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Artículo de método

Extensión probóscide Respuesta (PER) Ensayo en Drosophila

30.6K vistas

DOI:

10.3791/193

29 de abril de 2007

En este artículo

Resumen

Respuesta trompa de extensión o PER es un ensayo de comportamiento de sabor que se ha utilizado en las moscas, así como en las abejas. Cuando la trompa se pone en contacto con una sustancia atractiva, la mosca se extiende su trompa para consumir la sustancia. Soluciones de diversos azúcares son muy atractivos para la marcha.

Resumen

Respuesta trompa de extensión (PER) es un ensayo de comportamiento de sabor que se ha utilizado en las moscas, así como en las abejas.

En la superficie de la boca de la mosca (labelo), hay pelo-como las estructuras llamadas sensilla que alberga neuronas gusto. Cuando una sustancia atractiva entra en contacto con el labelo, la mosca se extiende su trompa para consumir el material. Extensión probóscide Respuesta (PER) ensayo mide la respuesta de comportamiento de gusto, y es un método útil para conocer las preferencias de alimentos en una sola mosca. Soluciones de azúcares diversos, tales como sacarosa, glucosa y fructosa, son muy atractivos para la marcha. El efecto de las sustancias aversivas también se puede probar que la reducción del PER cuando se mezcla en una solución dulce.

A pesar de la simplicidad del procedimiento básico, hay muchas cosas que pueden evitar que se trabaja. Uno de los factores que requiere atención es el estado de respuesta de la mosca. El tiempo de hambre necesaria para que la marcha para el estado de respuesta adecuada varía drásticamente de 36 a 72 horas. Hemos establecido una serie de controles para evaluar el estado de la mosca y que permite la detección de los animales individuales que no responden o hiper sensible. Otro factor importante es el nivel de impacto y la posición del contacto con el labelo, que sería difícil de describir con palabras. Esta presentación en video demuestra todo esto junto con otras mejoras que aumenten la reproducibilidad de este método.

Protocolo

Hambre

  1. En primer lugar, matar de hambre al vuelo.
  2. Ponga un pedazo pequeño de Kim-limpiar empapados con agua en un frasco vacío.
  3. Transferencia de 20-30 bien alimentados moscas en el vial vacío.
  4. Comprobar cada 12 a 24 horas para asegurarse de que el papel está húmedo.
  5. Matar de hambre al volar por 36 a 72 horas.

Arreglar la marcha

  1. Tome una mosca en un aspirador.
  2. Coloque una punta de 200 l de color amarillo sobre la apertura. Al mismo tiempo mover de un tirón y soplando sobre ella, se puede apretar la mosca en la punta amarilla.
  3. Aplicar suavemente un poco de....

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Discusión

En esta presentación, hemos pasado por todos los pasos para el ensayo de probóscide respuesta de extensión. El método parece bastante sencillo, pero como en muchos ensayos de comportamiento de otras, muchas pequeñas cosas pueden evitar que el ensayo de trabajo. Hemos pasado por muchas etapas de tal manera que necesitan una atención especial. En este caso, me reitero algunos de los factores más importantes.

Uno de ellos es la forma de la mecha. He mostrado algunos de los ejemplos muy buenos, pero por supuesto, en realidad, todo sería.......

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Agradecimientos

Damos las gracias a Paul Graham para servir como un hombre de la cámara en el video de presentación.

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Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo
NombreEmpresaNúmero de catálogoComentarios
HDR-HC1CámaraSony Corporation
SMZ800MicroscopioNikon Instruments
P-IBSSAdaptador de cámaraNikon Instruments
1x DC10LNAdaptador de cámaraOptem, Qioptiq Inc.
257010Adaptador de cámaraOptem, Qioptiq Inc.
TREKKER Mk2TrípodeBENBO
Gorillapod SLRTrípodeJoby
iMac G5ComputadoraApple
Power Mac G5ComputadoraApple
iMovieSoftwareApple
MPEG StreamclipSoftwareSQUARED 5

Referencias

  1. Dethier, V. G. The Hungry Fly. , Harvard University Press. Cambridge. (1976).
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Reimpresiones y permisos

Etiquetas

Comportamiento gustativo de Drosophilaoptimizaci n del tiempo de ayunom todo de fijaci n de moscast cnica de preparaci n de mechasm todo de control de impactocontroles positivos y negativosposici n de contacto del labelomapeo de sensibilidad de las sensilias