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Der vollständige Text Protokoll für diesen experimentellen Ansatz ist in <a href="http://www.mrw.interscience.wiley.com/emrw/9780471143031/cp/cpcb/article/cb1110/current/abstract ]">Current Protocols in Cell Biology</a> .

Die Autoren haben nichts offenzulegen.

vorbereitung und fraktionierung von xenopus laevis egg auszüge

Preparation and Fractionation of Xenopus laevis Egg Extracts

Crude und fraktionierte Xenopus Ei Extrakte können verwendet werden, um Zutaten für die Wiedererrichtung zelluläre Prozesse für die morphologische und biochemische Analyse zu liefern. Egg Lyse und differentielle Zentrifugation werden verwendet, um den Rohextrakt, die wiederum in zur fraktionierten Extrakte und Licht Membranpräparationen vorbereiten.

Vorbereitung und Fraktionierung von Xenopus laevis Egg Auszüge

Rohe und fraktionierte Xenopus-Eizellextrakte können verwendet werden, um Komponenten für die Rekonstitution zellulärer Prozesse für morphologische und biochemische ...

In einem vorherigen Video haben wir gezeigt, wie man Eier von ausgewachsenen XUS labis gewinnt und entgellt. Rohextrakte aus diesen Eiern stellen eine nützliche Quelle für zytoplasmatisches und organelläres Material zur in-vitro-Rekonstitution zellulärer Vorgänge wie Kernformation, nuklearem Proteinimport und DNA-Replikation dar. Hallo, mein Name ist Marie Cross und ich bin Doktorandin in Dr. Maureen Powers’ Labor in der Abteilung für Zellbiologie an der Emory University in Atlanta, Georgia.Heute zeigen wir Ihnen, wie man Ei-Extrakt in lösliche zytoplasmatische und leichte Membranfraktionen aufteilt. Dieses Verfahren umfasst die folgenden Schritte: Lyse der Eier, Sammeln der rohen Extrakte, Fraktionierung der rohen Ei-Extrakte sowie Gewinnung des zytoplasmatischen Extrakts und der leichten Membranfraktion des Ei-Extrakts. Beginnen wir also.Beginnen wir mit dem Lysevorgang der Eier und der Gewinnung roher Extrakte vor der Ei-Lyse. Eine Transferpipette muss hergestellt werden, indem eine Pasteur-Pipette gebrochen und das gebrochene Ende vorsichtig in einen Pipettenballon eingeführt wird. Überführen Sie die Eier in ein 15-ml-Polypropylenröhrchen.Ein Pipettierer mit großem Mund ist erf

preparation-and-fractionation-of-xenopus-laevis-egg-extracts

Research

Forschung

JoVE Journal

Biology

Biologie

Die Eier von Xenopus laevis intakt, lysiert und / oder fraktionierte sind nützlich für eine Vielzahl von Experimenten. Dieses Protokoll zeigt, wie die Eiablage zu veranlassen, zu sammeln und dejelly die Eier, und sortieren Sie die Eier, um beschädigte Eier zu entfernen.

Beziehen Eier von Xenopus laevis Weibchen

Kernmembran Montage ist ein wesentlicher Schritt in der Zellzyklus; dieser Prozess im Reagenzglas durch die Kombination von Xenopus Spermien Chromatin, Cytosol und Licht Membranfraktionen repliziert werden. Komplette Kerne gebildet werden, einschließlich der nuklearen Membranen mit Poren-Komplexe, und diese rekonstituierte Kerne sind in der Lage normale Kernprozesse.

In Vitro Nuclear Assembly mit Fraktionierte Xenopus Egg Auszüge

Xenopus embryonalen Epithelien sind ein ideales Modellsystem, um die Zelle Verhaltensweisen wie Polarität Entwicklung und Formänderung beim epithelialen Morphogenese zu studieren. Traditionelle Histologie des festen Proben wird zunehmend durch Live-Cell-konfokale Bildgebung ergänzt. Hier zeigen wir Methoden, um Frosch Gewebe zu isolieren und zu visualisieren leben Epithelzellen und deren Zytoskelett mit Live-cell konfokalen Mikroskopie.

Live-Cell-Imaging und Quantitative Analyse der embryonalen Epithelzellen in Xenopus laevis</em

Dieses Video-Protokoll beschreibt eine Methode zur Herstellung...

Herstellung transgener Xenopus laevis Durch Restriktionsenzym-vermittelte Integration und Reaktorsicherheit Transplantation

Xenopus Eiextrakt ist ein nützliches Modellsystem, um die DNA-Schäden Prüfpunkt untersuchen. Dieses Protokoll ist für die Herstellung von Xenopus Ei-Extrakten und DNA-Schaden induzierenden Prüfpunkt Reagenzien. Diese Techniken sind an eine Vielzahl von DNA-schädigenden Ansätze in der Untersuchung der DNA-Schädigung Prüfpunkt Signalisierung.

Untersuchung der DNA Damage Checkpoint mit<em&gt; Xenopus</em&gt; Egg Auszüge

Produktion von<em&gt; Xenopus tropicalis</em&gt; Egg Extrakte Mikrotubuli-assoziierten RNAs identifizieren

Es wird ein Verfahren zur Analyse von Protein-Abbau unter Verwendung radioaktiv markiert und die Luciferase-Fusionsproteine ​​in Xenopus-Ei-Extrakt und deren Anpassung für Hochdurchsatz-Screening für Kleinmolekül-Modulatoren der Proteinabbaus beschrieben.

Rekonstitution von β-Catenin-Abbau in<em&gt; Xenopus</em&gt; Egg Extract

Die molekularen Mechanismen der Dekondensation von hochverdichtetem mitotischem Chromatin sind unklar. Wir präsentieren einen zellfreien Assay, der auf mitotischen Chromatinclustern basiert, die aus HeLa-Zellen und Xenopus laevis-Eiextrakt isoliert wurden und den Dekondensationsprozess in vitro originalgetreu rekonstituieren.

Ein zellfreien Assay zu Chromatindekondensation Studieren am Ende der Mitose

Mechanismen der zellulären und intrazellulären Skalierung bleiben schwer fassbar. Die Verwendung von Xenopus-Embryoextrakten wird immer häufiger, um die Mechanismen der Organellengrößenregulation aufzuklären. Diese Methode beschreibt die Herstellung von Embryonenextrakten und einen neuartigen Kernskalierungsassay, durch den Mechanismen der Kerngrößenregulation identifiziert werden können.

Ein zellfreien Assay unter Verwendung von<em&gt; Xenopus laevis</em&gt; Embryo Extrahiert Mechanismen der Kerngröße Verordnung zum Studium

Wir präsentieren eine Methode zur Erzeugung von in-vitro- autarken mitotischen Schwingungen auf der Ebene der einzelnen Zelle durch Verkapselung Ei Extrakte von Xenopus Laevis in Wasser-in-Öl-Mikroemulsionen.

Rekonstitution des Zellzyklus Schwingungen in Mikroemulsionen zellfreie Xenopus Ei Extrakte

Wir beschreiben ein Verfahren zur Herstellung und Live-Bildgebung von unverdünnten zytoplasmatischen Extrakten aus Xenopus laevis-Eiern .

Xenopus laevis Ei-Extrakt-Zubereitung und Live-Bildgebungsverfahren zur Visualisierung der dynamischen zytoplasmatischen Organisation

Lernen Sie die Präparation und Fraktionierung von Xenopus laevis-Ei-Extrakten für die Rekonstitution zellulärer Prozesse. Diese Methode ermöglicht die Isolierung zytoplasmatischer und leichter Membranfraktionen für biochemische Analysen.

Vorbereitung und Fraktionierung von Xenopus laevis Egg Auszüge

Weitere Videos entdecken