Intratraqueal instilaciones solutos entregar directamente a los pulmones. Este procedimiento objetivos de la entrega de los instilado en las regiones distales de los pulmones, y por lo tanto incorpora a menudo en los estudios dirigidos a estudiar los alvéolos. Ofrecemos un protocolo detallado para la supervivencia de realizar instilaciones intratraqueal en ratones.
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Artículo de método
La instilación directa traqueal de solutos en pulmón de ratón
En este artículo
Resumen
Resumen
Intratraqueal instilaciones solutos entregar directamente a los pulmones. Este procedimiento objetivos de la entrega de los instilado en las regiones distales de los pulmones, y por lo tanto incorpora a menudo en los estudios dirigidos a estudiar los alvéolos. Ofrecemos un protocolo detallado para la supervivencia de realizar instilaciones intratraqueal en ratones. El uso de este enfoque, permite afrontar la entrega de los solutos de prueba o sólidos (como la terapéutica de pulmón, surfactantes, los virus, y los oligonucleótidos pequeños) en el pulmón distal. Instilaciones traqueal puede ser la metodología preferida, la inhalación a través de protocolos que se pueden orientar a todo el tracto respiratorio superior y, posiblemente, el investigador expone a sustancias potencialmente peligrosas. Además, al utilizar el protocolo de la instilación traqueal, los animales se pueden recuperar completamente el procedimiento no invasivo. Esto permite realizar posteriores mediciones fisiológicas de los animales de prueba, o la reinstalación con el mismo animal. La cantidad de instilado introduce en el pulmón debe ser cuidadosamente determinada y osmóticamente equilibrados para asegurar la recuperación de los animales. Por lo general, el volumen instilado 30-75 l pueden introducirse en los pulmones del ratón.
Protocolo
1. Anestesia
- Anestesiando los ratones con isoflurano puede facilitar el manejo de los animales y las restricciones previas a la administración de anestesia intraperitaneally. El uso de un anestésico inhalado puede o puede no ser adecuado para un estudio particular: determinar en primer lugar el impacto del uso de isoflurano, o cualquier otro anestésico, en el estudio de pulmón propuesto.
- Anestesiar a los animales con isoflurano. El video muestra el uso de una cámara fija en vaporizador isoflurano isoflurano al 2% mezclado con oxígeno. Si usted no tiene una cámara de isoflurano, también puedes usar estándares abiertos soltar las técnicas de exposi....
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Discusión
Intratraqueal instilaciones se han utilizado en varios estudios diferentes para evaluar la toxicidad de los compuestos de prueba (6), inducen daño alveolar del pulmón (4, 7), sustituir los tensioactivos (8), así como alterar la expresión génica a través de la entrega de los oligonucleótidos pequeños directamente en el pulmonar (5). Actualmente estamos explorando el uso de inculcar 1) fluorescentes redox material sensible en el pulmón con el fin de medir el estrés oxidativo in vivo en condiciones normales y fisiopatológi.......
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Agradecimientos
Este trabajo fue apoyado por el NIH K99 HL09222601 y el S & R Foundation Ryaji Uneo Premio otorgado a MNH.
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Materiales
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| Isoflurano | Webster Veterinary | 14043-220-05 | |
| Xilacina | Lloyd, Inc. | Nuevo medicamento veterinario aprobado #139-236 | |
| Ketamina | Bioniche Pharma | 67457-001-10 | |
| Nair | Disponible en farmacias | ||
| Jeringa SubQ de 1 mL | BD Biosciences | 309597 | 26 5/8 G |
| Sutura de nailon 4-0 | Ethicon Inc. | 1894G.S30 |
Referencias
- Driscoll, K. E., Costa, D. L., Hatch, G., Henderson, R., Oberdorster, G., Salem, H., Schlesinger, R. B. Intratracheal instillation as an exposure technique for the evaluation of respiratory tract toxicity: uses and limitations. Toxicol Sci. 55, 24-35 (2000).
- Helms, M. N., Jain, L., Self, J. L., Eaton, D. C.
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Reimpresiones y permisos
