Microscopía de fluorescencia de superresolución

La microscopía de fluorescencia convencional solo puede resolver estructuras más separadas que 200 nm. Esto se debe a que, bajo un microscopio, la difracción de la luz hace que las moléculas fluorescentes aparezcan como puntos borrosos en lugar de puntos afilados. Como resultado, cuando los objetos están muy cerca unos de otros, sus imágenes se superponen.

Por lo tanto, los científicos han desarrollado técnicas de superresolución que proporcionan una mejor resolución para obtener imágenes incluso de estructuras subcelulares pequeñas. Estas técnicas superan los límites de difracción mediante el uso de patrones específicos de luz para excitar los fluoróforos en la muestra.

Por ejemplo, la microscopía de iluminación estructurada utiliza un patrón de rayas que luego se gira para capturar múltiples imágenes. Las imágenes se combinan, creando un patrón de interferencia que se procesa computacionalmente para crear la imagen final.

La microscopía de depleción por emisión estimulada crea un patrón utilizando dos láseres. Un láser primario excita la muestra mientras que un haz en forma de rosquilla suprime la fluorescencia a su alrededor, haciendo que el punto fluorescente parezca más pequeñ