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Ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas
El ensayo de inmunoabsorción ligado a enzimas o ELISA es un inmunoensayo marcado con amplias aplicaciones en la detección y cuantificación de analitos como anticuerpos, péptidos, glicoproteínas, hormonas y virus.
Los anticuerpos de detección que se unen al antígeno o a la molécula diana se conjugan con enzimas específicas que, tras la adición de sustrato, producen señales medibles.
Dependiendo de los métodos de captura y detección, existen cuatro tipos principales de ELISA.
El ELISA directo utiliza un anticuerpo primario conjugado con enzimas para detectar el antígeno de la muestra recubierto en la placa.
Mientras que para el ELISA indirecto, el antígeno unido captura el anticuerpo primario de la muestra, al que se une el anticuerpo secundario conjugado.
El ELISA sándwich involucra dos anticuerpos, uno recubierto en la placa para capturar el antígeno de la muestra, mientras que el otro anticuerpo conjugado con enzimas se une al epítopo de antígeno específico que forma el sándwich.
En el ELISA competitivo, el antígeno y el anticuerpo primario se preincuban y se añaden a la placa que está recubierta con el mismo antígeno.
Cuanto mayor es la concentración de antígeno de la muestra, más complejos antígeno-anticuerpo se forman, dejando menos anticuerpos libres para unirse al antígeno competidor de la placa, generando así señales más débiles.
En 1971, Peter Perlman y Eva Engvall desarrollaron un ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA o EIA). ELISA se diferencia del Western Blot en…
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