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PÁGINA SDS
La electroforesis en gel de dodecil sulfato de sodio-poliacrilamida o SDS-PAGE es una técnica basada en el peso molecular que separa mezclas de proteínas en función de su tamaño.
Aquí, las proteínas de la muestra se tratan con β-mercaptoetanol y SDS.
β-mercaptoetanol es un agente reductor que rompe los enlaces disulfuro.
SDS, un detergente cargado negativamente, se une a las regiones hidrofóbicas para desplegar y desnaturalizar las proteínas y agrega una carga negativa uniforme.
A continuación, las muestras se cargan en un gel de poliacrilamida hecho de monómeros de acrilamida reticulados.
El gel de apilamiento superior tiene poros dilatados debido a la baja concentración de acrilamida.
En la aplicación de voltaje, las muestras de proteínas se apilan como monedas para ingresar simultáneamente al gel de resolución inferior.
El gel resolutivo tiene poros más pequeños debido a una mayor concentración de acrilamida. Actúa como un tamiz molecular, permitiendo que las proteínas más pequeñas corran más rápido, separando así las proteínas en función de sus tamaños.
Estas bandas de proteínas separadas se visualizan comúnmente mediante la tinción con azul de Coomassie. El peso molecular de cada banda se puede determinar utilizando proteínas marcadoras de referencia.
La electroforesis en gel es un método que separa macromoléculas biológicas como ácidos nucleicos o proteínas obligándolas a pasar a través de una matr…
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