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Sincronización de nematodos: un método para obtener poblaciones de gusanos en etapas idénticas de desarrollo

30 de abril de 2023

En este artículo

Resumen

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Fuente: Sarasija, S. y Norman, K. R. Medición de las tasas de consumo de oxígeno en Caenorhabditis elegans intacto. J. Vis. Exp. (2019).

En este video, mostramos un método para producir una población sincronizada con el desarrollo de C. elegans adultos estériles. El protocolo de ejemplo sincroniza gusanos para estudiar las tasas de consumo de oxígeno en animales vivos.

Protocolo

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Este protocolo es un extracto de Sarasija y Norman, Medición de las tasas de consumo de oxígeno en Caenorhabditis elegans intacto, J. Vis. Exp. (2019).

>1. Crecimiento y sincronización de la población de nematodos

Estos animales alcanzarán la etapa larvaria L4 después de ~42 h. En este momento, mueva las larvas L4 con un pico de platino a placas NGM sembradas con OP50 que contengan 0,5 mg/mL de 5-fluoro-2'-desoxiuridina (FUdR) para evitar que produzcan progenie.
NOTA Asegúrese de que dentro de un experimento todas las cepas estén sincronizadas d....

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Resultados

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Tabla 1: Recetas para placas NGM, tampón M9 y solución de lejía.

Tampón M9 (1 L)
dH2O1.000 mL
NaCl5 g
KH2PO43 g

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Divulgaciones

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No se han declarado conflictos de interés.

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo
NombreEmpresaNúmero de catálogoComentarios
100 mm; Placas de Petri de 60 mmProductos de Labware de Kord-Valmark2900; 2901
15 mLCorning430791
50 mLCorning430829
AgarFisher CientíficoBP1423-2
Bacto peptonaBd; Bacto211677
Bacto triptonaBd; Bacto211705
Extracto de levadura BactoBd; Bacto212705
Lejíagenérico
Cloruro de calcio dihidratado (CaCl2·2H2O)Fisher CientíficoC79-500
ColesterolFisher CientíficoC314-500
Agua desionizada (dH2O)
Pipetas Pasteur de vidrioKrackeler Científico6-72050-900
Sulfato de magnesio heptahidratado (MgSO4·7H2O)Fisher CientíficoBP213-1
Fosfato de potasio dibásico (K2HPO4)Fisher CientíficoBP363-1
Fosfato de potasio monobásico (KH2PO4)Fisher CientíficoP285-500
Cloruro de sodioFisher CientíficoBP358-10
Hidróxido de sodio (NaOH)Fisher CientíficoBP359-500
Fosfato de sodio dibásico anhidro (Na2HPO4)Fisher CientíficoBP332-1
Tubos cónicos Tubos cónicos de

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