En este artículo se muestra el procedimiento desarrollado por Enviaselo KB Et al. (1959) y el procedimiento que preserve desarrollado por Brill B Et al. (2008) para limpiar el cuarto inguinal almohadilla de grasa mamaria de un ratón de la pubertad en la preparación para el trasplante de fragmentos de mama, las células epiteliales mamarias, o las células mamarias tumorales.
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Artículo de método
Procedimiento de mama epiteliales de Trasplantes
En este artículo
Resumen
Resumen
En este artículo se describe y compara el procedimiento de autorización almohadilla grasa desarrollado por Enviaselo KB et al. 1 y el procedimiento que preserve desarrollado por Brill B et al. 2, seguido por el procedimiento de trasplante epiteliales mamarias. El procedimiento de trasplante de mama es ampliamente utilizado por los biólogos de mama, ya que se aprovecha del hecho de que un importante desarrollo del epitelio mamario no ocurre hasta después de la pubertad. A las 3 semanas de edad, el crecimiento del árbol epiteliales mamarias se limita a las cercanías del pezón y la almohadilla de grasa es en gran parte desprovista de epitelio mamario, pero por 7 semanas de edad del árbol epitelio ductal se extiende a lo largo de la almohadilla de grasa total. Por lo tanto, si esta pequeña porción de la almohadilla de grasa que contiene epitelio, la región entre el pezón y los ganglios linfáticos, se retira a las 3 semanas de edad, el epitelio endógeno nunca llenarán la almohadilla de grasa mamaria y la almohadilla de grasa que se describe como "despejó ". En este momento, el epitelio mamario de otra fuente pueden ser trasplantados en la almohadilla de grasa despejado en el que tiene el potencial para extender mama ductal árboles a través de la almohadilla de grasa. Este procedimiento ha sido utilizado en muchos modelos experimentales, incluyendo el examen del fenotipo tumoral en tejidos epiteliales mamarias transgénico sin los efectos de confusión del genotipo en el animal entero 3, en la identificación de células madre mamarias mediante el trasplante de células de la dilución 4,5 limitada, la determinación de si los nódulos hiperplásicos proceder a tumores mamarios 6, y para evaluar el efecto de la exposición hormonal previo sobre el comportamiento de el epitelio mamario 7,8.
Tres semanas de edad, los ratones de acogida están anestesiados, limpia y contenida en una fase quirúrgica. Se hace una incisión sagital se realiza a través de la piel, pero no el peritoneo, que se extiende desde el pubis hasta el esternón. Cortes oblicuos se realizan a través de la piel de la incisión sagital a través de la pelvis hacia cada pierna. La piel se separa del peritoneo para exponer la cuarta glándula mamaria inguinal. La capa de grasa que se elimina mediante la eliminación de la anterior plataforma de tejido graso de los ganglios linfáticos. Fragmentos de epitelio o de las células epiteliales son trasplantadas en el resto de almohadilla de grasa y despejó el ratón está cerrado.
Protocolo
1. Preparación del epitelio de Trasplantes
Donantes de tejidos frescos o congelados epiteliales pueden ser trasplantados en la almohadilla de grasa despejado, pero la preparación previa del epitelio donante congelado es más conveniente, con una mínima disminución en la eficacia del trasplante (eficiencia> 85%). El protocolo para la preparación del epitelio donante congelado es el siguiente:
Antes de preparar el epitelio de trasplantes, preparar los medios de congelación para el epitelio y la alícuota de 1 ml en crioviales. Esto se puede almacenar a 4 ° C durante un máximo de 6 meses hasta que sea necesario. Cong....
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Discusión
En este informe, se presentan dos métodos alternativos para la limpieza de la almohadilla de grasa mamaria de ratón en la preparación para los trasplantes de mama epiteliales. El procedimiento estándar ha estado en uso desde su desarrollo en 1959 por Enviaselo et al. 1 Mientras más invasivo, el método estándar es el método preferido para la formación de los principiantes, porque la estructura y la orientación de la glándula mamaria son fácilmente vistos. Sin embargo, el procedimiento que preserve pue.......
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Referencias
- DeOme, K. B., Faulkin, L. J. Jr, Bern, H. A., Blair, P. B. Development of mammary tumors from hyperplastic alveolar nodules transplanted into gland-free mammary fat pads of female C3H mice. Cancer Res. 19, 515-520 (1959).
- Brill, B., Boecher, N., Groner, B., Shemanko, C. S.
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Reimpresiones y permisos
